1病原微生物實驗室生物安全

2概述實驗室生物安全的法律法規要求病原微生物實驗室設施和設備的要求病原微生物實驗室的風險評估實驗室生物安全管理的基本要求實驗室生物安全工作人員的要求病原微生物實驗室人員醫學監督的要求病原微生物實驗室意外事故應急處置的要求3第一節實驗室生物安全的法律法規要求

截至2011年6月底，國家和各行政主管部門已頒布實施的與實驗室生物安全相關法律法規、技術標準等18項。其中：國家：2個科技部：1個衛生部和藥監局：6個農業部：6個環保部：1個國家質量監督檢驗檢疫總局等：2個4第一節實驗室生物安全的法律法規要求

這些法律法規和技術標準系統地規范和要求了病原微生物實驗室建設標準、審批、管理、設施、安全設備、人員等要求，主要有：

病原微生物分類管理的要求實驗室分級管理的要求高等級生物安全實驗室的系列審批要求實驗室生物安全管理的要求5第一節實驗室生物安全的法律法規要求病原微生物分類管理的要求第一類病原微生物第二類病原微生物第三類病原微生物第四類病原微生物第一類、第二類病原微生物又統稱為高致病性病原微生物。

6第一節實驗室生物安全的法律法規要求實驗室分級管理的要求一級生物安全防護實驗室（BSL-1和ABSL-1實驗室）二級生物安全防護實驗室（BSL-2和ABSL-2實驗室）三級生物安全防護實驗室（BSL-3和ABSL-3實驗室）四級生物安全防護實驗室（BSL-4和ABSL-4實驗室）BSL－1、BSL－2、ABSL－1和ABSL－2實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。BSL－3、BSL－4、ABSL－3和ABSL－4實驗室可從事高致病性病原微生物實驗活動。

7第一節實驗室生物安全的法律法規要求高等級生物安全實驗室的系列審批要求體系規劃審查同意可行性論證工程建設工程驗收環評驗收生物安全許可活動資格授權實驗室運行前期論證發改委科技部投資方+認可委＋建設單位設計方＋建設方有資質的建筑質量驗收單位環保部或省級環保局認可委衛生部和農業部建設方環評論證環保部或省級環保局環境監測環保部建設期認可與授權期8第一節實驗室生物安全的法律法規要求實驗室生物安全管理的要求國家對實驗室的生物安全管理模式省、自治區、直轄市的生物安全管理模式從事病原微生物工作機構的生物安全管理模式單位生物安全管理委員會實驗室安全負責人實驗室安全員生物安全手冊

9第一節實驗室生物安全的法律法規要求生物安全手冊：（1）試驗項目的申請、審批制度（2）病原微生物實驗室的使用及管理制度（3）實驗室設施安全檢查和維護制度（4）試驗操作技術規程的論證和審批制度（5）菌（毒）種使用和保存制度（6）試驗設備的安全檢測校準和使用程序（7）試驗操作程序（8）緊急情況及意外事故處理和報告程序（9）污物及廢棄物處理程序（10）個人安全防護器材使用程序10第二節病原微生物實驗室設施和

設備的要求試驗設施、設備要求應與所開展檢測的微生物要求一致BSL-1：第四類病原微生物BSL-2：第三類病原微生物BSL-3：第二類病原微生物BSL-4：第一類病原微生物11適用范圍結構、設施、安全操作規程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。如大腸埃希氏菌、枯草芽孢桿菌等。安全設備個體防護無需生物安全柜；人員應穿工作服、戴防護眼鏡。皮膚有破損或皮疹時應戴手套設計建造特殊要求應設洗手池；表面易于清潔；地面防滑不得鋪地毯；臺面不透水，耐腐蝕、耐熱；家俱應牢固，與設備之間有間隙，易于清潔；有生物廢棄物容器；紗窗。（一）BSL—1/P1實驗室的設施要求12應有防止節肢動物和嚙齒動物進入的設計。每個實驗室在靠近出口處應設洗手池。在實驗室門口處應設掛衣裝置，個人便裝與實驗室工作服分開設置。實驗室的墻壁、天花板和地面應平整、易清潔、不滲水、耐化學品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑，不得鋪設地毯。實驗臺面應防水，耐腐蝕、耐熱。實驗室如有可開啟的窗戶，應設置紗窗。應有適當的消毒設備。

