…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年華師大新版選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、為研究治療性克隆技術能否用于帕金森病的治療，科研人員利用帕金森病模型鼠進行如圖實驗，相關敘述錯誤的是（）

A.過程①中選擇MⅡ期的卵母細胞有利于細胞核全能性恢復B.過程②重構胚培養需對細胞進行一次脫分化和兩次胰蛋白酶處理C.過程③的關鍵是利用特定條件誘導胚胎干細胞相關基因表達D.過程④對受體小鼠無需注射免疫抑制劑來抑制其細胞免疫功能2、隨著轉基因技術的發展，“基因污染”應運而生，關于基因污染的說法不正確的是A.轉基因作物可通過花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫B.基因污染是一種不可以擴散的污染C.雜草、害蟲從它的近親獲得抗性基因，可能破壞生態系統的穩定性D.轉基因生物有可能成為“入侵的外來物種”，威脅生態系統中其他生物的生存3、酸性土壤是pH小于7的土壤總稱，包括紅壤、黃壤、磚紅壤、赤紅壤等。酸性土壤在世界范圍內分布廣泛，在農業生產中占有重要地位。如圖表示利用耐酸植物甲(4N)和高產植物乙(2N)培育高產耐酸雜種植物的過程，圖中序號表示過程或處理手段，字母表示細胞、細胞結構或組織名稱。下列敘述正確的是（）

A.①過程用到的酶是纖維素酶，B表示原生質層B.②過程可以使用高Ca2+-高pH或滅活的病毒誘導C.③過程得到的雜種細胞含有3個染色體組D.④⑤過程使用的培養基需加入生長素和細胞分裂素，但加入的比例不同4、人肌紅蛋白（Myo）是早期診斷急性心肌梗寒的生化標志物之一。為制備抗Myo的單克隆抗體，科研人員通常采用雙抗體夾心法對抗原進行定量檢測，具體過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）

A.抗Myo的單克隆抗體可與Myo特異性結合，用于診斷急性心肌梗塞B.可將能表達Myo基因的細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，來制備抗Myo的單克隆抗體C.固相抗體和酶標抗體雖都能與抗原結合，但二者仍具有不同的結構D.加入酶標抗體的目的是通過測定酶促反應的產物量來判斷待測抗原量5、腫瘤壞死因子（TNF）在體內和體外均能殺死某些腫瘤細胞或抑制腫瘤細胞的增殖，科研人員欲利用乳腺生物反應器大量生產TNF，用于臨床上疾病的治療。已知HindⅢ、BamHI、BglⅡ和PstI為限制性內切核酸酶，識別的序列均不相同。下列關于基因工程中重組質粒構建的說法，正確的是（）

A.可選用PstI，BglⅡ和HindⅢ、BglⅡ兩種組合切割質粒和目的基因B.可用DNA連接酶或DNA聚合酶連接TNF基因和切割開的質粒C.啟動子指的就是起始密碼子，可驅動TNF基因的轉錄過程D.四環素抗性基因屬于標記基因，便于鑒別受體細胞中是否含有目的基因6、為探究抗生素對細菌的選擇作用，將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養基上（如下圖），一段時間后測量并記錄抑菌圈的直徑。從抑菌圈邊緣的菌落上挑取細菌擴大培養，重復實驗2~5次。下列敘述不正確的是（）

A.接種時，將高濃度菌液涂布在平板培養基上B.①處濾紙片上不含抗生素，起對照作用C.重復2~5次實驗后，抑菌圈的直徑會變大D.抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細菌抗藥性較強評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)7、我國科學家提出的異種克隆大熊貓實驗技術路線如下圖。相關敘述錯誤的是（）

A.科學家通過對母兔注射孕激素，進行超數排卵處理以獲得更多的卵母細胞B.異種重構囊胚在體外培養時，為保證無毒無菌環境，往往需要在培養液中加入維生素C.囊胚由滋養層細胞和內細胞團構成，后者將來可發育成胎兒的各種組織D.兔子宮提供的生理環境與大熊貓差異大，異種重構囊胚可能不能正常發育出大熊貓幼仔8、傳統發酵技術是我國文化中的精髓，是我國人們利用勤勞的雙手、機智的頭腦所探究出來的智慧結晶。下列有關說法錯誤的是（）A.利用發酵技術，在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品B.制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制乳酸菌繁殖C.白酒的釀造過程中利用了霉菌和酵母菌兩種微生物的發酵作用D.將做好的發酵食品冷藏于地窖中，其目的是促進微生物代謝產物的累積9、下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因。下列說法正確的是（）

