…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年外研版選擇性必修三生物上冊階段測試試卷388考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、單克隆抗體制備過程中；對骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定的選擇培養基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養基上不能存活；增殖的細胞是()

①B淋巴細胞②骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③2、對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實際應用成果最多的領域，關于其原因的描述，不正確的是（）A.微生物具有生理結構和遺傳物質簡單的優點B.微生物具有生長繁殖快的優點C.微生物具有適應性強、對環境因素不敏感的優點D.微生物具有容易進行遺傳物質操作的優點3、紫杉醇是紅豆杉屬植物產生的一種次生代謝產物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運動的作用，可用于某些癌癥的治療。某研究小組利用含3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷（3H-TdR）細胞培養液、紫杉醇對乳腺癌細胞進行了培養，如下圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.紫杉醇對正常的細胞不會產生毒副作用B.甲、乙兩瓶中，核DNA含量為4N的占比較高的是乙瓶C.甲瓶中大量的3H-TdR會在S期進入細胞核D.甲乙在培養時應提供5%的CO2濃度環境，以調節培養過程中的pH4、下列關于轉基因生物安全性的敘述，錯誤的是（）A.轉抗蟲基因的植物，會導致昆蟲群體抗性基因頻率增加B.轉基因作物被動物食用后，目的基因會轉入動物體細胞中C.種植轉基因植物有可能因基因擴散而影響野生植物的遺傳多樣性D.轉基因植物的目的基因可能轉入根際微生物5、下列有關哺乳動物精子和卵細胞的發生以及受精作用的敘述，正確的是（）A.透明帶反應是防止多精入卵的唯一屏障B.性成熟后卵原細胞形成初級卵母細胞C.卵細胞形成時的分裂過程均在卵巢內完成D.受精完成的標志是雌原核和雄原核的相互融合6、基因工程是在DNA分子水平上進行設計操作的，在基因工程操作的基本步驟中，一定不進行堿基互補配對的是A.利用PCR技術擴增目的基因B.目的基因與運載體的黏性末端結合C.抗原-抗體雜交檢測目的基因表達D.DNA探針檢測受體細胞的目的基因7、基因治療是指（）A.對全身所有的細胞進行基因改造，以達到根治疾病的目的B.把健康的外源基因導入到有基因缺陷的細胞中，使其表達而達到治療疾病的目的C.運用人工誘變的方法，使有缺陷的基因突變回正?；駾.運用基因工程技術，把有缺陷的基因切除，達到治療疾病的目的8、藍莓酒工業化生產的大致流程如下：藍莓→破碎→酶解→榨汁過濾→滅菌→主發酵→后發酵→分離提純。下列說法錯誤的是（）A.將藍莓破碎后加果膠酶可提高出汁率B.對培養基和發酵設備滅菌的目的是防止雜菌污染C.菌種繁殖和酒精生成均在主發酵階段完成D.用顯微鏡檢測發酵過程中活菌數量，結果比實際值偏低評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、營養缺陷性菌株是野生型菌株經過人工誘變或自發突變失去合成某種成長因子的能力；只能在補充了相應的生長因子的基本培養基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養皿的培養基上，一段時間后將甲培養皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙；丙兩培養皿的培養基中，進一步培養得到如下圖所示結果。

下列分析正確的是（）A.接種到甲培養皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養皿中的培養基是基本培養基C.甲培養皿中菌落數有可能比接種的酵母菌數少D.甲、乙、丙三個培養皿都可能存在營養缺陷型10、如圖為體細胞核移植過程流程圖；下列相關敘述不正確的是（）

