考情1.考查題型：多以選擇題呈現，或與基因工程融合考查2.命題趨勢：常以中國最新的技術為背景考察細胞工程和胚胎工程，單克隆抗體可與免疫調節融合考查模塊五

生物技術與工程02細胞工程和胚胎工程概念4細胞工程通過細胞水平上的操作，獲得有用的生物體或其產品4.1植物細胞工程包括組織培養和體細胞雜交等技術4.2動物細胞工程包括細胞培養、核移植、細胞融合和干細胞的應用等技術4.3對動物早期胚胎或配子進行顯微操作和處理以獲得目標個體(1)植物組織培養：______________________________________________(2)植物體細胞雜交：____________________________________________(3)動物細胞培養：______________________________________________(4)動物體細胞核移植及克隆：__________________________________(5)動物細胞融合：______________________________________________(6)單克隆抗體的制備：_________________________________________細胞的全能性。細胞的全能性、細胞膜的流動性。細胞增殖。動物細胞核的全能性。細胞膜的流動性。細胞膜的流動性、細胞增殖。該圖可以表示受精作用，可以表示植物體細胞雜交，動物細胞融合，甚至可以表示核移植細胞工程的原理1.植物組織培養①培養基的組成：無機鹽、有機物、蔗糖及植物激素、瓊脂等。添加蔗糖的目的是________________________________。③

若生產人工種子，則培養到_____________階段；若提取細胞產物，則一般培養到__________________階段；若培育新個體，則應培養到試管苗階段。提供碳源和能源，調節滲透壓胚狀體愈傷組織②

為了獲得脫毒苗，可以選取植物的________進行組織培養。莖尖一、植物細胞工程[常考細節]

培養胡蘿卜根組織可獲得試管苗，過程如圖。1)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，原因是__________________________________________________________________________。2)步驟⑥要進行照光培養，其作用是____________________________________________________。3)經組織培養得到的植株，一般可保持原品種的______________，這種繁殖方式屬于__________繁殖。誘導葉綠素的形成，使試管苗能夠進行光合作用①

②

③④

⑤

⑥形成層形成層細胞的分化程度小，容易脫分化誘導形成愈傷組織遺傳特性無性2.植物體細胞雜交技術一、植物細胞工程與雜交育種、多倍體育種的區別染色體丟失例1.兩種遠緣植物的細胞融合后會導致一方的染色體被排出，染色體斷裂形成的片段在細胞融合后可能不被排出而整合到另一個細胞的染色體上。下圖是利用耐鹽的中間偃麥草培育耐鹽小麥的過程，相關敘述錯誤的是A．①需要使用纖維素酶和果膠酶處理，以去除細胞壁B．②的目的是誘導中間偃麥草原生質體突變出耐鹽基因C．③可以利用高Ca2+-高pH融合法D．④依據的原理是植物細胞的全能性B例2.為拯救珍稀植物紅豆杉，并同時獲得高抗癌活性物質——紫杉醇，科研小組設計了如圖所示的實驗流程。下列相關敘述正確的是CA.誘導紅豆杉莖尖經過再分化過程形成愈傷組織B.整個培養過程中生長素和細胞分裂素的比例固定不變C.用液體培養基擴大培養愈傷組織生產紫杉醇時，通常要通入無菌空氣D.同一株植物不同部位的細胞經誘導培養獲得的植株基因型一定相同1.動物細胞培養二、動物細胞工程糖類、氨基酸無機鹽、維生素、血清等無菌、無毒的環境適宜的溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環境在無菌、無毒等適宜環境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養時，需要定期更換培養液，目的是？清除代謝產物，同時給細胞提供足夠的營養2.單克隆抗體的制備二、動物細胞工程雜交瘤細胞的特點？單克隆抗體的優點和應用？例3.[模擬題整合]細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基蝶呤阻斷。人體淋巴細胞盡管有這兩條途徑，但不能無限增殖，腫瘤細胞盡管沒有S途徑，但能無限增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。為了從培養液中分離出雜交瘤細胞，設計獲得圖④細胞的實驗思路：配制動物細胞培養液→加入__________________（填藥劑）→接種圖_________（填序號）細胞→置于恒溫培養箱中培養。以上設計的原理是雜交瘤細胞可利用____途徑合成DNA，從而能在該培養液中增殖。由此分析過程⑤所用的HAT培養基從功能上看屬于________培養基。SPEG和氨基蝶呤選擇①③第二步篩選：無限稀釋，克隆化培養和抗體檢測陽性過程④中將雜交瘤細胞多倍稀釋，接種在______________上，盡量使每個孔只接種1個雜交瘤細胞以進行下一步的_____________，然后通過ELISA法（又稱酶聯免疫吸附試驗法）檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體，可與___________結合的培養孔為陽性孔。特定抗原克隆化培養多孔培養板3.動物體細胞核移植技術二、動物細胞工程(1)核移植獲得的克隆動物與提供細胞核的親本性狀可能不同的三個原因：①克隆動物遺傳物質來自兩個親本。②發育過程中可能發生基因突變或染色體變異。③外界環境可能引起不可遺傳的變異。(2)克隆動物的產生是無性繁殖。例4.亨廷頓舞蹈病是一種由于亨廷頓蛋白(HTT)基因突變所導致的疾病。我國科學家利用基因編輯技術(CRISPR/Cas9)，成功培育出世界首例亨廷頓舞蹈病的基因“敲入”豬模型，操作過程如圖所示。下列說法不正確的是A.上述操作過程的原理有基因重組、動物細胞核全能性等B.過程②為動物細胞融合技術，通常采用滅活病毒誘導C.過程④為胚胎分割，該技術的關鍵是將內細胞團均等分割D.基因“敲入”豬模型所攜帶的人突變HTT基因可遺傳給后代B

