藥物分析Ⅱ(藥物分析專論)

藥物分析教研室孫立新副教授藥物結構

性質分析方法第四章芳酸類藥物的分析

TheAnalysisofAromaticAcids第一節概述一、分類羧基直接與苯環相連接的藥物。根據結構分為:▲水楊酸類▲苯甲酸類▲其它芳酸1、水楊酸類代表藥物有阿斯匹林

水楊酸（鈉）

對氨基水楊酸（鈉）

2、苯甲酸類代表藥物苯甲酸（鈉）

氨甲苯酸泛影酸3、其它芳酸代表藥物止血敏

布洛酚二、性質1、性狀：大多數是結晶性固體少數為液體（水楊酸甲酯、苯甲酸芐酯）2、溶解性：游離芳酸類藥物，幾乎不溶于水，易溶于有機溶劑芳酸堿金屬鹽易溶于水3、酸性：芳酸類藥物分子中具有－COOH，所以顯弱酸性藥用芳酸pKa在3~6之間。具有酸性，可以與堿成鹽。4、紫外吸收：具有苯環，所以具有紫外吸收。一、呈色反應1、FeCl3反應

紫堇色第二節鑒別反應++※苯甲酸的堿性或中性溶液與三氯化鐵試液生成堿式苯甲酸鐵鹽的赭色沉淀。2、茚三酮反應具有類似

-氨基酸結構如氨甲苯酸，可與茚三酮反應，產生藍紫色的縮合物+二、阿斯匹林水解產物的反應三、重氮化-偶合反應

對氨基水楊酸鈉具有芳伯氨基結構，在鹽酸酸性溶液中，與亞硝酸鈉試液發生重氮化反應，生成重氮鹽，與堿性β—萘酚偶合產生橙紅色沉淀。四、溴代反應酚羥基鄰位、對位的氫比較活潑，很容易被溴取代。五、紫外光譜法六、紅外光譜法第三節水楊酸類藥物的分析

一、特殊雜質檢查(一)、阿斯匹林中的雜質檢查1、

熾灼殘渣2、

重金屬3、易碳化物4、溶液的澄清度檢查：檢查碳酸鈉試液中不溶物酚類（如苯酚）醋酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯雜質碳酸鈉試液中不溶，而阿斯匹林溶于碳酸鈉試液。5、水楊酸

來源：生產過程中乙酰化不完全或貯藏過程中水解產生。原理：阿斯匹林無酚羥基，不與高鐵反應。水揚酸有酚羥基，與高鐵反應生成紫堇色(二)、對氨基水楊酸中的雜質檢查

雜質來源:①未反應完全的原料間氨基酚

②遇熱受潮生成間氨基酚,再被氧化成二苯醌型化合物檢查方法:①雙相滴定法(ChP2000)②HPLC(USP23)二、含量測定(一)、阿斯匹林含量測定——酸堿滴定法1

直接滴定法原理：阿司匹林具有游離羧基，具有酸性，以標準堿滴定液直接滴定。方法:取本品0.4g,精密稱定,加中性乙醇(對酚酞指示液顯中性)20ml,溶解后,加酚酞指示液3滴,用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定.每1ml的氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當于18.02的C9H8O4。中性乙醇：①溶解供試品②防止酯水解。目的：扣除乙醇中酸的影響。2.水解后剩余滴定法原理:阿斯匹林酯結構在堿性溶液中易于水解,加入定量過量的氫氧化鈉滴定液,加熱使酯水解,剩余的堿用酸回滴.需做空白試驗校正.目的：NaOH在加熱時易吸收CO2,用酸回滴定會消耗酸，影響結果3.兩步滴定法適用于阿斯匹林片劑片劑穩定劑:酒石酸或枸櫞酸分解產物:水楊酸和醋酸第一步:中和第二步:水解和測定(二)、對氨基水楊酸鈉含量測定——亞硝酸鈉滴定法

對氨基水楊酸鈉具有芳伯氨基,能在鹽酸存在下與亞硝酸鈉定量地發生重氮化,生成重氮鹽.第四節苯甲酸類藥物的分析一、苯甲酸鈉的含量測定―雙相滴定法原理：苯鉀酸鈉——溶于H2O

苯甲酸——不溶于H2O，溶于乙醚滴定前：苯甲酸鈉

甲基橙指示劑，呈黃色（pH3.1~4.4）紅黃滴定中：

苯甲酸鈉+鹽酸苯甲酸滴定終點：過量HCl，使指示劑變橙紅色水相乙醚相第一章糖類和苷類藥物的分析

一、糖類1、醫學上的糖類葡萄糖,乳糖（半乳糖-葡萄糖）,蔗糖（葡萄糖-果糖）2、分類：※糖類就其化學結構來看，屬于多羥基醚或羥基酮以及它們的多縮聚體.※依其是否能水解及水解產生簡單糖分子多少，可分為：（1）

單糖類：a、戊糖：5個C原子b、己糖：6個C原子c、醛糖d、酮糖（2）

雙糖類：乳糖，蔗糖（3）

多糖類：淀粉，纖維素3、

性質（1）

單糖、雙糖為無色固體（無色結晶或結晶性粉末）或糖漿狀液體，易溶于水、不溶于乙醚及其它有機溶劑，微溶于乙醇。（2）

多糖：一般不溶于水。

(4).比旋度蔗糖：不得少于+66°（10%水溶液）乳糖：+52.0°～52.6°（10%水溶液，并100ml中加氨試液0.2ml）無水葡萄糖：+52.6°～53.2°葡萄糖：+52.5°～53°（10%水溶液，并100ml中加氨試液0.2ml）5、

含量測定(1)

旋光法（Polarimetry）＊旋光度：直線偏振光通過光學活性化合物液體或溶液時，能引起旋光現象，使偏振光平面向左或右旋轉，旋轉的度數稱旋光度。

＊比旋度：偏振光透過1dm且1ml中含旋光物質1g的溶液，在一定波長一定溫度下測得的旋光度稱比旋度。a=[a]·C·La：旋光度；[a]：比旋度ChP2000采用鈉光譜的D線（589.3nm）測定旋光度，除另有規定外，測定溫度20℃，測定管長度2dm，物質濃度以C（g/ml）表示，則：若物質濃度用%濃度（g/100ml）表示，C以C/100代入，則：即如果已知被測物質的比旋度[a],根據測量得到的比旋度a,由上式即可計算出被測物質的百分濃度。(2)

折光率法（Refractometry）折光率與溶液濃度（W/V）的關系用下式表示：n：折光率n0：同溫度時水的折光率（20℃為1.3330）F：經反復試驗測得的折光因數P：溶液的百分濃度（%，W/V）n=n0+F×Psini：光線入射角的正弦sinr：光線折射角的正弦只要求得折射因數F，從溶液的折光率和水溶液的折光率即可計算出溶液的濃度.本法可用于葡萄糖的快速測定，但測定結果較旋光法偏高。折光儀:阿培氏折光計測定前用棱鏡或水進行校正。20℃時水的折光率為1.333025℃時水的折光率為1.332540℃時水的折光率為1.3305藥物名稱VE1.494～1.499VK11.525～1.528苯甲醇1.517～1.522二甲硅油1.400～1.410月桂氮卓酮1.470～1.473Chp2000未見用于含量測定，但用于純度檢查。

