…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2024年西師新版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷309考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、小鼠胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞；制備流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.用胰蛋白酶將細(xì)胞b的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞C.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)D.ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)時(shí)會(huì)向不同類(lèi)型的組織細(xì)胞分化2、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是（）A.乳腺細(xì)胞比乳腺癌細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)B.細(xì)胞核移植主要在同種動(dòng)物、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行C.胚胎分割技術(shù)可以獲得基因型相同的個(gè)體D.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含維生素、激素等多種能源物質(zhì)3、ES細(xì)胞（胚胎干細(xì)胞）可以分化為多種細(xì)胞，不僅可以作為體外研究細(xì)胞分化和發(fā)育調(diào)控機(jī)制的模型，更重要的是ES細(xì)胞將會(huì)給人類(lèi)移植醫(yī)學(xué)帶來(lái)一場(chǎng)革命。下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.ES細(xì)胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞B.ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積大、細(xì)胞核大、核仁明顯的特點(diǎn)C.在體外培養(yǎng)的條件下，ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化D.利用ES細(xì)胞可以被誘導(dǎo)分化成新的組織細(xì)胞的特性，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能4、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，正確的是（）A.菜花提取的DNA濾液中，加入冷酒精有利于溶解DNAB.雞血細(xì)胞液中，加入0．14mol/L的NaCl溶液有利于溶解細(xì)胞膜C.洋蔥鱗片葉碎片中，加入沐浴液和食鹽后研磨有利于去除細(xì)胞膜D.與雞血相比，用同樣方法從等體積兔血中提取DNA的量較高5、蛋白質(zhì)工程被稱(chēng)為第二代基因工程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過(guò)程是相同的B.蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不存在的新型蛋白質(zhì)分子C.蛋白質(zhì)工程需通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)改造原有蛋白質(zhì)D.實(shí)施蛋白質(zhì)工程的前提條件是了解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系6、含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲；乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運(yùn)動(dòng)能力；用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng)B.為不影響菌的運(yùn)動(dòng)需選用液體培養(yǎng)基C.該實(shí)驗(yàn)不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染7、如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過(guò)程，有關(guān)敘述不正確的是（）

A.抗胃癌單克隆抗體可以和甲特異性結(jié)合B.利用聚乙二醇、滅活的病毒和電融合等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙C.用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙篩選，融合細(xì)胞均能生長(zhǎng)，未融合細(xì)胞不能生長(zhǎng)D.丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、抗菌肽又名多肽抗生素，廣泛存在于昆蟲(chóng)以及兩棲類(lèi)動(dòng)物、哺乳動(dòng)物體內(nèi)，具有廣譜抗菌活性。其作用原理是在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽對(duì)癌細(xì)胞甚至感染了病毒的宿主細(xì)胞均具有殺傷作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.從免疫調(diào)節(jié)的方式分析，抗菌肽參與特異性免疫過(guò)程B.抗菌肽改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡C.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)抗菌肽時(shí)，常選用大腸桿菌作為受體菌D.對(duì)抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路9、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中，正確的是（）A.我國(guó)已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B.國(guó)際上大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C.開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D.目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上10、下列關(guān)于基因工程中幾種工具的敘述，正確的是（）A.限制酶可水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可將末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)C.DNA聚合酶能夠從核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因11、如圖是科研人員構(gòu)建的類(lèi)精子單倍體胚胎干細(xì)胞，以及利用該種細(xì)胞獲得半克隆小鼠的過(guò)程（圖中序號(hào)表示過(guò)程）。下列敘述正確的是（）