A.去掉受體卵母細胞的核的目的是使核移植動物的遺傳物質幾乎全部來自有利用價值的動物提供的細胞核B.核移植的供體細胞一般都選傳代10~50代左右的細胞C.動物細胞核移植技術中使用的去核方法只有顯微操作法D.上述過程能夠體現動物細胞的細胞核具有全能性11、為有效防范由各類生物因子、生物技術誤用濫用等引起的生物性危害，生物安全已納入國家安全體系。下列不符合生物技術的安全性和倫理問題的是（）A.利用生物技術改造工程菌獲得大量的抗生素B.克隆技術可應用到器官移植但不能進行人體克隆C.中國反對生物武器，但在特殊情況下可以生產生物武器D.基因編輯技術不僅可用于疾病預防領域研究，也可用于編輯嬰兒12、下列關于動物細胞培養的敘述，錯誤的是（）A.培養基一般為固體培養基B.培養結果只能獲得大量細胞及生物制品，而不能獲得生物體C.需要氧氣來滿足細胞代謝的需要，不需要二氧化碳D.通過細胞培養可以檢測有毒物質，判斷某物質的毒性13、下列有關利用不同材料進行“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述，正確的是（）A.雞血細胞液中，加入0．14mol/L的NaCl溶液有利于瓦解細胞膜B.洋蔥鱗片葉碎片中，加入沐浴液和食鹽后研磨有利于去除細胞壁C.魚白（精巢）提取的DNA濾液中，加入嫩肉粉有利于去除蛋白質D.菜花提取的DNA濾液中，加入冷酒精有利于析出DNA14、多巴胺（DA）是神經系統中關鍵的單胺類神經遞質，廣泛調節多種脊椎動物的許多復雜生理功能。為了實時監測體內多巴胺濃度的動態變化情況，我國科研人員開發出了一種新型DA熒光探針，通過將對結構變化敏感的熒光蛋白（cpEGFP）嵌入人源多巴胺受體，使多巴膠這一化學信號轉化為熒光信號，再結合現有的成像技術即可實現。這一成果解決了如何在擁有數十億個神經細胞、數萬億個突觸連接的大腦中精確檢測神經遞質釋放的一個難題。結合以上信息和所學知識判斷，以下說法正確的是（）A.神經遞質是一類在細胞間充當信息分子的特殊物質B.DA與DA受體結合后會引起后者空間結構發生變化C.DA探針與基因診斷中的基因探針的化學本質相間D.DA探針熒光強度的變化能夠反映出DA濃度的變化評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、______——“分子縫合針”16、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起的絲狀物的顏色是____________。獲取的絲狀物后加入到質量濃度為______________mol/L濃度的NaCL溶液的試管中，使絲狀物重新溶解。17、通過____________的方式，來控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。18、請回答有關植物細胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細胞，經過________的誘導，可以脫分化失去其__________而轉變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉接到_________培養基上繼續培養。

（3）在植物組織培養過程中，由于培養細胞一直處于不斷的分生狀態，因此容易受到__________的影響而產生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養基上，獲得所需個體。19、最后檢測目的基因是否翻譯成______，方法是從轉基因生物中提取______，用相應的______進行______。評卷人得分四、判斷題(共2題，共20分)20、要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。()A.正確B.錯誤21、治療性克隆是指利用克隆技術產生特定的細胞、組織和器官，用它們來修復或替代受損的細胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共21分)22、單克隆抗體特異性強；靈敏度高，用于診療疾病具有準確；高效等特點。下圖表示單克隆抗體制備過程。

回答下列問題：

（1）若細胞B是小鼠的骨髓瘤細胞；則A是_________________細胞，誘導d過程常用的因素是_________________（答出一個即可）。

（2）用于篩選細胞D的培養基必需滿足兩個條件：一是_________________細胞都會死亡；二是保證_________________細胞能生長。

（3）使用合成培養基體外培養雜交瘤細胞時；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合氣體的培養箱中進行培養。

（4）制備抗新冠病毒單克隆抗體檢測試劑，可用_________________（選填數字標號：①新冠病毒滅活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以獲得圖中的A細胞。23、如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中的一些重要操作示意圖；請分析回答有關問題：

（1）正確的操作順序是_______________________（用字母和箭頭表示）。

（2）圖中C、E步驟都加入了蒸餾水，但其目的不同，分別是_______________________和_______________________。

（3）為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可將其溶解后，滴加________________試劑后沸水浴加熱，如果出現___________________；則證明該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是_________________________________________。24、利用乳腺生物反應器獲取藥用蛋白具有產量高；成本低等優點。如圖為培育轉基因奶牛獲得人血清白蛋白的流程。

請回答：

（1）PCR擴增人血清白蛋白基因使用的酶是_____________。要使人血清白蛋白基因在轉基因奶牛的乳腺細胞中表達，應將其與____________基因的啟動子等調控組件重組。

（2）基因工程的核心步驟是________________________，將目的基因導入牛受精卵所用的方法是____________________。

（3）體外受精前精子要進行____________處理，過程②包括__________技術和胚胎移植技術；可用___________技術獲得多只與該轉基因奶牛遺傳物質相同的牛犢。

（4）若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用_________________技術。評卷人得分六、綜合題(共4題，共20分)25、我國已出臺鼓勵農作物秸稈還田的政策；但是秸稈腐化時間長；易發病蟲害等問題限制其推廣。某研究小組進行了利用玉米秸稈發酵制備微生物菌肥的系列實驗。

