學而優·教有方PAGEPAGE1第1章發酵工程（考試時間：60分鐘試卷滿分：100分）基礎鞏固卷一、選擇題：本題共20個小題，每小題3分，共60分。在每小題給出的四個選項中，只有一項是符合題目要求的。1．某興趣小組從甘蔗地中取樣并計劃分離得到纖維素分解菌，但進行實驗時沒有分離得到纖維素分解菌，其最可能的原因是（

）A．制備的土壤浸出液稀釋倍數較高B．培養皿進行高壓蒸汽滅菌時不徹底C．培養基中加入的纖維素含量較少D．涂布器灼燒滅菌后立即接種2．黃瓜乳酸菌酵素飲料是一種以黃瓜汁為原料，以植物乳酸桿菌為生產菌種，采用一定的發酵工藝所制得的新型飲料，以下相關敘述錯誤的是（

）A．發酵前要對黃瓜進行清洗和榨汁處理B．發酵設備要進行相應的消毒或滅菌處理C．發酵過程要嚴格控制無氧的環境D．利用乳酸菌發酵還可生產泡菜腐乳等食品3．在酪蛋白溶液中加入菠蘿蛋白酶處理12h后，再100℃水浴加熱10min，得到酪蛋白水解肽（簡稱CHP）。制作酸奶時，在牛奶中額外添加適量CHP可提前34min到達發酵終點（pH=4.5），對該過程分析正確的是（

）A．菠蘿蛋白酶在酸奶發酵時起到催化作用B．菠蘿蛋白酶將酪蛋白的磷酸二酯鍵打開C．CHP進入發酵微生物的線粒體后起作用D．添加CHP制作酸奶能縮短乳酸發酵時間4．下列關于發酵工程的應用，敘述正確的是（

）A．谷氨酸是味精的原料，可以通過黑曲霉發酵制得B．使用基因工程改造的啤酒酵母，可以提高啤酒的質量和產量C．利用發酵工程生產的白僵菌特異性強，只能用來防治一種農林害蟲D．一種真菌通過發酵工程產生的井岡霉素可以用來防治水稻枯紋病5．下列關于豆腐乳制作的相關敘述，說法錯誤的是（

）A．在加鹽腌制豆腐乳時，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些B．青霉、曲霉、酵母、毛霉等多種微生物參與豆腐乳發酵C．現代食品企業是在無菌條件下接種毛霉來生產豆腐乳D．鹵湯中酒的含量過高，豆腐乳成熟的時間會明顯提前6．某同學用牛肉膏蛋白胨固體培養基進行大腸桿菌純化培養，下列說法錯誤的是（

）A．蛋白胨可為大腸桿菌的生長提供碳源、氮源和維生素等營養成分B．在牛肉膏蛋白胨培養基的配制過程中，需滅菌后調節pHC．倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置D．大腸桿菌純化培養的關鍵是要防止雜菌的污染7．發酵工程的正確操作過程是（

）①發酵②培養基的配制③滅菌④產品的分離與提純⑤菌種的選育和擴大培養⑥接種A．①③④⑤②⑥ B．⑤②③⑥①④ C．②③①⑥④ D．⑥⑤②④③①8．下列關于無菌技術的敘述，錯誤的是（

）A．實驗室的培養物在處理掉之前必須經過滅菌處理B．在蘸取菌液前后均要將盛有菌液的試管口通過火焰灼燒C．細菌在一定的條件下可以通過芽孢進行繁殖D．實驗室中嚴格禁止喝水和吃食物9．利用傳統發酵技術和發酵工程生產產品，下列說法正確的是（）A．傳統發酵技術都是直接利用天然原料中的微生物B．傳統發酵技術釀酒與發酵工程釀酒的基本原理不同C．發酵工程利用微生物進行發酵，傳統發酵技術不是利用微生物D．傳統發酵技術通常在自然條件下進行，發酵工程可人為控制發酵條件10．下列關于微生物純化培養的敘述，錯誤的是（

