…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年粵教新版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、單克隆抗體與常規(guī)抗體相比優(yōu)越之處在于（）A.單克隆抗體能夠制成“生物導彈”B.單克隆抗體可以在體外制備C.單克隆抗體的特異性強，靈敏度高，產(chǎn)量也大大高于常規(guī)抗體D.單克隆抗體的制備過程簡單2、犬卵母細胞體外成熟和早期胚胎培養(yǎng)一直是犬科動物繁殖領(lǐng)域的世界級技術(shù)難題。青島農(nóng)業(yè)大學生命科學學院趙明輝副教授通過研究發(fā)現(xiàn)，無機鹽離子的特殊配比可促進犬早期胚胎的基因組激活，而添加新鮮的維生索、組織液提取物等物質(zhì)則可幫助犬早期胚胎維持正常的形態(tài)和細胞分化。下列有關(guān)胚胎工程的敘述，錯誤的是（）A.為獲得多個犬卵母細胞，可對雕犬注射一定量的促性腺激素使其超數(shù)排卵B.早期胚胎的體外培養(yǎng)液中還應該加入有機鹽和血清等成分并需控制好溫度C.早期胚胎包括桑椹胚、囊胚和原腸胚等，原腸胚期開始出現(xiàn)細胞分化形成原腸腔D.趙教授的發(fā)現(xiàn)揭示了營養(yǎng)物質(zhì)的配比有時比濃度更重要，促生長因子作用很大3、將大腸桿菌接種到適宜的細菌培養(yǎng)基上，加蓋后，以不同的方式處理，并放置在不同的溫度環(huán)境中，培養(yǎng)24小時后，所得結(jié)果如下表：。編號abcdef處理。

方法接種大。

腸桿菌接種大腸桿菌；

并覆一吸有抗。

生素X的圓紙片接種大腸桿菌；

并覆一吸有抗。

生素Y的圓紙片接種大腸桿。

菌；表面全被。

醋酸覆蓋接種大。

腸桿菌無菌接種溫度40℃40℃40℃40℃0℃40℃觀察。

結(jié)果全表面。

呈渾濁紙片周圍呈現(xiàn)。

一片清晰其。

余表面呈渾濁全表面呈渾濁全表面清晰全表面。

清晰全表面。

清晰

根據(jù)上述實驗結(jié)果所作出的判斷，錯誤的是A.編號a和f比較可知，有大腸桿菌培養(yǎng)基的表面會變渾濁B.根據(jù)編號b和c的觀察結(jié)果，可知抗生素Y比抗生素X的殺菌能力強C.將編號e和a的結(jié)果比較可知，0℃的環(huán)境不適合大腸桿菌生長D.若揭開編號f的蓋子，24小時后培養(yǎng)基表面會出現(xiàn)渾濁4、在基因工程中，切割載體和含有目的基因的DNA片段，一般需使用A.同種限制酶B.不同種限制酶C.同種連接酶D.不同種連接酶5、SRY基因為Y染色體上的性別決定基因；可用SRY-PCR法鑒定胚胎性別，其基本程序如下圖。相關(guān)說法不正確的是（）

A.通常提取囊胚期內(nèi)細胞團細胞的DNA作為復制模板B.PCR反應需要提供含DNA模板、兩種引物、四種脫氧核苷酸和耐熱的DNA聚合酶的緩沖溶液C.擴增相同時間，獲得DNA的含量與模板DNA的量成正相關(guān)D.SRY探針能與雄性胚胎樣品中DNA配對6、下列關(guān)于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗，說法錯誤的是（）A.PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制B.PCR的產(chǎn)物一般要通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定C.凝膠中DNA分子的遷移速率只與DNA分子的大小有關(guān)D.為避免外源DNA等因素的污染，PCR實驗中使用的工具也需要滅菌處理評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)7、某實驗室做了下圖所示的實驗研究；有關(guān)敘述正確的是（）

A.與纖維母細胞相比，過程①形成的誘導干細胞的全能性較高B.過程②是誘導干細胞中基因選擇性表達的結(jié)果C.過程③得到的Z細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測及多次篩選D.圖中的肝細胞、神經(jīng)細胞及Y細胞具有相同的基因組成8、為對某樣品中噬菌體計數(shù)，工作人員將0.1mL稀釋倍的噬菌體樣品與敏感細菌混合后平鋪在平板上培養(yǎng)一段時間，長滿細菌的平板因部分細菌被噬菌體裂解而形成圓形透明斑，即噬菌斑（1個噬菌斑為1個pfu），噬菌體效價可用每毫升樣品中含有的pfu數(shù)表示。下列敘述正確的是（）