A.過(guò)程①使受精卵中的遺傳物質(zhì)減少一半B.過(guò)程②需在培養(yǎng)液中添加抗生素和血清C.過(guò)程③獲得的干細(xì)胞只有一條性染色體D.半克隆小鼠為雌性且與受體遺傳特性不同12、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的細(xì)菌，需要用科學(xué)的方法測(cè)定微生物數(shù)量。下列相關(guān)敘述不正確的是（）A.利用以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基，可從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌B.平板劃線(xiàn)法可以分離得到單菌落，也可用來(lái)測(cè)定樣品中的活菌數(shù)C.樣品的稀釋度直接影響平板上的菌落數(shù)目，因此稀釋度越大越好D.利用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù)，可快速直觀地測(cè)定樣品中的活菌數(shù)13、免疫PCR是對(duì)微量抗原的一種檢測(cè)方法。下圖是利用該技術(shù)檢測(cè)牛乳中微量抗生素的流程圖：首先將抗體1固定在微板上，沖洗后加入待檢的牛乳，再加入DNA標(biāo)記的抗體2，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，最后進(jìn)行電泳檢測(cè)，相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次沖洗不充分則有可能出現(xiàn)假陽(yáng)性現(xiàn)象C.電泳檢測(cè)結(jié)果只能判斷陽(yáng)性與否，無(wú)法判斷牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗體反應(yīng)通過(guò)PCR技術(shù)間接擴(kuò)增放大，從而達(dá)到可檢測(cè)的水平14、植物利用硝酸鹽需要硝酸還原酶，現(xiàn)有兩種煙草硝酸還原酶缺失突變體，為探究?jī)煞N突變體的突變是否在同一基因位點(diǎn)上，研究人員將兩種突變體進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交。下列分析正確的是A.誘導(dǎo)兩種突變體進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)應(yīng)先用纖維素酶和果膠酶酶解得到原生質(zhì)體B.可用高Ca2+-高pH誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，細(xì)胞膜融合是細(xì)胞融合完成的標(biāo)志C.若雜種細(xì)胞能在硝酸鹽培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)，說(shuō)明兩種突變體的突變位點(diǎn)相同D.兩種突變體均不能在以硝酸鹽作為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)15、2020年7月20日，國(guó)際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗(yàn)的成果。該試驗(yàn)是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團(tuán)隊(duì)開(kāi)展的研究，試驗(yàn)中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗(yàn)結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護(hù)”，將新冠病毒“拒之門(mén)外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過(guò)檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________17、常用的轉(zhuǎn)化方法：

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是_______，其次還有______和______等。

將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是_______。此方法的受體細(xì)胞多是_______。

將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是_______，最常用的原核細(xì)胞是_____，其轉(zhuǎn)化方法是：先用______處理細(xì)胞，使其成為_(kāi)_____，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。18、第三步：將目的基因?qū)隷_____19、PCR技術(shù)的DNA體外復(fù)制環(huán)境有DNA解旋酶、耐熱DNA聚合酶、DNA母鏈、4種脫氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能夠從引物的________端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為_(kāi)___個(gè)核苷酸。20、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起的絲狀物的顏色是____________。獲取的絲狀物后加入到質(zhì)量濃度為_(kāi)_____________mol/L濃度的NaCL溶液的試管中，使絲狀物重新溶解。21、通過(guò)____________的方式，來(lái)控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。22、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ)，通過(guò)______，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_____，或制造一種______，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)）

23、植物體細(xì)胞雜交的意義：_____。24、請(qǐng)回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問(wèn)題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共16分)25、治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來(lái)修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤26、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共16分)27、番茄果實(shí)在成熟的過(guò)程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮。科學(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄，大大延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。操作流程如下，回答下列問(wèn)題：

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因，最好從番茄的_____細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因番茄主要通過(guò)抑制PG基因的_____過(guò)程；使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。

（3）圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的方法稱(chēng)為_(kāi)____。要檢測(cè)感染農(nóng)桿菌后的番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)，理由是_____。

（5）在將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過(guò)程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是_____。28、下圖是某同學(xué)設(shè)計(jì)的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問(wèn)題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般以天然存在的______發(fā)酵，品質(zhì)不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質(zhì)較高。自制的果酒并非商品意義上的產(chǎn)品，在實(shí)際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過(guò)______裝瓶等過(guò)程才能獲得成品酒。