二、苷類1、含義：糖類和有羥基的非糖有機化合物縮合成環狀縮醛結構的化合物，其水解產生糖+非糖類化合物（苷元或稱配基）2、分類：按苷元的結構分為：（1）

氰苷類（如苦杏仁苷）（2）

恩苷類（如大黃酚）（3）

黃酮苷類（如蘆丁）（4）甾體強心苷類（如洋地黃毒苷）（5）皂苷類（如甘草皂苷）3、

構成天然苷類的糖(1)

葡萄糖；(2)

其他的五碳糖、六碳糖；(3)特殊的去氧糖類（洋地黃毒糖）4、性質（1）

味苦，中性（有的呈酸性，也有呈堿性，稱生物堿苷）（2）

多為白色結晶，易溶于水，不溶于甲醇、乙醇，難溶于非極性溶劑中。強心苷類難溶于水，可溶于乙醇及氯仿。5、

鑒別（1）

天然產的苷類:均呈左旋性,無還原性.但當苷在堿性或酸性下水解后,生成苷元和糖類,后者多為右旋且具有還原性。鑒別方法：天然苷：左旋性，無還原性已水解苷：右旋，有還原性（2）Keller-kiliani反應(3)

Kedde反應

6、

含量測定

ChP2000對洋地黃毒苷采用比色法、熒光法或色譜法測定。

（1）比色法：地高辛原料、地高辛注射液采用堿性三硝基苯酚顯色后，于485nm處比色測定。

（2）熒光法：地高辛片劑含量測定、含量均勻度檢查、溶出度采用熒光法測定。是利用洋地黃毒苷+VC+H2O2+HCl→產生熒光（激發波長360nm，發射波長485nm）。第二章

醇、醚、醛和酮類藥物的分析

一、醇1、

代表藥物及特點：CH3CH2OH乙醇甘油二巰丙醇三氯叔丁醇三梨醇結構分析：含-OH（醇羥基），可與酸成酯。a-活潑H（乙醇、三氯叔丁醇）反應（在堿性下與碘反應生成碘仿）；丙烯醛反應（甘油、二巰丙醇，堿性下加熱生成丙烯醛）；三氯叔丁醇堿性下加熱回流生成氯化鈉，可加入定過量硝酸銀，過量硝酸銀用硫氫酸銨滴定，以硫酸鐵銨為指示劑，可以定量測定；本類藥物具有還原性，可采用碘量法或高碘酸法測定。2、

鑒別反應(1)

碘仿反應（a-活潑H）：乙醇在OH-下可被碘氧化生成甲酸鹽，并生成碘仿臭氣或黃色↓CH3CH2OH+4I2+6NaOH→CHI3+5NaI+HCOONa+5H2O三氯叔丁醇→同上，碘仿↓（a-活潑H）

(2)

丙烯醛反應：甘油、二巰丙醇在堿性下加熱，即產生丙烯醛的刺激性臭氣。+2H2O

(3)沉淀反應：+PbAC2→↓+2HAC3、

含量測定(1)

碘量法：基于巰基的強還原性

原理：+I2→+2HI(2)方法：同時做空白實驗。

(2)高碘酸法：凡含有鄰位二元或多元羥基的化合物均能被高碘酸氧化生成相應的小分子酸和醛，反應時n個相鄰羥基，消耗n-1個高碘酸。生成的HCOOH用NaOH標準液滴定;或生成的HIO3+KI→I2用Na2S2O3滴定。C6H14O6+5HIO4→2HCHO+4HCOOH+5HIO3+H2O(3)

GC法乙醇的測定，可采用GC法（頂空GC法）二、醚1、

代表藥物：C2H5-O-C2H5麻醉乙醚2、

雜質檢查：（1）

酸度（2）醛類（3）過氧化物，（4）異臭（5）不揮發物三、醛1、

代表藥物：HCHOCCl3CH(OH)2

甲醛烏洛托品水合氯醛2、

鑒別：(1)

醛基的還原反應：①堿性酒石酸酮（Fehling）→Cu2O紅色②氨制AgNO3液（Tollen)→Ag↓銀鏡(2)甲醛的反應：甲醛+H2SO4+變色酸→紫色（專屬反應）(3)水合氯醛的反應：水合氯醛+NaOH→CHCl3+HCOONa+H2O（形成二液層）(4)烏洛托品反應：烏洛托品加稀酸，加熱即分解生成甲醛和銨鹽。生成的甲醛具有特臭味，并和氨制硝酸銀反應生成銀鏡。銨鹽加堿放出氨氣。NH4HSO4+2NaOH→NH3↑+Na2SO4+2H2OHCHO+2Ag(NH3)OH→HCOONH4+2Ag↓+3NH3↑+H2O6HCHO↑+4NH4HSO4C6H12N4+4H2SO4+6H2O3、

含量測定：

(1)

碘量法：醛+I2（定、過量）→醛基在OH-下被I2氧化成相應的酸，剩余碘在酸性下以Na2S2O3滴定。(2)

中和法（氧化后剩余滴定法）HCHO+NaOH+H2O→HCOONa+H2O2NaOH+H2SO4→Na2SO4+2H2O(3)

剩余堿水解法水合氯醛+NaOH→CHCl3+HCOONa2NaOH+H2SO4→Na2SO4+2H2O水解生成CHCl3在堿性下會有少量分解消耗堿CHCl3+4NaOH→HCOONa+3NaCl+2H2O生成的NaCl可采用銀量法測定后折算成NaOH的體積,自酸堿滴定中扣除。(4)