A.透明的平板培養(yǎng)一段時間后變?yōu)椴煌该鳡顟B(tài)，是由細菌大量繁殖造成的B.噬菌體樣品應有足夠的稀釋度，以保證初期一個細菌最多被一個噬菌體吸附C.若平均每個平板的噬菌斑數(shù)量為150，則該樣品的噬菌體效價為1.5×108pfu/mLD.若有少數(shù)活噬菌體末能侵染細菌，噬菌斑計數(shù)結(jié)果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低9、研究發(fā)現(xiàn)，跨膜糖蛋白CD47與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，能抑制巨噬細胞的吞噬作用。腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞表面的高，導致巨噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。為驗證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，科學家按照如下流程進行了實驗組實驗。下列敘述正確的是（）

A.①過程注射CD47相當于給小鼠注射抗原B.②過程依據(jù)的原理是細胞膜具有流動性C.③過程需要進行抗體檢測D.與對照組相比，圖中巨噬細胞的吞噬指數(shù)會下降10、通過設(shè)計引物，運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。下圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。下列敘述正確的是（）

A.引物中設(shè)計兩種限制酶識別位點有利于目的基因定向插入載體B.PCR的過程主要包括變性→延伸→復性（退火），溫度逐漸降低C.第3輪PCR，引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因D.每一輪PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及時補充11、免疫PCR是對微量抗原的一種檢測方法。下圖是利用該技術(shù)檢測牛乳中微量抗生素的流程圖：首先將抗體1固定在微板上，沖洗后加入待檢的牛乳，再加入DNA標記的抗體2，進行PCR擴增，最后進行電泳檢測，相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次沖洗不充分則有可能出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象C.電泳檢測結(jié)果只能判斷陽性與否，無法判斷牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗體反應通過PCR技術(shù)間接擴增放大，從而達到可檢測的水平評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)12、回答下列問題。

（1）目前人類對基因________及基因間的________________尚缺乏足夠的認識，要想通過基因檢測達到預防疾病的目的是困難的；況且人類的____________病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和________________有關(guān)。

（2）生物武器種類包括__________、________、__________，以及經(jīng)過___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下_____________、_____________、______________生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散。13、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。14、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以將_____________水解成_________________和________________。15、請寫出基因工程的概念：_________________。請寫出胚胎移植的概念：_____________________。請分別寫出植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的原理_________。16、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)；蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過程獲取目的基因→構(gòu)建表達載體→導入受體細胞→目的基因的檢測與鑒定預期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列→合成DNA→表達出蛋白質(zhì)實質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達）定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進行修改。_________17、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評卷人得分四、判斷題(共4題，共24分)18、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽之任之，不管不問（______）A.正確B.錯誤19、目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯誤20、基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面。（選擇性必修3P87）()A.正確B.錯誤21、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共24分)22、下圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程示意圖；請據(jù)圖回答：

（1）泡菜是乳酸菌發(fā)酵的產(chǎn)物，乳酸菌的代謝類型是___________________。制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜，原因是____________________________。

（2）將鹽與清水按照一定的比例配制鹽水，待鹽水煮沸冷卻后，注入裝好原料的泡菜壇中，同時加入一定量的“老汁”(陳泡菜水)。將鹽水煮沸冷卻的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）測定亞硝酸鹽含量的方法是_________________。即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與____________________________發(fā)生重氮化反應后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合后形成_______________色的染料，然后將顯色反應后的樣品與已知濃度的____________進行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。23、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導致的遺傳病。科研人員對此病的治療進行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞，并采用___________技術(shù)檢測導入基因的表達情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。24、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機體特異性免疫，實現(xiàn)腫瘤的預防和治療。

(1)部分腸道細菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細胞。細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達產(chǎn)物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結(jié)合，提高樹突狀細胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應的效果，研究者用健康小鼠進行如下實驗：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時后，飲用含阿拉伯糖的水結(jié)果檢測第1組空載體+第12天，每組隨機取5只小鼠等量的脾臟細胞與黑色素瘤細胞共培養(yǎng)，檢測殺傷率，結(jié)果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時后其在腸道內(nèi)存在數(shù)量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結(jié)果說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應，理由是_____。

②為進一步驗證上述結(jié)論，研究者進行如下實驗：先加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，檢測熒光細胞的數(shù)目，若第5組_____為最大值；則上述結(jié)論成立。

