4GB/TXXXX.5—XXXX保健食品原料褪黑素本文件規定了保健食品用原料褪黑素的質量要求，包括包括技術要求、試驗方法、檢驗規則和標志、標簽、包裝、運輸、貯存。本文件適用于以合成的5-甲氧基色胺經乙酰化制得的保健食品用原料褪黑素的生產、檢驗和銷售。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標志GB/T601化學試劑標準滴定溶液的制備GB/T602化學試劑雜質測定用標準溶液的制備GB/T603化學試劑試驗方法中所用制劑及制品的制備GB4789.2食品安全國家標準食品微生物學檢驗菌落總數的測定GB4789.3食品安全國家標準食品微生物學檢驗大腸菌群計數GB4789.4食品安全國家標準食品微生物學檢驗沙門氏菌檢驗GB4789.10食品安全國家標準食品微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗GB4789.15食品安全國家標準食品微生物學檢驗霉菌和酵母計數GB5009.11食品安全國家標準食品中總砷及無機砷的測定GB5009.12食品安全國家標準食品中鉛的測定GB5009.17食品安全國家標準食品中總汞及有機汞的測定GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法GB7718食品安全國家標準預包裝食品標簽通則3術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4化學名稱、分子式、結構式和相對分子質量4.1化學名稱N-乙酰基-5-甲氧基色胺。4.2分子式C13H16N2O2。GB/TXXXX.5—XXXX54.3結構式褪黑素4.4相對分子質量232.28（按2023年國際相對原子質量）5技術要求5.1鑒別褪黑素原料試樣溶液（A.2.4）主峰的保留時間應與褪黑素標準溶液（A.2.3）主峰的保留時間一致。5.2感官要求應符合表1的規定。表1感官要求5.3理化指標應符合表2的規定。表2理化指標5-甲氧基色胺/%干燥失重/%熾灼殘渣/%5.4微生物指標GB/TXXXX.5—XXXX6應符合表3的規定。表3微生物指標霉菌和酵母/（CFU/g）≤大腸菌群/（MPN/g）≤5.5標志性成分指標應符合表4的規定。表4標志性成分指標褪黑素含量/%6試驗方法6.1感官要求取適量樣品，置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光下觀察色澤和狀態。6.2褪黑素含量按附錄A中A.2規定的方法測定。6.35-甲氧基色胺按附錄A中A.3規定的方法測定。6.4干燥失重按附錄A中A.4規定的方法測定6.5熾灼殘渣按附錄A中A.5規定的方法測定。6.6鉛按GB5009.12規定的方法測定。6.7總砷按GB5009.11規定的方法測定。GB/TXXXX.5—XXXX76.8總汞按GB5009.17規定的方法測定。6.9菌落總數按照GB4789.2規定的方法測定。6.10霉菌和酵母菌按照GB4789.15規定的方法測定。6.11大腸菌群按照GB4789.3中“MPN計數法”規定的方法測定。6.12沙門氏菌按照GB4789.4規定的方法測定。6.13金黃色葡萄球菌按照GB4789.10規定的方法測定。7檢驗規則7.1組批同一批原料、相同生產工藝、連續生產或同一班次生產的同一規格的產品為一批。7.2抽樣7.2.1按表5規定隨機抽取樣本。表5褪黑素原料抽樣表<5024>10067.2.2將抽取的樣品平均分裝2份置于兩個潔凈、干燥的容器中，密封，注明產品名稱、批號、取樣時間及地點、取樣人姓名等，其中1份供檢測用，另1份封存后保存以備復查。7.3出廠檢驗7.3.1產品出廠前，應按本文件規定逐批進行檢驗。檢驗符合本文件要求后方可出廠。7.3.2出廠檢驗項目為：感官、褪黑素含量（以干物質計）、5-甲氧基色胺、干燥失重、熾灼殘渣。7.4型式檢驗GB/TXXXX.5—XXXX8檢驗項目為本文件要求中規定的全部項目，一般情況下，型式檢驗半年進行一次。有下列情況之一時，亦應進行型式檢驗：a)原輔材料有較大變化時；b)更改關鍵工藝或設備時；c)新試制的產品或正常生產的產品停產三個月后，重新恢復生產時；d)出廠檢驗與上次型式檢驗結果有較大差異時；e)生產場所發生變化時；f)國家行政主管機構提出型式檢驗要求時。7.5判定規則7.5.1所檢驗項目全部合格，判定該批次產品合格。7.5.2檢驗結果中有任何指標不符合本文件規定時，可自同批產品中重新加倍取樣進行復檢。若復檢結果仍不符合本文件規定,則判定該批產品不合格。微生物指標不應復檢。8標志、標簽、包裝、運輸、貯存8.1標志8.1.1標簽或說明書中應標示產品分類。8.1.2包裝儲運圖示標志應符合GB/T191的要求。8.2標簽8.2.1標簽標示內容應符合GB7718的要求。8.3包裝8.3.1包裝容器（瓶、桶、袋等）應整潔、無破損。8.4運輸8.4.1運輸工具應清潔。8.4.2不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品混裝、混運，應避免受潮、受壓、曝曬。裝卸時，應輕拿輕放，不得直接鉤扎包裝。8.5貯存8.5.1避光、密閉，在陰涼處保存。8.5.2不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品混放。GB/TXXXX.5—XXXX9（規范性附錄）檢驗方法A.1一般規定本方法中所用的水，在未注明其他要求時，應符合GB/T6682中水的規格，所用試劑，在未注明其他規格時，均指分析純。分析中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑及制品，在沒有注明其它要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規定制備。A.2褪黑素含量的測定A.2.1試劑和材料A.2.1.1褪黑素標準品（CAS號：73-31-4純度不低于99%，或經國家認證并授予證書的標準品。A.2.1.2三氟乙酸。A.2.1.370%甲醇溶液：量取700mL無水甲醇（色譜純用水稀釋至1000mL，混勻。