A.若能在細菌B中檢測到人的生長激素基因，則說明該基因工程項目獲得成功B.將完成導入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養基上，能生長的就是導入了重組質粒的細菌C.將人的生長激素基因與質粒A結合的過程共形成了4個磷酸二酯鍵D.將重組質粒導入細菌B之前，可以用Ca2+處理細菌B10、2020年5月22日，在世界權威醫學期刊《柳葉刀》雜志在線刊登了中國陳薇團隊研發的重組腺病毒疫苗I期人體（108位志愿者）試驗臨床數據結果：安全、能誘導免疫反應。重組腺病毒疫苗是一種重組的基因工程產品，用不會使人體致病的腺病毒作為載體，把克隆出來的編碼新冠病毒S蛋白（介導新冠病毒感染細胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進入人體細胞，表達出S蛋白，刺激人體產生針對新冠病毒的免疫應答。相關敘述正確的是（）A.重組腺病毒疫苗包括S蛋白基因、啟動子、終止子和標記基因等B.重組腺病毒疫苗只能使人體產生體液免疫C.重組腺病毒疫苗引發的體液免疫中有吞噬細胞、T細胞的參與D.重組腺病毒疫苗引起免疫反應后相應淋巴細胞增多，細胞周期將變長11、某對美國夫婦將用他們精子、卵子形成的胚胎冷藏在澳大利亞墨爾本一家不孕癥治療中心。在一次外出時，他們因飛機失事而去世。于是有親人提出，可以將該夫婦冷藏的胚胎植入某個受體母親子宮，生下一個孩子來繼承遺產。下列相關敘述正確的是（）A.用精子、卵子形成胚胎需要借助人工授精技術B.若實施胚胎移植，需要受體母親處于合適的生理狀態C.受體母親與胚胎的主要HLA的相似程度要大于50%D.該件事反映了“胚胎冷藏”技術可能帶來倫理問題評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)12、本課題對能分解尿素的細菌進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對分離的菌種作進一步的鑒定，還需要借助生物化學的方法。在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會使培養基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測培養基______________來判斷該化學反應是否發生。在以尿素為唯一氮源的培養基中加入_____________，培養某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。13、統計的菌落數往往比活菌的實際數目_____________。這是因為______________________。因此，統計結果一般用而不是用活菌數來表示。除了上述的活菌計數法外，______________也是測定微生物數量的常用方法。14、通過統計平板上的________________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在_________________________的平板進行計數。15、目的：使目的基因在受體細胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。16、什么是生物武器？簡述生物武器的危害。__________17、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()評卷人得分四、判斷題(共1題，共10分)18、胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共12分)19、苯酚是工業生產排放的有毒污染物質,自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株,篩選的主要步驟如圖所示,①為土壤樣品。請回答下列問題:

(1)②中培養目的菌株的培養基中應加入________作為碳源,②中不同濃度碳源的培養基____（A.影響;B.不影響)細菌的數量,如果要測定②中活細菌數量,常采用_____法.

(2)④為對照,微生物在④中不生長,在⑤中生長,④與⑤培養基的主要區別在于_______;使用________法可以在⑥上獲得單菌落;采用固體平板培養細菌時為什么進行倒置培養?___________________。

(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小?____________________________。

(4)實驗過程中如何防止其他微生物的污染?____________________________。20、嗜熱土壤芽孢桿菌產生的β-萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶。為使其在工業生產中更好地應用；開展了以下實驗。如圖為質粒限制酶酶切圖譜，如表為幾種限制酶的識別序列及酶切位點。請回答下列問題：

(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進行擴增，最簡便的方法是_________技術。

(2)分析上圖，可選擇_______和_______兩種不同的限制酶切割質粒，以防止質粒自身環化。質粒被切割后，可用_______將其與目的基因連接。在動物基因工程中將目的基因導入受體細胞時通常的方法是_______。

