…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年冀教版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、實驗人員利用矮牽牛（二倍體，2n=14）的紅色花瓣細胞（液泡呈紅色）與枸杞（四倍體，4n=48）葉肉細胞，制備了相應的原生質體，并誘導其融合，經篩選、培養獲得雜種植株。下列有關敘述錯誤的是（）A.獲得該雜種植株時不用考慮兩種高等植物間的生殖隔離問題B.可利用聚乙二醇、滅活的病毒等作為融合劑誘導原生質體融合C.可利用光學顯微鏡觀察，篩選出雜種原生質體D.若原生質體均為兩兩融合，則融合后的細胞中染色體數目可能為28、96或62條2、成纖維細胞具有較強的分裂增殖能力，是較易培養的動物細胞。科學家通過體外誘導成纖維細胞，獲得了形態和功能均類似胚胎干細胞的一類細胞，將其稱為誘導多能干細胞（簡稱iPS細胞），并用iPS細胞治療了鐮刀型細胞貧血。下列說法錯誤的是（）A.體外培養成纖維細胞時，若要使其保持正常的二倍體核型，則培養代數應控制在10代以內B.iPS細胞在形態上應表現出體積大、細胞核小、核仁明顯的特點C.iPS細胞在功能上應可分化為成年動物體內任何一種組織細胞D.將iPS細胞增殖分化出的不同細胞移植回病人體內，理論上可以避免免疫排斥反應3、下面是某同學用動物肝臟做“DNA粗提取與鑒定實驗”的操作，正確的是（）A.在含DNA的濾液中加入冷卻的酒精，使蛋白質與DNA分開B.在燒杯中加入肝臟和蒸餾水并進行攪拌，使細胞破裂釋放核物質C.調節NaCl溶液物質的量濃度至0．14mol?L-1，過濾后取濾液進行后續步驟的操作D.向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后溶液呈藍色4、如圖為基因表達載體的模式圖，下列敘述錯誤的是（）

A.構建基因表達載體需要用到限制酶和DNA連接酶B.終止子位于基因的下游，使翻譯在所需要的地方停止下來C.構建成功后可使目的基因在受體細胞中穩定存在，并遺傳給下一代D.抗生素抗性基因作為標記基因5、對“DNA的粗提取與鑒定”實驗中的三次過濾的敘述中，不正確的是（）A.第一次過濾后，核物質存在于濾出的固體物中B.第二次過濾后，使用多層紗布，DNA存在于紗布上的黏稠物中C.第三次過濾后，DNA存在于濾液中，可進一步除去非DNA物質D.上述C均正確評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)6、下列關于動物細胞培養的敘述，錯誤的是（）A.培養基一般為固體培養基B.培養結果只能獲得大量細胞及生物制品，而不能獲得生物體C.需要氧氣來滿足細胞代謝的需要，不需要二氧化碳D.通過細胞培養可以檢測有毒物質，判斷某物質的毒性7、大多數哺乳動物的早期胚胎具有調節發育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以發育成一個完整的胎兒，調節能力隨著發育進程逐漸減弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分離的卵裂球仍具有調整發育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而發育至囊胚。下列說法正確的是（）A.桑椹胚的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能B.桑椹胚不同部位的細胞致密化程度不同C.胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇D.胚胎發育到原腸胚階段，可將其取出向受體移植8、下列關于轉基因生物安全性的敘述，正確的是（）A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產生二次污染B.種植抗蟲棉可以減少農藥的使用量，對環境沒有任何負面影響C.如果轉基因花粉中有毒蛋白或過敏蛋白，可能會通過食物鏈傳遞到人體內D.轉基因生物所帶來的安全性問題是可以解決的9、下列關于土壤中纖維素分解菌的分離與計數，敘述正確的是（）A.可從富含腐殖質的林下土壤中篩選產纖維素酶菌B.培養基中應含大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養C.培養微生物的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌D.菌種分離和菌落計數都可以使用固體培養基10、如圖是單克隆抗體制備過程示意圖，1～3代表相關過程，a～e代表相關細胞，其中c是兩兩融合的細胞。以下敘述錯誤的是（）