（1）從植物根際土壤中篩選出具有高效固氮、釋放不溶性無機磷和水解有機磷能力的三種菌株N3、Y1、W3；需選用的培養基分別為下表中的_______。

。類型組成甲葡萄糖、NaCl、MgSO4、CaSO4、CaCO3、KH2PO4，pH7．0乙葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、植酸鈣，pH7．0丙葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、Ca3(PO4)2，pH7．0注：植酸鈣分子式為C6H6Ca6O24P6；可溶于水，微溶于丙酮或乙醇。

（2）將粉碎后的玉米秸稈進行_______滅菌，冷卻后接種一定濃度的里氏木霉菌懸液。發酵一定時間后，再接種等量的N3、Y1、W3菌懸液。繼續發酵一定時間后；稱取10g固態發酵物，梯度稀釋后，用_______法統計有效活菌數。推測加入里氏木霉菌懸液的用途是：_______。

（3）分別在不同的_______；_______、接種量和發酵時間等條件下進行實驗；最終確定最佳發酵條件后就可以進行發酵生產。

（4）用發酵得到的復合微生物菌肥進行煙草幼苗盆栽實驗；測得栽培40天時葉片的凈光合速率如下表所示?？傻贸龅慕Y論是：_______。

。盆栽基質土肥比例凈光合速率（μmol·m-2·s-1）珍珠巖57g泥炭土150g0．5珍珠巖57g泥炭土145g、菌肥5g2．6珍珠巖57g泥炭土140g、菌肥10g4．0珍珠巖57g泥炭土120g、菌肥30g2．1（5）將玉米秸稈發酵制備的微生物菌肥用于農業生產，其優越性是：_______。（寫出2點即可）26、如圖是運用生物工程技術培育“轉基因試管?！钡膱D解。請回答下列相關問題：

（1）圖中①過程采集到的良種公牛精子需進行_________________處理。精子和卵子在發生上的重要區別是哺乳動物卵泡的形成和在卵巢內的儲備是在_________________完成的。

（2）圖中③過程通常選擇發育到_________________階段的胚胎進行移植，移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎是_____________________________________________________。

（3）構建藥用蛋白基因表達載體需要將藥用蛋白基因與_____________的啟動子等調控組件重組在一起，通過___________方法導入到性染色體組成為___________的受精卵中。

（4）若得到的藥用蛋白不穩定，在體外保存期短。為解決這一問題，可通過對藥用蛋白基因進行_________________來實現對現有藥用蛋白的改造。27、螢火蟲發光是體內熒光素酶催化一系列反應所產生的現象。如果熒光素酶存在于植物體內；也可使植物體發光。一直以來熒光素酶的惟一來源是從螢火蟲腹部提取。但加利福尼亞大學的一組科學家成功地通過轉基因工程實現了將熒光素酶基因導入到大腸桿菌體內，并在大腸桿菌體內產生熒光素酶。

請你根據已有的知識回答下列有關問題：

（1）在此轉基因工程中；目的基因是________，具體操作過程中下圖所示的黏性末端是由________種限制性核酸內切酶作用產生的。

（2）將此目的基因導入到大腸桿菌體內需要載體的幫助。下列各項是選取載體時必須考慮的是________。

【選項A】能夠在宿主細胞內復制并穩定保存。

【選項B】具有特定的限制酶切割位點。

【選項C】具有與目的基因相同的堿基片段。

【選項D】具有某些標記基因。

（3）本實驗中將目的基因導入大腸桿菌的載體可以是________。

【選項A】質粒【選項B】動物病毒。

【選項C】噬菌體衍生物【選項D】植物病毒。

（4）在此轉基因工程中；將體外重組DNA導入大腸桿菌體內，并使其在細胞內穩定保存和表達的過程稱為________。最常用的方法是首先用________處理大腸桿菌得到___________細胞。

（5）目的基因是否導入受體細胞，用____________技術來檢測。目的基因是否表達出相應的蛋白質，除了通過大腸桿菌是否發光來確定外，還可以通過________________特異性反應來判斷。28、科學家將人的生長激素基因導入綿羊細胞內；經培養獲得的轉基因綿羊的生長速率比一般綿羊提高30%，體型增大50%。請回答下列問題：

(1)將人的生長激素基因導入綿羊細胞前，需先獲得生長激素基因，可從人的__________細胞中提取總RNA，經逆轉錄獲得cDNA，cDNA中___________（填“包含”或“不包含”）啟動子。使用PCR技術擴增目的基因時，可用獲得的cDNA作為模板，此外，還需在PCR反應體系中加入根據__________設計的兩種引物、四種脫氧核苷酸和___________等。