(3)若要測(cè)定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，觀察并統(tǒng)計(jì)到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個(gè)，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個(gè)。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時(shí)，操作上的最主要的區(qū)別是______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共28分)29、Anti基因是小型豬器官表面的抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板鏈與Anti基因的模板鏈互補(bǔ)。科學(xué)家利用合成的reAnti基因培育出轉(zhuǎn)基因豬；用于解決人類(lèi)器官移植后免疫排斥的問(wèn)題。回答下列問(wèn)題：

(1)科學(xué)家可利用__________技術(shù)獲取大量reAnti基因。要想成功獲取上述轉(zhuǎn)基因豬，需要實(shí)施基因工程。基因工程的核心步驟是______________的構(gòu)建，這一關(guān)鍵操作的目的是：①使目的基因_________________________；②使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。

(2)通常采用___________法將人工合成的reAnti基因?qū)胧荏w細(xì)胞（某種豬的受精卵）中，然后進(jìn)行胚胎的早期培養(yǎng)。為了提高胚胎的利用率，可進(jìn)行胚胎分割操作，在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將__________均等分割，該部位細(xì)胞的發(fā)育的趨勢(shì)是_______________________________。

(3)轉(zhuǎn)基因豬可以用于人類(lèi)器官移植的原因是________________________________。30、人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白；可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

（1）htPA基因與載體用_________切割后，通過(guò)DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用_________技術(shù)。

（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要經(jīng)過(guò)__________；才具備受精能力。

（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是__________。為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的__________。

（4）若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到__________，說(shuō)明目的基因成功表達(dá)。31、人工栽培的馬鈴薯易感染病菌而出現(xiàn)青枯病導(dǎo)致產(chǎn)量降低。某研究小組采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將抗菌肽基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯中提高其抗性；具體步驟如下：基因表達(dá)載體的構(gòu)建（含抗菌肽基因與青霉素抗性基因）；重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌、轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選、農(nóng)桿菌侵染外植體、愈傷組織的誘導(dǎo)與分化。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的原理是其Ti質(zhì)粒的T-DNA片段具有_________的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)中基因表達(dá)載體的組成除了有抗菌肽基因與青霉素抗性基因外，還有啟動(dòng)子、終止子和__________等。

(2)將重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí)可用_________對(duì)農(nóng)桿菌進(jìn)行處理；提高其吸收外源DNA的能力。

(3)將本實(shí)驗(yàn)中農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入含有_________的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；可以篩選出成功導(dǎo)入抗菌肽基因的細(xì)胞。

(4)使用不同種類(lèi)農(nóng)桿菌對(duì)馬鈴薯外植體侵染后的轉(zhuǎn)化成功率不同。某研究小組為了尋找較高轉(zhuǎn)化效率的侵染方法；測(cè)定了不同種類(lèi)農(nóng)桿菌侵染馬鈴薯外植體后的轉(zhuǎn)化效率，結(jié)果如下圖甲。

由圖甲可知，進(jìn)行馬鈴薯農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化時(shí)應(yīng)該選擇_________農(nóng)桿菌菌種。實(shí)驗(yàn)中農(nóng)桿菌過(guò)度繁殖可能會(huì)使外植體細(xì)胞壞死，判斷依據(jù)是___________________________。

(5)為避免農(nóng)桿菌過(guò)度繁殖，被侵染后的外植體在培養(yǎng)一段時(shí)間后還需要進(jìn)行脫菌處理，研究小組測(cè)定了不同抗生素對(duì)未導(dǎo)入質(zhì)粒的不同種農(nóng)桿菌抑菌率如圖乙。根據(jù)圖甲和圖乙分析，本實(shí)驗(yàn)中導(dǎo)入了抗菌肽基因的農(nóng)桿菌與外植體共培養(yǎng)一段時(shí)間后，選擇_________作為抑菌抗生素能起到最佳脫菌效果。