酸水解后剩余滴定法烏洛托品+H2SO4→（NH4）2SO4+6HCHO

H2SO4（過量）用堿測定。三、酮1、

代表藥物

富馬酸酮替酚吡喹酮撲米酮

撲米酮酸性下分解，生成甲醛，可利用甲醛的專屬反應鑒別。

撲米酮堿性下加熱灼燒分解生成氨氣，可利用紅色石蕊試紙鑒別。富馬酸酮替酚環上氮顯堿性，可采用非水滴定法測定含量，富馬酸不干擾；

富馬酸酮替酚環上酮可與二硝基苯肼反應，生成紅色絮狀沉淀。1.結構特點：

代表藥物有：

對乙酰氨基酚鹽酸利多卡因2．性質：③

堿性利多卡因側鏈中具有叔氨N原子，顯弱堿性，能與酸成鹽，且能與生物堿沉淀試劑或重金屬離子反應。②

與FeCl3反應具有酚羥基或水解后能產生酚羥基（對乙酰氨基酚），可與FeCl3作用呈色。④

紫外吸收具有苯環結構，有紫外吸收。二、對氨基苯甲酸酯類具有對氨基苯甲酸酯基本結構。具有游離的芳伯氨基。1．結構特點：代表藥物有：

鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸丁卡因2．性質：①

具有芳伯氨基，發生重氮化或重氮化-偶合反應③

具有酯的結構，容易水解。④

紫外吸收具有苯環結構，有紫外吸收。三、鑒別反應1、重氮化-偶合反應具有芳伯氨基藥物，如鹽酸普魯卡因等，在酸性溶液中與NaNO2TS發生重氮化反應，再與堿性

-萘酚偶合產生紅色偶氮化合物。具有潛在芳伯氨基，如對乙酰氨基酚，水解后可得芳伯氨基，能發生類似反應。2、三氯化鐵反應具有酚羥基（如對乙酰氨基酚），可與FeCl3TS作用顯藍紫色。4、與重金屬離子反應(1)．與銅離子的反應(2)．與鈷鹽反應6、水解產物的反應(1)．苯佐卡因的鑒別試驗(2).鹽酸普魯卡因的鑒別試驗

對乙酰氨基酚以對硝基氯苯為原料合成。(1)．乙醇溶液的澄清度與顏色對乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有顏色，則說明有雜質存在。生產工藝用鐵粉作還原劑，如帶入成品，則導致對乙酰氨基酚乙醇溶液產生渾濁。中間體對氨基酚有色氧化物在乙醇中顯橙紅色或棕色。副反應副副反應副反應TLC法①

樣品液③

分離系統硅膠GF254氯仿-丙酮-甲苯（13∶5∶2）⑥

限量:④點樣量樣品液：200

l點于硅膠GF254薄層板上對照液：40

l⑤

判斷在254nm波長紫外燈下觀察，供試品與對照品主斑點Rf值相同的斑點比較,不得超過其大小與顏色。(3)．對氨基酚制備中乙酰化不完全或貯存不當發生水解都能引入對氨基酚☆檢查原理：對氨基酚在堿性條件下，與亞硝基鐵氰化鈉作用，生成藍色絡合物，與對照液比較判斷對氨基酚的限量。檢查方法：限量：0.005%四、含量測定1．亞硝酸鈉滴定法①

原理具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應生成重氮鹽，根據消耗NaNO2量，計算出含量。潛在芳伯氨基藥物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或還原，得芳伯氨基后，再進行測定。②

操作中的主要條件＊重氮化反應屬于分子反應＊滴定液NaNO2及反應生成的重氮鹽都不穩定＊反應速度受多種因素影響第一步反應速度比較慢，而后兩步反應速度則比較快。ⅰ．反應速度與藥物結構的關系重氮化反應機制：a.當苯環上特別是氨基鄰位或對位上有吸電基時,如等可使氨基的堿性降低，重氮化反應速度加快。b.

當在苯環上有供電基時，則使反應速度降低。如等。ⅱ．反應速度與酸及酸度的關系a.

酸的種類重氮化反應在HBr、HCl、H2SO4中反應速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍

用HBr時，生成NOBr量大，反應速度快。但HBr價格貴，用鹽酸代替，為加快反應速度，需加入KBr（催化劑）。產生HBr與HNO2反應，可生成大量NOBr，加快反應速度。原因：＊強酸性可加速反應＊重氮鹽在酸性下穩定＊酸性下避免副反應發生。

如鹽酸量增加，則反應向左進行。如鹽酸濃度太大，反到會使游離芳伯氨的量減小（成鹽），而影響重氮化反應速度，使反應速度減慢。ⅲ．反應速度與滴定時溫度的關系一般，溫度升高反應速度加快。但重氮化反應所生成的重氮鹽不穩定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測定結果。所以，重氮化反應應在低溫條件下進行。中國藥典規定：在30

C以下，把滴定管尖端插入液面下處進行滴定。在滴定時一邊攪拌一邊加入大部分標準溶液。到近終點時把滴定管提出液面，用水沖洗后再繼續滴定至終點。標準溶液在液面下加入，可避免NaNO2揮發。③

指示終點的方法重氮化滴定法指示終點的方法有:永停法電位法外指示劑法內指示劑法我國藥典主要采用永停滴定法指示終點ⅰ．永停法原理：在被測溶液中插入兩個相同鉑電極，在兩個電極間加10~200mV電壓，并且在回路中串聯一個靈敏的檢流計（10A－9/格）。當用NaNO2滴定時，在終點前回路中沒有電流，電流計指針指零。當到達滴定終點時，由于溶液中有微過量的NaNO2，使得在兩個電極上發生氧化還原反應陽極：導致在兩電極間有電子流動，從而回路中有電流產生，使得電流計指針發生偏轉并且不再返回零點。陰極：ⅱ．電位法在被測溶液中插入甘汞-鉑電極，到達滴定終點時，溶液中稍過量的NaNO2使電位產生突躍，從而指示終點。USP采用這個方法指示終點。ⅲ．外指示劑法淀粉-KI糊劑或試紙原理：當達到滴定終點時，溶液中稍過量的NaNO2在酸性條件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉顯藍色。使用方法：滴定時，把淀粉-KI試液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上劃，如果立即出現藍色即已到滴定終點。外指示劑法的缺點：

由于滴定的溶液是強酸性，KI遇光能被空氣氧化析出碘，所以，在沒有達到終點時，就有可能呈現藍色，而造成誤判。

由于經常蘸取溶液進行試驗，可造成滴定液的損失而帶來誤差。

方法難掌握。ⅳ．內指示劑法內指示劑法指示終點，操作簡便，但生成重氮鹽一般都帶有顏色，干擾指示劑顏色變化的觀察，尤其是顏色很深時，更是這樣。在重氮化滴定法中，內指示劑法應用不是很廣泛。代表藥物

腎上腺素去甲腎上腺素二．性質：1.

易被氧化鄰苯二酚或苯酚結構，易被氧化呈色。3.

具有旋光性具有手性碳原子，具有光學活性。三．鑒別試驗1.氧化反應區別腎上腺素和去甲腎上腺素。2.