(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉入上述建構好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因為_______。

(4)蛋白質工程是二代基因工程，它的基本途徑是從預期的蛋白質功能出發→_______→_______→找到相對應的脫氧核苷酸序列。評卷人得分六、綜合題(共3題，共21分)21、人乳鐵蛋白（hLF）廣泛分布于乳汁等外分泌液，初乳中含量較高，對細菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達載體構建及轉染研究，主要流程如圖，圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關限制酶切點，neor為新霉素抗性基因；BLG基因為β乳球蛋白基因，GFP基因為綠色熒光蛋白基因。請回答：

(1)過程①方法的基本原理是先以人乳腺細胞總RNA為模板通過逆轉錄合成cDNA（互補DNA），再通過PCR技術擴增相應的DNA片段——hLF基因。但是過程①中，不能從人肌肉細胞中提取RNA用于RT-PCR，這是因為____________，在RT-PCR過程中，加入的引物需在____________端添加識別序列的限制酶是____________；以便于hLF基因插入pEB質粒中。

(2)過程②中，hLF基因插入到BLG基因之后，利用后者的啟動子的目的是____________。

(3)將轉染后的山羊乳腺上皮細胞先置于含新霉素的培養液中培養，能夠存活的細胞應該是導入了____________的細胞，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞是否有____________以篩選出轉染成功的細胞。

(4)科研過程中，可以用PCR技術檢測受體細胞中的染色體上DNA上是否____________或檢測____________。可以用____________技術，檢測hLF基因是否翻譯成人乳鐵蛋白。22、西北農業大學的科學家們將抗煙草花葉病毒的基因與土壤農桿菌的質粒進行重組。下圖表示構建重組質粒和篩選含抗煙草花葉病毒基因的土壤農桿菌的過程；請據圖回答：

圖1表示含有目的基因的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列；限制性核酸內切酶SmaⅠ的識別序列為CCCGGG，切點在C和G之間。

（1）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，其產物長度為___________。若圖1中虛線方框內的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變為基因d。從雜合子中分離出圖1及對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產物中共有___________種不同長度的DNA片段。

（2）構建重組質粒需要_____酶，為了促進重組質粒導入土壤農桿菌的過程，常用_________處理土壤農桿菌，使之成為感受態，即___________。

（3）分析圖中B、C兩個培養基上的菌落存活情況，含抗煙草花葉病毒基因的菌落位于____________（B/C）上，由此可知目的基因很可能是插入到________________（卡那霉素基因/氯霉素基因）中。

（4）將含有重組質粒的土壤農桿菌轉入煙草的葉肉細胞后，通過_____技術培養成抗煙草花葉病毒的煙草植株，為檢測轉基因煙草是否抗煙草花葉病毒，可采用________的方法檢測煙草體內是否含煙草花葉病毒的蛋白質，也可進行___________水平的鑒定，既用病毒進行接種實驗。23、人胰島素由A鏈和B鏈構成；其中B鏈的第20~29位氨基酸是胰島素分子間相互作用形成多聚體的關鍵區域。丹麥科學家將B28位脯氨酸替換為天冬氨酸，從而有效抑制了胰島素分子間的聚合，由此研發出速效胰島素類似物，并已經在臨床上廣泛應用。回答下列相關問題：

(1)蛋白質工程是指以_________作為基礎；通過改造或合成基因，來改造現有蛋白質，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需要。

(2)蛋白質工程的基本思路如下圖所示，物質a是_________；在制備速效胰島素類似物時可能出現物質b不同但合成的速效胰島素類似物空間構象相同的現象，原因是_________。

(3)在對胰島素基因進行改造時；常采用重疊延伸PCR技術引入特定位點突變，過程如圖所示：

除DNA模板﹑引物外，PCR反應還需要_________等物質條件才能順利進行。PCR②③過程分別至少需要經過_________輪反應可得到等長的DNA片段。PCR②③過程不能在同一反應容器內同時進行，原因是_________。經⑤過程形成的改造后的胰島素基因在PCR擴增時，需要添加的引物是_________。