A.過程1是給小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠產生特異性免疫反應B.過程2的促融方法可采用電融合技術，該技術能擊穿核膜促使核融合C.c細胞有三種，每種細胞染色體組數不相等，e細胞是雜交瘤細胞D.過程3是進行抗體檢測，并克隆產生陽性細胞的過程11、玉米秸稈轉化為綠色能源酒精是解決能源危機的措施之一，具體的工藝流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.用酸或堿預處理有利于酶與底物充分接觸，提高催化效率B.步驟③中，酵母菌在發酵初期更多分布在發酵液的上層C.隨培養次數的增加，分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩定D.發酵過程中酒精濃度升高會抑制酵母菌代謝活動，同時使發酵液pH降低，發酵停止評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)12、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。13、基因的“剪刀”是_____，它的化學本質是_____，它只能識別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構成；基因的運載體是將_____送入_____的運輸工具。目前常用的運載體有_____、________和_____。質粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環狀_____。14、去除DNA中的雜質，可以在濾液中加入2mol/L濃度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再調節NaCL溶液濃度為0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用濃度為2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________15、胚胎工程。

胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術，由______、______、______、胚胎冷凍保存技術和______技術等組成的現代生物技術。16、應用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細胞產物的工廠化生產。17、隨著現代科技的發展，有些新的致病微生物被發現，它們的危害可能更大。通過互聯網或圖書館搜集近年發現的致病微生物的相關資料，分析和歸納這些資料__________。18、最后檢測目的基因是否翻譯成______，方法是從轉基因生物中提取______，用相應的______進行______。評卷人得分四、實驗題(共3題，共24分)19、《本草綱目》記載；“蟬花可治療驚癇，夜啼心悸，功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復合體，內含蟲草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人員從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進行人工培養。

(1)制備培養基：

①該實驗選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養基，配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，瓊脂20g，用蒸餾水定容至1000mL，自然pH，培養基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供_____等營養成分（至少寫出2種），該培養基的自然pH為______性范圍。

②為了便于篩選蟬擬青霉菌株，培養基中還應加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生長。該培養基從功能上分類屬于______培養基。

③配制的培養基必須進行滅菌處理，目的是_______。檢測固體培養基滅菌效果的常用方法是_____。

(2)蟬擬青霉的分離純化：取新鮮蟬花，挑取蟲體胸腔中的少量菌絲采用_______法接種至PDA培養基上進行培養。

(3)發酵生產：發酵生產中常用液體培養基擴大培養。下表為發酵菌絲體和天然蟬花的主要成分及含量的測定結果，據表判斷_______（填“能”或“不能”）用發酵菌絲體替代天然蟬花，判斷的理由是_______。粗蛋白（%）粗纖維（%）灰份（%）水分（%）蟲草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）發酵菌絲體25．388．327．878．9233．278．9天然蟬花19．653．127．849．8128．553．620、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機體特異性免疫，實現腫瘤的預防和治療。

(1)部分腸道細菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內豐富的免疫細胞。細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達載體轉化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達產物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結合，提高樹突狀細胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發特異性免疫反應的效果，研究者用健康小鼠進行如下實驗：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時后，飲用含阿拉伯糖的水結果檢測第1組空載體+第12天，每組隨機取5只小鼠等量的脾臟細胞與黑色素瘤細胞共培養，檢測殺傷率，結果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時后其在腸道內存在數量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結果說明工程菌在人為可控條件下引發特異性免疫反應，理由是_____。

②為進一步驗證上述結論，研究者進行如下實驗：先加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，檢測熒光細胞的數目，若第5組_____為最大值；則上述結論成立。

A．帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物。

B．帶有綠色熒光標記的細胞毒性T細胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細胞。

③腫瘤患者術后極易復發，研究者重復上表實驗，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發為不同腫瘤的精準治療和預防提供了可能。依據本研究，設計針對肺癌治療的工程菌表達載體元件：_____。21、下圖是某同學設計的傳統發酵裝置示意圖。比較傳統發酵技術與現代發酵工程；回答下列問題：

(1)傳統發酵釀酒與現代工業發酵釀酒的原理是______。請設計簡單的實驗驗證發酵過程中產生了酒精（不考慮發酵液中葡萄糖的影響），寫出實驗思路并預期實驗結果與結論______。

