T/CNHFA0XX—2022保健食品用原料金銀花1范圍本標準適用于保健食品用原料金銀花。2規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。下列文件中所包含的部分條款通過相關標準的引用而成為本標準的部分內容。凡是注明日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版本）適用于本文件。GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》GB2762食品安全國家標準食品中污染物限量GB2763食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量GB16740食品安全國家標準保健食品GB2761食品安全國家標準食品中真菌毒素限量《中華人民共和國藥典》一部《中華人民共和國藥典》四部GB5009.12食品安全國家標準食品中鉛的測定GB5009.11食品安全國家標準食品中總砷及無機砷的測定GB5009.17食品安全國家標準食品中總汞及有機汞的測定GB5009.15食品安全國家標準食品中鎘的測定3技術要求3.1來源金銀花為忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初開的花。夏初花開放前采收，干燥。3.2感官要求應符合表1的規定。表1感官要求項目要求檢驗方法色澤表面黃白色或綠白色（貯久色漸深）。雄蕊黃色在日光下觀察顏色；如斷面不易觀察，可削平后觀察滋味、氣味氣清香，味淡、微苦滋味可取少量直接口嘗，或加熱水浸泡后嘗浸出液；氣味可直接嗅聞，或在折斷、破碎或搓揉時進行形態本品呈棒狀，上粗下細，略彎曲，長2~3cm，上部直徑約3mm，下部直徑約1.5mm。表面密被短柔毛。偶見葉狀苞片。花萼綠色，先端5裂，裂片有毛，長約2mm。開放者花冠筒狀，先端二唇形；雄蕊5，附于筒壁；雌蕊1，子房無毛在日光下觀察；長度、寬度及厚度測量時應用毫米刻度尺；質地是指用手折斷時的感官感覺3.3理化指標應符合表2的規定。表2理化指標項目指標檢驗方法水分，%≤12.0《中華人民共和國藥典》2020年版四部0832第二法灰分，%≤10.0《中華人民共和國藥典》2020年版四部2302方法酸不溶性灰分，%≤3.0《中華人民共和國藥典》2020年版四部2302方法鉛（Pb），（mg/kg）≤5.0GB5009.12總砷（As），（mg/kg）≤1.0GB5009.11總汞（Hg），（mg/kg）≤0.3GB5009.17鎘（Cd），（mg/kg）≤1.0GB5009.15阿維菌素，（mg/kg）≤1按照GB2763規定的方法測定吡蟲啉，（mg/kg）≤1皂苷類成分（灰氈毛忍冬皂苷乙、灰氈毛忍冬皂苷甲、川續斷皂苷乙）應符合規定附錄A注：其他未列的污染物限量應符合GB2762的規定；其他未列的農藥最大殘留限量應符合GB2763及國家有關規定和公告。3.4標志性成分指標應符合表3的規定。表3標志性成分指標項目指標檢驗方法綠原酸（C16H18O9）含量，%（以干燥品計）≥1.5附錄B酚酸類含量，%（以干燥品計）≥[酚酸類含量以綠原酸（C16H18O9）、3,5-O-二咖啡酰奎寧酸（C25H24O12）、4,5-O-二咖啡酰奎寧酸（C25H24O12）的總量計]3.83.5真菌毒素限量真菌毒素限量應符合GB2761中相應類屬食品的規定和(或)有關規定。4其他保健食品所用原料為本品的炮制加工品，其炮制加工前的原料應符合本標準。炮制如為凈制、切制的，除另有規定外，相關項目應符合本標準。炮制如為其他炮制工藝的，炮制加工品應符合相應標準的規定。T/CNHFA0XX—2022附錄A（規范性附錄）皂苷類成分檢驗方法A.1一般規定本標準所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682規定的三級水。實驗中所用的溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。A.2方法提要本品經甲醇超聲提取后，采用薄層色譜法對皂苷類成分（灰氈毛忍冬皂苷乙、灰氈毛忍冬皂苷甲和川續斷皂苷乙）進行檢查。A.3儀器A.3.1分析天平：感量為0.01mg和0.0001g。A.3.2超聲波清洗儀。A.3.3鼓風干燥箱。A.3.4點樣器：玻璃毛細管（直徑為0.5mm，長度為100mm）或微量注射器。A.3.5色譜展開缸：密閉玻璃槽（長度、寬度及高度可根據實際使用進行選擇）。A.3.6玻璃噴霧瓶。A.3.7紫外光燈：波長365nm。A.4試劑和耗材A.4.1甲醇。A.4.2正丁醇。A.4.3甲酸。A.4.4水。A.4.5硫酸。A.4.6乙醇。A.4.7薄層層析硅膠板：以硅膠G為吸附劑，加以適量粘合劑，涂布于玻璃板上，涂層厚度為0.2~0.3mm的薄層層析板，可自行制備或使用市售符合規格的薄層層析硅膠板。使用前置（105±5）℃鼓風干燥箱中活化1.5~2小時，置干燥器中備用。A.4.6對照品灰氈毛忍冬皂苷乙對照品、川續斷皂苷乙對照品（均購自中國食品藥品檢定研究院）、灰氈毛忍冬皂苷甲對照品或其他等同對照品，其CAS號、分子式和相對分子量見表A.1。