(2)人生長激素基因能與質粒重組的基礎是__________；人生長激素基因在受體細胞中能夠表達的基礎是___________。

(3)在培育轉基因綿羊的過程中，__________是基因工程的核心，常用___________法將人的生長激素基因導入綿羊體細胞內，然后經___________技術能獲得大量的轉基因綿羊。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、A【分析】【分析】

單克隆抗體的制備：

1；細胞來源：B淋巴細胞：能產生特異性抗體；在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細胞：不產生專一性抗體，體外能無限繁殖。

2；雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖；又能產生特異性抗體。

3；兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產生特異性抗體的細胞群。

4；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性。

5；提取單克隆抗體：從培養液或小鼠腹水中提取。

6；單克隆抗體的優點：特異性強、靈敏度高；并可能大量制備。

【詳解】

特定培養基培養細胞的目的是篩選出既能大量增殖、又能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，因此其他的細胞都不能在此培養基上生存。在這種培養基上不能存活和繁殖的細胞有：①B淋巴細胞、②小鼠骨髓瘤細胞、③B淋巴細胞自身融合細胞、④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞。故選A。2、C【分析】【分析】

對微生物的基因改造是基因工程中研究最早；最廣泛和取得實際應用成果最多的領域；這是因為微生物具有生理結構和遺傳物質簡單、生長繁殖快、對環境因素敏感和容易進行遺傳物質操作等優點。

【詳解】

A；微生物具有生理結構和遺傳物質簡單的優點；便于研究，A正確；

B；微生物的生長周期短；具有生長繁殖快的優點，B正確；

C；微生物對環境因素敏感；如在某種抗生素的環境中不能生存，C錯誤；

D；微生物的遺傳物質簡單；具有容易進行遺傳物質操作的優點，D正確。

故選C。3、A【分析】【分析】

有絲分裂間期分為G1（DNA合成前期）、S（DNA合成期）、G2（DNA合成后期）三個階段，其中G1期與G2期進行RNA（即核糖核酸）的復制與有關蛋白質的合成；S期進行DNA的復制。

動物細胞培養條件：無菌；無毒的環境：對培養液和所有培養用具進行無菌處理；通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素，以防被污染，此外應定期更換培養液，以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害；營養物質：無機物（無機鹽、微量元素等），有機物（糖、氨基酸、促生長因子等）血清和血漿(提供細胞生長必須的營養成份)；溫度和pH：（36.5±0.5℃，7.2～7.4）；氣體環境：（95%的空氣+5%CO?的混合氣體），其中5%CO?氣體是為保持培養液的pH穩定。

【詳解】

A；對于正常細胞而言；分裂增殖是正常現象之一，根據題干“紫杉醇是紅豆杉屬植物產生的一種次生代謝產物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運動的作用”可知：若用紫杉醇處理正常的細胞，會影響正常細胞增殖過程中染色體的運動從而影響細胞的正常分裂，具有毒副作用，A錯誤；

B；甲、乙的區別在于乙瓶中加了紫杉醇處理；根據題干“紫杉醇是紅豆杉屬植物產生的一種次生代謝產物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運動的作用”可知紫杉醇可以抑制進行有絲分裂的細胞正常分裂成兩個子細胞，由于核DNA的復制是正常的，經過間期復制核DNA數量為4N，甲瓶中細胞分裂正常，乙瓶中細胞核DNA復制后無法分配到子細胞中去，仍留在原來的細胞中，導致乙瓶中核DNA為4N含量的細胞占比高于乙瓶，B正確；

C、3H-TdR作為DNA的合成原料之一；會在分裂間期的S（DNA合成期）進入細胞核，以供核DNA的復制使用，C正確；

D；動物細胞培養條件之一：氣體環境：（95%的空氣+5%CO?的混合氣體）；其中5%CO?氣體是為保持培養液的pH穩定，D正確。

故選A。4、B【分析】【分析】

轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。

【詳解】

A；轉抗蟲基因的植物；植物對昆蟲進行選擇，會導致昆蟲群體抗性基因頻率增加，A正確；

B；動物取食轉基因作物后；要經過消化吸收才進入身體，目的基因不可能直接進入動物細胞中，B錯誤；

C；轉基因植物可能與野生植物發生雜交而出現基因交流；影響野生植物的遺傳多樣性，C正確；

D；目的基因被微生物攝入細胞內后；可能進入這些微生物中，D正確。

故選B。5、D【分析】【分析】

受精包括受精前的準備階段和受精階段準備階段；精子獲能，剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發生相應的生理變化后，才能獲得受精能力準備階段，卵子的準備，動物排出的可能是初級卵母細胞也可能是次級卵母細胞，都要在輸卵管內進一步成熟，達到減數第二次分裂中期時，才具備與精子受精的能力。

