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34TechnicalregulationfornestedPCRdetectionmethodforporcinecircovirustypI本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。蕭縣畜牧獸醫水產服務中心、岳西縣畜牧獸醫水產服務中心、望江縣畜牧獸醫技術推廣1豬圓環病毒3型套式PCR檢測技術規程GB/T6682分析實驗室用水規格和NY/T541獸醫診斷樣品采集、保存與運輸技術規范《病死及病害動物無害化處理技術規范》（農醫發〔2013.1豬圓環病毒屬于圓環病毒科、圓環病毒屬，根據其致病性、抗原性及基因組序列分為1型、2型和3型等基因型，豬圓環病毒3型是2015年發4主要儀器設備4.2臺式高速冷凍離心機：可控溫至4℃,離心力12000g以上4.3全自動組織快速碾磨儀。4,4渦旋振蕩器4.5冰箱：2℃~8℃、-20℃、-70℃三種。4.7水平電泳槽。4.8凝膠成像系統2）：5.7無水乙醇：分析純。5.9DNA分子量標準：DL2000Ma按照NY/T541的規定執行。病死g～10g活豬采集EDTA抗凝全血（5m7.2運輸與保存3），8.2抗凝血樣品8.3糞便、口鼻拭子樣品10.1反應體系配制按照表1配制反應體系，總反應體系體積為20μLMix8811410.2反應條件設定第1輪、第2輪PCR反應條件均為：95℃預變性5min后，35個循環擴增（95℃變性30s、58℃），10.3電泳10.4結果觀察）；11.2結果判定在試驗成立的條件下，如果檢測樣品PCR產物電泳后未出現412bp大小特異性目的條帶，判為陰按照《病死及病害動物無害化處理技術規范》的12.2實驗廢棄物處理56A.7

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