A．帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物。

B．帶有綠色熒光標記的細胞毒性T細胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細胞。

③腫瘤患者術(shù)后極易復發(fā)，研究者重復上表實驗，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發(fā)為不同腫瘤的精準治療和預防提供了可能。依據(jù)本研究，設(shè)計針對肺癌治療的工程菌表達載體元件：_____。評卷人得分六、綜合題(共2題，共16分)25、在治療大面積燒傷病人時；通常是取患者自身細胞，在體外培養(yǎng)獲得大量的自體健康皮膚，再移植給患者進行恢復性治療。回答下列問題：

（1）通常要取皮膚的成纖維細胞或皮膚干細胞進行體外培養(yǎng)；推測其原因是_____________。

（2）一般可取患者腹部2~3cm2的皮膚；用_____________酶來處理組織，可使細胞分散成單個細胞，細胞分散成單個的好處是_______________________________________。

（3）培養(yǎng)細胞的過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象；該現(xiàn)象是指__________________________。

（4）在動物細胞的體外培養(yǎng)過程中；需要提供無菌；無毒環(huán)境，可通過添加一定量的抗生素來抑制細菌的生長。據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，抗生素可抑制細菌細胞中基因控制蛋白質(zhì)的合成過程，抗生素的作用機理可能有_____________________（寫出1點即可）。

（5）在動物細胞的體外培養(yǎng)過程中，需要的氣體主要有O2和CO2.O2的主要作用是_____________________，CO2的主要作用是______________________________。26、棉花植株產(chǎn)出棉纖維時；會產(chǎn)生大量棉籽這一副產(chǎn)品。棉籽可用于榨取棉籽油（一種食用油）。高油酸食用油可防止動脈硬化。因此，可通過提高棉籽油中油酸和亞油酸的比例以提高其品質(zhì)。FAD2酶是催化油酸形成亞油酸的關(guān)鍵酶。研究者擬通過基因工程的方法，利用RNA干擾技術(shù)培育產(chǎn)高油酸棉籽的棉花品種。

(1)RNA干擾是指雙鏈RNA誘發(fā)的與其有相似序列的mRNA降解的現(xiàn)象。該過程通過降低基因____________的過程進而降低FAD2酶的含量。

(2)為使用RNA干擾技術(shù)降低FAD2酶含量；研究者進行了干擾載體的構(gòu)建。

①首先；通過技術(shù)手段得到了如圖1所示的片段。

片段中序列A是FAD2基因的部分序列，序列B應為____________。

②然后，將圖1所示片段連入載體中，形成干擾載體。在連入過程中，____________（選填“需要”或“不需要”）考慮片段與載體方向的問題，原因是____________。

③將干擾載體通過____________導入棉花中。

(3)利用____________方法檢測了轉(zhuǎn)基因棉花的FAD2酶含量，得到結(jié)果如圖2所示。圖示結(jié)果說明____________。

(4)為將該轉(zhuǎn)基因棉花應用于實際生產(chǎn)，還需進行的檢測有：____________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

向動物體內(nèi)反復注射某種抗原；使得動物產(chǎn)生抗體，這種方法不僅產(chǎn)量低，純度低，而且制備的抗體特異性差；單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強；靈敏度高，并可能大量制備。

【詳解】

單克隆抗體的制備是通過已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞在體外或體內(nèi)培養(yǎng)產(chǎn)生的。它區(qū)別于常規(guī)抗體的特點是特異性強；靈敏度高；產(chǎn)量大大高于常規(guī)抗體。

故選C。2、C【分析】【分析】

早期胚胎培養(yǎng)用到發(fā)育培養(yǎng)基,包含無機鹽；有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清動物細胞培養(yǎng)用到液體培養(yǎng)基,包含糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、血清血漿。促性腺激素能促進超數(shù)排卵。

【詳解】

A；一定量的促性腺激素能促進超數(shù)排卵；得到多個犬卵母細胞，A正確；

B；早期胚胎的體外培養(yǎng)液中還應該加入有機鹽和血清等成分；另外需要控制溫度、氣體條件，保持無毒無菌環(huán)境，B正確；

C；早期胚胎包括桑椹胚、囊胚和原腸胚等；但細胞分化開始于囊胚，C錯誤；

D；無機鹽離子的特殊配比可促進犬早期胚胎的基因組激活；說明營養(yǎng)物質(zhì)的配比有時比濃度更重要，促生長因子作用很大，D正確。

故選C。3、B【分析】【分析】

分析表格：表中表示將大腸桿菌接種到適宜的細菌培養(yǎng)基上，加蓋后，以不同的方式處理，并放置在不同的溫度環(huán)境中，培養(yǎng)24小時后，觀察所得的結(jié)果。比較a和f可知有大腸桿菌培養(yǎng)基的表面會變渾濁；比較b和c可知抗生素X比抗生素Y的殺菌能力強；比較e和a可知0℃不適合大腸桿菌生長。