三氯化鐵反應：在0.1mol/L鹽酸中與Fe3+顯翠綠色，加氨試液后，顯紫色或紫紅色四、腎上腺素中腎上腺酮的檢查（講過）五、含量測定（一）

非水溶液滴定法（二）

溴量法第三節氨基醚衍生物類藥物的分析

鹽酸苯海拉明一.代表藥物1.結構2.性質①白色結晶性粉末②水中極易溶解,醇或氯仿中易溶,乙醚或苯中極微溶.③見光分解④酸性溶液中易分解.⑤紫外吸收二、鑒別1、與硫酸反應：顯色2、水解反應：3、與硝酸銀反應形成白色凝乳狀沉淀4、紫外、紅外特征吸收三、含量測定

（一）

非水溶液滴定法（原料）（二）

酸性染料比色法（片劑，見生物堿章）（三）陰離子表面活性劑滴定法（其注射液）（四）HPLC（片劑）第六章雜環類藥物的分析

TheAnalysisofHeterodrugs

第一節概述雜環:環狀有機化合物的碳環中夾雜有其他非碳原子的環狀結構叫做雜環.非碳原子,又稱雜原子,如N,S,O.共性:

(1)雜環類藥物是合成藥物中所占比例最多的一大類藥物.(2)多為五元環或六元環,單環或并合環.(3)雜環結構較穩定,不易開環,其性質受雜原子種類、數目、位置影響.(4)雜環上取代基性質較活潑,常用于分析.(5)含氮雜環,其堿性的強弱往往用于分析.本章重點介紹吡啶類吩噻嗪類苯并二氮雜卓類.

第二節吡啶類藥物分析一、結構分析1.

結構：本類藥物均有吡啶環吡啶

異煙肼尼可剎米二、鑒別：1.

母核反應：（1）與金屬離子反應生成有色沉淀

a.異煙肼,尼可剎米+HgCl2→白色沉淀↓b.異煙肼+CuSO4→紅棕色↓（Cu2O）尼可剎米+CuSO4+硫氰酸鉀→淡綠色絮狀沉淀（2）開環反應：適用于a,a’未取代，b,γ為烷基或羧基取代的。a.

戊烯二醛反應（k?nig反應）b.2，4-二硝基氯苯反應（Vongerichten反應）2.酰肼基團的反應

常用的氧化劑：I2、Br2、KBrO3、AgNO3（1）還原反應：（2）縮合反應：與芳醛縮合形成腙，如香草醛、水楊醛、二甲氨基苯甲醛黃色λmax=380nm3.

與酸堿共熱，以降解產物鑒別用紅色石蕊試紙檢查1.

氧化還原滴定法：常用氧化劑有：碘、溴、溴酸鉀、高錳酸鉀、重鉻酸鉀、NaNO2、硫酸鈰等。其中碘量法，溴量法，溴酸鉀法最常用。（1）剩余碘量法：三、含量測定：以異煙肼為例。操作：

原理：CONHNH2N+2I2+5NaHCO330min38-40度

COONaN+N2+4NaI+5CO2+4H2OI2（過）+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6討論：a.本法簡便,但因碘氧化力較弱,反應不易完全。常因反應時間、溫度不同有所差異；b.用于制劑分析時,含有還原性賦形劑時有干擾；c.化學計量關系：(1:4)0.1mol/LI2≈3.429mgC6H7N3(2)剩余溴量法：

原理：0.1mol/LBr2

（溴酸鉀3g+溴化鉀15g→水1000ml）在稀HCl反應條件下：KBrO3+5KBr+6HCl→Br2+6KCl+3H2O操作：

Br2（過）+KI→I2+2KBrI2+Na2S2O3→2NaI+Na2S4O6討論：ChP63版曾用本法測定異煙肼a.酸度0.70～0.86mol/L，所測結果一致，高、低都會使結果偏低；b.放置時間15～30min；c.滴定溫度﹤30℃；d.測定應在25min內完成(3)溴酸鉀法：

操作：

原理：

等當點:稍過量的Br2討論：a.緩緩滴定并充分振搖,防止局部濃度過高終點提前；b.到終點后,補加一滴指示劑,如顏色褪去即可,否則未到終點；c.ChP77、85、90、95、2000均采用本法測定異煙肼（片）；d.化學計量關系：3/2T=0.01667×3/2×137.14=3.4292.比色測定：利用開環反應或酰肼基團與試劑呈色測定3.非水滴定法：利用吡啶環的堿性，進行非水滴定第三節吩噻嗪類藥物分析一、結構分析共同點：（1）硫氮雜蒽母核；（2）含兩個雜原子多環共軛體系，有UV吸收；（3）S被氧化生成砜或亞砜；（4）與金屬離子絡合，生成有色物，可比色測定不同點：R，R’取代基不同RR’鹽類藥名-(CH2)3N(CH3)2-HHCl鹽酸丙嗪-(CH2)3N(CH3)2-ClHCl鹽酸氯丙嗪-CH2CH(CH3)N(CH3)2-HHCl鹽酸異丙嗪二、鑒別1、特征的紫外吸收：具有三個峰值205nm、254nm和300nm附近，兩個谷220nm和280nm附近；若被氧化則有四個吸收峰，可用于判斷樣品中有無氧化物。2.顯色反應：

(1)氧化劑：H2SO4、溴水、FeCl3、H2O2

(2)（可用于比色測定）三、含量測定

1、非水堿量法：吩噻嗪類藥物母核上氮原子堿性極弱,不能進行滴定,10位取代基上N原子為堿性,可在非水介質中以高氯酸標準液，以CV為指示劑。

2、鈰量法：

原理:適當pH下,用硫酸鈰氧化吩噻嗪進行測定開始時,吩噻嗪失去一個電子→游離基（紅色）等電點吩噻嗪失去2個電子→無色，終點：紅色→無色條件：在硫酸性下

3、鈀離子比色法：

原理：吩噻嗪類藥物可與一些金屬離子（如Pd2+）在適當pH值的溶液中形成有色的絡合物，借以進行比色測定。討論：（1）鈀離子試劑：PdCl2和十二烷基硫酸酯鈀鹽.

＊用PdCl2時，形成的有色絡合物水中溶解度小,樣品量大時,產生沉淀.＊十二烷基硫酸酯鈀鹽,其絡合物溶解度大,吸收強度增大（約2倍）.（2）本法優點：氧化產物不干擾。4、UV法：(1)

直接分光光度法：(2)萃取后分光光度法：(3)二階導數分光光度法：(4)萃取-雙波長分光光度法：直接分光光度法：操作：取10片，除去糖衣后，精稱，研細→稱取粉末適量→加水、鹽酸溶解→過濾，取濾液于249nm處測定。已知：鹽酸異丙嗪=910，即可計算優點：不需標準品缺點：儀器精密度要求高測定中注意問題：避光、防止氧化。萃取-雙波長分光光度法：----用于校正樣品中氧化產物對測定影響氯丙嗪的最大吸收波長為254nm,其氧化產物在此波長也有吸收,同時在277nm處氧化產物也有吸收,且其吸收度與在254nm處吸收度相等,而氯丙嗪在此波長處無吸收.