(4)若要比較蛋白質工程改造后的速效胰島素和天然胰島素的降血糖能力的差異，簡要寫出實驗設計思路：_________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

動物胚胎發育的基本過程為；①在輸卵管完成受精；②卵裂期，受精進行有絲分裂，細胞數量不斷增加，但胚胎的總體體積并不增加，或略有減小；③桑葚胚，胚胎細胞數目達到32個左右時，胚胎形成致密的細胞團，形似桑葚，每個細胞都是全能細胞；④囊胚，開始出現分化，聚集在胚胎一端個體較大的細胞稱為內細胞團，將來發育成胎兒的各種組織，中間的空腔稱為囊胚腔；⑤原腸胚，有了三胚層的分化，具有囊胚腔和原腸腔。

【詳解】

A；卵母細胞中含激發細胞核全能性的物質；核移植過程中選擇MII中期的卵母細胞有利于細胞核全能性恢復，A正確；

B；過程②重組細胞培養經歷了卵裂、桑椹胚、囊胚和原腸胚等胚胎發育過程；不需要進行脫分化和胰蛋白酶處理，B錯誤；

C；過程③是誘導分化過程；其關鍵是利用特定條件誘導胚胎干細胞相關基因表達，C正確；

D；過程④移植的神經元細胞是取自該小鼠自身細胞誘導分化而來；不會發生免疫排斥反應，D正確。

故選B。2、B【分析】【分析】

【詳解】

A；轉基因作物的花粉能夠散落到它的近親作物上；導致轉基因擴散，從而污染生物基因庫，A正確；

B；基因污染可以隨著轉基因生物的花粉傳播而擴散；是一種可以擴散的污染，B錯誤；

C；雜草、害蟲可以與它的感染轉基因的近親雜交；進而從它的近親獲得抗性基因，可能破壞生態系統的穩定性，C正確；

D；轉基因生物獲得的某些特殊性狀；增強了它們在該地區生存條件下的競爭能力，有可能成為“入侵的外來物種”，威脅生態系統中其他生物的生存，D正確。

故選B。

【點睛】3、D【分析】【分析】

植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞；進而利用植物的組織培養將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。在進行植物體細胞雜交時需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁，使用化學方法(聚乙二醇)或物理方法誘導原生質體融合。可根據植物細胞的質壁分離和復原鑒定雜種細胞是否再生細胞壁，從而確定原生質體融合是否完成。

【詳解】

A；①過程是用酶解法去除植物細胞壁；用到的酶是纖維素酶和果膠酶，A、B表示原生質體，A錯誤；

B、②過程可以使用化學方法(聚乙二醇、高Ca2+-高pH）或物理方法誘導原生質體融合；但滅活的病毒是誘導動物細胞融合的方法之一，B錯誤；

C；③過程得到的雜種細胞含有兩種細胞的遺傳物質；故有4+2=6個染色體組，C錯誤；

D；決定植物④脫分化和⑤再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的共同作用在組織培養過程中非常重要，但加入的比例不同，D正確。

故選D。4、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗Myo的單克隆抗體可與Myo特異性結合；用于診斷急性心肌梗塞，A正確；

B；B細胞和骨髓瘤細胞融合制備單克隆抗體；表達Myo基因的細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，不能制備抗Myo的單克隆抗體，B錯誤；

C；抗體與抗原的結合具有特異性；因此不同抗體可與同一抗原表面的不同部位結合，固相抗體和酶標抗體具有不同的結構，C正確；

D；由于抗體具有特異性；因此該檢測方法中，酶標抗體的作用是與待測抗原結合，酶催化檢測底物反應，可通過測定產物量來推測抗原量，D正確。

故選B。5、D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；據圖可知；限制酶PstI切割質粒時，會將質粒切成兩段，且會破壞標記基因，切掉啟動子，因此不能選用PstI．BglⅡ這一組合，A錯誤；