【詳解】

根據(jù)對照原則；a；f的區(qū)別在于是否接種了大腸桿菌，比較可知，有大腸桿菌培養(yǎng)基的表面會變渾濁，無大腸桿菌培養(yǎng)基的表面清晰；A正確。含有抗生素的紙片覆蓋在大腸桿菌的培養(yǎng)基上，可根據(jù)培養(yǎng)基表面的渾濁程度判定此種抗生素對大腸桿菌的殺菌能力，即X強于Y；B錯誤。e、a形成對照，其變量是溫度，可知0℃不適合大腸桿菌生長；C正確。f暴露在空氣中后，會自然接種菌種，形成菌落，使培養(yǎng)基表面出現(xiàn)渾濁；D正確。故選B。

【點睛】

本題結(jié)合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)及實驗分析，要求考生掌握實驗原則，正確區(qū)分實驗的變量，能對比分析不同實驗組別的處理方法、溫度和觀察結(jié)果，得出正確的結(jié)論。此類試題也鍛煉了學生分析問題、解決問題的能力。4、A【分析】1；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與表達。

2；基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建；其一般過程為：首先用同種限制酶切割載體和含有目的基因的DNA片段；其次用DNA連接酶將兩者連接形成重組DNA分子。

【詳解】

AB；基因工程中；切割載體和含有目的基因的DNA片段時，需要使用同種限制酶，以產(chǎn)生相同的黏性末端，再在DNA連接酶的作用下形成重組DNA分子，為了讓它們的黏性末端能正好進行堿基配對，所以二者切割的限制酶必須是相同的，B錯誤，A正確。

CD；DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵；題干中要求切割載體和含有目的基因的DNA片段，CD錯誤。

故選A。5、A【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應過程是：變性→復性→延伸過程。

3；結(jié)果：上述三步反應完成后；一個DNA分子就變成了兩個DNA分子，隨著重復次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加，PCR的反應過程都是在PCR擴增儀中完成的。

【詳解】

A；通常提取滋養(yǎng)層細胞的DNA作為復制模板；這是因為滋養(yǎng)層細胞是胎兒發(fā)育過程中形成的細胞，其DNA可作為復制模板，A錯誤；

B；PCR反應需要提供含DNA模板、兩種引物、四種脫氧核苷酸作原料和耐熱的DNA聚合酶的緩沖溶液；B正確；

C、PCR反應中，DNA分子以2n的形式增加；若擴增相同時間，獲得DNA的含量與模板DNA及引物的量成正相關(guān)，C正確；

D；SRY探針能與雄性胚胎樣品中DNA配對；形成雜合雙鏈，D正確。

故選A。

【點睛】6、C【分析】【分析】

DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶；高溫和洗滌劑的耐受性。

【詳解】

A；PCR技術(shù)利用了DNA的熱變性原理；通過調(diào)節(jié)該變性-復性-延伸步驟中不同溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合，A正確；

B；對PCR擴增后的產(chǎn)物；一般需要通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，凝膠中的DNA分子需要染色，以便使電泳結(jié)果更直觀，B正確；

C；在凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度有關(guān)；C錯誤；

D；為避免外源DNA等因素的污染；PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水等在使用前都必須進行高壓滅菌處理，D正確。

故選C。二、多選題(共5題，共10分)7、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析；①過程導入外源基因，類似于植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化，②表示細胞分裂和分化，③表示動物細胞融合成雜交瘤細胞，④是動物細胞培養(yǎng)。

【詳解】

A；①過程是通過誘導基因作用使纖維母細胞（高度分化）脫分化為干細胞（具有分裂和分化能力）；與纖維母細胞相比，干細胞的全能性較高，A正確；

B；②過程是干細胞再分化為其他組織器官細胞；是基因選擇性表達的結(jié)果，B正確；

C；③過程是細胞融合形成雜交瘤細胞過程；需要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測及多次篩選，C正確；

