免疫學應用第一節

免疫學預防一、免疫學預防破傷風針≠破傷風預防大家口中的“破傷風針”一般指的破傷風抗毒素(TAT)，保護期只有10天左右，達不到預防破傷風效果(潛伏期0一178天)，破傷風免疫球蛋白保護期28天左右，兩者均屬于被動免疫；而破傷風疫苗屬于主動免疫，全程接種，保護期5-10年。一、免疫學預防免疫預防：是指采用人工方法將抗原或抗體制成各種制劑，接種于人體，使人體主動或被動獲得特異性免疫能力，以達到預防某些疾病的一種措施。特異性免疫獲得方式：自然免疫、人工免疫1、自然免疫：自然主動免疫（感染病原體后）--抗原刺激機體免疫系統自然被動免疫（經胎盤、乳汁獲得抗體）--直接攝入抗體2、人工免疫：人為獲得人工主動免疫（也稱預防接種）--注射抗原人工被動免疫--注射抗體一、免疫學預防-人工主動免疫（一）人工主動免疫：是給機體輸入疫苗或類毒素等抗原物質，剌激機體產生特異性免疫力。1、死疫苗：用物理或化學的方法將病原微生物殺死制備而成的制劑。又稱滅活疫苗。

2、活疫苗：用人工變異或從自然界篩選獲得的減毒或無毒的活的病原微生物制成的制劑。又稱減毒活疫苗。

3、類毒素：用0.3-0.4%甲醛處理外毒素，使其失去毒性，保留免疫原性的物質。

4、新型疫苗：亞單位疫苗、合成疫苗、基因工程疫苗1）亞單位疫苗：提取有效免疫原成分。如HA、NA，HBsAg2）合成肽疫苗：人工合成抗原肽。（無需培養微生物，可大量生產，無致癌、返祖的危險性）3）基因工程疫苗編碼免疫原基因→載體→體內 ↓ 酵母菌、大腸桿菌（體外培養）如：重組抗原疫苗、重組載體疫苗、DNA疫苗、轉基因植物疫苗一、免疫學預防-死/活疫苗

區別點

死疫苗

活疫苗制劑特點死、強毒株活、弱毒或無毒接種劑量及次數較多，2-3次較少，1次副作用較大較小保存及有效期易保存，1年不易保存4℃數周免疫效果較差，維持數月至2年較好，維持3-5年或更長一、免疫學預防-人工主動免疫注意事項1、接種對象：免疫力差、流行地區的易感者等；

2、接種劑量、次數和間隔時間：死疫苗2-3次，間隔7-10天；活疫苗1次；類毒素2次，間隔4-6周。

3、接種途徑：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮內注射、皮上劃痕或以自然感染途徑接種。

4、接種后反應：接種24小時左右局部出現紅腫、疼痛、淋巴結腫大；短暫發熱、頭痛、惡心等，一般癥狀輕微，數天恢復正常。

5、禁忌癥：高熱、嚴重心、肝、腎疾病、傳染病、惡性腫瘤、孕婦等。一、免疫學預防-計劃免疫一、免疫學預防-人工被動免疫人工被動免疫：是給機體輸入抗體，使機體獲得特異性免疫力?？闪⒓传@得，但免疫維持時間短，2-3周，多用于治療或緊急預防。1、抗毒素：是抗細菌外毒素的抗體。多為馬血清制劑，具有抗體性和免疫原性。

2、人丙種球蛋白：從正常人血漿或健康產婦胎盤中提取制成。

3、人特異性免疫球蛋白：來源于恢復期病人及含高價特異性抗體供血者血漿，或接受類毒素和疫苗免疫者的血漿。一、免疫學預防-人工主動免疫VS人工被動免疫項目人工主動免疫人工被動免疫接種物質抗原抗體接種次數1～3次1次生效時間2～3周立即維持時間數月至數年2～3周主要用途預防治療和緊急預防第二節

免疫學治療二、免疫學治療概念：利用免疫學原理，通過物理、化學和生物學的手段抑制或增強機體免疫應答的功能，對機體進行干預，達到治療疾病的目的。一、分子治療分子疫苗、抗體和細胞因子二、細胞治療造血干細胞移植、免疫效應細胞過繼療法和細胞疫苗三、免疫調節劑免疫增強劑和免疫抑制劑二、免疫學治療-分子治療一、以抗體為基礎的免疫治療（一）抗感染血清：抗毒素血清、抗病毒血清、人丙種球蛋白等。（二）抗淋巴細胞丙種球蛋白：（三）單克隆抗體：1.抗細胞表面的單克隆抗體2.抗細胞因子的單克隆抗體3.抗體導向藥物治療二、免疫學治療-分子治療二、以細胞因子及其拮抗劑為基礎的免疫細胞因子療法是應用重組細胞因子對疾病進行治療。例如，IFN-γ主要用于病毒感染性疾病和腫瘤的治療；IFN-β用于治療多發性硬化癥；IL-2最早被批準用于腎細胞瘤、黑色素瘤的治療；應用紅細胞生成素治療腎性貧血等。二、免疫學治療-細胞治療（一）骨髓移植1．自體骨髓移植2．異體骨髓移植3．臍血干細胞移植（二）免疫效應細胞1．同種淋巴細胞被動轉移2．自體免疫效應細胞過繼免疫療法二、免疫學治療-免疫調節劑免疫增強劑和免疫抑制劑免疫增強劑（IPA）：是增強、促進和調節機體免疫功能的生物或非生物制劑。主要用于惡性腫瘤、免疫缺陷病和傳染病的輔助治療。免疫增強劑分類分類舉例細胞因子制劑IL-2、TNF、IFN微生物制劑卡介苗、短小棒狀桿菌、脂磷壁酸化學藥物左旋咪唑、西咪替丁多糖類制劑茯苓多糖、人參多糖二、免疫學治療-免疫調節劑免疫抑制劑：是一類抑制機體免疫功能的生物或非生物制劑。主要用于抗移植排斥反應、超敏反應性疾病、自身免疫性疾病及感染性炎癥。常見免疫抑制劑種類分類舉例抗生素環孢霉素A、FK-506單克隆抗體制劑抗TC及亞群、抗MHC、抗IL和IL受體激素腎上腺皮質類固醇烷化劑環磷酰胺抗代謝藥硫唑嘌呤、5-氟尿嘧啶第三節