2017年，我國科學家首次培育出靈長類動物克隆猴“中中”和“華華”，這對人類重大疾病的研究和治療有積極意義，其克隆的基本過程如圖所示。下列敘述正確的是A.對乙猴和丙猴同時注射促性腺激素進行超數排卵處理B.卵母細胞所去除的“核”其實是紡錘體-染色體復合物C.“中中”和“華華”的性別及遺傳物質只與甲猴有關D.使用PEG或滅活的病毒激活重構胚以使其完成細胞分裂和發育進程B(課本細節P52)胚胎移植的操作流程三、胚胎工程胚胎移植的理論基礎？胚胎移植是基因工程、體外受精、胚胎分割等技術獲得轉基因哺乳動物個體的最后一個環節！例5.(2020·山東)經遺傳改造的小鼠胚胎干細胞注入囊胚，通過胚胎工程的相關技術可以獲得具有不同遺傳特性的實驗小鼠。下列說法錯誤的是A.用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子B.體外受精前要對小鼠的精子進行獲能處理C.胚胎移植前要檢查胚胎質量并在囊胚或原腸胚階段移植D.遺傳改造的小鼠胚胎干細胞可以通過轉基因等技術獲得CA.選擇胎猴的體細胞進行核移植的理由是

動物胚胎細胞分化程度高，表現全能性

相對容易B.卵母細胞在去核環節實際操作中被去除

的不是核膜包被的細胞核，而是紡錘體－染色體復合物C.使用Kdm4d的mRNA和TSA處理重構胚都不利于重構胚的分裂和發育D.為得到遺傳背景相同的克隆猴用于科研，可用機械方法將早期胚胎隨

機切割成2份或4份后再進行胚胎移植B例6.在體細胞克隆猴培育過程中，為調節相關基因的表達，提高胚胎的發育率和妊娠率，研究人員將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構胚，同時用組蛋白脫乙酰酶抑制劑(TSA)處理，具體培育流程如圖所示。下列說法正確的是例7.小鼠胚胎干細胞經定向誘導可獲得多種具有不同功能的細胞，制備流程如圖所示。下列相關敘述錯誤的是A.用胰蛋白酶處理a處的細胞后可獲得分

散的胚胎干細胞B.欲提高胚胎的利用率，可用胚胎分割技

術將a處細胞團均等分割C.為獲得更多的囊胚，采用促性腺激素注射促進雄鼠產生更多的精子D.a處的細胞與b處的細胞的核基因相同，但mRNA有差異C例8.世界首例豬腎移植人體手術成功，3天均未發生排異現象。這顆腎臟來自一頭實施過基因編輯的豬。該器官的來源雖然存在一定的倫理問題，但是現階段挽救病人生命的有效措施。下圖為基因編輯豬的培育流程，請根據所學生物學知識，結合圖示回答下列問題：(1)基因編輯豬的培養過程中，使用的生物技術有________________________________________(至少寫出3個技術名稱)。(2)在1號豬的細胞分離培養時，需要將細胞置于含有_________________的混合氣體的CO2培養箱中進行培養，其中CO2的主要作用是________________________。(3)對2號豬可以使用____________使其超數排卵，得到的卵母細胞必須進行去核處理，原因是________________________________________________。(4)對3號豬進行胚胎移植時，圖中所示的重組胚胎處于________期。95%空氣和5%CO2維持培養液的pH