）A．涂布平板時應先將培養皿蓋置于實驗操作臺上B．微生物的純化培養包括配制培養基、滅菌、接種、分離和培養等步驟C．用平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在固體培養基上得到單菌落D．倒平板操作應等培養基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近進行11．下列關于果酒、果醋及腐乳制作的相關敘述，不正確的是（

）A．制作果酒過程中應適時放氣，制作果醋時要保證通氣B．果醋制作既可以在獲得果酒后進行，也可利用果汁直接制得C．制作果酒、果醋和腐乳的主要微生物都屬于真核生物D．控制好溫度和pH既有利于目的菌繁殖，又可抑制雜菌生長12．實驗小組對菌落的理解判斷，不準確的是（

）A．不同微生物菌落的大小、形狀、顏色等有所不同B．一個標準的細菌菌落應該是一個細菌在固體培養基上形成的C．利用稀釋涂布平板法統計菌落數目時，統計的菌落數往往較活菌實際數目少D．原核生物才形成菌落，真核生物不能形成菌落13．某人利用自制的發酵罐進行酵母菌發酵實驗，把葡萄糖加入發酵罐，接種酵母菌后，發現酒精產量較低、檢測發現發酵罐密封不嚴，此種狀態下發酵罐中的其他結果可能是（）①酵母菌數量不變

②酵母菌數量增加

③葡萄糖的消耗量減少④CO2的釋放量增加⑤葡萄糖的消耗量增加A．①③ B．②③ C．①③④ D．②④⑤14．工業化大規模制酒時，可能需要將菌種擴大培養，下列有關說法正確的是（

）A．應將菌種接種至固體培養基中B．最后應使用蛋白胨、酵母提取物等物質制備成LB培養基培養菌種C．接種操作工具一般都選擇高壓蒸汽滅菌鍋滅菌D．在超凈工作臺上進行接種工作時，應關閉事先打開的紫外燈15．已知固體培養基會因碳酸鈣存在而呈乳白色，且乳酸菌能分解培養基中碳酸鈣。某同學用新鮮的泡菜濾液為材料進行了分離純化乳酸菌的實驗，下列敘述正確的是（

）A．加入碳酸鈣的培養基屬于選擇培養基，且碳酸鈣作為唯一碳源B．分離純化所用的培養基都要進行嚴格的滅菌處理C．分離純化乳酸菌時，需要用蒸餾水對泡菜濾液進行梯度稀釋D．分離純化乳酸菌時，應挑選出不具有透明圈的菌落作為候選菌16．下列有關微生物數量說法，錯誤的是（

）A．土壤中各類微生物的數量不同，因此分離不同類型的微生物要選擇不同的稀釋倍數B．測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍不同C．只要得到了3個或3個以上菌落數目在30～300的平板，就能夠統計樣品中活菌數目D．牛肉膏蛋白胨培養基的菌落數明顯大于選擇培養基，說明選擇培養基已篩選出一些菌落17．在稀釋涂布平板法對微生物進行計數時的錯誤操作是（

）A．將1mL樣品稀釋10倍，需加入10mL無菌水B．吸取菌液的移液管需要干熱滅菌避免雜菌污染C．將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃D．稀釋涂布平板法既能分離純化微生物，又能計數18．下列關于微生物培養的敘述，正確的是（

）A．配制培養基時，一般先調pH再滅菌B．培養微生物用到的接種環、培養皿、培養基等都用干熱滅菌法滅菌C．培養乳酸菌時，除了基本的碳源、氮源、水和無機鹽，還需要添加抗生素D．用平板劃線法和稀釋涂布平板法進行微生物的計數時，所得數據往往比實際數據偏小19．下列與檢測亞硝酸鹽含量有關的敘述，正確的是（

）A．亞硝酸鹽與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合后形成玫瑰紅色染料B．標準顯色液和樣品處理液的配制過程、顯色方法基本相同C．比色時選擇顏色最相近的標準顯色液并記錄對應的亞硝酸鹽含量D．亞硝酸鹽含量計算方法是：20．下圖甲為果酒和果醋制作裝置，圖乙表示制作過程中的物質變化，有關敘述正確的是（