A=A254-A277第四章苯駢二氮雜卓類藥物的分析

一.結構分析

氯氮卓（1955年合成）

地西泮（1959年合成）

共同點：（1）二氮雜卓環為七元環，環上氮原子具有強堿性，苯基的取代使堿性降低，可進行非水滴定法測定；（2）UV吸收，用于含量測定；第七章生物堿類藥物的分析

TheAnalysisofAlkaloid第一節概述一、特點1．含氮堿性化合物2．沒有共同母核3．多數具有含氮雜環結構，少數氮在側鏈上（如麻黃堿）4.絕大部分存在于植物體內；少數存在于動物體內（如蟾蜍堿）二、堿性與結構的關系堿性—氮原子結合狀態和所處化學環境電子效應:誘導效應和共軛效應立體效應＊與質子結合能力大，堿性強＊與質子結合能力小，堿性弱N連接供電基團，如-OR、-R時，堿性就強。N連接吸電基團，如-NO2、-COOH等時，堿性就弱。＊電子效應:1．季銨類生物堿以季銨形式存在，可以離子化，有類似金屬的性質，堿性最強。如：小蘗堿（pKa=11.53）堿性強弱取決于芳環上取代基的性質。供電子取代基（如-CH3等）堿性強吸電子取代基（如-NO2等）堿性弱＊立體效應如：苦參堿兩個N原子再如：東莨菪堿和莨菪堿

三元氧環的存在，N上孤電子產生顯著立體效應（增強了空間位阻），使N原子不易給出電子，堿性較弱（與莨菪堿比）。（東莨菪堿）（莨菪堿）例外：含-COOH、酚-OH的生物堿，屬于兩性生物堿。如：嗎啡三、生物堿類藥物的溶解性一般情況下＊游離生物堿不溶或難溶于水，易溶于有機溶劑＊生物堿鹽易溶于水，不溶于有機溶劑＊游離生物堿，可在稀酸水溶液中成鹽而溶解。例外：①

有的生物堿能溶于水，如麻黃堿、煙堿等②

具有酸堿兩性的生物堿，可在堿的水溶液中成鹽而溶解，如嗎啡、茶堿等③

堿性較弱的生物堿不能與酸形成穩定的鹽，如咖啡因、利血平等四、生物堿類藥物的分類：2、托烷類（莨菪烷類）※莨菪烷衍生的氨基醇和不同有機酸縮合成酯類的生物堿硫酸阿托品、氫溴酸山莨菪堿3、喹啉類硫酸奎寧、硫酸奎尼丁4、異喹啉類鹽酸嗎啡、磷酸可待因6、黃嘌呤類咖啡因、茶堿第二節鑒別反應一測定理化常數1．熔點和衍生物熔點

2．比旋度二、光譜法1．UV吸收光譜

a.比較最大（小）吸收波長和相應的吸收度b.與對照品的吸收光譜比較一致性c.比較吸收系數2．IR吸收光譜IR光譜信息豐富三、化學反應1．沉淀反應：酸性水溶液中，與重金屬鹽類和大分子酸類等沉淀試劑發生沉淀反應。常用試劑：I2—KI鞣酸碘化鉍鉀硅鎢酸碘化汞鉀2．顯色反應生物堿固體+顯色試劑→顏色常用：C·H2SO4、C·HNO3、鉬硫酸3．官能團反應

第三節含量測定

一、非水堿量法在水中堿性較弱，不能順利地進行中和滴定（滴定突躍不明顯，難以判斷滴定終點）。在酸性非水介質中（如gHAc中），則能顯示出較強的堿性，滴定突躍增大，可以順利地進行中和滴定。1．測定方法＊供試品：以消耗標準液8ml計算。＊溶劑：gHAc，一般用量10~30ml，＊滴定劑：0.1mol/LHClO4/無水gHAc溶液＊指示劑：結晶紫＊做空白試驗2．討論①

適用范圍Kb﹤10-8的有機堿鹽。

Kb為10-8~10-10選冰醋酸作溶劑Kb為10-10~10-12選冰醋酸和醋酐作溶劑Kb﹤10-12選醋酐作溶劑＊HA不同，對滴定反應的影響也不同。②

鹽的滴定＊置換滴定，即用強酸（HClO4）置換出與生物堿結合的較弱的酸（HA）.HClO4、HBr、HCl、H2SO4、HNO3＊水中酸強度相等。＊gHAc中酸強度不相同.HClO4＞HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3＞其它弱酸a.

氫鹵酸鹽的測定氫鹵酸gHAc中酸性較強，對滴定有影響。排除方法：加入過量的HgAc2/gHAc溶液b.硫酸鹽的測定（以硫酸奎寧的測定為例）ⅰ．直接滴定法注意硫酸鹽的結構，正確判斷反應的摩爾比。兩個N原子喹啉N，屬于芳環族N，堿性較弱喹核N，屬于脂環族N，堿性較強在水中硫酸是二元酸，能夠解離出兩個氫離子，即在冰醋酸中硫酸是一元酸，能夠解離出一個氫離子，即奎寧與硫酸結合時，一分子的硫酸能與兩分子的奎寧結合，即：滴定反應如下：+3HClO4+用HClO4直接滴定硫酸喹寧時，摩爾比是1∶3用HClO4直接滴定硫酸阿托品硫酸阿托品（莨菪堿）的結構如下：反應的摩爾比是1∶1ⅱ．加入高氯酸鋇消除H2SO4的影響加入高氯酸鋇，摩爾比是1∶2練習題：硫酸奎寧的測定稱取樣品適量，加gHAc7ml，醋酐3ml與結晶紫指示液1滴，用0.1mol/LHClO4液滴定至終點，并將滴定結果用空白試驗校正。已知：1ml0.1mol/LHClO4液相當于24.90mg的硫酸奎寧。求：硫酸奎寧的分子量。（747.00）c.

硝酸鹽的測定＊HNO3在gHAc中為弱酸，不影響滴定突躍。＊HNO3具有氧化性，應采用電位法指示終點或將HNO3破壞分解后再進行測定。d.

磷酸鹽及有機酸鹽的測定磷酸、有機酸為弱酸，不干擾滴定。③

終點指示方法最常用的指示劑是結晶紫CrystalViolet（CV）紫藍藍綠黃綠黃（堿性區）—————→（酸性區）終點的顏色應用電位法校準。④

注意事項a.

水分的影響及排除gHAc和HClO4中都含有一定量的水分▲排除法：＊配制時，根據gHAc和HClO4含水量，加入計算量的醋酐。＊費休氏（Fischer）水分測定法準確測出gHAc和HClO4中含水量，準確加入醋酐。b.