免疫學診斷三、免疫學診斷免疫學檢測技術廣泛應用于臨床疾病的診斷、發病機制的研究、預后判斷、防治和藥物療效評價，是當今生命科學主要的研究手段之一。一、抗原或抗體的檢測二、細胞免疫功能的檢測三、免疫學診斷-抗原/抗體的檢測原理體外抗原和相應抗體結合，在一定條件下出現肉眼可見反應現象。實踐中常用已知的抗原或抗體來檢測相應的抗體或抗原，并可進行定性、定量、定位的檢測?？乖贵w反應的特點：特異性可逆性比例性階段性三、免疫學診斷-抗原/抗體的檢測方法1、凝集反應：顆粒性抗原（如細胞、細菌等）與相應抗體結合，在一定條件下出現可見的凝集現象。三、免疫學診斷-抗原/抗體的檢測方法2、沉淀反應：可溶性抗原（血清蛋白、外毒素、組織浸液、細菌濾液等）與相應抗體結合，在一定條件下出現可見沉淀物的現象。單向瓊脂擴散試驗雙向瓊脂擴散試驗對流免疫電泳三、免疫學診斷-抗原/抗體的檢測方法3、免疫標記技術：——免疫熒光技術免疫熒光直接法免疫熒光間接法用熒光素標記已知抗體或抗原，用于相應抗原或抗體的分析鑒定和定量測定。——免疫酶技術1、包被抗體

洗2、加抗原

洗3、加酶標抗體

洗4、加底物顯色1、包被抗原

洗2、加抗體

洗3、加酶標抗

球蛋白

洗4、加底物顯色ELISA雙抗體夾心法ELISA間接法用酶標記抗體或抗原，通過酶催化相應底物顯色，觀察顏色的有無或深淺來判定抗原或抗體的有無和含量。三、免疫學診斷-抗原/抗體的檢測方法3、免疫標記技術：

放射免疫測定法（RIA）是將放射性核素分析的靈敏性和抗原抗體反應的特異性結合的測定技術。具有靈敏、精確、特異性高、易規范化及自動化等優點的一種先進的免疫標記技術。

金免疫技術是一處以膠體金作為標記物的免疫標記技術。是目前應用廣泛、簡便、快速的檢驗方法。

化學發光免疫技術是將化學發光分析的高靈敏度和抗原抗體反應的高度特異性相結合而建立的一種檢測抗原或抗體的新技術。該技術因標記物為非放射性物質，而且可進行全自動化分析，具有快速、簡便、靈敏、特異等特點。三、免疫學診斷-細胞免疫功能的檢測（一）T細胞數量檢測通過檢測T細胞表面的CD（CD3分子）抗原來了解外周血T細胞數量和亞群的變化。一般采用免疫熒光法測定。正常外周血淋巴細胞中熒光陽性細胞占60%~80%。從外周血分離單個核細（PBM）后，用鼠抗人CD3的單克隆抗作第一抗體與PBM結合，再用熒光素（FITC）標記的兔抗鼠IgG抗體作第二抗體進行間接熒光染色。三、免疫學診斷-細胞免疫功能的檢測（二）T細胞亞群檢測T細胞的不同亞群各有其特有的分化抗原，如CD4Th細胞,CD8Tc細胞，因此可用其相應的單克隆抗體進行檢測。正常值為CD4占淋巴細胞數55%~60%，CD8占淋巴細胞數的20%~30%；CD4／CD8為2:1。用間接熒光法檢測CD4和CD8T細胞CD4/CD8正常比值為1.7-2.0左右。三、免疫學診斷-細胞免疫功能的檢測（三）T細胞功能檢測1．淋巴細胞轉化試驗淋巴細胞轉化試驗是檢測T細胞功能的體外試驗。當T細胞在體外培養時受到有絲分裂原PHA、ConA等刺激后能轉化為淋巴母細胞，根據T細胞的轉化率，來判斷機體細胞免疫狀態。正常值為70%左右。

PHA刺激48~72小時（1）形態學方法（2）3H-TdR摻入法三、免疫學診斷-細胞免疫功能的檢測（1）植物血凝素(PHA)皮膚試驗PHA是一種常用的非特異性有絲分裂原,皮內注射后與注射局部的T淋巴細胞表面的相應絲裂原受體結合,刺激T細胞發生有絲分裂,增殖的淋巴細胞6~12小時在局部出現紅腫硬結,24~48小時達高峰。2．檢測細胞免疫功能的皮膚試驗（2）特異性抗原皮膚試驗常用的為結核菌素(OT)試驗。將定量的OT注射到受試者前臂皮內，24~48小時在注射的局部形成紅腫硬結，直徑大于0.5cm為陽性。陽性說明機體對結核桿菌有特異性免疫力,