）A．制作果酒時應關閉閥b，適時打開閥a排氣B．制作果醋時需打開閥a通氣，打開閥b排氣C．過程①②都只能發生在缺氧的條件下D．過程①～④所需的最適溫度基本相同非選擇題：本題共4個小題，共40分。21．（10分）苯酚是含酚工業廢水的主要成分，具有致癌、致畸和致突變作用。某污水處理廠檢測出要處理的廢水中含有較高濃度的苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員欲從淤泥中篩選出能高效降解苯酚的菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，回答下列問題：(1)培養基甲和乙營養成分相同，都要加入________作為唯一的碳源，甲中還加入了_______使其與乙物理性質不同；甲、乙兩種培養基按用途劃分均屬于選擇培養基，其機理是____________。(2)圖中振蕩培養可以使_____________。將C培養基中的菌液稀釋并涂布在平板上，所得的菌落數比活菌數目偏少，原因是________。(3)在統計菌落數目時，要選取菌落數目穩定時的記錄數據作為結果，這樣可防止_____________。(4)實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理后才能丟棄。原因是________。22．（12分）釀酒酵母菌性能的優劣會影響所釀葡萄酒的口感、風味和產量。篩選優質釀酒酵母菌、提高葡萄酒的質量，是葡萄酒工業發展的重點。回答下列問題：(1)參與蘋果酒發酵的酶主要位于酵母菌細胞的__________中。傳統發酵中，發酵液雖然未經過嚴格的滅菌處理，但雜菌卻不能正常生長繁殖，這是由于___________________。(2)葡萄汁裝入發酵瓶要留________，這種做法的目的是_____________________（出兩點即可）。(3)實驗用的培養皿常用的滅菌方法是___________；為了避免滅菌后器皿被污染，滅菌前應該___________，為了從土壤中篩選出酵母菌，培養基中添加了青霉素，目的是___________。(4)研究發現，經葡萄里面的糖分自然發酵而成的酒精，含量一般在10%~13%為最佳，發酵時的溫度和時間會影響果酒發酵產生的酒精的含量。為了找到適合生產的最佳發酵溫度和時間。請設計出探究的思路：___________________________。23．（9分）下圖是從土壤中篩選細菌的過程。請回答下列問題：(1)土壤中存在能分解尿素的細菌，這些細菌中產生的________催化尿素分解成NH3和CO2。某同學配置以下的培養基成分:葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、尿素1.0g、瓊脂15.0g、H2O（定容至1L）。分析培養基的成分可知，上述培養基____（填“能”或“不能”）用于分離出能分解尿素的細菌，理由是__________。(2)在向培養基接種土壤稀釋液中微生物時，最常用的方法是_______和______。(3)若在3個細菌培養基平板上均接種稀釋倍數為105的土壤樣品0.1mL，培養一段時間，平板上菌落數分別為35個、33個、34個，則可推測每克土壤樣品中的細菌數為____個。運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小，原因是________

。24．（9分）果酒和果醋的制作離不開酵母菌和醋酸菌，腐乳的制作離不開毛霉等微生物。回答下列問題：(1)酵母菌和醋酸菌在結構上的主要區別是酵母菌________。(2)葡萄汁裝入發酵瓶之前要將發酵瓶清洗干凈，用________消毒。制作_________時應將下圖中的開關2打開，原因是________________。(3)制作腐乳的原料中，含量比較高的有機物是________。毛霉可利用體內的酶將該成分分解成________。在用鹽腌制腐乳的過程中，若鹽的濃度過低會出現________。(4)傳統的制作過程中，豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子。而現代的腐乳生產是在嚴格的無菌條件下，將優良的毛霉菌種接種在豆腐上，這樣可以________________。第1章發酵工程（考試時間：60分鐘試卷滿分：100分）基礎鞏固卷一、選擇題：本題共20個小題，每小題3分，共60分。在每小題給出的四個選項中，只有一項是符合題目要求的。1．某興趣小組從甘蔗地中取樣并計劃分離得到纖維素分解菌，但進行實驗時沒有分離得到纖維素分解菌，其最可能的原因是（