表A.1化學對照品（標準品）信息中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子量灰氈毛忍冬皂苷乙MacranthoidinB136849-88-2C65H106O321399.52灰氈毛忍冬皂苷甲MacranthoidinA140360-29-8C59H96O271237.38川續斷皂苷乙DipsacosideB33289-85-9C53H86O221075.24A.5薄層色譜條件及系統適用性A.5.1薄層色譜條件點樣量：3μL，斑點寬6~8mm；展開劑：正丁醇-甲酸-水（4∶1∶5,v/v/v）上層溶液；展開距離：6~8cm；顯色劑：10%硫酸乙醇試液。A.5.2系統適用性經10%硫酸乙醇試液顯色后，在紫外燈365nm下，對照品溶液顯示3個獨立的清晰斑點。A.6操作方法A.6.1對照品溶液的制備分別取灰氈毛忍冬皂苷乙對照品、灰氈毛忍冬皂苷甲對照品和川續斷皂苷乙對照品適量，加甲醇制成每1mL含各成分均為1mg的混合溶液，備用。A.6.2供試品溶液的制備取供試品粉碎，取粉末約0.5g，置50mL具塞錐形瓶中，加入甲醇10mL，超聲處理10分鐘，濾過，取濾液，備用。A.6.3供試品溶液的測定照薄層色譜法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部0511）試驗，分別吸取供試品溶液和對照品溶液3μL點于同一硅膠G薄層板上，展開缸內采用展開劑預飽和15~20分鐘后，放入薄層板，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇試液，于105℃下加熱5分鐘，置紫外燈365nm下檢視。A.7結果判別供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜灰氈毛忍冬皂苷乙、灰氈毛忍冬皂苷甲以及川續斷皂苷乙相應的位置上，不應顯示相同顏色的熒光斑點。T/CNHFA0XX—2022附錄B（規范性附錄）標志性成分檢驗方法B.1一般規定本標準所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682規定的三級水。實驗中所用的溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。B.2方法提要本品經75%甲醇超聲提取后，采用反相高效液相色譜法測定，以外標法分別計算綠原酸、3,5-O-二咖啡酰奎寧酸和4,5-O-二咖啡酰奎寧酸的含量，酚酸類含量以上述三種成分的總量計。B.3儀器B.3.1分析天平：感量為0.01mg和0.0001g。B.3.2超聲波清洗儀。B.3.3高效液相色譜儀：配有紫外檢測器。B.4試劑和耗材B.4.1甲醇。B.4.2乙腈：色譜純。B.4.3磷酸。B.4.4水。B.4.50.45μm微孔濾膜（有機相）。B.4.6對照品綠原酸對照品、3,5-O-二咖啡酰奎寧酸對照品和4,5-O-二咖啡酰奎寧酸對照品（均購自中國食品藥品檢定研究院）或其他等同對照品，其CAS號、分子式和相對分子量見表B.1。表B.1化學對照品（標準品）信息中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子量綠原酸Chlorogenicacid327-97-9C16H18O9354.313,5-O-二咖啡酰奎寧酸3,5-O-Dicaffeoylquinicacid89919-62-0C25H24O12516.453,5-O-二咖啡酰奎寧酸4,5-O-Dicaffeoylquinicacid57378-72-0C25H24O12516.45B.5色譜條件及系統適用性B.5.1色譜條件色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：A相：乙腈；B相：含0.1%磷酸水溶液。梯度洗脫，梯度程序見表B.2；表B.2梯度條件時間/minA相/%B相/%0148681981141981343169359010409010檢測波長：327nm；進樣量：2μL；流速：0.7mL/min。B.5.2系統適用性理論板數按綠原酸峰計算應不低于10000。B.6操作方法B.6.1對照品溶液的制備取綠原酸對照品、3,5-O-二咖啡酰奎寧酸對照品、4,5-O-二咖啡酰奎寧酸對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加75%甲醇制成每1mL含綠原酸0.28mg、3,5-O-二咖啡酰奎寧酸0.15mg、4,5-O-二咖啡酰奎寧酸0.044mg的混合溶液，搖勻，備用。B.6.2供試品溶液的制備取供試品粉碎，取粉末約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50mL，稱定重量，超聲處理（功率500W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，再經0.45μm濾膜（B.4.5）濾過，取續濾液，備用。B.6.3供試品溶液的測定照高效液相色譜法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部0512）試驗，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各2μL，注入高效液相色譜儀測定，按外標法分別計算供試品中綠原酸、3,5-O-二咖啡酰奎寧酸和4,5-O-二咖啡酰奎寧酸的含量。B.7測定結果的計算B.7.1計算公式金銀花中酚酸類含量以質量分數計，數值以%表示，按公式（B.1）和（B.2）計算：