卵細胞形成過程；其中減數第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成的，場所在卵巢;減數第二次分裂是在受精過程中完成的，場所在輸卵管中。受精作用完成的標志:在卵黃膜和透明帶之間的間隙可以觀察到兩個極體(一個是第一極體，還有一個是第二極體)。

【詳解】

A；透明帶反應和卵細胞質膜反應是防止多精入卵的兩道屏障；A錯誤；

B；在胎兒期性別分化后卵原細胞就可以形成初級卵母細胞；B錯誤；

C；卵細胞形成時的分裂過程在卵巢和輸卵管中完成；C錯誤；

D；雌原核和雄原核的相互融合標志著受精過程的完結；D正確。

故選D。6、C【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定。其中人工合成目的基因；基因表達載體的構建、目的基因的檢測都進行堿基互補配對原則。

【詳解】

A；利用PCR技術擴增目的基因的原理是DNA的雙鏈復制；DNA復制過程中遵循堿基互補配對，A不符合題意；

B；目的基因與運載體的粘性末端之間的堿基通過堿基互補配對連接在一起；形成基因表達載體，B不符合題意；

C；抗原與抗體都不含堿基；所以抗原抗體雜交不存在堿基互補配對，C符合題意；

D；用DNA探針檢測目的基因時需要進行堿基互補配對；D不符合題意。

故選C。7、B【分析】【分析】

本題主要考查基因治療的概念?；蛑委煟╣enetherapy）是指將外源正常基因導入靶細胞；以糾正或補償缺陷和異?；蛞鸬募膊?，以達到治療目的。其中也包括轉基因等方面的技術應用，也就是將外源基因通過基因轉移技術將其插入病人的適當的受體細胞中，使外源基因制造的產物能治療某種疾病。從廣義說，基因治療還可包括從DNA水平采取的治療某些疾病的措施和新技術。

【詳解】

通過分析可知；基因治療是指把健康的外源基因導入有基因缺陷的細胞中，達到治療疾病的目，B正確；ACD錯誤。

故選B。8、D【分析】【分析】

植物細胞壁主要成分是纖維素和果膠；可在果汁加工過程中加入纖維素酶和果膠酶以破壞細胞壁，提高出汁率。獲得純凈培養物的關鍵是防止雜菌污染，需要對培養基和發酵設備進行滅菌。果酒的發酵過程分為主發酵和后發酵兩個階段，菌種的繁殖；大部分糖的分解和酒精生成在主發酵階段完成。用顯微鏡檢測酵母菌數量時，因為無法區分活菌和死菌，會導致統計結果比實際值偏高。

【詳解】

A；植物細胞壁主要成分是纖維素和果膠；可在果汁加工過程中加入纖維素酶和果膠酶以破壞細胞壁，提高出汁率，A正確；

B；獲得純凈培養物的關鍵是防止雜菌污染；需要對培養基和發酵設備進行滅菌，B正確；

C；果酒的發酵過程分為主發酵和后發酵兩個階段；菌種的繁殖、大部分糖的分解和酒精生成在主發酵階段完成，C正確；

D；用顯微鏡檢測酵母菌數量時；因為無法區分活菌和死菌，會導致統計結果比實際值偏高，D錯誤。

故選D。二、多選題(共6題，共12分)9、A:C【分析】【分析】

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過足夠稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后，可形成單菌落。

【詳解】

A；甲培養皿的菌落均勻分布；接種方法應為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲、丙培養基菌落數目多；包括野生型酵母菌菌株和某種營養缺陷型酵母菌菌株，乙培養皿菌株是某種營養缺陷型酵母菌菌株，乙培養皿的培養基是基本培養基，甲和丙是加入了同種營養成分的培養基，B錯誤；

C；由于基因突變具有不定向性；接種到甲培養皿的酵母菌可能還有其他營養缺陷型，且有些菌落不一定由一個酵母菌形成，所以，甲培養皿中菌落數有可能比接種的酵母菌數少，C正確；