（一）BSL—1/P1實驗室的設施要求131415161718適用范圍結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對人或環境具有中等潛在危害的微生物，如沙門氏菌、HBV、麻疹病毒、弓形蟲。安全設備個體防護需Ⅱ級生物安全柜；可能產生致病微生物氣溶膠或濺出及處理高濃度或大容量感染性材料應使用Ⅱ級BSC，使用個體防護設備（面部用品可除外）設計建造特殊要求滿足P1的條件。設置各種消毒的設施，如高壓滅菌鍋、化學消毒裝置對廢棄物進行處理；洗眼裝置；實驗室帶鎖、自動關閉；具有生物危害警示標識；可通風換氣。（二）BSL—2/P2實驗室設施要求1920滿足BSL-1實驗室要求。實驗室門應帶鎖并可自動關閉。實驗室的門應有可視窗。應有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用。在實驗室工作區域外還應當有供長期使用的存儲空間。在實驗室內應使用專門的工作服；應戴乳膠手套。在實驗室所在的建筑物內應配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。應在實驗室內配備II級生物安全柜。應通風，如使用窗戶自然通風，應有防蟲紗窗。

（二）BSL—2/P2實驗室設施要求21三、生物安全柜1Ⅰ級生物安全柜可使氣流由外向柜內流動以保護操作者，然后氣流排向外界，配有高效微粒空氣過濾器，僅能捕獲0.1---0.3m以上的顆粒，而不能捕獲化學煙氣。2Ⅱ級生物安全柜氣流可部分在柜內循環，部分外排，A1型30%排到室內，A2型30%排到室外，B1型70%排到室外，B2型全部排到室外。3Ⅲ級生物安全柜工作空間為經高效過濾器凈化的無渦流的單向流空氣，下部為手套箱式操作口，箱內負壓，可確保人體與柜內物品完全隔絕。22II級生物安全柜防護特征比較柜子類型面速度（英尺/分）氣流方式應用非揮發性化學毒物/放射性物質揮發性化學毒物/放射性物質Ⅱ級A1型7570%通過HEPA在工作區內循環，30％通過HEPA排出到實驗室內。能（微量）不能A2型100同ⅡA,但箱內呈負壓和管道排氣能能（痕量）1B1型10030%通過HEPA在工作區內循環，70通過HEPA和嚴格的管道排出能能（微量）1B2型100無循環，全部通過HEPA和嚴格的管道排出能能（少量）1.化學濃度不能超過最低爆炸濃度。

23生物安全柜空氣流向24252627282930313233第三節病原微生物實驗室的風險評估病原微生物的風險評估病原微生物分類與實驗室及實驗活動（操作）分級（名錄規定）病原微生物的生物學特性

形態特征培養特性免疫學特性（特異性抗原）遺傳特性（基因組及編碼產物）變異性（包括基因重配的特性）毒力和致病性種（型）鑒別特征34在環境中的穩定性在自然環境中的存活能力與其它生物和環境的交互作用對理化因子的敏感性對溫度作用時間、紫外燈等物理因素的敏感性對不同消毒劑的敏感性（用于實驗室消毒方式的選擇）

病原微生物的風險評估35自然宿主和易感人群（適宜宿主）自然宿主易感人群感染途徑自然感染途徑:呼吸道、消化道、血液或媒介等自然宿主和感染人群的相關性:是否在動物與動物，動物與人，人與動物，人與人之間傳播等。非自然感染途徑:實驗室和臨床感染（氣溶膠、銳器傷害、皮膚感染、接觸病等途徑）病原微生物的風險評估36致病性臨床表現：臨床癥狀、潛伏期、發病時間、疾病進程快慢（急性與慢性）、感染劑量、入侵部位、并發癥預后：免疫、治愈、致殘、致死

實驗室感染或院內感染信息基因技術操作導致風險分析：分析重組病毒、重組細菌以及其他所有基因技術是否可能導致擴大微生物的宿主范圍，毒力變化或改變。病原微生物的風險評估37實驗活動實驗活動內容及所操作病原微生物的量一般操作的濃度和劑量標本濃縮操作的濃度和劑量操作超常規量實驗操作過程微生物實驗室活動的風險評估和控制38實驗室設施設備儀器設備實驗室設施實驗室設施設備設計與實際狀態是否可滿足上述實驗活動防護與周邊環境保護要求實驗室在常規運行中對設施設備進行維修過程中風險與預防措施評估實驗室對設施設備進行清潔、維護或關停期間發生暴露的風險