(6)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，抑菌抗生素在對(duì)農(nóng)桿菌生長(zhǎng)起抑制作用的同時(shí)，對(duì)馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)與分化也可能產(chǎn)生抑制作用，為探究是否存在這種毒副作用，還需要進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)是__________________。32、許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因；其編碼的產(chǎn)物β—半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。基因工程中常利用該原理從受體細(xì)胞中篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過(guò)程如圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答：

(1)基因工程中，基因表達(dá)載體的組成包括復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、_________、_________。

(2)限制酶EcoRI的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是Sma_I的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是圖中目的的基因被切割下來(lái)和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端，連接的末端序列是_________，連接過(guò)程中需要的基本工具是_________。

(3)轉(zhuǎn)化過(guò)程中，大腸桿菌應(yīng)先用Ca2+處理，使其處于能吸收周?chē)鷂________的狀態(tài)。

(4)菌落顏色為白色的是_________，原因是_________。

(5)檢測(cè)菌落③中的目的基因是否表達(dá)，可采用的方法是_________。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、C【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。

2；ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛磺酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類(lèi)型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進(jìn)成熟雌性個(gè)體超數(shù)排卵，然后將卵細(xì)胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進(jìn)行體外受精，培育成胚胎，A錯(cuò)誤；

B；運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動(dòng)物的早期胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞；首先必須用胰蛋白酶處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，分解細(xì)胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；以維持培養(yǎng)液的pH，C正確；

D；ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)時(shí)會(huì)維持只分裂不分化的狀態(tài)；D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】2、C【分析】【分析】

1；動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體（克隆動(dòng)物）。

2；胚胎移植的生理基礎(chǔ)（1）供體與受體相同的生理變化；為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；（3）子宮不對(duì)外來(lái)胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。

3；胚胎分割的特點(diǎn)：來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A；癌細(xì)胞具有無(wú)限增殖的能力；因此乳腺癌細(xì)胞比乳腺細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；

B；細(xì)胞核移植可以在同種動(dòng)物的不同組織間進(jìn)行；B錯(cuò)誤；

C；胚胎分割所產(chǎn)生的二分胚等所含的細(xì)胞是由同一個(gè)受精卵分裂產(chǎn)生的；核遺傳物質(zhì)相同，故二分胚等發(fā)育成的個(gè)體基因型相同，C正確；

D；維生素和激素都不是能源物質(zhì)；D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】3、B【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或原始性腺。胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞。

【詳解】

A；ES細(xì)胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞；A正確；

B；ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯的特點(diǎn)；B錯(cuò)誤；

C；在體外培養(yǎng)的條件下；ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化，C正確；

D；利用ES細(xì)胞可以被誘導(dǎo)分化成新的組織細(xì)胞的特性；移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】4、C【分析】【分析】

1；DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同；在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低；

2；DNA不溶于酒精溶液；

3；蛋白質(zhì)不能忍受60～80℃的高溫；DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響；

4；DNA含量相對(duì)較高的生物組織；如雞血、菜花、洋蔥等。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；所以加入冷酒精不利于溶解DNA，A錯(cuò)誤；

B；DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低；不利于提取DNA，洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，B錯(cuò)誤；

C；沐浴液屬于洗滌劑；能夠瓦解細(xì)胞膜，C正確；

D；DNA含量相對(duì)較高的生物組織；如雞血、菜花、洋蔥等；兔屬于哺乳動(dòng)物，血中DNA含量少，D錯(cuò)誤。

故選C。5、A【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活需求。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程是通過(guò)改造基因來(lái)改造蛋白質(zhì)；流程和天然蛋白質(zhì)合成的過(guò)程是不同的，A錯(cuò)誤；

B；蛋白質(zhì)工程能通過(guò)改造基因；生產(chǎn)出自然界中不存在的新型蛋白質(zhì)分子，B正確；

C；蛋白質(zhì)工程需通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)改造原有蛋白質(zhì)；C正確；

D；蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；所以前提條件是了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系，D正確。