(2)傳統發酵技術一般以天然存在的______發酵，品質不一，現代工業發酵一般為單一菌種發酵，品質較高。自制的果酒并非商品意義上的產品，在實際生產中還需要經過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測定發酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細胞計數板，觀察并統計到中方格中的酵母菌平均數為9個，則每毫升發酵液中酵母菌數量約是______個。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時，操作上的最主要的區別是______。評卷人得分五、綜合題(共4題，共24分)22、玉米是世界上的第三大糧食作物；廣泛種植于世界各地。研究表明，轉基因抗蟲玉米中的細菌BT基因能表達一種毒蛋白，這種毒蛋白能有效殺死玉米螟（一種農業害蟲）請回答下列問題：

（1）BT基因在基因工程中稱為______________。在基因表達載體中，除了要有BT基因外，還必須有啟動子、終止子和______________若將BT基因插入到Ti質粒的______________上；通過農桿菌的轉化作用，就可以使其導入玉米細胞并將其插入到玉米細胞中的染色體上。

（2）BT基因與載體結合過程中需要限制性核酸內切酶和DNA連接酶。若某限制酶的識別序列和切點是請畫出目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端_______。DNA連接酶對所連接的兩端堿基序列______________（填“有”或“沒有”）專一性要求。

（3）為了防止抗蟲玉米通過花粉傳播帶來的生態學問題，科研小組考慮將抗蟲基因導入到玉米根尖細胞的______________中以防止基因污染，同時在大規模種植的抗蟲玉米田中設置一個或多個避難所種植普通玉米，目的是______________。

（4）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉化實驗為證明DNA是遺傳物質做出了重要貢獻，也可以說是基因工程的先導，如果說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么，這一啟示是______________。23、在生活中；人們可以利用微生物來生產多滋多味的發酵產品，如果醋；果酒、腐乳和泡菜等。回答下列相關問題：

（1）酵母菌是兼性厭氧型微生物，在___________(填“有氧”或“無氧”)條件下，酵母菌會迅速大量繁殖。20℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發酵時，一般將溫度控制在___________℃。發酵一段時間后，觀察到發酵罐內液面不再有___________；說明發酵完畢。

（2）與果酒發酵相比，果醋發酵需要控制的條件是______________________。

（3）泡菜的制作離不開乳酸菌，常見的乳酸菌有___________和___________。泡菜制作過程中會產生亞硝酸鹽，影響亞硝酸鹽含量的因素有___________(答出2個)。24、小豆起源于中國。栽培小豆種皮多為紅色；此外還有白色；綠色、褐色等各種類型。

(1)為探究種皮顏色的遺傳規律；用4個不同種皮顏色的小豆品種進行如下雜交實驗。

①根據雜交實驗Ⅰ結果推測，小豆種皮的顏色（紅色、綠色和褐色）是由___________對等位基因控制。雜交實驗Ⅱ的F2白色種皮個體中雜合子的比例為___________。

②有人根據以上雜交實驗結果推測小豆種皮相關色素的代謝途徑；如圖1。

為探究R/r基因與B/b基因之間的位置關系，利用上述4個品種中的白色和綠色品種進行雜交實驗，F1自交獲得F2。在上述推測成立的情況下，若F2小豆的種皮顏色及比例為___________，則說明R/r基因與B/b基因位于同源染色體上；且減數分裂時不發生交換。

(2)小豆種皮顏色與花青素等物質的種類有關；蛋白M1和M2調控花青素合成相關基因的表達。

①分別用帶有M1和M2基因的質粒轉化植株，得到M1和M2過表達植株，檢測其花青素的含量，結果如圖2。根據實驗結果推測，M1基因________。

②研究發現，M2基因過表達植株的一些組織中M1的表達量升高。為研究M2與M1基因的關系，將M2蛋白與用M1基因的啟動子部分片段制作的探針混合并電泳，結果如圖3（生物素越多則條帶顏色越深）。圖3結果表明____。