B；不能使用DNA聚合酶連接目的基因和切割開的質粒；應使用DNA連接酶，B錯誤；

C；起始密碼子位于mRNA上；啟動子是一段具有特殊序列結構的DNA片段，是RNA聚合酶識別和結合的位點，可驅動TNF基因的轉錄過程，C錯誤；

D；四環素抗性基因屬于標記基因；便于鑒別受體細胞中是否含有目的基因，D正確。

故選D。6、C【分析】【分析】

本實驗的思路為：將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養基上；濾紙片周圍會出現抑菌圈，在抑菌圈邊緣生長的細菌可能是耐藥菌；若抗生素對細菌起選擇作用，則隨著培養次數增多，耐藥菌的比例增大，在連續培養幾代后，抑菌圈的平均直徑變小。

【詳解】

A；將高濃度菌液涂布在平板培養基上；使平板上長出密集菌落，利于觀察抑菌圈，A正確；

B；①處濾紙片周圍未出現抑菌圈；濾紙片上不含抗生素，起對照作用，B正確；

C；隨重復次數增加；抗藥菌株的比例增加，抑菌圈的直徑會變小，C錯誤；

D；抑菌圈邊緣的菌落可能是耐藥菌；所以，抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細菌抗藥性較強，D正確。

故選C。二、多選題(共5題，共10分)7、A:B【分析】【分析】

分析圖解：異種克隆大熊貓的培育首先通過核移植技術獲得重組細胞；然后經過早期胚胎培養獲得異種重構囊胚，再利用胚胎移植技術將重構囊胚移植如代孕兔體內。

【詳解】

A；科學家通過對母兔注射促性腺激素；進行超數排卵處理以獲得更多的卵母細胞，A錯誤；

B；異種重構囊胚在體外培養時；往往需要在培養液中加入抗生素，從而保證無毒無菌環境，B錯誤；

C；囊胚由滋養層細胞和內細胞團構成；其中滋養層細胞將來發育為胎盤和胎膜，內細胞團將來發育成胚胎的各種組織，C正確；

D；目前；異種重構囊胚在代孕兔的子宮內能正常著床，但是不能正常發育生產出大熊貓幼仔，很可能是代孕兔提供的營養物質不能讓異種重構囊胚正常發育，D正確。

故選AB。

【點睛】8、B:D【分析】【分析】

（1）微生物的發酵在食品的制作中具有重要意義；如制饅頭；面包、釀酒要用到酵母菌，制酸奶要用到乳酸菌。

（2）低溫能抑制細菌；真菌的生長和繁殖。

（3）制作泡菜的原理就是利用乳酸菌使蔬菜中的有機物生成乳酸。

【詳解】

A；制酸奶要用到乳酸菌；乳酸菌發酵產生乳酸，使得酸奶有一種特殊的酸味，所以在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品，A正確；

B；制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制需氧型微生物繁殖；B錯誤；

C；白酒的釀造過程中利用了酵母菌的發酵作用；同時利用霉菌產生的淀粉酶將淀粉糖化，C正確；

D；地窖中溫度低；能抑制細菌、真菌等微生物的生長和繁殖，使其繁殖速度慢，數量少，不能充分分解食物，達到保鮮的目的，所以將做好的發酵食品冷藏于地窖中是為了抑制微生物的生長，D錯誤。

故選BD。9、C:D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成；

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測到細菌B合成人的生長激素才能說明獲得成功；A錯誤；

B；根據題意；細菌B不含有質粒A及其上的基因，即沒有抗氨芐青霉素基因；質粒含抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發生重組時抗四環素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養基上能生長的是導入了普通質粒或者重組質粒的細菌，B錯誤；

C；將人的生長激素基因與質粒A結合的過程連接兩個切口；該過程共形成4個磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因導入細菌時，需要用Ca2+處理細菌；使其處于易于吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態，D正確。

故選CD。

【點睛】10、A:C【分析】【分析】

編碼新冠病毒的S蛋白不具有感染性；但可以引起機體產生特異性免疫，腺病毒不會使人致病，可將克隆出來的編碼新冠病毒S蛋白（介導新冠病毒感染細胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進入人體細胞，表達出S蛋白，刺激人體產生針對新冠病毒的免疫應答。