D；乙培養皿的培養基是基本培養基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D錯誤。

故選AC。10、B:C【分析】【分析】

分析題圖：該圖為動物體細胞核移植過程和胚胎移植過程。動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發育成一個新的胚胎。

【詳解】

A；生物的性狀主要受核基因控制；去掉受體卵母細胞的核的目的是使核移植動物的遺傳物質幾乎全部來自有利用價值的動物提供的細胞核，A正確；

B；核移植時做供核一方的一般是傳代10代以內細胞；原因是細胞能保持正常的二倍體核型，遺傳物質不發生改變，B錯誤；

C；動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微操作法；也可采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學物質處理等方法，C錯誤；

D；核移植技術得到克隆動物能夠體現動物細胞的細胞核具有全能性；D正確。

故選BC。11、C:D【分析】【分析】

1；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。

2；對待轉基因技術的利弊；正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；可以通過生物合成法、全化學合成法、半化學合成法來產生抗生素；其中生物合成法中可以通過工程菌制造法來產生，A正確；

B；克隆技術是可以克隆器官的；但是不可以人體克隆，禁止生殖性克隆，B正確；

C；中國聲明：在任何情況下；不發展、不生產、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散，C錯誤；

D；基因編輯技術可用于疾病預防領域研究；但不能用于編輯嬰兒，D錯誤。

故選CD。12、A:C【分析】【分析】

1；動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養。

2、動物細胞培養需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環境；②營養；③溫度和pH；④氣體環境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A；動物細胞一般用液體培養基來培養；需要無菌、無毒的環境、基本營養物質、適宜的溫度和pH、一定量的氧氣和二氧化碳等，A錯誤；

B；由于動物細胞分化程度高；雖然細胞核內具有該物種的全套遺傳物質，但單個細胞不能形成完整生物體，所以目前還不能通過動物細胞培養獲得生物體，B正確；

C；動物細胞培養過程中；需要氧氣滿足細胞代謝，需要二氧化碳維持培養液的pH，C錯誤；

D；通過動物細胞培養可以生產生物制品；可以培養皮膚移植的材料，還可以檢測有毒物質等，D正確。

故選AC。13、C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質溶于酒精。

2；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

3；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A；雞血細胞液加入蒸餾水；使得雞血細胞的細胞膜吸水漲破，A錯誤；

B；洋蔥鱗片葉碎片中；加入沐浴液有利于去除細胞膜，食鹽能溶解DNA，B錯誤；

C；向DNA粗提取物中加入嫩肉粉；嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能破壞其中的蛋白質，有利于去除蛋白質，獲得較純凈DNA，C正確；

D；由于DNA不溶于酒精；蛋白質溶于酒精，因此需向DNA濾液中加入冷酒精有利于析出DNA，一步純化DNA，D正確。

故選CD。

【點睛】14、A:B:D【分析】【分析】

神經遞質是指由突觸前神經元合成并在末梢處釋放；經突觸間隙擴散，特異性地作用于突觸后神經元或效應器細胞上的受體，引致信號從突觸前遞質到突觸后的一些化學物質。

【詳解】

A；神經遞質是一類充當信息分子的特殊物質；能引發突觸后膜興奮（傳遞興奮，如乙酰膽堿）或抑制，A正確；

B；神經遞質需要與突觸后膜的特異性受體結合后才能發揮作用；DA與DA受體結合后會引起后者空間結構發生變化，從而使DA發揮作用，B正確；

C；由題意知；多巴胺（DA）是神經系統中關鍵的單胺類神經遞質，而基因診斷中的基因探針本質是一段DNA序列，C錯誤；

D；由題“為了實時監測體內多巴胺濃度的動態變化情況；我國科研人員開發出了一種新型DA熒光探針”知，DA探針熒光強度的變化能夠反映出DA濃度的變化，D正確。

故選ABD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】冷酒精白色217、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液18、略

【分析】【分析】

植物組織培養的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時的光照、pH和無菌環境等）；②一定的營養（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的協同作用在組織培養過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細胞，經過激素的誘導，可以脫分化失去其特有的結構和功能而轉變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉接到分化培養基上繼續培養。

（3）在植物組織培養過程中；由于培養細胞一直處于不斷的分生狀態，因此容易受到培養條件和外界壓力的影響而產生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養基上，獲得所需個體。

【點睛】

本題考查植物組織培養的相關知識，要求考生識記植物組織培養的過程、原理及條件，掌握植物組織培養技術的相關應用，能結合所學的知識準確分析，屬于考綱識記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結構和功能③.黑暗④.分化⑤.培養條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質蛋白質抗體抗原－抗體雜交四、判斷題(共2題，共20分)20、B【分析】【詳解】