③綜合以上研究，請補充完善M1、M2、花青素合成的關系圖（括號內填寫“促進”或“抑制”），并從物質和能量的角度解釋這種關系的意義____。

25、人胰島素由A；B兩條肽鏈構成。研究人員用大腸桿菌作生產菌；利用基因工程TTA號凍技術分別生產兩條肽鏈，并在體外將兩條肽鏈加工成胰島素。請回答下列問題：

（1）由A、B兩條肽鏈可推導出A、B基因的堿基序列，依據是______。因為A、B基因中的脫氧核苷酸數較少，因此常用______的方法獲取目的基因。

（2）在基因表達載體中，標記基因的作用是______。基因工程中不能將A、B基因直接導入大腸桿菌的原因是______。

（3）檢測A、B基因是否導入受體菌時，常用______作探針。若A、B基因表達的肽鏈售中氨基酸數目增多，肽鏈后延，則需對A、B基因進行改造，這個改造是______。

（4）引導肽是由引導肽基因控制合成的段多肽序列，若在A、B肽鏈的前端加上引導肽序列后，可將A、B肽鏈引導到大腸桿菌的細胞膜外，便于A、B肽鏈提取。為實現上述目的，在基因層面的操作是______參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、B【分析】【分析】

誘導植物細胞融合前；先要采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細胞壁，獲得原生質體；誘導植物原生質體融合時，可以采用物理方法（電激；振動等）和化學方法（聚乙二醇）；若原生質體均為兩兩融合，則會形成3種細胞，即矮牽牛細胞自身融合的細胞、枸杞細胞自身融合的細胞，雜種細胞。可利用顯微鏡篩選得到融合后的雜種原生質體。

【詳解】

A；植物體細胞雜交技術能克服遠源雜交不親和的障礙；因此獲得該雜種植株時不用考慮兩種高等植物間的生殖隔離問題，A正確；

B；誘導植物原生質體融合時不能用滅活的病毒作為誘導劑；B錯誤；

C；顯微鏡下可以觀察到染色體；因此可利用光學顯微鏡觀察，篩選出雜種原生質體，C正確；

D；若原生質體均為兩兩融合；則有三種情況，即矮牽牛細胞自身融合、枸杞細胞自身融合、矮牽牛細胞和枸杞細胞融合，因此融合后的細胞中染色體數目可能為28、96或62條，D正確。

故選B。2、B【分析】【分析】

根據分化潛能分類：

(1)全能干細胞：具有自我更新和分化形成任何類型細胞的能力；如胚胎干細胞。

(2)多能干細胞：具有產生多種類型細胞的能力；但卻失去了發育成完整個體的能力，發育潛能受到一定的限制；如造血干細胞。

(3)單能干細胞（也稱專能干細胞）：只能分化為成體組織；器官中的細胞。

【詳解】

A；體外培養成纖維細胞時；培養代數應控制在10代以內，以保持正常的二倍體核型，A正確；

B；iPS細胞的形態類似胚胎干細胞；在形態上應表現出體積小、細胞核大、核仁明顯的特點，B錯誤；

C；iPS細胞的功能均類似胚胎干細胞；所以iPS細胞具有發育的全能性，可分化為成年動物體內任何一種組織細胞，C正確；

D；是用患者自己的體細胞通過體外誘導成iPS細胞；所以將iPS細胞增殖分化出的不同細胞移植回病人體內，理論上可以避免免疫排斥反應，D正確。

故選B。3、A【分析】【分析】

1；DNA粗提取的實驗材料選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮；但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大。

2；DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同；利用這一特點，選擇適當的鹽濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的。

3；DNA不溶于酒精溶液；但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分離。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精，故在含DNA的濾液中加入冷卻的酒精，可使蛋白質與DNA分開，A正確；

B；肝臟細胞沒有分散開；在燒杯中加入肝臟和蒸餾水并進行攪拌，不能使細胞破裂，燒杯中的肝臟應進行研磨，B錯誤；

C；DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低；過濾后DNA不在濾液中，存在于析出物中，過濾后取析出物進行后續步驟的操作，C錯誤；

D；向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后需水浴加熱溶液才能呈藍色；D錯誤。

故選A。

【點睛】4、B【分析】【分析】

基因表達載體的構建〈即目的基因與運載體結合）是實施基因工程的第二步；也是基因工程的核心。其構建目的是使目的基因能在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發揮作用。

