37Determinationofamantadineinmarineorganisms—LiquidchromatographytandemI 2 2 3 4 5 5 5 6 8本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定1海洋生物體中金剛烷胺的測定液相色譜-串聯質譜法儀器和設備、樣品、分析步驟、結果計算與表示、準確剛烷胺檢出限為0.5μg/kg，測定下限為1.0μg/kg。GB/T6682分析實驗室用水規格和海洋生物體樣品用1%乙酸乙腈提取后，經固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯質譜儀測定，內標法定）：）：）：5.5氨水（NH4OH優級純。）：5.71%乙酸乙腈溶液（體積分數）。5.85%氨水甲醇溶液（體積分數）。25.100.1%甲酸乙腈定容液（體積分數）。將1mL甲酸與300mL乙腈，加入到700mL水中。5.13金剛烷胺標準貯備液。稱取金剛烷胺0.0100g，用乙腈溶解，并定容至10mL，配制成1.0mg/mL標準貯備液，-20℃下避光保存，有效期為90d。移取100μL金剛烷胺標準貯備液（5.13用乙腈溶解，并定作液，4℃下避光保存，有效期為30d。移取100μLD15-金剛烷胺內標溶液（5.12），用乙腈溶解，并定容至100mL，配制成1.0μg/mL內標標準中間液，4℃下避光保存，有效期為30d。移取1mLD15-金剛烷胺內標標準中間液（5.15用乙腈定容至10mL，配制成100μg/L內標標準6.1液相色譜-串聯質譜儀：配電噴霧電離源（E6.8固相萃取柱：MCX（混合型陽離子固相萃），6.11濾膜：聚偏氟乙烯濾膜，孔徑為0.22量新鮮或解凍的空白或供試組織，絞碎，并3稱取3.00(±0.01）g樣品至50mL離心管中，加入100μL內標標準工作液（5.16）和15mL1%乙酸乙腈溶液（5.7），渦旋30s，超聲提取15min，8000r/min離心10min，待凈化。MCX固相萃取柱經6mL甲醇（5.2）和6mL水（5.1）活化后，取5mL上清液移入固相萃取柱，3mL水（5.1）淋洗，6mL5%氨水甲醇溶液（5.8）洗脫，全程控制流速為2mL/min～3mL/min。收集洗脫液，用氮吹儀于40℃下吹至近干，用定容液（5.d)進樣量：10μL；min%%555555a)離子化模式：ESI+；h)氬氣流速：0.12mL/min；），4m/zm/zV40.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L，現用現配。以各標準工作液金剛烷胺峰面積與內標峰面積的比值為按照儀器條件（8.1分別測定金剛烷胺標準工作液（8.2）、試樣（7.3）、空白試金剛烷胺標準溶液、空白樣品和加標樣品的色譜圖參9結果計算與表示9.1定性分析的校正標準溶液相對豐度一致。定性確證時相對離子豐度的允許偏差應符合表%%>50>20～50>10～209.2定量分析9.3結果計算·············································5x——樣品中金剛烷胺的含量，單位為微克每千克(μg/kg）；c——試樣溶液中金剛烷胺的濃度，單位為微克每升(μg/Lc0——空白試樣溶液中金剛烷胺的濃度，單位為微克每升(μg/L9.4結果表示計算結果扣除空白值，測定結果用兩次平行測定的算術平均值表示，保留三位有效數字。本方法批內相對標準偏差和批間相對標準偏差均小于15%。詳見金剛烷胺在添加濃度1.0μg/kg～100μg/kg時，回收率為70%～120%。詳見表B.2。每20個樣品或每批次（少于20個樣品/批）應至少測定一個平行樣。平行樣測定結果的相對偏差應實驗過程中產生的廢液和廢物應分類收集，集中保管，委托有資質的單6色譜圖 圖A.1金剛烷胺標準溶液色譜圖（10.0μg/L） 7 ——-----———-—————-----——-—---——-------———-、-c-、-- = TT-——iii——Ti-——ii————-i——T-iiiTT-——iii——Ti-——ii————-i——T-iiiii-TTT—-Tiiiiiiiiliiiiliiiiii