）A．制備的土壤浸出液稀釋倍數較高B．培養皿進行高壓蒸汽滅菌時不徹底C．培養基中加入的纖維素含量較少D．涂布器灼燒滅菌后立即接種【答案】D【分析】稀釋涂布平板法涂布的過程中，先將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中，然后將涂布器放在火焰上灼燒，待酒精燃盡、涂布器冷卻后，再進行涂布。【詳解】A、制備的土壤浸出液稀釋倍數較高，會導致得到的纖維素分解菌偏少，不會得不到分解菌，A錯誤；B、培養皿進行高壓蒸汽滅菌時不徹底，會導致雜菌污染，纖維素分解菌由于競爭作用導致數量少，不會分離不到，B錯誤；C、培養基中加入的纖維素含量較少，纖維素分解菌的能量來源少，產生的菌落數少，可以分離到少量纖維素分解菌，C錯誤；D、涂布器灼燒滅菌后立即接種，會導致菌體死亡，應冷卻，D正確。故選D。2．黃瓜乳酸菌酵素飲料是一種以黃瓜汁為原料，以植物乳酸桿菌為生產菌種，采用一定的發酵工藝所制得的新型飲料，以下相關敘述錯誤的是（

）A．發酵前要對黃瓜進行清洗和榨汁處理B．發酵設備要進行相應的消毒或滅菌處理C．發酵過程要嚴格控制無氧的環境D．利用乳酸菌發酵還可生產泡菜腐乳等食品【答案】D【分析】乳酸菌是厭氧菌，在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。【詳解】A、由題干信息可知，該飲料是以黃瓜汁為原料制備的，故發酵前要對黃瓜進行清洗和榨汁處理，A正確；B、在發酵過程中，為防止其他微生物的干擾，需要事先對發酵設備進行相應的消毒或滅菌處理，B正確；C、黃瓜乳酸菌酵素飲料以植物乳酸桿菌為生產菌種，乳酸菌是厭氧型微生物，故發酵過程要嚴格控制無氧環境，C正確；D、泡菜制作利用的菌種是乳酸菌，制作腐乳利用的主要是霉菌，D錯誤。故選D。3．在酪蛋白溶液中加入菠蘿蛋白酶處理12h后，再100℃水浴加熱10min，得到酪蛋白水解肽（簡稱CHP）。制作酸奶時，在牛奶中額外添加適量CHP可提前34min到達發酵終點（pH=4.5），對該過程分析正確的是（

）A．菠蘿蛋白酶在酸奶發酵時起到催化作用B．菠蘿蛋白酶將酪蛋白的磷酸二酯鍵打開C．CHP進入發酵微生物的線粒體后起作用D．添加CHP制作酸奶能縮短乳酸發酵時間【答案】D【分析】由題意可知，在酪蛋白溶液中加入菠蘿蛋白酶處理12h后，再100℃水浴加熱10min，此時蛋白酶失活；添加適量CHP可提前34min到達發酵終點，說明添加CHP制作酸奶能縮短乳酸發酵時間。【詳解】A、菠蘿蛋白酶在水浴加熱時失活，在酸奶發酵時不能起到催化作用，A錯誤；B、酪蛋白中無磷酸二酯鍵，B錯誤；C、酸奶的發酵微生物是乳酸菌（原核生物），無線粒體，C錯誤；D、由題意可知，添加適量CHP可提前34min到達發酵終點，說明添加CHP制作酸奶能縮短乳酸發酵時間，D正確。故選D。4．下列關于發酵工程的應用，敘述正確的是（

）A．谷氨酸是味精的原料，可以通過黑曲霉發酵制得B．使用基因工程改造的啤酒酵母，可以提高啤酒的質量和產量C．利用發酵工程生產的白僵菌特異性強，只能用來防治一種農林害蟲D．一種真菌通過發酵工程產生的井岡霉素可以用來防治水稻枯紋病【答案】B【分析】發酵工程是指采用現代工程技術手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產有用的產品，或直接把微生物應用于工業生產過程的一種技術。發酵工程的內容包括菌種選育、培養基的配制、滅菌、種子擴大培養和接種、發酵過程和產品的分離提純（生物分離工程）等方面。【詳解】A、谷氨酸是通過谷氨酸棒狀桿菌發酵制得的，A錯誤；B、利用基因工程改造的啤酒酵母，可以提高啤酒的產量和質量，B正確；C、利用發酵工程生產的白僵菌可以用來防治玉米螟、松毛蟲等農林害蟲，C錯誤；D、一種放線菌通過發酵工程產生的井岡霉素可以用來防治水稻枯紋病，D錯誤。故選B。5．下列關于豆腐乳制作的相關敘述，說法錯誤的是（