【詳解】

A；首先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體；再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組DNA分子，A正確；

B；終止子位于基因的下游；作用是使轉錄在相應的地方停止，不是使翻譯在所需要的地方停止下來，B錯誤；

C；基因表達載體的構建目的是使目的基因能在受體細胞中穩定存在；并且可以遺傳給下一代，C正確；

D；抗生素抗性基因作為標記基因；標記基因便于目的基因的鑒定和篩選，可檢測受體細胞中是否導入了目的基因，D正確。

故選B。5、A【分析】【分析】

三次過濾的目的是不同的：第一次過濾是為了濾出膜碎片等大量雜質；留下核物質于濾液中．第二次過濾是為了分離DNA和蛋白質，留下DNA于紗布上．第三次過濾是為了進一步除去溶解度較低的蛋白質，留下DNA于濾液中．隨著三次過濾，DNA純度越來越高。

【詳解】

A；在雞血細胞中加入蒸餾水；使得血細胞吸水破裂，細胞核內物質釋放出來，然后用紗布過濾取其濾液，A錯誤；

B；在2mol/L的NaCl溶液加蒸餾水并攪拌；由于DNA溶解度下降而析出白色絲狀黏稠物，用多層紗布過濾取其黏稠物，B正確；

C；第三次過濾后；DNA存在于濾液中，能除去高濃度鹽中不能溶解的雜質，C正確；

D；由BC選項可知；上述B、C均正確，D正確。

故選A。

【點睛】二、多選題(共6題，共12分)6、A:C【分析】【分析】

1；動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養。

2、動物細胞培養需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環境；②營養；③溫度和pH；④氣體環境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A；動物細胞一般用液體培養基來培養；需要無菌、無毒的環境、基本營養物質、適宜的溫度和pH、一定量的氧氣和二氧化碳等，A錯誤；

B；由于動物細胞分化程度高；雖然細胞核內具有該物種的全套遺傳物質，但單個細胞不能形成完整生物體，所以目前還不能通過動物細胞培養獲得生物體，B正確；

C；動物細胞培養過程中；需要氧氣滿足細胞代謝，需要二氧化碳維持培養液的pH，C錯誤；

D；通過動物細胞培養可以生產生物制品；可以培養皮膚移植的材料，還可以檢測有毒物質等，D正確。

故選AC。7、A:C【分析】【分析】

當胚胎細胞數目達到32個左右時；胚胎形成致密的細胞團，形似桑椹，叫做桑椹胚；實驗證實，這一階段前的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞，這些細胞都是由受精卵經有絲分裂產生的。

【詳解】

A；桑椹胚前的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能；屬于全能細胞，A正確；

B；囊胚期細胞可分化內細胞團和滋養層兩部分；不同部位的細胞致密化程度有差異，桑椹胚不同部位的細胞致密化程度相同，B錯誤；

C；胚胎分割是指采用機械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；經移植獲得同卵雙胚或多胚的技術，胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇，C正確；

D；胚胎移植一般選擇桑椹胚或囊胚期進行；D錯誤。

故選AC。8、A:C:D【分析】【分析】

轉基因植物可能會對生物多樣性構成潛在的風險和威脅理由：①轉基因植物擴散到種植區外變成野生種或雜草；②轉基因植物競爭能力強，可能成為“入侵的外來物種”，③轉基因植物的外源基因與細菌或病毒雜交，重組出有害的病原體，④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”。

【詳解】

A；重組的微生物在降解污染物的過程中可能產生二次污染；造成環境安全問題，A正確；

B；種植抗蟲棉可以減少農藥的使用量；保護環境，但轉基因植物可能會與野生植物雜交，造成基因污染，可能會對生物多樣性構成潛在的風險和威脅，B錯誤；

C；轉基因花粉中若有毒蛋白或過敏蛋白；可能會通過食物鏈傳遞到人體內，轉基因作物可通過花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫，C正確；

D；對待轉基因技術；應趨利避害，可以避免轉基因生物引發的安全性問題，轉基因生物所帶來的環境安全問題在今后有可能得到解決，D正確。

故選ACD。9、A:D【分析】【分析】

纖維素分解菌能合成和分泌纖維素酶，纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。用以纖維素為唯一碳源的培養基可以篩選出纖維素分解菌。