標準溶液的穩定性◆水的膨脹系數是0.21×10-3/

C◆gHAc膨脹系數是1.1×10-3/

C，較大，體積隨溫度變化較大，且還具有揮發性。

測定樣品與標定標準溶液時溫度不同，應對濃度進行校正。其中：

0.0011：gHAc的膨脹系數t0和t1：標定標準溶液和測定樣品時的溫度F0和F1：t0和t1所對應的標準溶液的F值★說明：ⅰ．

t1-t0

>10

Cⅱ．或貯存時間超過30天則在臨用前必須重新標定標準溶液的濃度。校正公式：二、提取中和法1．基本原理利用生物堿鹽類可溶于水,游離生物堿不溶于水而溶于有機溶劑的性質進行提取，然后進行滴定的方法。即2．討論(1)

堿化試劑①

常用的堿化試劑NaOH、NH3、Na2CO3、NaHCO3、Ca(OH)2、MgO等。②

對堿化試劑的要求堿化試劑堿性大于生物堿的堿性，即堿化試劑的pKb＜生物堿的pKb③選用堿化試劑時應考慮的因素ⅰ．生物堿的化學性質易水解或具兩性，不能用強堿性堿化試劑。＊阿托品具有酯結構，與強堿接觸時分解；＊嗎啡具有酚羥基，和NaOH形成酚鹽溶于水，難以用有機溶劑提取。ⅱ．脂肪性物質的共存有脂肪性物質共存時，不能用強堿性的堿化試劑，以免形成乳化而難以用有機溶劑提取。④

NH3優點氨水是最常用的堿化試劑。氨Kb值：1.75×10-5一般生物堿Kb：10-6~10-9氨堿性適當，能使大部分生物堿游離，又不能使具酯結構或兩性生物堿水解或成鹽。(2)

提取溶劑①

提取溶劑要求ⅰ．不與水相混溶ⅱ．沸點低，容易揮散除去ⅲ．對所提取生物堿有極大的溶解度，而對其它共存物質不溶或極少溶解ⅳ．與堿化試劑或生物堿不起任何化學反應②

常用的提取溶劑氯仿、乙醚，有時也使用混合溶劑＊氯仿：ⅰ．比重大，易于分離ⅱ．對大部分生物堿都有較大的溶解度ⅲ．不燃燒，使用安全※氯仿在堿性下受熱很容易分解，尤其是堿性較強時更容易分解。。三、酸性染料比色法1．原理:在適當pH溶液中,有機堿（B）可以與氫離子成鹽,酸性染料（HIn）可解離成陰離子,陰離子可與有機堿鹽陽離子定量地結合成有色離子對，而進入到有機相。通過測定有機溶劑提取液的吸收度;或將有機溶劑提取液酸化或堿化，使與有機堿結合的酸性染料釋放出來，測定染料的吸收度來測得有機堿的含量。

溴麝香草酚藍(BTB)bromthymolbluepH6.0~7.6（黃~藍）2．常用酸性染料磺酞類指示劑溴甲酚綠(BCG)bromcresolgreenpH3.6~5.2（黃~藍）溴酚藍(BPB)bromophenolbluepH3.8~4.6（黃~紫）3．主要條件最主要條件是水相的pH。※要求：能使有機堿全部以鹽的形式存在，酸性染料能夠解離成離子，以便它們定量地結合成離子對而轉溶于有機相，且又能將剩余的染料完全保留在水相。★pH

（酸性）

BH+

，In－

BH+In-

，有機溶劑提取的是HIn★pH

（堿性）

In-

，BH+

BH+In-

，有機溶劑提取的是B※水相pH的選擇方法：理論計算。實驗求得。＊用待測的有機堿加入一定的酸性染料，配制成一系列不同pH值的溶液，分別用有機溶劑提取后測定有機溶劑提取液的吸收度，吸收度值最大的溶液所對應的pH值就是水相的最佳pH值。

四、凱氏定氮法＊凱氏定氮法－藥物分析＊杜馬氏法－元素定量分析＊范斯萊克法－生化分析（氨基氮測定）1、原理含氮供試品與濃硫酸共熱，供試品中所含氮轉變成氨，并與硫酸結合為硫酸氫銨和硫酸銨，用氫氧化鈉堿化后，釋出氨，隨水蒸氣餾出，用硼酸溶液或定量的酸吸收后，用標準酸液或標準堿液滴定，用空白試驗校正。凱氏定氮法分為3個步驟。(1)．消解

在凱氏燒瓶中進行。將樣品、Con.H2SO4、K2SO4、CuSO4放入凱氏燒瓶中一起加熱，有機含N化合物中的N全部轉變成NH3并以銨鹽的形式固定－(NH4)2SO4、NH4HSO4。＊H2SO4：氧化劑和炭化劑。SO2和SO3消解一般在通風櫥中進行。＊K2SO4：提高H2SO4的沸點，使消解時間縮短。＊CuSO4：催化劑，使消解速度加快。消解產物：(NH4)2SO4、NH4HSO4(2)．蒸餾與吸收用40%的NaOH溶液水蒸氣蒸餾(NH4)2SO4+2NaOH

Na2SO4+2NH3

+2H2ONH4HSO4+NaOH

NaHSO4+NH3

+H2O(3)．測定①

直接滴定法吸收液：用2%硼酸溶液滴定液：0.005mol/LH2SO4液每1ml的0.005mol/LH2SO4液

0.1401mg的N指示劑：甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑終點顏色：灰紫色NH3+H3BO3

NH3.H3BO32NH3.H3BO3+H2SO4

(NH4)2SO4+2H3BO3②

剩余滴定法用標準鹽酸或硫酸作吸收液。將蒸餾出來的NH3吸收于定過量的標準酸溶液中，過量的酸用標準堿溶液滴定。五．高效液相色譜法：

1．特點：80~90%反相色譜分離，最常用十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）。硅膠表面僅有25~50%硅醇基可與硅烷化試劑作用，在分離極性化合物特別是堿性藥物和生物堿時，裸露的硅醇基和堿性藥物發生吸附或離子交換作用，而使色譜峰拖尾，保留時間過長，甚至長期保留在色譜柱上。

（2）用硅膠作固定相法：在不改性的普通硅膠柱上，利用堿性成分與硅醇基相互作用，以高濃度極性有機溶劑，堿性水相緩沖液為流動相分離堿性藥物。（3）用金剛烷基硅烷化硅膠作固定相法：這種固定相表面被一根根短的烴鏈（乙基）連著的烴球（金剛烷）將硅膠表面上未反應的硅醇基全部覆蓋，使其不能與極性物質作用。六．陰離子表面活性劑滴定法

原理：陰離子表面活性劑:十二烷基磺酸鈉、磺基丁二酸鈉二辛酯在水和有機溶劑所組成的二相中用十二烷基磺酸鈉（或磺基丁二酸鈉二辛酯）的標準溶液為滴定劑，滴定堿性藥物的鹽類。當滴定至等當點時，滴定劑與堿性藥物完全反應，生成可溶于有機溶劑的有色配位化合物，溶解進入有機相，使有機相突然變色而指示終點。本法簡便易行，而且藥物制劑中的附加劑對測定無干擾。七、四苯硼鈉雙相滴定法滴定前：

R4N++In-R4N+In(藍色)滴定中：R4N++TPB-R4N+TPB-（無色）等當點(淺紫色)TPB-+R4N+In-R4N+TPB-（無色）原理：水相有機相In-—酸性染料如溴酚藍或溴麝香草酚藍TPB-—四苯硼鈉的陰離子本法適用于季銨類生物堿第八章維生素類藥物的分析

TheAnalysisofVitamines概述＊維生素是維持人體正常生理機能所必需的生物活性物質。＊如果人體缺少某種維生素，就會引起維生素缺乏癥，而影響人體的正常生理機能。

例如:VA缺乏—夜盲癥VB1缺乏—腳氣病

脂溶性：水溶性：按溶解性分類VA、VD、VE、VK等B族（VB1、VB2等）、VC、煙酸、葉酸、泛酸等

第一節維生素A的分析

一．結構與性質1．化學結構2.性質a.