）A．在加鹽腌制豆腐乳時，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些B．青霉、曲霉、酵母、毛霉等多種微生物參與豆腐乳發酵C．現代食品企業是在無菌條件下接種毛霉來生產豆腐乳D．鹵湯中酒的含量過高，豆腐乳成熟的時間會明顯提前【答案】D【分析】1、作腐乳利用的是主要是毛霉，毛霉產生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解成多肽和氨基酸，產生的脂肪酶能夠將豆腐中的脂肪水解為甘油和脂肪酸。2、含水量過大時腐乳不易成形，進行腐乳制作所選豆腐含水量不宜超過70%。3、酒精含量的高低與腐乳后期發酵時間的長短有很大關系。酒精含量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。【詳解】A、越接近瓶口，雜菌污染的可能性越大，因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量，在接近瓶口的表面，鹽要鋪厚一些，以有效防止雜菌污染，A正確；B、多種微生物參與了豆腐的發酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，B正確；C、傳統的腐乳制作過程中，有多種微生物在起作用，但主要是毛霉。現代腐乳生產接種優良的毛霉菌種，不僅可以防止其他雜菌的污染，而且能保證腐乳的風味，保證腐乳質量，C正確；D、酒精含量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長，D錯誤。故選D。6．某同學用牛肉膏蛋白胨固體培養基進行大腸桿菌純化培養，下列說法錯誤的是（

）A．蛋白胨可為大腸桿菌的生長提供碳源、氮源和維生素等營養成分B．在牛肉膏蛋白胨培養基的配制過程中，需滅菌后調節pHC．倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置D．大腸桿菌純化培養的關鍵是要防止雜菌的污染【答案】B【分析】1、將接種于培養基內，在合適條件下形成的含有特定種類微生物的群體稱為培養物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養物，獲得純培養物的過程就是純培養。2、微生物的純培養包括配制培養基、滅菌、接種、分離和培養等步驟。【詳解】A、蛋白胨可為大腸桿菌的生長提供氮源和維生素等營養，A正確；B、牛肉膏蛋白胨培養基應先調pH再經高壓蒸汽滅菌，B錯誤；C、倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上，防止水蒸氣倒流，C正確；D、大腸桿菌純化培養可以采用平板劃線法或稀釋涂布平板法，D正確。故選B。7．發酵工程的正確操作過程是（

）①發酵②培養基的配制③滅菌④產品的分離與提純⑤菌種的選育和擴大培養⑥接種A．①③④⑤②⑥ B．⑤②③⑥①④ C．②③①⑥④ D．⑥⑤②④③①【答案】B【分析】發酵工程是指采用現代工程技術手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產有用的產品，或直接把微生物應用于工業生產過程的一種新技術；發酵工程的內容包括菌種的選育、培養基的配制、滅菌、擴大培養和接種、發酵過程和產品的分離提純等方面。【詳解】發酵工程的基本操作過程為：菌種的選育→培養基的配制→滅菌→擴大培養和接種→發酵過程→產品的分離提純。因此正確的操作過程是⑤②③⑥①④，B正確，ACD錯誤。故選B。8．下列關于無菌技術的敘述，錯誤的是（