【詳解】

A；木材、秸稈中富含纖維素；故可以從富含腐殖質的林下土壤中篩選產纖維素酶菌，A正確；

B；應該用以纖維素為唯一碳源的培養基篩選纖維素分解菌；只有纖維素分解菌能夠存活，B錯誤；

C；接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理；接種環等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養皿等常用干熱滅菌法處理，培養基用高壓蒸汽滅菌法處理，C錯誤；

D；菌落只能在固體培養基中形成；菌種分離和菌落計數都可以使用固體培養基，D正確。

故選AD。10、B:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備涉及細胞融合；細胞培養和細胞篩選；從題干信息圖可看出，過程1代表的是注射特異性抗原使小鼠免疫，從而獲得能產生相應抗體的B淋巴細胞；過程2是將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程；過程3是克隆培養篩選后的陽性細胞，一共需要進行兩次，最終獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，此后在培養基或小鼠腹腔中培養。

【詳解】

A；圖中過程1是通過注射抗原或抗原蛋白來獲得產生相應抗體的B淋巴細胞；A正確；

B；過程2是促進細胞融合的過程；其中電融合技術是用低壓電流擊穿細胞膜促使細胞融合，B錯誤；

C；c細胞為雜交瘤細胞；有三種，分別是骨髓瘤細胞-骨髓瘤細胞、骨髓瘤細胞-B淋巴細胞、B淋巴細胞-B淋巴細胞，其中骨髓瘤細胞和B淋巴細胞都有兩個染色體組，融合后的細胞都含有4個染色體組，其中e細胞是雜交瘤細胞，C錯誤；

D；過程3是專一抗體檢測及克隆培養篩選后獲得陽性細胞；該過程需要多次進行，D正確。

故選BC。11、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸稈生產燃料酒精是利用微生物進行生物發酵的過程；所利用的微生物為酵母菌，通過酒精發酵將葡萄糖轉化為酒精，玉米秸稈中含有的糖類主要是纖維素，因此需要先將纖維素水解成葡萄糖，再進行發酵。

【詳解】

A；由于纖維素組成成分復雜、結構穩定；生物降解時難以迅速進行，常用酸或堿進行預處理，初步打斷纖維素內部的化學鍵，降低聚合度，利于酶與底物充分接觸，提高催化效率，A正確；

B；在有氧的條件下酵母菌進行出芽生殖；上層培養液與空氣接觸部位氧氣較多，短時間內酵母菌更多分布在發酵液的上層，B正確；

C；在選擇培養基中經多次培養；分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩定，C正確；

D、發酵液pH下降是因為產生了CO2；D錯誤。

故選ABC。三、填空題(共7題，共14分)12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質核苷酸序列特定的切點DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細胞質粒噬菌體動植物病毒細菌酵母菌細胞核自主復制DNA分子14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不容的雜質析出DNA過濾溶液中的雜質DNA15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】體外受精技術、胚胎移植技術、胚胎分割技術性別控制16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）17、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個宿主轉移到另一個宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時近年來由于溫室效應加劇，也會使致病微生物的繁殖周期變短，可能會使危害性更大，因此我們需要積極開展科學研究，掌握防范的措施和防范，實現最好的防護，目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質蛋白質抗體抗原－抗體雜交四、實驗題(共3題，共24分)19、略

【分析】【分析】

為了殺滅培養基中的微生物；實驗所配制的培養基必須進行滅菌處理；可將滅菌后的固體培養基放置在適宜的溫度下培養一段時間，以檢測培養基的滅菌效果，若培養基中無菌落長出，說明培養基的滅菌是合格的；在固體培養基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）①馬鈴薯中含有淀粉；蛋白質和無機鹽等物質；故培養基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供碳源、氮源、無機鹽等營養成分；

培養霉菌時需將培養基的pH調至酸性；培養細菌時需將pH調至中性或微堿性，即培養蟬擬青霉的培養基的自然pH為酸性范圍。

②氯霉素等抗生素可以通過抑制肽聚糖（細菌細胞壁的主要成分）的合成來抑制細菌的生長；而對真菌的生長無影響。為了便于篩選蟬擬青霉（真菌）菌株，培養基中還應加入氯霉素等抗生素以抑制細菌的生長，該培養基從功能上分類屬于選擇培養基。

