PAGE6-第1課時動物細胞培育(建議用時：40分鐘)題組一動物細胞培育的條件1．在動物細胞培育過程中，下列處理中不恰當的是()A．培育液和培育用具要進行無菌處理B．供應種類齊全的養分物質C．供應純氧以保證細胞的呼吸作用D．保證供應相宜的溫度和pHC[動物細胞培育過程中要保證無菌、無毒，須要對培育液和培育用具進行無菌處理，A項正確；培育液中養分成分齊全、足夠，以滿意細胞增殖的須要，B項正確；動物細胞培育過程須要的氣體環境應為95%的空氣和5%的CO2的混合氣體，空氣中的O2保證其代謝所用，CO2維持培育液的pH，C項錯誤；細胞體外培育須要相宜溫度和pH，其中溫度一般與動物體溫接近，D項正確。]2．一般來說，動物細胞體外培育須要滿意以下條件()①無毒的環境②無菌的環境③運用合成培育基，但通常需加血漿、血清等自然成分④溫度與動物的體溫相近⑤因在二氧化碳培育箱中培育，故不須要O2⑥相宜的pHA．①②③④⑤⑥ B．①②③④C．①②④⑤⑥ D．①②③④⑥D[動物細胞培育須要無菌、無毒的環境，①②正確；用于動物細胞培育的合成培育基需加入糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等，還需加入血清、血漿等自然物質，③正確；動物細胞培育須要相宜的溫度和pH，其中溫度要與動物體溫相近，④⑥正確；動物細胞培育須要肯定的氣體環境，為95%空氣和5%的CO2，⑤錯誤。故選D。]3．對某種動物的肝腫瘤細胞進行細胞培育，下列說法錯誤的是()A．在利用肝組織塊制備細胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．細胞培育應在含5%CO2的恒溫培育箱中進行，CO2的作用是刺激細胞呼吸C．為了防止細胞培育過程中細菌的污染，可向培育液中加入適量的抗生素D．在合成培育基中，通常需加入血清、血漿等自然成分B[在利用肝組織塊制備細胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以分解細胞間的蛋白質，得到單個細胞；細胞培育應在含95%的空氣和5%CO2的恒溫培育箱中進行，CO2的作用是維持培育液的pH；為了防止細胞培育過程中細菌的污染，要求對培育液進行消毒、滅菌，也可向培育液中加入適量的抗生素；合成培育基通常需加入血清、血漿等自然成分。]題組二動物細胞培育的過程4．下列動物細胞培育過程中屬于原代培育的是()A．把組織分散成單個細胞的過程B．從機體取得細胞后初次進行培育的過程C．出現接觸抑制現象后取下的細胞的培育過程D．哺乳動物細胞在培育基中的懸浮生長過程B[原代培育是指從動物機體組織取得細胞后馬上培育，直到細胞出現接觸抑制為止。因為細胞之間存在接觸抑制現象，所以細胞最終會停止分裂增殖，并漸漸走向衰亡。要想接著培育，必需將細胞取下分裝后才能進行，而分裝后的細胞培育是傳代培育。]5．下列關于動物細胞培育的敘述，不正確的是()A．傳代培育時須要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細胞B．細胞的癌變發生于原代培育向傳代培育的過渡過程中C．癌細胞在培育瓶中不會出現接觸抑制現象D．動物細胞培育一般須要運用CO2培育箱B[由原代培育換瓶進行傳代培育時，須要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理貼壁生長的細胞，A項正確；細胞的癌變一般發生于50代后的細胞培育過程中，B項錯誤；癌細胞膜上糖蛋白削減，細胞黏著性降低，失去了接觸抑制，簡單分散和轉移，C項正確；動物細胞培育的場所是CO2培育箱，培育箱內含有95%的空氣和5%的CO2的混合氣體，為動物細胞供應相宜的氣體環境，D項正確。]6．在將動物組織塊分散成單個細胞時，可以運用胰蛋白酶。由此推斷以下推想不合理的是()A．動物細胞之間可能依靠蛋白質相互聯系B．處理時肯定要留意處理時間、加酶量C．胰蛋白酶肯定不會對動物細胞造成損傷D．動物細胞培育液的pH應與胰蛋白酶作用的相宜pH基本一樣C[胰蛋白酶可使蛋白質分解，胰蛋白酶可破壞動物細胞之間的聯系，可推想動物細胞之間可能依靠蛋白質相互聯系；細胞膜中含有蛋白質成分，所以肯定要留意處理的時間和酶的用量，以防止對動物細胞造成損傷；酶促反應須要相宜的pH，所以培育液的pH應與胰蛋白酶作用的相宜pH基本一樣。]