微生物實驗室活動的風險評估和控制39感染性材料使用、管理的風險分析被誤用和惡意使用的風險與防范措施評估被偷盜和被不正當使用的風險運輸中可能出現的風險個人防護用品評估個人防護用品選擇與儲備依據個人呼吸道防護用品佩戴防護效果測試方法評估個人防護用人員穿戴正確性評估微生物實驗室活動的風險評估和控制40消毒方法選擇與感染性廢棄物處理評估實驗活動清場消毒和終末消毒方法的選擇；感染性材料、動物實驗尸體、糞便等廢棄物以及實驗室銳器處理。人員素質與要求評價實驗室工作人員的種類與數量；對不同崗位人員相關的風險評估；個人素質與健康狀況。微生物實驗室活動的風險評估和控制41根據病原體特性設定的實驗室風險控制水平（容許的風險水平）；滿足上述要求所需的條件和措施（硬件、軟件、人員）；現有的措施、條件或擬采用消除、減少或控制風險的管理措施和技術措施；是否具備開展擬從事實驗活動的能力？如何改進（硬件、軟件、人員等）？風險評估結論42第四節實驗室生物安全管理的基本要求實驗室生物安全日常管理的基本要求實驗項目的申請和審批制度項目來源、目的；實驗室、試驗時間；試驗內容、使用的微生物、所用安全防護設備；試驗方法；參加人員、包括人員的培訓、健康情況；個人防護方案；消毒處理方法；緊急情況下的預防措施等。43第四節實驗室生物安全管理的基本要求病原微生物實驗室的使用管理制度

使用實驗室的申請、審批；實驗室設備、設施的正確使用及維護；菌毒種、藥品、試劑的使用要求；個人防護規定及防護器材的使用與處理；污染物及廢棄物的處理規定；實驗室的實時監控；各種緊急情況下的處理方法；事故的處理與報告程序。44第四節實驗室生物安全管理的基本要求上崗前培訓制度實驗室的工作人員必須是受過專業教育的技術人員；訓練應包括生物安全常識、實驗室安全操作規程、常規試驗操作和特殊試驗要求、個人防護技術等，以及不安全操作引起的意外事故的處置。意外事故的處置最好組織模擬訓練或演練，保證在出現事故時每人都能正確應對；特殊行業如壓力容器、動物飼養使用等還需持特定上崗證。實驗室設施和安全防護設備的檢查、維護和檢測校準制度實驗室準入制度

45第四節實驗室生物安全管理的基本要求試驗操作技術規程的論證和審批制度依據試驗目的、要求，制定試驗方案和詳細的試驗操作規程；新實驗方法須驗證或生物安全專家委員會論證。菌（毒）種使用及保管制度應依據國家或行業的菌（毒）種使用及保管的有關法律法規，從實際出發，制定切合本單位實際的菌（毒）種使用保管制度，從菌（毒）種的申請、領取、傳代、使用、銷毀、保存都應有嚴格的規定和制度，確保菌（毒）種的安全。46第四節實驗室生物安全管理的基本要求建立生物安全管理應遵循的原則應依法建章立制應緊密聯系本單位實際，務求實用生物安全管理制度應涵蓋生物安全的一切要素文件要便于管理和使用管理制度應不斷完善應由具有實際經驗的技術和管理人員編制文件（5W1H，即做什么，誰來做，什么時候做，在哪里做，為什么做和如何做）47第四節實驗室生物安全管理的基本要求組織生物安全管理體系文件應考慮的要素