【詳解】

A；基因表達載體的構建是基因工程的核心；一個完整的基因表達載體至少包括目的基因（S蛋白基因）、啟動子、終止子和標記基因等，A正確；

B；由于病毒需要寄生在細胞內；且S蛋白是在細胞內合成的，所以重組腺病毒疫苗能使人體產生體液免疫和細胞免疫，B錯誤；

C；重組腺病毒疫苗引發的體液免疫中有吞噬細胞（處理抗原）、T細胞（釋放淋巴因子）的參與；C正確；

D；重組腺病毒疫苗引起免疫反應后相應淋巴細胞增多；細胞周期將變短，D錯誤。

故選AC。

【點睛】11、B:D【分析】【分析】

胚胎移植的生理學基礎：①動物發情排卵后；同種動物的供；受體生殖器官的生理變化是相同的，這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環境。②早期胚胎在一定時間內處于游離狀態，這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對移入子宮的外來胚胎不發生免疫排斥反應，這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；人工授精技術是輔助生殖技術；在臨床上利用工具把精液放置進入子宮內，合成受精卵，用精子、卵子形成胚胎需要借助的是體外受精技術，不是人工授精技術，A錯誤；

B；若實施胚胎移植；需要受體母親處于受孕狀態，即處于合適的生理狀態，B正確；

C；子宮對外來胚胎一般不發生免疫排斥反應；因此不需要受體母親與胚胎的主要HLA相似，C錯誤；

D；“胚胎冷藏”技術所引起的這些爭論；實質是冷凍胚胎的道德與法律地位的爭論，即帶來的倫理問題，D正確。

故選BD。三、填空題(共6題，共12分)12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強升高pH的變化酚紅指示劑紅13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落菌落數14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數30～30015、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩定存在遺傳至下一代表達和發揮16、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規模傷亡，也能損害植物，若用與戰爭，則可以對軍隊和平民造成大規模殺傷后果。【解析】生物武器種類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規模傷亡，也能損害植物。17、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤。【解析】錯誤四、判斷題(共1題，共10分)18、A【分析】【分析】

早期胚胎發育從受精卵開始；當卵裂分裂到16-32個細胞時，卵裂產生的子細胞逐漸形成致密的細胞團，形似桑葚時，這時的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞。胚胎進一步發育，細胞開始出現分化，形成內細胞團；滋養層；隨著胚胎進一步發育，胚胎內部出現了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個時期的胚胎叫做囊胚。胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時期聚集在胚胎一端的細胞形成內細胞團，將來發育成胚胎的各種組織，即發育成完整的胚胎，而沿透明帶內壁拓展和排列的細胞，稱為滋養層細胞，它們將來發育成胎膜和胎盤，為胚胎的發育提供營養，故“胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化表述”正確。五、實驗題(共2題，共12分)19、略

【分析】【詳解】

（1）②中的選擇培養基中應加入苯酚作為碳源；②中不同濃度的碳源A影響細菌數量，稀釋涂布平板法來測定②中活菌數目。

（2）④與⑤培養基的主要區別在于④的培養基沒有加入苯酚作為碳源；⑤培養基的中加入苯酚作為碳源。使用釋涂布平板法或平板劃線法可以在（6）上獲得單菌落。采用固體平板培養細菌時要倒置培養，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養基上污染培養基。

（3）5支潔凈培養瓶→分別加入相同培養基（加等量的苯酚；用pH試紙檢測這5支瓶內培養基的pH值，用苯酚調試使之相等，苯酚是唯一的碳源）→分別接種5種等量的來自不同菌株的菌種→在相同的適宜條件下培養相同時間→再用pH試紙檢測這5支瓶內培養基的pH.苯酚顯酸性，不同菌株的菌種降解苯酚的能力不同，5支瓶內培養基中的苯酚被分解的量不同，所以pH值不同。用pH試紙檢測這5支瓶內培養基的pH值，從而比較不同菌株降解苯酚能力的大小。

