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文檔簡介

蛋白質技術作業總結1、名詞解釋肽單位:又稱為肽基（peptidegroup）,是肽鍵主鏈上反復結構。是由參于肽鏈形成氮原子,碳原子和它們4個替換成份:羰基氧原子,酰氨氫原子和兩個相鄰α-碳原子組成一個平面單位。疏水內核:蛋白質結構共同特征,在分子內部由一個由疏水側鏈堆積形成結構。有穩定結構作用。分子伴侶:是以熱休克蛋白為代表一類參與蛋白質轉運、折疊、聚合、解聚、錯誤折疊后重新折疊、水解以及原始蛋白質活性調控等一系列功效保守蛋白質家族。2、哪些氨基酸強烈傾向于形成阿爾法螺旋？哪些非常不利于形成阿爾法螺旋氨基酸？強烈傾向于形成阿爾法螺旋氨基酸:谷氨酸Glu、蛋氨酸Met、丙氨酸Ala、亮氨酸Leu

非常不利于形成阿爾法螺旋氨基酸:絲氨酸Ser、酪氨酸Tyr、甘氨酸Gly、脯氨酸Pro3.簡述β-折疊特征。β-折疊結構形成通常需要兩條或兩條以上肽段共同參與,即兩條或多條幾乎完全伸展多肽鏈側向聚集在一起,相鄰肽鏈主鏈上氨基和羰基之間形成有規則氫鍵,維持這種結構穩定。β-折疊結構特點以下:包含肽段較短,通常為5—10個氨基酸殘基。（2）借相鄰主鍵間氫鍵維系,在反平行層中是窄對氫鍵,平行層中是寬對氫鍵。（3）相鄰肽鏈走向能夠是平行和反平行兩種。（4）主鏈骨架伸展展現鋸齒狀。4、結構域、亞基基礎區分是什么？一個分子中結構域區是以共價鍵相連,而亞基是以非共價鍵。5.圖解蛋白質結構層次體系6.請列出建立一個蛋白質純化試驗室所需要基礎設備。樣品處理:

1.低溫冷凍高速離心機,常規離心機,超聲破碎儀,機械破碎儀

2.不一樣體積超濾裝置,雙蒸水裝置,冷凍干燥機,冰箱（4,-20,-70攝氏度）

蛋白質分離純化:

一套蛋白質分離純化系統（比如法瑪西亞AKTA系統）,同時配置多種類型層析柱和填料;高效液相系統。

檢測判定系統:

電泳儀,WESTERNBLOT轉膜儀（半干或濕轉）,干膠儀,紫外分光光度計,酶標儀。7、經過半合成對蛋白質進行工程操作標準是利用非共價鍵相互作用,二硫鍵,常規肽鍵（經過化學法或酶法產生）,其她非肽共價鍵將較小肽段連在一起。8、簡明描述試驗設計方案:以大腸桿菌質粒DNA為載體克隆一個目蛋白基因,并使之在大腸桿菌中進行表示。9、測定蛋白分子量方法有哪些？（思索:設計一試驗方案測定蛋白質分子量）沉降法（超速離心法）、凝膠過濾法、SDS.測定總蛋白質量方法。凱氏定氮法、雙縮脲法、Fol

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