D；圖中的肝細胞、神經(jīng)細胞均來自于甲鼠；具有相同的基因組成，Y細胞來自于乙鼠，其基因組成不同，D錯誤。

故選ABC。8、A:B:D【分析】【分析】

病毒：是一種個體微小結(jié)構(gòu)簡單；只含一種核酸(DNA或RNA)和蛋白質(zhì)組成的，必須在活細胞內(nèi)寄生并以復制方式增殖的非細胞結(jié)構(gòu)生物。

【詳解】

A；噬菌體在細菌細胞中；沒有裂解細菌，細菌繁殖導致透明的平板培養(yǎng)一段時間后變?yōu)椴煌该鳡顟B(tài)，A正確；

B；噬菌體樣品應有足夠的稀釋度；以保證初期一個細菌最多被一個噬菌體吸附，如果稀釋度不夠，會出現(xiàn)兩個或多個噬菌體吸附同一個細菌，從而導致噬菌斑數(shù)量減少，噬菌斑計數(shù)結(jié)果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低，B正確；

C、若平均每個平板的噬菌斑數(shù)量為150，則該樣品的噬菌體效價為：150÷0.1×106=1.5×109pfu/mL；C錯誤；

D；若有少數(shù)活噬菌體末能侵染細菌；會導致形成噬菌斑數(shù)量減少，從而導致噬菌斑計數(shù)結(jié)果比樣品中實際活噬菌體數(shù)偏低，D正確。

故選ABD。9、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過程注射CD47相當于給小鼠注射抗原；通過多次注射可獲得更多已免疫的B淋巴細胞，A正確；

B；②過程表示誘導細胞融合；依據(jù)的原理是細胞膜具有流動性，B正確；

C；③過程表示雜交瘤細胞多次篩選培養(yǎng)；該過程需要進行抗體檢測，從而獲得能產(chǎn)生我們所需要抗體的雜交瘤細胞，C正確；

D；根據(jù)題干中“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用”；因此與對照組相比，圖中巨噬細胞的吞噬指數(shù)會升高，D錯誤。

故選ABC。10、A:C【分析】【分析】

PCR的原理是DNA雙鏈復制；步驟包括高溫變性；復性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料。根據(jù)圖中可得，由于引物的一個堿基在不影響與模板鏈整體配對的前提下不與目的基因配對，再利用PCR技術(shù)實現(xiàn)了目的基因的定點誘變。其技術(shù)原理是堿基互補配對原則。

【詳解】

A；引物中設(shè)計兩種限制酶識別位點；可以配合載體的限制酶識別位點，幫助目的基因定向定點插入運載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，A正確；

B；在PCR反應過程中變性大約94℃→復性大約55℃→延伸大約72℃；B錯誤；

C；第3輪PCR中；物質(zhì)②是引物2以引物1拓展得到的DNA鏈為模板進行復制得到的，故引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因，C正確；

D；PCR一次大概有30個循環(huán)；每一輪PCR都消耗引物和原料，是在最初加入，不是后期補充，D錯誤。

故選AC。11、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一種抗原檢測系統(tǒng)；將一段已知序列的DNA片段標記到抗體2上，通過抗原抗體的特異性識別并結(jié)合，抗體2會和固定抗體1；抗生素形成復合物“固定抗體1—抗生素—抗體2”，再用PCR方法將這段DNA進行擴增，通過檢測PCR產(chǎn)物的量，即可推知固定抗體1上吸附的抗生素的量。

【詳解】

A；免疫PCR中所用的DNA不選用受檢樣品（牛乳）中可能存在的DNA。待檢測的牛乳中可能含有牛乳腺細胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若圖示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，經(jīng)過PCR擴增后的產(chǎn)物中，不僅有抗體2上的DNA擴增產(chǎn)物，還可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的擴增產(chǎn)物，使檢測結(jié)果偏大，A正確；

B；如果第三次沖洗不充分；可能使殘留的、呈游離狀態(tài)的抗體2上的DNA也作為PCR的模板參與擴增，會出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，B正確；

CD；微量抗原抗體反應；是通過PCR技術(shù)擴增抗體2上連接的DNA，最后通過檢測擴增產(chǎn)物—DNA的量來確定抗生素的量的方法。因此，PCR擴增產(chǎn)物的量與牛乳中抗生素的量呈正相關(guān)，抗原、抗體的數(shù)量可通過PCR技術(shù)間接擴增放大，C錯誤，D正確。

故選ABD。三、填空題(共6題，共12分)12、略

【分析】【分析】

【詳解】

（1）人類對基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用尚缺乏足夠的認識；人類的多基因病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和生活習慣有關(guān)。