A.2.2儀器和設備A.2.2.1電子天平：感量0.1mg。A.2.2.2高效液相色譜儀。A.2.3標準溶液的制備精密稱定褪黑素標準品約50mg（精確至0.1mg），置于50mL容量瓶中，加70%甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取適量上述溶液，用流動相稀釋制成濃度約為0.1mg/mL的標準溶液。避光操作。A.2.4試樣溶液的制備精密稱定褪黑素原料樣品約100mg（精確至0.1mg），置于100mL容量瓶中，加70%甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取適量上述溶液，用流動相稀釋制成濃度約為0.1mg/mL的試樣溶液。避光操作。A.2.5色譜條件a）色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱（粒徑5μm，4.6mm×150mm）；b）流動相：甲醇-0.1%三氟乙酸水溶液（35:65，體積分數）；c）檢測波長：222nm；d）流速：1.0mL/min；e）進樣量：10μL。A.2.6測定將上述溶液依次注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以保留時間定性，分別測量標準溶液和試樣溶液峰面積。GB/TXXXX.5—XXXXA.2.7結果計算褪黑素含量按式（A.1）計算:式中：W——褪黑素含量，單位為%；Au——試樣溶液的峰面積；As——標準溶液的峰面積；Cs——標準溶液的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；V——試樣溶液定容體積，單位為（mL）；m——原料的稱樣量（mg）。計算結果表示到小數點后一位。A.2.8精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不應超過其算術平均值的5%。A.35-甲氧基色胺的測定A.3.1試劑和材料A.3.1.15-甲氧基色胺標準品（CAS號：608-07-1純度不低于99%，或經國家認證并授予證書的標準品。A.3.1.2三氟乙酸。A.3.1.370%甲醇溶液：量取700mL無水甲醇（色譜純用水稀釋至1000mL，混勻。A.3.2儀器和設備A.3.2.1電子天平：感量0.1mg。A.3.2.2高效液相色譜儀。A.3.3標準溶液的制備精密稱定5-甲氧基色胺標準品約50mg（精確至0.1mg），置50mL容量瓶中，加70%甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取適量上述溶液，用流動相稀釋制成濃度約為1μg/mL的標準溶液。避光操作。A.3.4試樣溶液的制備精密稱定褪黑素原料樣品約100mg，置于10mL容量瓶中，加70%甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取適量上述溶液，用流動相稀釋制成濃度約為1mg/mL的試樣溶液。避光操作。A.3.5色譜條件a）色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱（粒徑5μm，4.6mm×150mm）；b）流動相：甲醇-0.1%三氟乙酸水溶液（35:65，體積分數）；c）檢測波長：222nm；d）流速：1.0mL/min；e）進樣量：10μL。A.3.6測定將上述溶液依次注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以保留時間定性，分別測量標準溶液和試樣溶液峰面積。A.3.7結果計算5-甲氧基色胺含量按式（A.2）計算:式中：W——5-甲氧基色胺含量，單位為%；Au——試樣溶液的峰面積；As——標準溶液的峰面積；Cs——標準溶液的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL）；V——總體積，單位為毫升（mL）；m——原料的稱樣量，單位為毫克（mg）；1000——單位換算系數。計算結果表示到小數點后一位。A.3.8精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不應超過其算術平均值的5%。A.4干燥失重的測定A.4.1試劑和材料干燥劑：五氧化二磷、無水氯化鈣或硅膠。A.4.2儀器和設備A.4.2.1電子天平：感量0.1mg。A.4.2.2扁形稱量瓶。A.4.2.3烘箱。GB/TXXXX.5—XXXXA.4.2.4干燥器。A.4.3分析步驟取潔凈鋁制或玻璃制的扁形稱量瓶，于101℃~105℃加熱1h，置干燥器內冷卻，稱量，重復干燥1h以上至前后兩次質量差不超過0.3mg，即為恒重。精密稱取約1g試樣，放入稱量瓶中，試樣厚度不超過5mm。于101℃~105℃加熱2h~4h，放入干燥器內冷卻0.5h后稱量。重復以上操作至前后兩次質量差不超過0.3mg，即為恒重。A.4.4結果計算干燥失重按式（A.3）計算:式中：X——干燥失重，單位為%；m1——稱量瓶和試樣干燥恒重后的質量，單位為克（g）；m2——稱量瓶恒重后的質量，單位為克（g）；m——試樣的稱樣量，單位為克（g）。計算結果表示到小數點后一位。A.4.5精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不應超過其算術平均值的10%。A.5熾灼殘渣的測定A.5.1試劑和材料A.5.1.1硫酸。A.5.1.2干燥劑：五氧化二磷、無水氯化鈣或硅膠。A.5.2儀器和設備A.5.2.1電子天平：感量0.1mg。A.5.2.2坩堝。A.5.2.3電熱板。A.5.2.4馬弗爐。A.5.2.5干燥器。A.5.3分析步驟將洗凈的坩堝置于馬弗爐內，700℃~800℃熾灼30min，于干燥器內冷卻至室溫，稱重，精確至0.1mg。重復熾灼30min以上至前后兩次質量差不超過0.3mg，即為恒重。稱取1g~2g試樣放入此坩堝中，精密稱量后，以小火加熱使試樣充分炭化至無煙，冷卻至室溫。加0.5mL~1mL硫酸使濕潤，低溫加熱GB/TXXXX.5—XXXX至硫酸蒸汽除盡，于700℃~80