（4）從制備培養基到接種與培養等全部實驗過程要無菌操作，通過培養基滅菌、接種環境滅菌、接種過程無菌操作等都可以防止其他微生物的污染。【解析】①.苯酚②.A③.稀釋涂布平板④.①含除苯酚外的其他碳源；②以苯酚作為唯一碳源⑤.稀釋涂布平板法或平板劃線⑥.避免培養過程中產生的水分影響微生物的生長⑦.用同樣苯酚濃度的培養液培養不同菌株,一定時間后,測定培養液中苯酚的含量⑧.培養基滅菌、接種環境滅菌、接種過程無菌操作20、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作過程主要包括四個步驟：目的基因的獲取；基因表達載體的構建；將目的基因導人受體細胞；目的基因的檢測與鑒定。（1）目的基因的獲取方法目的基因的獲取方法主要有從自然界已有的物種中分離出來（如鳥槍法從基因文庫或cDNA文庫中獲取）、人工合成（常用的方法有化學合成法和反轉錄法）、PCR技術擴增目的基因。（2）構建基因表達載體；需分別用限制酶切割目的基因和質粒，用限制酶切割質粒時，選擇的限制酶不可以破壞質粒上的標記基因和復制原點、啟動子、終止子等必須的結構。用DNA連接酶連接，構成重組質粒。（3）將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法：將含有目的基因的表達載體提純→從雌性動物體內取出卵（可在體外受精，也可在體內受精）→采用顯微注射儀進行顯微注射→將注射了目的基因的受精卵經胚胎早期培養一段時間后，移植到雌性動物的輸卵管或子宮內，使其發育成為具有新性狀的動物。

2；蛋白質工程的基本途徑是從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。

【詳解】

（1）獲取目的基因的方法主要有三種；最簡便的是PCR技術。

（2）用限制酶切割質粒時；選擇的限制酶不可以破壞質粒上的標記基因和復制原點；啟動子、終止子等必須的結構，由圖可知可選用NdeⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割質粒。用DNA連接酶將切割后的質粒與目的基因連接。在動物基因工程中將目的基因導入受體細胞時通常的方法是顯微注射法。

（3）上述建構好的表達載體含有能夠表達β-萄糖苷酶(BglB)的基因；轉基因大腸桿菌能夠分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能夠降解纖維素。

（4）蛋白質工程的基本途徑是從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。【解析】(1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA連接酶顯微注射法。

(3)轉基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)設計預期的蛋白質結構推測應有的氨基酸序列六、綜合題(共3題，共21分)21、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中①是利用反轉錄法獲取目的基因；②是基因表達載體的構建，③是用脂質體將目的基因導入受體細胞。

【詳解】

（1）由于hLF基因在人肌肉細胞中不轉錄(表達)；因此①過程中不能從人肌肉細胞中提取RNA用于RT-PCR。DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的，根據②過程構建的重組質粒中目的基因兩側限制酶的識別序列（只有Sall和BamHI）可知，在RT-PCR過程中，加入的引物需在5'端添加Sall和BamHI兩種限制酶的識別序列以便于hLF基因插入pEB中。

（2）BLG基因為B乳球蛋白基因；過程②中，hLF基因插入到BLG基因之后，利用BLG基因的啟動子的目的是使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達。

（3）據圖可知，質粒和重組質粒中的標記基因是neor；因此將轉染后的山羊乳腺上皮細胞先置于含新霉素的培養液中培養，能夠存活的細胞應該是導入pEB質粒或pEBL質粒的細胞，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞中是否有綠色熒光，以篩選出轉染成功的細胞。

（4）目的基因的檢測首先要采用PCR技術檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；其次采用分子雜交技術檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，最后通過抗原一抗體雜交技術檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。

【點睛】

本題考查基因工程的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。【解析】(1)hLF基因在人肌肉細胞中不轉錄（表達）5'SalⅠ和BamHⅠ

(2)使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達。

(3)pEB質粒或pEBL質粒（或普通質粒或重組質粒）綠色熒光。

(4)插入了hLF基因hLF基因是否轉錄出mRNA抗原—抗體雜交22、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中DNA片段含有2個限制酶SmaⅠ切割位點。細菌能在加入氯霉素的培養基生長；就說明構建重組質粒時沒有破壞氯霉素抗性基因。

【詳解】

（1）由分析可知，D基因片段有兩個限制酶SmaⅠ酶切位點，可被限制酶SmaⅠ切割產生長度為534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp的三種DNA片段。發生基因突變后的d基因片段只有一個限制酶SmaⅠ酶切位點，完全切割后出現兩個片段長度分別是1327bp、661bp。D基因和d基因被切割后有一個片段相同；所以從雜合子中分離出圖1及其對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割產物中共有4種不