（2）生物武器種類包括致病菌；病毒、生化毒劑、以及經(jīng)過基因重組的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器。【解析】①.結(jié)構(gòu)②.相互作用③.多基因④.生活習慣⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒劑⑧.基因重組⑨.不發(fā)展⑩.不生產(chǎn)?.不儲存13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學合成法14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸15、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學為理論基礎(chǔ)，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預先設(shè)計的藍圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。

3；動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖，其原理是細胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性。

【點睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動植物細胞培養(yǎng)等相關(guān)知識，意在考察考生對知識點的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱受精卵移植，是指將雌性動物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)③.植物細胞全能性、細胞增殖16、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，其結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)。【解析】蛋白質(zhì)工程的結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。四、判斷題(共4題，共24分)18、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯誤。19、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜，所以錯誤。20、A【分析】【詳解】

目前，基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面，例如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物；將植物花青素代謝相關(guān)的基因?qū)霠颗；ㄖ校蛊涑尸F(xiàn)自然界沒有的顏色，提高了觀賞價值；將外源生長素基因?qū)膈庺~體內(nèi)，轉(zhuǎn)基因鯉魚生長速率加快等，所以正確。21、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。五、實驗題(共3題，共24分)22、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷?/p>

2；泡菜的制作過程：按照清水與鹽的質(zhì)量比為4：1的比例配制鹽水；將鹽、水煮沸冷卻。將經(jīng)過預處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡萊壇內(nèi)，裝至半壇時，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續(xù)裝至八成滿，再徐徐注入配制好的鹽水，使鹽水沒過全部菜料，蓋好壇蓋。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。在發(fā)酵過程中要注意經(jīng)常向水槽中補充水。發(fā)酵時間長短受室內(nèi)溫度的影響。

3；泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測定；即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應生成重氮鹽，重氮鹽與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

（1）

乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料；這是因為新鮮的蔬菜亞硝酸鹽的含量低。

（2）

將鹽水煮沸冷卻的目的是煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動不受影響）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時間內(nèi)成為優(yōu)勢菌。

（3）

測定亞硝酸鹽含量的方法是比色法。即在鹽酸酸化條件下；亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合后形成玫瑰紅色的染料，然后將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準顯色液進行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。

【點睛】

本題考查制作泡菜，要求考生識記制作泡菜的原理和過程，理解用比色法測定亞硝酸鹽的含量，意在考查考生的識記能力和分析能力。【解析】（1）異養(yǎng)厭氧型亞硝酸鹽的含量低。

（2）煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動不受影響）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時間內(nèi)成為優(yōu)勢菌。

（3）比色法對氨基苯磺酸玫瑰紅標準顯色液23、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗目的是比較攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應該含有導入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進行通讀，進而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內(nèi)都沒有相應mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異。【解析】(1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異24、略

【分析】【分析】

樹突狀細胞為抗原呈遞細胞；可識別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細胞。所以，ClyA基因的作用為表達出細菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進而融合基因可以被免疫細胞識別。Fc表達產(chǎn)物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結(jié)合，進而提高樹突狀細胞識別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據(jù)表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進而激活融合基因的表達；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導，殺傷率均低。

②小鼠脾臟細胞具有免疫細胞；可在抗原刺激下引起特異性免疫。帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物可引起小鼠脾臟細胞發(fā)生特異性免疫，故先加入第1-5組小鼠脾臟細胞和帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物進行保溫，判斷特異性免疫的強度；

故選AC。

再加入帶有綠色熒光標記的細胞毒性T細胞特異性抗體；目的是檢測OVA抗原肽復合物是否能夠產(chǎn)生特異性細胞毒性T細胞。

故選B。

若第5組同時被紅色和綠色熒光標記的細胞數(shù)目占比越多；說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應，結(jié)論成立。

③腫瘤患者術(shù)后極易復發(fā)；說明特異性免疫功能減弱。所以，可多次注射黑色素瘤細胞，進而研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復發(fā)。

（3）本實驗中融合基因里面有OVA（黑色素瘤細胞特異性抗原），所以只需將OVA替換為肺癌細胞特異性抗原即可。即將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因。【解析】(1)表達ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面識別；攝取。

(2)第4組:ClyA-OVA-Fc和-第5組:ClyA-OVA-Fc和+第3；5組含有OVA；在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高;1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導，殺傷率均低ACB同時被紅色和綠色熒光標記的細胞數(shù)目占比研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復發(fā)。

(3)將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因六、綜合題(共2題，共16分)25、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)過程。

取動物胚胎或幼齡動物器官；組織。將材料剪碎；并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），