紫外吸收＊具有共軛多烯側鏈—紫外吸收。＊最大吸收波長在325~328nm，隨VA存在狀態以及所用的溶劑，最大吸收波長的位置有所不同b.溶解性：＊不溶于水＊溶于乙醚，氯仿，異丙醇，環己烷，脂肪和油。＊共軛多烯側鏈—性質非常活潑.c.

不穩定性◆維生素A的氧化產物：▲ⅰ．環氧化物▲

ⅱ．維生素A醛▲ⅲ．維生素A酸ord.與SbCl3作用—Carr-Price反應★鑒別★含量測定二.鑒別試驗1.

三氯化銻反應

無水2.

紫外吸收光譜VA的無水乙醇溶液在326nm有最大吸收。三．含量測定紫外分光光度法－三點校正法

1.概述＊共軛多烯的結構—具有特征的紫外吸收。＊相關物質—結構相似,維生素A最大吸收波長附近也有吸收，對測定有影響。＊Morton和Stubbs等人提出了三點校正法。2.

原理（根據、假定）ⅰ．物質對光的吸收具有加和性，即ⅱ．維生素A中的不相關吸收在310~340nm范圍內近似一條直線。效價為維生素A1的40%，

max345~350nm3.

相關物質的吸收＊a.

維生素A的衍生物ⅰ．維生素A2

去氫維生素A效價低于維生素A1，

max385~390nm＊b.

維生素A的氧化產物已介紹。ⅱ．維生素A3

去水維生素A＊c.

合成時的中間體側連有4個雙鍵—應有種異構體。目前，包括維生素A在內，共發現有6種異構體。它們是：＊e.

維生素A異構體＊d.

鯨醇維生素A醇的二聚體，沒有生物活性名稱順反異構

max(nm)相對效價ⅰ．新維生素Aa2-順式32875%ⅱ．新維生素Ab4-順31924%ⅲ．新維生素Ac2,4-二順31115%ⅳ．異維生素Aa6-順32321%ⅴ．異維生素Ab2,6-二順32424%ⅵ．維生素A全反式325~328100%新維生素Aa新維生素Ab新維生素Ac異維生素Aa異維生素Ab維生素A4.三個波長的選擇方法

1：維生素A的

max

2、

3：分別在

1兩側ⅰ．等波長差法：這兩個波長分別在

1兩側12nm處，即

1=328nm;

2=314nm;

3=340nmⅱ．等吸光度法：VA在這兩個波長下的吸光度應該等于

1下的吸光度的，即

1=325nm;

2=310nm;

3=334nm5.方法Chp收載有2種方法。★第一法（適用于酯式維生素A的測定）a.

操作方法ⅰ．最大吸收波長確認

max在326~329nm，第一法測定。

max不在326~329nm，第二法測定。b.

計算方法測定波長吸光度吸光度比值吸光度比值差計算值規定值300

0.555

316

0.907

(326)

328

1.000

(329)

340

0.811

360

0.299

ⅱ．計算吸收度比及比值差首先要計算吸收度比值。然后計算吸收度的比值差。測定波長吸光度吸光度比值吸光度比值差計算值規定值300

0.555

316

0.907

(326)

328

1.000

(329)

340

0.811

360

0.299

ⅲ．計算校正吸收度吸收度校正公式：

ⅳ換算因數定義：每一個數值所相當的效價。1IU=0.344

g全反式維生素A醋酸酯，1g的維生素A醋酸酯就相當于

維生素A醋酸酯練習題：維生素AD膠丸中維生素A的含量測定已知：平均膠丸重為0.0815g維生素A的標示量為10000IU/丸取樣：波長吸收度比值規定值比值差3000.3740.5740.5550.0193160.5840.8960.907-0.013280.6521103400.5340.8190.8110.0083600.2110.3390.2990.04求：維生素A的標示百分含量。測定數據如下表首先要求樣品的。根據比爾定律A為測得吸收度or校正吸收度首先計算吸收度比值和吸收度比值差。（填于上表）由此可知，應該用測得的328nm處的吸收度計算。然后計算校正吸收度與未校正吸收度相差的百分數由結果知，需計算校正吸收度。所以所以，維生素A的標示含量這樣★第二法（皂化法）：消除植物油干擾：適合VA醇b.在300，310，325和334nm處測定吸收度，找出λmaxc.計算d.校正公式A325（校）=6.815A325-2.555A310-4.260A334e.判斷5、注意事項（1）VA遇光易氧化變質，操作應半暗室中快速進行，所用試劑不得含氧化性物質，以防VA紫外線或氧化性物質破壞。

（2）用三校正法測定時，一點在λmax處，其余兩點均為吸收曲線的上升和下降陡坡處。對波長的正確性要求嚴格。340nm處，若波長誤差±0.5nm，可影響結果-3.1~2.07%。所以測定時所用儀器的波長讀數應注意，必要時應作標準。維生素A醋酸酯膠丸含量測定:取內容物39.1mg,加環己烷溶解并稀釋成100ml，在下列五個波長處測得吸收度A值如下：測定波長(nm)測得吸收度A值吸收度比值差值規定值計算值3000.3740.555

3160.5920.907

3280.6631.000

3400.5530.811

3600.2280.299

已知：平均膠丸內容物重為0.08736g;維生素A的標示量為3000IU/丸試求：維生素A的標示百分含量？維生素A醋酸酯膠丸的含量測定，取內容物W，加環己烷溶解并稀釋至10ml，搖勻，精密量取0.1ml,再加環己烷稀釋至10ml，使其濃度為9~15IU/ml。已知內容物平均重量為80.0mg,每丸標示量為10000IU。試計算取樣量（W）的范圍是多少？第二節維生素E的分析一．化學結構與性質名稱：消旋—α—生育酚醋酸酯母核：苯駢二氫吡喃衍生物苯環上有一乙酰化的酚羥基側鏈：脂肪烷烴二、鑒別試驗1、硝酸反應：本品，無水乙醇溶解，加硝酸，75℃加熱約15分鐘，顯橙紅色。2、水解后氧化反應：本品，在堿性條件下水解，得α—生育酚，在聯吡啶和三氯化鐵試液的作用下，反應產生血紅色配離子。3、UV吸收：VE的0.01%無水乙醇液：λmax=284nmλmin=254nm2、反應條件（1）VE在H2SO4酸性條件下水解為宜。堿性溶液中游離生育酚易被氧化。Ce(SO4)2液滴定在酸性溶液中進行,如在堿性中會生成堿式鹽而影響測定。（2）Ce(SO4)2溶于酸水溶液，不溶于醇,α—生育酚溶于酸而不溶于水,滴定過程中應有一定濃度的乙醇。（3）本法適用于純度高的VE供試品。（二）氣相色譜法：Chp20001、色譜條件及系統適應性試驗色譜柱：2m×4mmI.D.硼硅玻璃柱，內裝硅藻土（80~100目）固定相：硅酮（OV-17）涂布濃度2%載氣：N2，流速:含2%固定相：以18~20分鐘為宜；含5%固定相：以30~32分鐘為宜2、溶液配制：內標溶液：正三十二烷的環己烷溶液（1.0mg/ml）對照溶液：對照品溶解于內標溶液中(1mg/ml)供試品溶液：供試品約50mg，用內標溶液，溶解并稀釋至50ml