）A．實驗室的培養物在處理掉之前必須經過滅菌處理B．在蘸取菌液前后均要將盛有菌液的試管口通過火焰灼燒C．細菌在一定的條件下可以通過芽孢進行繁殖D．實驗室中嚴格禁止喝水和吃食物【答案】C【分析】1、無菌技術的主要內容：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；②將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等器具進行滅菌；③為避免周圍環境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。2、實驗室常用的消毒方法：煮沸消毒；化學藥物消毒；紫外線消毒；實驗室常用的滅菌方法：灼燒滅菌，干熱滅菌，高壓蒸汽滅菌。【詳解】A、實驗室的培養物在處理掉之前必須經過滅菌處理，以防污染環境，A正確；B、在蘸取菌液前后均要將盛有菌液的試管口通過火焰灼燒，防止雜菌污染試管中的菌液，B正確；C、細菌通過二分裂進行繁殖，C錯誤；D、實驗室中嚴格禁止喝水和吃食物，以防微生物隨食物進入人體內，D正確。故選C。9．利用傳統發酵技術和發酵工程生產產品，下列說法正確的是（）A．傳統發酵技術都是直接利用天然原料中的微生物B．傳統發酵技術釀酒與發酵工程釀酒的基本原理不同C．發酵工程利用微生物進行發酵，傳統發酵技術不是利用微生物D．傳統發酵技術通常在自然條件下進行，發酵工程可人為控制發酵條件【答案】D【分析】發酵：指人們利用微生物，在適宜條件下，將原料通過微生物的代謝轉化為人類所需要的產物的過程。【詳解】A、傳統發酵技術利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發酵保存下來的面團、鹵汁等發酵物中的微生物，A錯誤；B、傳統發酵技術釀酒與發酵工程釀酒的基本原理相同，都是利用酵母菌無氧呼吸產生酒精，B錯誤；C、兩者都是利用微生物，C錯誤；D、傳統發酵技術通常在自然條件下進行，發酵工程可人為控制發酵條件，D正確。故選D。10．下列關于微生物純化培養的敘述，錯誤的是（

）A．涂布平板時應先將培養皿蓋置于實驗操作臺上B．微生物的純化培養包括配制培養基、滅菌、接種、分離和培養等步驟C．用平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在固體培養基上得到單菌落D．倒平板操作應等培養基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近進行【答案】A【分析】稀釋涂布平板法：將土樣放進無菌水的錐形瓶中，充分搖勻，取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中，依次等比稀釋；取0.1mL菌液，滴加到培養基表面；將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中；將涂布器放在火焰上灼燒，待酒精燃盡、涂布器冷卻后，再進行涂布；用涂布器均勻將菌液涂布在培養基表面，涂布時可轉動培養皿，使涂布均勻。平板劃線法：①將接種環放到火焰上灼燒，直到接種環的金屬絲燒紅。②在火焰旁冷卻接種環。同時，拔出試管的棉塞。③將試管口通過火焰。④在火焰附近用接種環蘸取一環菌液。⑤將試管口通過火焰，并塞上棉塞。⑥在火焰附近將皿蓋打開一條縫隙，用接種環在培養基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。⑦灼燒接種環，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復以上操作，作第三、四、五次劃線，注意不要將最后一次劃線與第一次的相連。【詳解】A、涂布平板時不能完全掀開培養皿蓋，將其置于實驗操作臺上，只需要打開一條縫隙，A錯誤；B、微生物的純化培養包括配制培養基、滅菌、接種、分離和培養等步驟，B正確；C、用平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在固體培養基上得到單菌落，C正確；D、倒平板操作應等培養基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近進行，D正確。故選A。11．下列關于果酒、果醋及腐乳制作的相關敘述，不正確的是（

）A．制作果酒過程中應適時放氣，制作果醋時要保證通氣B．果醋制作既可以在獲得果酒后進行，也可利用果汁直接制得C．制作果酒、果醋和腐乳的主要微生物都屬于真核生物D．控制好溫度和pH既有利于目的菌繁殖，又可抑制雜菌生長【答案】C【分析】果酒制作原理：利用酵母菌無氧呼吸分解葡萄糖產生酒精和二氧化碳。果醋制作原理：利用醋酸菌有氧呼吸將葡萄糖或者乙醇轉化為醋酸。酒精發酵一般將溫度控制在18~25℃。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。腐乳制作的原理：多種微生物參與了豆腐的發酵，如毛霉、曲霉、根霉、酵母菌等，其中起主要作用的是毛霉。【詳解】A、制作果酒過程中，產生酒精的同時會產生CO2，故需適時放氣。果醋是需氧菌。A正確；B、醋酸菌有氧呼吸時，可利用葡萄糖或者乙醇作為反應物。B正確；C、酵母菌、毛霉是真核生物，醋酸菌是原核生物。C錯誤；D、不同微生物生長需要的溫度和pH不同。D正確。故選C。12．實驗小組對菌落的理解判斷，不準確的是（