故選A。6、B【分析】【分析】

圖中是穿刺接種的方法；根據(jù)題干中的信息“硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀”，所以根據(jù)黑色沉淀的多少，比較兩種菌產(chǎn)生硫化氫的能力。

【詳解】

A；從圖中可以看出甲菌在試管中分布范圍小于乙菌；說(shuō)明了乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng)，A正確；

B；為不影響菌的運(yùn)動(dòng)需選用半固體培養(yǎng)基；B錯(cuò)誤；

C；該實(shí)驗(yàn)可以根據(jù)黑色沉淀的多少初步比較細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫的能力；但不能測(cè)定產(chǎn)生硫化氫的量，C正確；

D；微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染；D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】7、C【分析】【分析】

分析題圖：甲為抗原；乙為多種細(xì)胞（包括為融合的細(xì)胞和多種融合的細(xì)胞），丙表示經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞，丁表示經(jīng)過(guò)抗體陽(yáng)性檢測(cè)出的能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

A；抗胃癌單克隆抗體可以和甲（抗原）特異性結(jié)合；A正確；

B；利用聚乙二醇（化學(xué)法）、滅活的病毒（生物法）和電融合（物理法）可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞；B正確；

C；用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙篩選；融合具有同種核的細(xì)胞和未融合細(xì)胞均不能生長(zhǎng)，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)，C錯(cuò)誤；

D；需對(duì)丙（雜交瘤細(xì)胞）進(jìn)行抗體檢測(cè)；經(jīng)過(guò)篩選后才能獲得丁（能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞），D正確。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)8、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一樣；具有繁殖、遺傳、變異、進(jìn)化的特點(diǎn)，病毒是一種體積非常微小，結(jié)構(gòu)極其簡(jiǎn)單的生物，僅由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成，沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)。不能獨(dú)立生活，只能寄生在活細(xì)胞內(nèi)，并在寄主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行繁殖。一旦離開(kāi)了活細(xì)胞，病毒就無(wú)法生存，就會(huì)變成結(jié)晶體。

2；真菌較細(xì)菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)是真菌為真核微生物；含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對(duì)蛋白進(jìn)行加工和修飾。

【詳解】

A；通過(guò)題干信息可知；抗菌肽具有廣譜抗菌活性，抗菌肽不參與特異性免疫過(guò)程，A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)題干信息；抗菌肽“在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡”，即改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡，B正確；

C；抗菌肽“是廣泛存在于昆蟲(chóng)以及兩棲類(lèi)動(dòng)物、哺乳動(dòng)物體內(nèi)的抗菌活性物質(zhì)”；即來(lái)源于真核細(xì)胞，如利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高抗菌肽的產(chǎn)量，但最好選擇真菌作為受體菌，因?yàn)檎婢钦婧思?xì)胞，繁殖速度快，遺傳物質(zhì)少，C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)題干信息；“某些抗菌肽對(duì)癌細(xì)胞甚至病毒等均具有強(qiáng)有力的殺傷作用”，則對(duì)抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路，D正確。

故選BD。

【點(diǎn)睛】9、A:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。轉(zhuǎn)基因食品、產(chǎn)品上都要標(biāo)注原料來(lái)自轉(zhuǎn)基因生物；如“轉(zhuǎn)基因××”“轉(zhuǎn)基因××加工品（制成品）”“加工原料為轉(zhuǎn)基因××”“本產(chǎn)品為轉(zhuǎn)基因××加工制成”．對(duì)于轉(zhuǎn)基因食物潛在隱患要進(jìn)行開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤等措施多環(huán)節(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩栽u(píng)價(jià)，保障了現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性。

【詳解】

A；為了加強(qiáng)對(duì)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的標(biāo)識(shí)管理；保護(hù)消費(fèi)者的知情權(quán)，我國(guó)對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行了標(biāo)識(shí)制度，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因食品上只標(biāo)明原料來(lái)自轉(zhuǎn)基因生物；并未標(biāo)明其危害，B錯(cuò)誤；