③為了殺滅培養基中的微生物；配制的培養基必須進行滅菌處理；將滅菌后的固體培養基放置在適宜的溫度下培養一段時間，若培養基中無菌落長出，說明固體培養基的滅菌是合格的。

（2）蟬擬青霉的分離純化：由（1）的題干信息可知；PDA為固體培養基，在固體培養基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）根據題意“蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復合體，內含蟲草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并結合表格信息可知，發酵菌絲體中各種活性成分的含量明顯高于天然蟬花，故能用發酵菌絲體來替代天然蟬花。【解析】(1)碳源；氮源、無機鹽酸細菌選擇殺滅培養基中的微生物將滅菌的固體培養基放置在適宜的溫度下培養一段時間；觀察是否長出菌落。

(2)平板劃線（稀釋涂布平板）

(3)能發酵菌絲體活性成分的含量明顯高于天然蟬花20、略

【分析】【分析】

樹突狀細胞為抗原呈遞細胞；可識別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內豐富的免疫細胞。所以，ClyA基因的作用為表達出細菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進而融合基因可以被免疫細胞識別。Fc表達產物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結合，進而提高樹突狀細胞識別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進而激活融合基因的表達；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導，殺傷率均低。

②小鼠脾臟細胞具有免疫細胞；可在抗原刺激下引起特異性免疫。帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物可引起小鼠脾臟細胞發生特異性免疫，故先加入第1-5組小鼠脾臟細胞和帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物進行保溫，判斷特異性免疫的強度；

故選AC。

再加入帶有綠色熒光標記的細胞毒性T細胞特異性抗體；目的是檢測OVA抗原肽復合物是否能夠產生特異性細胞毒性T細胞。

故選B。

若第5組同時被紅色和綠色熒光標記的細胞數目占比越多；說明工程菌在人為可控條件下引發特異性免疫反應，結論成立。

③腫瘤患者術后極易復發；說明特異性免疫功能減弱。所以，可多次注射黑色素瘤細胞，進而研究該口服工程菌是否能夠誘發長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復發。

（3）本實驗中融合基因里面有OVA（黑色素瘤細胞特異性抗原），所以只需將OVA替換為肺癌細胞特異性抗原即可。即將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因。【解析】(1)表達ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面識別；攝取。

(2)第4組:ClyA-OVA-Fc和-第5組:ClyA-OVA-Fc和+第3；5組含有OVA；在人為控制口服阿拉伯糖后產生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高;1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導，殺傷率均低ACB同時被紅色和綠色熒光標記的細胞數目占比研究該口服工程菌是否能夠誘發長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復發。

(3)將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因21、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養兼性厭氧型，較適宜的發酵溫度為18~30℃。在無氧的環境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測發酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統發酵釀酒與現代工業發酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發生化學反應；變成灰綠色，該實驗目的是驗證發酵過程中產生了酒精，因此實驗自變量是是否加入發酵液，因變量為溶液顏色變化。對照組中應加入酒精作為陽性對照。實驗過程中應遵循等量原則；單一變量原則等，因此實驗思路是：取兩支試管分別標號A、B，A試管中各加入2ml發酵液，作為實驗組，B試管中各加入2ml酒精，作為對照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變為灰綠色，即可驗證發酵過程中產生了酒精。

（2）傳統發酵技術一般不進行嚴格滅菌操作；因此其發酵菌種為天然的混合菌種。現代工業發酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細胞計數板計算公式：酵母細胞個數/1mL=1個中方格中酵母菌數×25×10000×稀釋倍數，因此該實驗中每毫升發酵液中酵母菌數量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣。【解析】(1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實驗思路：取兩支試管分別標號A；B，向A試管中各加入2ml發酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時需關閉充氣口，釀醋時則需向充氣孔中充入無菌空氣五、綜合題(共4題，共24分)22、略