7．回答下列有關動物細胞培育的問題。(1)在動物細胞培育過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面________時，細胞會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的________。此時，瓶壁上形成的細胞層數是________。要使貼壁的細胞從瓶壁上分別下來，須要用酶處理，可用的酶是________。(2)隨著細胞傳代次數的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現________的現象；但極少數細胞可以連續增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發生變更而變成__________細胞，該種細胞的黏著性________，細胞膜表面蛋白質(糖蛋白)的量________。(3)現用某種大分子染料，對細胞進行染色，視察到死細胞能著色，而活細胞不能著色，緣由是_________________________________________________。(4)檢查某種毒物是否能變更細胞染色體的數目，最好選用細胞分裂到________期的細胞用顯微鏡進行視察。(5)在細胞培育過程中，通常在________條件下保存細胞。因為在這種條件下，細胞中________的活性降低，細胞________的速率降低。[解析]動物細胞在體外培育時，當貼壁細胞分裂生長到相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制，需用胰蛋白酶處理后再分瓶培育。在細胞培育過程中，隨傳代次數增多，大部分細胞停止分裂，進而出現蒼老甚至死亡現象，少部分細胞會克服細胞壽命的自然極限，獲得不死性，這些細胞已經發生了突變，正在朝著等同于癌細胞的方向發展。癌細胞細胞膜表面的糖蛋白削減，黏著性降低。活細胞的細胞膜具有選擇透過性，大分子染料無法進入細胞內，因此不會著色。[答案](1)相互接觸接觸抑制單層(或一層)胰蛋白酶(2)蒼老(甚至死亡)不死性降低削減(3)活細胞的細胞膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內，故活細胞不能著色(或死細胞的細胞膜丟失了選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內而著色)(4)中(5)冷凍(或超低溫、液氮)酶新陳代謝題組三干細胞的培育及其應用8．關于iPS細胞的探討是生物醫學領域的熱門課題，相關說法錯誤的是()A．人體已經分化的體細胞經過激素的誘導可產生iPS細胞B．iPS細胞的產生類似于植物組織培育中的脫分化的過程C．iPS細胞經過誘導培育可產生特定功能的細胞用于疾病的治療D．病人對自身的iPS細胞誘導產生的細胞或組織不產生免疫排斥反應A[人體已經分化的體細胞誘導產生iPS細胞的方法是導入特定的基因或蛋白，不是由激素誘導。]9．下圖表示人體干細胞發生的變更過程。下列有關此圖的敘述，正確的是()A．a、b、c均代表細胞分化過程B．圖中各細胞中蛋白質種類相同C．b、c過程產生的細胞一般都具有細胞周期D．a、b、c過程產生的各細胞遺傳物質沒有發生變更D[a過程表示干細胞的生成，即干細胞的自我更新；干細胞通過b、c生成了不同形態結構的細胞，所以b、c過程表示細胞分化的過程，A項錯誤。細胞分化的根本緣由是基因的選擇性表達，導致各細胞中蛋白質種類存在差異，B項錯誤。高度分化的細胞會丟失分裂實力，不具有細胞周期，C項錯誤。在細胞的分裂和分化過程中，遺傳物質不發生變更，D項正確。]10．下圖為哺乳動物的胚胎干細胞及其分化的示意圖。請回答下列問題。(1)在機體內，皮膚干細胞分化成皮膚細胞是機體細胞中基因________的結果。(2)某患者不能產生正常的白細胞，通過骨髓移植可以達到治療的目的。骨髓移植的實質是將圖中的________細胞移植到患者體內。(3)若要克隆某種哺乳動物，從理論上分析，上述紅細胞、白細胞、皮膚細胞、神經細胞中不能選用作為供體的細胞是成熟的________，其緣由是_______________________________________________________________。