C；為了保障現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性；需要開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤等措施，C正確；

D；生物安全是指擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會(huì)影響到生物多樣性；D正確。

故選ACD。10、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

A；限制酶可識(shí)別并在特定位置水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵；A正確；

B；DNA連接酶可以連接黏性末端相同；即末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段之間的磷酸二酯鍵，B正確；

C；DNA聚合酶只能從核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C錯(cuò)誤；

D；標(biāo)記基因可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)；故作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因，D正確。

故選ABD。11、B:C:D【分析】【分析】

“人造精子”是一種可以替代精子使卵細(xì)胞“受精”的單倍體胚胎干細(xì)胞。目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞系；其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無(wú)包含Y染色體的細(xì)胞。單倍體胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)成為二倍體細(xì)胞，原因是有一部分單倍體細(xì)胞在分裂期時(shí)發(fā)生異常，跳過(guò)分裂期重新進(jìn)入分裂間期，導(dǎo)致DNA含量加倍。

【詳解】

A；過(guò)程①只是去掉雌原核遺傳物質(zhì)（核遺傳物質(zhì)）；受精卵中還有卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；過(guò)程②需保證培養(yǎng)過(guò)程無(wú)菌；因而可添加抗生素，由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚，因此在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需要添加血清等天然成分，B正確；

C；孤雌單倍體胚胎細(xì)胞只含有精子的染色體；而精子只含1條性染色體，因而過(guò)程③獲得的干細(xì)胞只有一條性染色體，C正確；

D；卵母細(xì)胞的性染色體是X；類(lèi)精子單倍體胚胎干細(xì)胞的性染色體也是X，因而半克隆小鼠的性染色體是X，發(fā)育成雌性，受體只為胚胎提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，不影響胚胎的遺傳物質(zhì)，D正確。

故選BCD。12、B:C:D【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是用來(lái)將某種或某類(lèi)微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái)的培養(yǎng)基。設(shè)計(jì)選擇培養(yǎng)基時(shí)；主要考慮某些微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或它們對(duì)某些化學(xué)物質(zhì)具有的抗性。

【詳解】

A；以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基；可從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌，A正確；

B；平板劃線(xiàn)法能將單個(gè)微生物分散到培養(yǎng)基上；從而分離得到單菌落，但是不可以用來(lái)測(cè)定樣品中的活菌數(shù)，稀釋涂布平板法可以計(jì)數(shù)，B錯(cuò)誤；

C；樣品的稀釋度太大；會(huì)導(dǎo)致微生物數(shù)量太少，一般要求稀釋后平板上的菌落數(shù)在30到300之間比較合適，C錯(cuò)誤；

D；利用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù)；可快速直觀地測(cè)定樣品中的活菌數(shù)和死菌數(shù)，D錯(cuò)誤。

故選BCD。13、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一種抗原檢測(cè)系統(tǒng)；將一段已知序列的DNA片段標(biāo)記到抗體2上，通過(guò)抗原抗體的特異性識(shí)別并結(jié)合，抗體2會(huì)和固定抗體1；抗生素形成復(fù)合物“固定抗體1—抗生素—抗體2”，再用PCR方法將這段DNA進(jìn)行擴(kuò)增，通過(guò)檢測(cè)PCR產(chǎn)物的量，即可推知固定抗體1上吸附的抗生素的量。

【詳解】

A；免疫PCR中所用的DNA不選用受檢樣品（牛乳）中可能存在的DNA。待檢測(cè)的牛乳中可能含有牛乳腺細(xì)胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若圖示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物中，不僅有抗體2上的DNA擴(kuò)增產(chǎn)物，還可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的擴(kuò)增產(chǎn)物，使檢測(cè)結(jié)果偏大，A正確；

B；如果第三次沖洗不充分；可能使殘留的、呈游離狀態(tài)的抗體2上的DNA也作為PCR的模板參與擴(kuò)增，會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性現(xiàn)象，B正確；

