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37法I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定1豬塞尼卡谷病毒的檢測重組酶恒溫?cái)U(kuò)增法本文件描述了豬塞尼卡谷病毒(SenecaValleyvirus,SVV)的重組酶恒溫核酸擴(kuò)增檢測(RecombinasePolymeraseAmplGB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范4試劑或材料除非另有規(guī)定,僅使用分析純?cè)噭K靡后w試劑均需使用無D稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4)0.27g、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)1.42g、氯化鈉(NaCl)8g、氯化鉀(KCl)25.4冰箱:2℃~8℃和-20℃以下。5.5酸度計(jì)。5.7渦旋振蕩器。符合GB19489和NY/T541中關(guān)于實(shí)驗(yàn)室生物采集病死豬的淋巴結(jié)、脾、胸腺、腸粘膜和肺等組織樣2℃~8℃不超過24h,-20℃以下不超過3個(gè)月,-70℃以下不超過10年。6.1.3.2淋巴結(jié)、脾、胸腺等組織樣設(shè)50μL重組酶恒溫核酸擴(kuò)增反應(yīng)體系,擴(kuò)增反應(yīng)液體系見3225選擇檢測模式:FAM。將加樣后的PCR管放入熒光PCR檢測儀內(nèi),做好標(biāo)記。恒溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)條件按照12345’-TTCTAAAGCGCAAATTCGTCCAAAACAACGACG-3’5’-CCAGAATGTTGAGCCAACATAGAAACAGATTGC-3’spacer-3’5(資料性)結(jié)果判定陰性對(duì)照和陽性對(duì)照擴(kuò)增曲線見圖B.1。熒光強(qiáng)度擴(kuò)增曲線熒光強(qiáng)度陽性對(duì)照?qǐng)DB.1陰性對(duì)照和陽性對(duì)照樣本檢測曲線見圖B.2。熒光強(qiáng)度熒光強(qiáng)度
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