【分析】【分析】

將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法；

目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等；

基因表達載體的構建：

①過程：用同一種限制酶切割目的基因和運載體；再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。

②目的：使目的基因在受體細胞中穩定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發揮作用。

③基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因。

（1）啟動子在基因的首段；它是RNA聚合酶的結合位點，能控制著轉錄的開始；

（2）終止子在基因的尾端；它控制著轉錄的結束；

（3）標記基因便于目的基因的鑒定和篩選。

【詳解】

（1）根據題干意思；BT基因為目的基因；基因表達載體，需要目的基因；啟動子、終止子以及標記基因；若將BT基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以使其導入玉米細胞并將其插入到玉米細胞中的染色體上；

（2）根據堿基互補配對原則，目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端為DNA連接酶作用位點是磷酸二酯鍵，故沒有專一性；

（3）為了防止抗蟲玉米通過花粉傳播帶來的生態學問題；科研小組考慮將抗蟲基因導入到玉米根尖細胞的線粒體中以防止基因污染，同時在大規模種植的抗蟲玉米田中設置一個或多個避難所種植普通玉米，目的是延緩抗毒蛋白的玉米螟出現（或減緩害蟲抗性基因頻率增加的速度）；

（4）艾弗里等人的肺炎雙球菌體外轉化實驗為證明DNA是遺傳物質；這給其他人的啟示為：DNA可以從一種生物個體轉移到另一種生物體。

【點睛】

本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟及應用，掌握各步驟中的相關細節，能運用所學的知識準確解答，屬于考綱識記和理解層次的考查。【解析】目的基因標記基因T－DNA沒有線粒體延緩抗毒蛋白的玉米螟出現（或減緩害蟲抗性基因頻率增加的速度）DNA可以從一種生物個體轉移到另一種生物體23、略

【分析】【分析】

1；在利用酵母菌發酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環境下一段時間使其繁殖；再隔絕氧氣進行發酵；酒精發酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌是好氧型細菌；當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。

3；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代謝類型是異養厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠將蔬菜中的葡萄糖氧化為乳酸。

（1）

酵母菌是兼性厭氧型微生物，在有氧條件下將葡萄糖徹底氧化分解，釋放大量能量用于酵母菌自身繁殖。酵母菌酒精發酵時，一般將溫度控制在在18℃～25℃。該發酵產生酒精的過程中，會產生CO2；當發酵液不再有氣泡冒出時說明發酵結束。

（2）

醋酸菌是好氧型細菌，生長的最適溫度為30~35℃，酵母菌是兼性厭氧型真菌，與果酒發酵相比，果醋發酵時需要提供充足的O2；發酵溫度更高。

（3）

泡菜的制作離不開乳酸菌；常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌，代謝類型均為異養厭氧型。泡菜制作過程中會產生亞硝酸鹽，影響亞硝酸鹽含量的因素有溫度；腌制時間和食鹽用量等。

【點睛】

本題以微生物發酵為背景，主要考查果酒、果醋與泡菜的制作，要求考生理解傳統發酵技術的原理，識記相關流程，具有一定的實驗與探究能力。【解析】（1）有氧18~25氣泡冒出。

（2）O2充足；發酵溫度高。

（3）乳酸鏈球菌乳酸桿菌溫度、腌制時間、食鹽用量24、略

【分析】【分析】

基因自由組合定律：位于非同源染色體上的非等位基因的分離或組合是互不干擾的；在減數分裂過程中；同源染色體上的等位基因彼此分離的同時，非同源染色體上的非等位基因自由組合。

啟動子：是RNA聚合酶識別和結合的位點；用于驅動RNA轉錄。

【詳解】

（1）①雜交實驗Ⅰ結果中F2總和為16，性狀分離比為9:3:4，為9:3:3:1的變式，可推測小豆種皮的顏色（紅色、綠色和褐色）是由2對或2對以上等位基因控制。雜交實驗Ⅱ的F2的結果總和為16，也為9:3:3:1的變式，F2白色種皮個體中雜合子的比例為2/16÷4/16=1/2。

②根據圖1可知，白色個體基因型為rr____，紅色個體基因型為R_gg__，綠色個體基因型為R_G_bb，褐色個體基因型為R_G_B_。在雜交實驗Ⅰ中，根據F2的性狀分離比可推出F1褐色基因型為RRGgBb，親本紅色和綠色個體只