CD；微量抗原抗體反應(yīng)；是通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增抗體2上連接的DNA，最后通過(guò)檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物—DNA的量來(lái)確定抗生素的量的方法。因此，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的量與牛乳中抗生素的量呈正相關(guān)，抗原、抗體的數(shù)量可通過(guò)PCR技術(shù)間接擴(kuò)增放大，C錯(cuò)誤，D正確。

故選ABD。14、A:D【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交過(guò)程：1；酶解法去壁獲取原生質(zhì)體；2、人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；3、再生出新細(xì)胞壁；標(biāo)志著原生質(zhì)體融合完成；4、經(jīng)脫分化和再分化過(guò)程，通過(guò)組織培養(yǎng)把雜種細(xì)胞培育成雜種植株。

【詳解】

A；植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠；因此先用纖維素酶和果膠酶酶解得到原生質(zhì)體，A正確；

B；植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生形成新的細(xì)胞壁；B錯(cuò)誤；

C；若雜種細(xì)胞能在硝酸鹽培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)；說(shuō)明兩種突變體的植物體細(xì)胞雜交后代能夠合成硝酸還原酶，即兩種突變體的突變基因位點(diǎn)不同，雜交后未突變的基因重新組合在一起，控制了硝酸還原酶的合成，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)題可知；植物利用硝酸鹽需要硝酸還原酶，兩種突變體煙草硝酸還原酶都缺失，因此均不能在以硝酸鹽作為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，D正確。

故選AD。15、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過(guò)體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱(chēng)為亞單位疫苗；是通過(guò)基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱(chēng)基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過(guò)正常的人體生理活動(dòng)產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進(jìn)行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；主要通過(guò)檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。三、填空題(共9題，共18分)16、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快揮發(fā)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體DNA分子18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】受體細(xì)胞19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2種引物DNA或RNA20—3020、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】冷酒精白色221、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。24、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無(wú)機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類(lèi)和比例；特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，被稱(chēng)為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確分析，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。【解析】①.激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽四、判斷題(共2題，共16分)25、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來(lái)修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。本說(shuō)法正確。26、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克隆：是指把克隆出來(lái)的組織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術(shù)制造胚胎稱(chēng)為治療性克隆。生殖性克隆：處于生殖的目的使用克隆技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室制造人類(lèi)胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共16分)27、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA??分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，說(shuō)明PG基因在果肉中表達(dá)量較高，所以最好從番茄的果肉細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）；

（2）據(jù)圖可知；轉(zhuǎn)基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA1和mRNA2相結(jié)合形成雙鏈，從而抑制PG基因的翻譯過(guò)程，使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期；

（3）分析表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程圖可知；目的基因插入到圖中農(nóng)桿菌的四環(huán)素抗性基因上，導(dǎo)致農(nóng)桿菌失去了四環(huán)素的抗性，所以圖中農(nóng)桿菌能夠在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌；

（4）圖中是利用農(nóng)桿菌將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的；此方法稱(chēng)為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。不能用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，理由是番茄細(xì)胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會(huì)與該探針形成雜交帶；