）A．不同微生物菌落的大小、形狀、顏色等有所不同B．一個標準的細菌菌落應該是一個細菌在固體培養基上形成的C．利用稀釋涂布平板法統計菌落數目時，統計的菌落數往往較活菌實際數目少D．原核生物才形成菌落，真核生物不能形成菌落【答案】D【分析】分離和純培養微生物最常用的培養基是瓊脂固體培養基，最常用的手段是單菌落分離，單菌落分離常用的兩種方法是涂布平板法和劃線平板法，各種平板分離法的目的是要在培養基上得到目的微生物的單個菌落。【詳解】A、微生物菌落的大小、形狀、顏色等有所不同，所以菌落是區分不同微生物的重要特征，A正確；B、一個標準的細菌菌落應該是一個細菌在固體培養基上繁殖形成的細胞群，B正確；C、當兩個或多個細胞連在一起時，會共同形成一個菌落，故統計菌落的數目較活菌數目少，C正確；D、菌落是微生物的重要特征，酵母菌等部分真核生物，能形成菌落，D錯誤。故選D。13．某人利用自制的發酵罐進行酵母菌發酵實驗，把葡萄糖加入發酵罐，接種酵母菌后，發現酒精產量較低、檢測發現發酵罐密封不嚴，此種狀態下發酵罐中的其他結果可能是（）①酵母菌數量不變

②酵母菌數量增加

③葡萄糖的消耗量減少④CO2的釋放量增加⑤葡萄糖的消耗量增加A．①③ B．②③ C．①③④ D．②④⑤【答案】D【分析】參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，反應式如下：（2）無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵，反應式如下：【詳解】發酵罐中酒精產量較低，且密封不嚴，說明發酵罐中的酵母菌主要進行的是有氧呼吸，所以酵母菌數量增加，CO2的釋放量增加，葡萄糖的消耗量增加。故選D。14．工業化大規模制酒時，可能需要將菌種擴大培養，下列有關說法正確的是（

）A．應將菌種接種至固體培養基中B．最后應使用蛋白胨、酵母提取物等物質制備成LB培養基培養菌種C．接種操作工具一般都選擇高壓蒸汽滅菌鍋滅菌D．在超凈工作臺上進行接種工作時，應關閉事先打開的紫外燈【答案】D【分析】菌種擴大培養的目的：發酵罐的投料提供足夠數量的代謝旺盛的種子。因為發酵時間的長短和接種量的大小有關，接種量大，發酵時間則短。將較多數量的成熟菌體接入發酵罐中，就有利于縮短發酵時間，提高發酵罐的利用率。【詳解】A、擴大培養應該使用液體培養基，A錯誤；B、LB培養基主要用于培養細菌、擴增菌種數量，酵母菌是真菌，通用的培養基是馬鈴薯蔗糖瓊脂培養基，B錯誤；C、不是所有的操作工具都必須選擇高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，如接種環使用灼燒滅菌，C錯誤；D、在超凈工作臺上進行接種工作時，應關閉事先打開的紫外燈，D正確。故選D。15．已知固體培養基會因碳酸鈣存在而呈乳白色，且乳酸菌能分解培養基中碳酸鈣。某同學用新鮮的泡菜濾液為材料進行了分離純化乳酸菌的實驗，下列敘述正確的是（