4、供試品測定mg=F×Ax×Ms/As

Ax：供試品峰面積

F：校正因子

As：

內標物的峰面積5、特點：（1）簡便快速、專屬性強，適用于VE、VE制劑及多種維生素制劑中VE的測定。（2）需要特殊儀器（三）高效液相色譜法

日本藥局方（JP13）色譜條件：柱：ODS

流動相：甲醇—水(49:1)

檢測波長：292nm對照品法定量第三節維生素B1的分析一、化學結構與性質1.結構：氯化3-[（4-氨基-2-甲基嘧啶-5-）甲基]-5-（2-羥乙基）-4-甲基噻唑的鹽酸鹽2.結構特點：☆a.氨基嘧啶—次甲基—噻唑環季銨化合物☆

b.堿性基團：嘧啶環上的氨基可與酸成鹽噻唑環上的季銨

3.性質：①

硫色素反應VB1噻唑環在堿性條件下可被鐵氰化鉀K3Fe(CN)6等一些氧化劑氧化后，與嘧啶環上的氨基縮合成具有熒光的硫色素。

②

沉淀反應VB1的含氮雜環，能和生物堿沉淀試劑反應產生沉淀。如：VB1與硅鎢酸反應可生成組成一定的沉淀。＊重量法測定VB1含量。④

加堿分解后與醋酸鉛反應VB1與NaOH試液一起加熱，分解產生NaS，可與PbAc2反應生成PbS的黑色沉淀。⑤維生素B1的水溶液顯氯化物的特征反應。二.鑒別試驗1.硫色素熒光反應VB1專屬反應，用于鑒別和含量測定。2、沉淀反應：可與某些生物堿沉淀試劑生成組成恒定的沉淀如：與碘化汞鉀產生淡黃色沉淀與碘生成紅色沉淀與硅鎢酸生成白色沉淀與苦味酸生成扇形白色結晶三.含量測定非水滴定法（ChP所用方法）硅鎢酸重量法銀量法硫色素熒光法紫外分光光度法比色法絡合滴定法2、方法：溶劑：冰醋酸指示劑：喹哪定紅-亞甲藍混合指示液滴定劑：高氯酸醋酸汞：終點：天藍色空白校正：T=16.86mg/ml（二）硅鎢酸重量法2VB1＋硅鎢酸白色沉淀＋4HCl1、原理：

VB1在酸性溶液中與硅鎢酸作用產生沉淀，根據沉淀的重量和供試品的重量即可計算其含量。

2、計算：2VB1的分子量為2×337.27沉淀的分子量為3479.22換算因數=0.1939（含義：1g沉淀相當于0.1939gVB1）

3、測定方法：4、實驗條件（1）取樣量：應在50mg左右，不得少于25mg。（2）加入鹽酸的目的：易于過濾。＊酸量不足：沉淀的顆粒過細。＊酸量過多：無太大影響。（3）硅鎢酸的用量：硅鎢酸：VB1=8：1

用量不足，導致結果偏低（4）干燥溫度：80℃，干燥3hr，至恒重，沉淀含4分子結晶水，換算因數為0.1939（5）硅鎢酸的加入速度用滴管一滴一滴加入，純度高快加，純度低慢加。★防止沉淀表面吸附的雜質來不及離開而被沉淀包圍。（6）煮沸時間2~5min為宜★使沉淀顆粒大，利于過濾洗滌。（7）沉淀的洗滌用熱稀鹽酸洗滌，洗滌液用量不得多于50ml，否則，沉淀會部分溶解（8）洗器用4號垂熔玻璃漏斗為宜。

4、重量法特點（1）比較準確、靈敏；（2）方法簡便，不需要特殊儀器；（3）恒重比較費時間。第四章維生素C的分析一.化學結構結構特點：①

維生素C分子中具有2個手性C原子，具有4種光學異構體。其中生理活性最強的是L（+）-抗壞血酸D(-)-異抗壞血酸L(+)-異抗壞血酸L(+)-抗壞血酸D(-)-抗壞血酸②具有內酯結構。堿性下可水解。③

具有烯二醇基。還原性，能夠被氧化成去氫抗壞血酸。酸性,能與堿成鹽。二．性質與鑒別試驗1.

酸性烯二醇結構—酸性。▲C3-OH，pKa=4.17(共軛效應)▲C2-OH，pKa=11.57(鄰位羰基)一元酸.能與NaHCO3作用生成鈉鹽。2.還原性烯二醇基—還原性。如：3.

水解反應

L-二酮古羅糖酸(無生物活性)4.

熒光反應5.糖的性質VC的結構很象糖結構，具有糖的性質。這個反應的摩爾比是1∶2。三．含量測定1.

碘量法a.

原理b.

操作終點顏色：無色→藍色1ml0.1mol/L碘液1ml

8.806mgC6H8O6c.

討論ⅰ．反應條件＊酸性使VC在空氣中氧化速度減慢。ⅱ．溶劑＊新沸放冷的水。減少水中溶解氧的影響。ⅲ．還原性物質的影響及排除＊VC注射液中常加有亞硫酸鹽如NaHSO3作為抗氧劑.排除：加入丙酮或甲醛。+→所以，終點的顏色是溶液由無色變為紅色。氧化型（紅色）還原型（無色）++第九章甾體激素類藥物的分析

TheanalysisofSteroidHormonDrugs

第一節概述

一、母核環戊烷駢多氫菲環上雙鍵的表示方法：用“

”表示,雙鍵的位置寫在

的右上角。

雙鍵位置

4

1,4

5

5(10)

環上取代基構型表示方法：＊構型：與母核連接的取代基,指向環平面的前面時,為

構型.用實線表示“———”＊構型：與母核連接的取代基,指向環平面的背面時,為

構型.用虛線表示“

”二、分類按生理作用分為：1．腎上腺皮質激素皮質酮的衍生物代表藥物有：

可的松氫化可的松人工合成藥物：

地塞米松氫化可的松結構的基礎上1，2位間引入一個雙鍵，9位上引入