對于生物安全實驗室來說，人員、設施、設備、樣品、供應品、方法、環境條件、管理等要素就構成了生物安全體系。48第四節實驗室生物安全管理的基本要求管理

法律、法規、標準、文件（起草、修訂、更新、審批、宣貫等）、生物安全監督、檢查、評審、項目（實驗方法、準入、管理、工作分包等）等都是管理的目標。人員

包括管理人員、實驗室工作人員、后勤保障人員，應考慮培訓、考核、準入、醫療監測、健康管理、緊急就醫、個人防護、崗位職責等都是管理的對象。環境

應考慮環境評價、廢棄物、清場消毒、實驗室污染監測等環境要素。49第四節實驗室生物安全管理的基本要求設施和設備

包括防護性設備和可能產生危害的設備，除了考慮其工作狀態控制、安全保證和操作程序等要素，還要包括維護、保養、檢修、去污染等硬件要素。感染性物質

應考慮包括對感染性物質的采集、包裝、運輸、儲存、保藏、使用、流轉和銷毀等可溯源的環節。理化危險因素

應考慮同位素、危險化學品等危險因素的購置、儲存、使用、廢棄物處理等環節，電氣、火災、噪聲、紫外線與激光危害等相關風險因素。

50第四節實驗室生物安全管理的基本要求應急

應制訂發生水災、火災、地震、意外事故等情況和緊急就醫的預案。規范（通用性生物安全SOP）和方法

對于方法的獲得、確認、使用等應有規定，實驗方法應強調那些與安全密切相關的細節。支持性數據

包括危害評估，實驗材料安全數據單（MSDS），應控制其編制、獲取、維持、分發、修訂等環節。

記錄

應涵蓋針對上述要素的所有活動和過程。51第五節實驗室生物安全工作人員的要求培訓與上崗建立健康檔案限定不宜加參加高致病性病原微生物試驗人員明確試驗的指導和監督人員52第六節病原微生物實驗室人員

醫學監督的要求醫學監督內容醫學監督基本要求BSL-1和BSL-2實驗室工作人員的醫學監督在BSL－1實驗室操作微生物的工作人員的醫學監督所有實驗室工作人員應進行上崗前的體檢，并記錄其病史。在BSL-2（含ABSL-2實驗室）操作微生物的實驗室工作人員的醫學監督必須有錄用前或上崗前的體檢，進行一次有目的的職業健康評估實驗室管理人員要保存工作人員的疾病和缺勤記錄患發熱性疾病、感冒、上呼吸道感染、或其他導致抵抗力下降的情況的人員不應進入BSL-實驗室和ABSL-2實驗室已經在實驗室控制區域內連續工作4h以上，或其他原因造成的疲勞狀態53第六節病原微生物實驗室人員

醫學監督的要求在BSL-3實驗室（含ABSL-3實驗室）操作微生物的實驗室工作人員的醫學監督進入BSL-3及以上級別實驗室工作的相關人員，應每日早、晚測量體溫并觀察相應癥狀結束實驗室工作后，應繼續進行相應時段（相關疾病的平均潛伏期）的健康監測。一旦出現異常情況應立即報告實驗室負責人，以便及時采取相應控制措施。對在三級生物安全水平的防護實驗室內工作的所有人員，要強制進行醫學檢查。臨床檢查合格后，給受檢者配發一個醫療聯系卡，卡片上應有持卡者的照片，卡片應制成錢包大小，并由持卡者隨身攜帶。所填寫的聯系人姓名需經所在機構同意，應包括實驗室主任、醫學顧問和/或生物安全官員。

54第六節病原微生物實驗室人員

醫學監督的要求人員樣本的保存和記錄無論是在BSL-2實驗室和ABSL-2實驗室的工作人員，還是BSL-3和ABSL-3實驗室的工作人員，都應留取血清樣本，包括接種疫苗前的血清樣本、接種疫苗后的血清樣本。詳細記錄在微生物實驗室工作人員的從事的病原微生物種類、工作內容、血清保留的信息、疫苗接種的信息、不同階段的體檢情況、生育情況（女性工作人員）等工作人員的主要信息。

55第六節病原微生物實驗室人員

醫學監督的要求人員的定點救治醫院實驗室工作人員，一旦出現與本實驗室從事的病原微生物相關的臨床癥狀或者體征時，實驗室負責人應當立即向本單位生物安全委員會及單位負責人報告，同時派專人陪同及時就診。原則上應首先到本單位的醫務室（內設醫療機構）就診，緊急時可直接到定點醫院就診。就診時，實驗室工作人員應當將近期所接觸的病原微生物的種類和危險程度如實告知接診的醫務人員。經內設醫療機構預檢、觀察，排除患者患傳染病的可能性后，可轉診至相應醫院就診；若不能排除該患者可能患有傳染病時，應采取相應的隔離、消毒措施，并及時轉診至定點醫院就診。56第六節病原微生物實驗室人員