要對蛋白質的結構進行設計改造；最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導蛋白質的生物合成。

故錯誤。21、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術產生特定的細胞、組織和器官，用它們來修復或替代受損的細胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。本說法正確。五、實驗題(共3題，共21分)22、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養注意事項：

（1）原理：細胞增殖。

（2）培養基性質：液體培養基。動物細胞培養所用的培養基的成分與體內細胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、動物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無菌環境。

（3）需要使用動物血清。

（4）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（5）無菌條件下進行。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素；以防培養過程中的污染。此外，應定期更換培養液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。

（6）氣體環境：95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養液的pH。

2；單克隆抗體的制備：

（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細胞能產生特異性抗體。②細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合。③動物細胞培養技術：對雜交瘤細胞進行體內；體外培養。

（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產生單一抗體；但不能無限增殖。②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產生抗體。③雜交瘤細胞：既能產生單一抗體，又能在體外培養條件下無限增殖。

（4）動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖。動物細胞融合誘導手段有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等；結果產生雜交細胞。

【詳解】

（1）若細胞B是小鼠的骨髓瘤細胞；則此過程可以為單克隆抗體的制備過程。故A是已經免疫的B淋巴細胞或能產生特定抗體的B細胞。動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖。動物細胞融合誘導手段（誘導d過程）有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產生雜交細胞。

（2）一般來說；誘導A細胞和B細胞融合，形成C細胞后，必須利用選擇培養基來篩選出目的細胞。那么滿足的條件必須是：未融合的（親本）細胞和融合的同種（核的）細胞都會死亡，而雜交（瘤）細胞（或雜種細胞）能夠在選擇培養基上生長。

（3）動物細胞培養注意事項：一是液體培養基。動物細胞培養所用的培養基的成分與體內細胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、動物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無菌環境。二是氣體環境：95%空氣+5%CO2。

（4）選用免疫原性好的細菌；病毒、立克次體、螺旋體等；經人工培養，再用物理或化學方法將其殺滅制成疫苗，即為滅活疫苗。而新冠病毒為RNA病毒，選用RNA疫苗都可以。故選③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗。

【點睛】

本題考查動物細胞培養、單克隆抗體制備的相關知識，意在考查考生理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識與觀點，對某些現實生活中的生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論。【解析】經過（抗原、病原體）免疫的（小鼠）B（淋巴）細胞（或漿細胞，或已免疫的B細胞，或能產生特定抗體的B細胞）聚乙二醇（PEG）、滅活的（仙臺）病毒、電激（或電融合）未融合的（親本）細胞和融合的同種（核的）細胞雜交（瘤）細胞（或雜種細胞））血清（或血漿）95%空氣和5%CO2③23、略

【分析】【分析】

1；利用動物細胞進行DNA的粗提取與鑒定的實驗原理：①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的．當氯化鈉的物質的量濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低．利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些物質則可以溶于酒精溶液．利用這一原理，可以進一步提取出含雜質較少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

2；利用動物細胞進行DNA的粗提取與鑒定的實驗步驟是：①制備雞血細胞液；②提取雞血細胞和物質，③細胞核物質中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤過濾獲取紗布上的粘稠物，⑥DNA的再溶解，⑦加冷卻酒精使DNA析出，⑧二苯胺鑒定DNA分子。

【詳解】

（1）DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水；破碎細胞→過濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質→DNA的析出→鑒定．所以正確的操作順序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸餾水的目的是使雞血細胞吸水漲破；釋放細胞核物質；E步驟甲蒸餾水是降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出。

（3）鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA；可滴加二苯胺試劑，在沸水浴加熱的條件下如果出現藍色則該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是獲取含雜質較少（或較純凈）的DNA。

【點睛】

本題結合圖解，考查DNA的粗提取和鑒定，要求考生識記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實驗中采用的試劑及試劑的作用等，再結合所學的知識準確答題，難度適中?！窘馕觥緾→B→E→D→A使雞血細胞吸水漲破，釋放出細胞核物質降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出二苯胺藍色提取含雜質較少（或較純凈）的DNA24、略