（5）將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過(guò)程中；需要在培養(yǎng)基中添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是該培養(yǎng)過(guò)程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用（或光合作用很弱）。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程及應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。【解析】果肉逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）翻譯卡那霉素四環(huán)素農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法不能番茄細(xì)胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會(huì)與該探針形成雜交帶要該培養(yǎng)過(guò)程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用（或光合作用很弱）28、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無(wú)氧的環(huán)境中酵母菌把糖類(lèi)分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過(guò)程中檢測(cè)發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說(shuō)明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無(wú)氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類(lèi)型是兼性厭氧型，在有氧條件下進(jìn)行大量增殖，在無(wú)氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；變成灰綠色，該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精，因此實(shí)驗(yàn)自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對(duì)照組中應(yīng)加入酒精作為陽(yáng)性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)遵循等量原則；單一變量原則等，因此實(shí)驗(yàn)思路是：取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實(shí)驗(yàn)組，B試管中各加入2ml酒精，作為對(duì)照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗(yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般不進(jìn)行嚴(yán)格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種。現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經(jīng)過(guò)沉淀；過(guò)濾、滅菌、裝瓶等過(guò)程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/1mL=1個(gè)中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實(shí)驗(yàn)中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無(wú)氧呼吸，需要關(guān)閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無(wú)菌空氣。【解析】(1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無(wú)氧條件下將葡萄糖分解為酒精實(shí)驗(yàn)思路：取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過(guò)濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時(shí)需關(guān)閉充氣口，釀醋時(shí)則需向充氣孔中充入無(wú)菌空氣六、綜合題(共4題，共28分)29、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2；進(jìn)行胚胎分割時(shí)；應(yīng)選擇形態(tài)正常、發(fā)育良好的桑椹胚或囊胚進(jìn)行操作，應(yīng)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，以免影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)行一步發(fā)育。(1)

若要獲得大量的目的基因；可通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。實(shí)施基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的包括：①使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給后代；②使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。

(2)

通常采用顯微注射法將目的基因?qū)雱?dòng)物受體細(xì)胞；動(dòng)物的受體細(xì)胞一般選擇受精卵；在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞的個(gè)體較大，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織。

(3)

轉(zhuǎn)基因豬的細(xì)胞核中既含有reAnti基因又含有Anti基因，reAnti基因的模板鏈與Anti基因的模板鏈互補(bǔ)；二者轉(zhuǎn)錄的mRNA可以發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，會(huì)阻止翻譯過(guò)程，從而使器官表面不會(huì)出現(xiàn)抗原，移植后不會(huì)發(fā)生免疫排斥。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記胚胎分割移植技術(shù)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。【解析】(1)①.PCR②.基因表達(dá)載體③.在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在；并且可以遺傳給下一代。

(2)①.顯微注射②.內(nèi)細(xì)胞團(tuán)③.將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織。

(3)eAnti基因和Anti基因轉(zhuǎn)錄的mRNA可以發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，會(huì)阻止翻譯過(guò)程，從而使器官表面不會(huì)出現(xiàn)抗原，移植后不會(huì)發(fā)生免疫排斥30、略

【分析】【詳解】

（1）構(gòu)建重組表達(dá)載體時(shí)；要用同種限制性核酸內(nèi)切酶，對(duì)目的基因與載體切割，再通過(guò)DNA連接酶連接。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用DNA分子雜交技術(shù)。

（2）促性腺激素能促進(jìn)性腺產(chǎn)生卵母細(xì)胞；對(duì)供體母羊注射促性腺激素，可獲取更多的卵（母）細(xì)胞，超數(shù)排卵。剛采集的精子沒(méi)有受精能力，需要經(jīng)過(guò)獲能，才具備受精能力。

（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是顯微注射法。藥用蛋白可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得；為獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定。早期胚胎細(xì)胞具有全能性，利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體。

（4）目的基因是否成功表達(dá)的依據(jù)是看能否獲得由目的基因控制合成的蛋白質(zhì)。若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到htPA（或人組織纖溶酶原激活物）；說(shuō)明目的基因成功表達(dá)。

【點(diǎn)睛】【解析】①.同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）②.DNA分子雜交（或核酸探針）③.超數(shù)排卵④.獲能⑤.顯微注射法⑥.性別鑒定⑦.全能性⑧.htPA（或人組織纖溶酶原激活物）31、略

【分析】【分析】

農(nóng)桿菌易感染植物細(xì)胞；其Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。利用上述原理，將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再導(dǎo)入農(nóng)桿菌，用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，可以將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。

【詳解】

（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的原理是其Ti質(zhì)粒的T-DNA片段具有可轉(zhuǎn)移并整合到植物細(xì)胞的染色體DNA上的特點(diǎn)。

在農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中；構(gòu)建基因表達(dá)載體是為了把目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中，并在導(dǎo)入農(nóng)桿菌后，讓