醫學監督的要求人員的定點救治醫院傳染病患者或疑似傳染病患者轉診時應嚴格采取隔離防護措施，必要時請急救中心（站）轉診。傳染病患者或疑似傳染病患者的單位及接診醫務人員，發現由于實驗室感染而引起的與高致病性病原微生物相關的傳染病病人、疑似傳染病病人，應當在2h內報告所在地的縣級人民政府衛生主管部門。出現傳染病患者或疑似傳染病患者后，應盡可能采取有效的主動和被動免疫措施。

57第七節病原微生物實驗室意外事故

應急處置的要求意外事故的報告高致病性病原微生物菌（毒）種或者樣本在運輸、儲存中被盜、被搶、丟失、泄漏實驗室工作人員出現與本實驗室從事的高致病性病原微生物相關實驗活動有關的感染臨床癥狀或者體征實驗室發生高致病性病原微生物泄漏58第七節病原微生物實驗室意外事故

應急處置的要求事故記錄發生的時間、地點及詳細經過暴露方式；暴露途徑、受傷部位、傷口深淺、暴露程度污染物種類（培養液、血液或其它體液）現場應急處理方法和經過，包括專家或領導赴現場指導和處理的情況暴露后是否采用藥物預防，如果是，應詳細記錄用藥情況，包括首次用藥時間、服藥方案和毒副作用隨訪檢測的日期、項目和結果

59第七節病原微生物實驗室意外事故

應急處置的要求意外事故的現場處置制定應急預案微生物實驗室應急處置程序微生物實驗室人員受傷應急處置程序潛在危害性氣溶膠的釋放離心機離心管發生破裂衛生主管部門或者獸醫主管部門接到關于實驗室發生工作人員感染事故或者病原微生物泄漏事件的報告，依法采取的預防、控制措施。60第七節病原微生物實驗室意外事故

應急處置的要求制定應急預案：應考慮以下幾方面問題

高危險度等級微生物的鑒定高危險區域的地點，如實驗室、儲藏室和動物房明確處于危險的個體和人群明確責任人員及其責任，如生物安全委員會人員、臨床醫生、微生物專家、獸醫專家、流行病專家、生物安全專家、安全人員、地方衛生部門等列出能接受暴露或感染人員名單，以及進行治療和隔離的單位61第七節病原微生物實驗室意外事故

應急處置的要求制定應急預案：應考慮以下幾方面問題

暴露或感染人員的轉移方式列出儲備的免疫血清、疫苗、藥品、特殊儀器的種類和來源應急裝備的供應，如防護服、消毒劑、化學和生物學的溢出處理盒、清除污染的器材物品。還應該寫明各種裝備、物品、消毒藥劑的使用方法應有人員撤離程序事故現場緊急處置程序和方法，以及處置后效果評價方法62第七節病原微生物實驗室意外事故

應急處置的要求微生物實驗室應急處置程序戴手套，穿防護服，必要時需進行臉和眼睛防護用沾有消毒劑布或紙巾從污染區的四周向中心覆蓋并吸收污染物向紙巾上傾倒適當的消毒劑，并立即覆蓋周圍區域（通常可以使用5%漂白劑溶液；但在飛機上發生污染時，則應該使用季銨類消毒劑）使用消毒劑時，從污染區域的外圍開始，朝向中心進行處理63第七節病原微生物實驗室意外事故

應急處置的要求微生物實驗室應急處置程序作用適當時間后（例如30min），將所處理物質清理掉。如果含有碎玻璃或其他銳器，則要使用簸箕或硬的厚紙板來收集處理過的物品，并將它們置于可防刺透的容器中以待處理對污染區域再次清潔并消毒（如有必要，重復第2～5步）將污染材料置于防漏、防穿透的廢棄物處理容器中64第七節病原微生物實驗室意外事故

應急處置的要求微生物實驗室人員受傷應急處置程序皮膚針刺傷或切割傷：立即用肥皂和大量流水沖洗，盡可能擠出損傷出的血液，用70%乙醇或其它消毒劑消毒傷口