【分析】【分析】

轉基因奶牛的產生采用了體外受精（精子的采集和獲能；卵母細胞的采集和培養、受精）、早期胚胎培養和胚胎移植等技術。

【詳解】

（1）參與PCR的主要物質：引物；熱穩定性DNA聚合酶（Taq酶）、原料（dNTP）、模板和緩沖液（其中需要Mg2+）等；故主要使用熱穩定性DNA聚合酶（Taq酶）?；虮磉_載體包括目的基因、啟動子、終止子、復制原點和標記基因等，故要使人血清白蛋白基因在轉基因奶牛的乳腺細胞中表達，應將其與（牛）乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組。

（2）基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟。將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法。

（3）體外受精是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環境中完成受精過程的技術。成熟的精子在受精前需獲能處理；過程②包括早期胚胎培養（動物細胞培養）技術和胚胎移植技術。為了獲得多只與該轉基因奶牛遺傳物質相同的牛犢；可進行胚胎分割，操作時的注意事項是將囊胚階段的內細胞團均等分割。

（4）若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白；根據抗原特異性結合原理，可采用抗原—抗體雜交技術。

【點睛】

本題考查基因工程等知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟；蛋白質工程是通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行基因改造，或制造一種新的蛋白質。能根據題干信息設計實驗，綜合考察運用生物學知識解決實際問題的能力。【解析】熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）（牛）乳腺蛋白基因表達載體的構建顯微注射法獲能早期胚胎培養（動物細胞培養）胚胎分割抗原—抗體雜交六、綜合題(共4題，共20分)25、略

【分析】【分析】

在微生物培養中；各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質）、氮源（提供氮元素的物質）和無機鹽。另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。

【詳解】

（1）固氮菌可以利用空氣中的氮氣，因此菌株N3的培養基中不需要氮源，N3對應培養基甲；水解有機磷的菌株W3，在培養基中應含有有機磷（植酸鈣），故W3對應培養基乙；丙培養基中有Ca3(PO4)2，對應釋放不溶性無機磷的Y1。

（2）粉碎后的玉米秸稈滅菌采用高壓蒸汽滅菌法；要統計有效活菌數；用稀釋涂布平板法；推測在粉碎的秸稈溶液中加入里氏木霉菌懸液的用途是，初步分解玉米秸稈中的物質，使其容易被目的菌吸收利用。

（3）分別在不同的溫度和pH；接種量和發酵時間等條件下進行實驗；最終確定最佳發酵條件后就可以進行發酵生產。

（4）從表格數據可以看出；加了菌肥后，凈光合速率都比對照組要高，故可以得出結論：復合微生物菌肥能促進煙草的光合作用，且在土肥比為14∶1時促進作用最強。

（5）將玉米秸稈發酵制備的微生物菌肥用于農業生產；其優越性是：降低或替代化學肥料的使用；可有效利用秸稈廢棄物；減少秸稈直接還田導致的病蟲害。

【點睛】

本題主要考查微生物的培養和篩選的相關知識，意在考查考生識記培養基的成分等，能挖掘題干信息，分析題干情境準確作答?！窘馕觥考?、丙、乙高壓蒸汽涂布平板初步分解玉米秸稈中的物質，使其容易被目的菌吸收利用溫度pH復合微生物菌肥能促進煙草的光合作用，且在土肥比為14∶1時促進作用最強降低或替代化學肥料的使用；可有效利用秸稈廢棄物；減少秸稈直接還田導致的病蟲害26、略

【分析】【分析】

由圖可知：①是體外受精；②是早期胚胎培養、③是胚胎移植、④是用顯微注射法把目的基因導入受體細胞。

（1）

精子需要進行獲能處理；才能進行受精。精子和卵子在發生上的重要區別是哺乳動物卵泡的形成和在卵巢內的儲備是在出生前（或胎兒時期）完成的。

（2）

圖中③為胚胎移植過程；該過程通常選擇發育到桑椹胚或囊胚階段的胚胎進行移植。移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎是受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應。

（3）

要使目的基因只在乳腺中表達；在構建藥用蛋白基因表達載體時需要將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起。將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法，由于只有雌性個體能產生乳汁，因此要導入到性染色體組成為XX的受精卵中。

（4）

為了解決藥用蛋白在體外保存期短的問題；可通過對藥用蛋白基因進行基因修飾來實現對現有藥用蛋白的改造，產生自然界原本不存在的蛋白質，屬于蛋白質工程的范疇。

【點睛】

本題考查基因工程、胚胎工程等相關知識，要求考生熟悉基因工程的應用和相關流程，熟記受精過程和理解胚胎移植的原理也是解決此類問題的關鍵?！窘馕觥浚?）獲能出生前（或胎兒時期）

（2）桑椹胚或囊胚受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應。

（3）乳腺蛋白基因顯微注射