(4)若某藥物可抑制肝腫瘤細胞DNA的復制，運用該藥物可使肝腫瘤細胞停留于細胞周期的________期。[解析](1)細胞分化是基因選擇性表達的結果。(2)骨髓是人體的造血組織，存在造血干細胞，骨髓治療的實質是將題圖的造血干細胞移植到患者體內。(3)克隆某種哺乳動物須要供體供應細胞核，而成熟的紅細胞沒有細胞核，所以不能作為供體。(4)DNA分子的復制在細胞分裂間期進行。[答案](1)選擇性表達(2)造血干(3)紅細胞成熟的紅細胞中無細胞核(4)間11．(不定項)動物細胞體外培育時，通常要在培育基中補充肯定濃度的某些物質。下圖是血清對正常細胞和癌細胞培育影響的試驗結果，能從該圖獲得的結論是()A．正常細胞與癌細胞的增殖速率相同B．有無血清對正常細胞培育的影響較大C．培育基中補充血清有助于正常細胞的培育D．培育基中是否補充血清對癌細胞的培育影響不大BCD[分析圖中曲線可知，對正常細胞來說，在相同的培育時間內，有血清的培育基中培育的細胞數目遠遠多于沒有血清的培育基中培育的細胞數目，說明有無血清對正常細胞的培育影響較大；對癌細胞來說，相同的培育時間內，培育基中有無血清，其細胞數目相差不大，說明培育基中有無血清對癌細胞的培育影響不大；在相同條件和相同的培育時間內，癌細胞和正常細胞的數目差距較大，正常細胞達到肯定的數目后不再增加，而癌細胞卻能不斷增加。]12．下列屬于動物細胞培育與植物組織培育主要區分的是()A．培育基不同B．植物組織培育不須要在無菌條件下進行C．動物細胞可以傳代培育，而植物細胞不能D．動物細胞能夠大量培育，而植物細胞只能培育成植株A[動物細胞培育所用的培育基是液體培育基，其中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等，植物組織培育所用的培育基是固體培育基，其中通常含有蔗糖、氨基酸、無機鹽和植物激素等，A正確；動物細胞培育與植物組織培育均須要滅菌處理，并且須要在無菌條件下進行，B錯誤；動植物細胞都可以傳代培育，C錯誤；植物細胞可以培育成植株，也能培育成大量細胞，D錯誤。]13．甲、乙兩種化學物質可能有肯定致畸、致癌作用，利用動物細胞培育的方法鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強弱。請依據試驗結果完成下列試驗報告。(1)試驗步驟：①制備細胞懸液：用________處理小白鼠胚胎組織使其離散成單個細胞，制成細胞懸浮液。②進行細胞培育：a．取A、B、C三個干凈的錐形瓶，分別加入________。b．向A、B兩個培育瓶中分別加入等量的化學物質甲、乙，并將其搖勻；C瓶加等量生理鹽水，作為比照。c．把3個培育瓶放在37℃的CO2培育箱中培育。③制作臨時裝片。④鏡檢和統計：把臨時裝片放在顯微鏡下，找尋處于有絲分裂中期的細胞，與小白鼠正常體細胞有絲分裂高倍顯微鏡照片進行對比，以確認發生變異的細胞。統計_____________________________________________________________。(2)試驗結果：培育瓶ABC變異細胞數占總細胞數的百分比1.3%12.5%0.1%(3)請寫出試驗結論：___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。[解析](1)①解離組織細胞常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶。②依據b的試驗步驟可以得出：a中A、B、C三個干凈的錐形瓶，分別加入等量的細胞懸浮液。④依據試驗目的可知，應統計該時期變異的細胞數占細胞總數的百分比。(3)C組為比照組，A組與B組變異細胞數占總細胞數的比例均比C組高，說明甲、乙兩種化學物質均有肯定毒性，B組數據比A組數據大說明乙的毒性比甲的毒性大。[答案](1)①胰蛋白酶②a.等量的細胞懸浮液④該時期變異的細胞數占細胞總數的百分比(3)甲、乙兩種化學物質均有肯定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大對原代培育和傳代培育辨別不清14．下列關于動物細胞培育的敘述，正確的是()A．傳代培育的正常動物細胞在培育瓶壁上可形成多層細胞B．原代培育過程中多數細胞的基因型會發生變更C．傳代培育的細胞一般不會發生染色體變異D．通過在高倍顯微鏡下