人胚胎生殖干細(xì)胞對卵巢癌細(xì)胞體內(nèi)外生長抑制的研究_第1頁
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文檔簡介

山東大學(xué)齊魯醫(yī)院宋欣燕孔北華研究背景腫瘤的發(fā)展也與周圍微環(huán)境有關(guān)，二者相互作用影響腫瘤的生長、侵襲；因而，我們設(shè)想這種能支持正常發(fā)育過程的全能干細(xì)胞及其微環(huán)境能否逆轉(zhuǎn)異常的腫瘤細(xì)胞表型。Nature,2007,448:1015-21StemCells,2006,24:501-505

JSurRes,2004,121:342

方法與路線

5-7周流產(chǎn)胎兒生殖嵴分離原始生殖細(xì)胞接種培養(yǎng)傳代鑒定（AP，SSEA-1、3、4，OCT-4，TRA-1-60，TRA-1-81等）直接共培養(yǎng)EGcells與SKOV3cells研究EG細(xì)胞在體內(nèi)對卵巢癌細(xì)胞生長的作用培養(yǎng)的EG細(xì)胞呈克隆樣生長，邊界清楚，似鳥巢狀，AP染色陽性。HEG細(xì)胞鑒定結(jié)果A：SSEA-1B:SSEA-3C:SSEA-4D:TRA-1-60E:TRA-1-81結(jié)果HEG細(xì)胞的鑒定HEG自發(fā)分化共培養(yǎng)48h計數(shù)SKOV3cells實驗組：(7.8±2.4)×104

對照組：(11.5±2.3)×104(p=0.0258)

結(jié)果TUNEL凋亡檢測A、C：實驗組B、D：對照組免疫細(xì)胞化學(xué)檢測Caspase9的表達(dá)RealtimePCR檢測AKTmRNA表達(dá)結(jié)果Westernblot檢測p-akt、akt蛋白的表達(dá)結(jié)果

腫瘤生長曲線同期觀察測量實驗組腫瘤生長慢于對照組石蠟組織切片TUNEL凋亡檢測結(jié)論與生殖干細(xì)胞體外共培養(yǎng)后，卵巢癌SKOV3細(xì)胞的生長顯著受到抑制；體內(nèi)注射實驗也表明能夠抑制腫瘤生長。Tunel結(jié)果初步表明：

此抑制現(xiàn)象可能是通過誘導(dǎo)凋亡途徑發(fā)生。PI3Ks/Akt信號通路與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，在人類腫瘤譜中廣泛失調(diào),

p-AKT可以通過激活或抑制下游的受體蛋白BAD、Caspase9等，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡以及遷移等；本實驗結(jié)果顯示AKT信號通路參與了此誘導(dǎo)凋亡過程，表現(xiàn)為：

p-AKT表達(dá)減少，使凋亡抑制被解除；caspase-9被激活，引起SKOV3細(xì)胞的凋亡。干細(xì)胞對癌細(xì)胞的影響是通過胞外分泌形式還是細(xì)胞接觸途徑？需進(jìn)一步驗證。干細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)物多種多樣，具體是哪些蛋白或蛋白多糖發(fā)揮了作用還需要進(jìn)一步研究

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