）A．加入碳酸鈣的培養基屬于選擇培養基，且碳酸鈣作為唯一碳源B．分離純化所用的培養基都要進行嚴格的滅菌處理C．分離純化乳酸菌時，需要用蒸餾水對泡菜濾液進行梯度稀釋D．分離純化乳酸菌時，應挑選出不具有透明圈的菌落作為候選菌【答案】B【分析】乳酸菌進行無氧呼吸將葡萄糖分解成乳酸。選擇培養基是指允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基。培養基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽。獲得純凈的培養物關鍵是防止外來雜菌的入侵。微生物接種常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。【詳解】A、加入碳酸鈣的培養基屬于鑒別培養基。乳酸菌的同化作用為異養型不能利用碳酸鈣作為唯一碳源。A錯誤；B、培養基都要進行嚴格的滅菌處理。B正確；C、分離純化乳酸菌時，需要用無菌水對泡菜濾液進行稀釋。C錯誤；D、分離純化乳酸菌時，乳酸菌產生的乳酸將碳酸鈣分解，應挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌。D錯誤。故選B。16．下列有關微生物數量說法，錯誤的是（

）A．土壤中各類微生物的數量不同，因此分離不同類型的微生物要選擇不同的稀釋倍數B．測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍不同C．只要得到了3個或3個以上菌落數目在30～300的平板，就能夠統計樣品中活菌數目D．牛肉膏蛋白胨培養基的菌落數明顯大于選擇培養基，說明選擇培養基已篩選出一些菌落【答案】C【分析】在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱為選擇培養基。樣品的稀釋度將直接影響平板上的菌落數目，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養，以保證獲得菌落數為30~300、適于計數的平板，在同一稀釋度下，應至少對3個平板進行重復計數，然后求出平均值。【詳解】A、樣品的稀釋度將直接影響平板上的菌落數目，土壤中各類微生物數量不同，含量最多的是細菌，其次是放線菌，最少的是真菌，為了獲得菌落數為30~300、適于計數的平板，因此分離不同類型的微生物要選擇不同的稀釋倍數，A正確；B、分解尿素的細菌只是屬于土壤中眾多細菌的一種，測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，應選用的稀釋范圍不同，測定土壤中細菌總量的稀釋倍數較大，B正確；C、如果得到了兩個或多個菌落數為30~300的平板，說明稀釋度合適，操作比較成功，能夠進行菌落的計數，C錯誤；D、牛肉膏蛋白胨培養基屬于完全培養基，如果接種后的完全培養基上的菌落數明顯多于選擇培養基上的菌落數，說明選擇培養基具有篩選作用，D正確；故選C。17．在稀釋涂布平板法對微生物進行計數時的錯誤操作是（

）A．將1mL樣品稀釋10倍，需加入10mL無菌水B．吸取菌液的移液管需要干熱滅菌避免雜菌污染C．將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃D．稀釋涂布平板法既能分離純化微生物，又能計數【答案】A【分析】稀釋涂布平板法：稀釋涂布平板法除了可以用于分離微生物外，也常用來統計樣品中活菌的數目。當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測樣品大約含有多少活菌。【詳解】A、將1mL樣品稀釋10倍，需加入9mL無菌水，A錯誤；B、吸取菌液的移液管需要干熱滅菌避免雜菌污染，B正確；C、將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃，將涂布器滅菌，C正確；D、稀釋涂布平板法既能分離純化微生物，又能計數，D正確。故選A。18．下列關于微生物培養的敘述，正確的是（

）A．配制培養基時，一般先調pH再滅菌B．培養微生物用到的接種環、培養皿、培養基等都用干熱滅菌法滅菌C．培養乳酸菌時，除了基本的碳源、氮源、水和無機鹽，還需要添加抗生素D．用平板劃線法和稀釋涂布平板法進行微生物的計數時，所得數據往往比實際數據偏小【答案】A【分析】1、實驗室常用的消毒和滅菌方法：（1）消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高溫的液體，如牛奶）、化學藥劑消毒法（如用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源等）、紫外線消毒法（接種室、操作臺）。（2）滅菌：灼燒滅菌（接種工具）、干熱滅菌（玻璃器皿、金屬用具）、高壓蒸汽滅菌（培養基及容器）。2、平板劃線法通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。3、稀釋涂布平板法則是菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。【詳解】A、配制培養基時，一般先調pH再滅菌，這樣可以避免在調pH時有雜菌污染培養基，A正確；B、培養微生物用到的接種環、培養皿可以用干熱滅菌法滅菌，培養基用高壓蒸汽滅菌法滅菌，B錯誤；C、培養乳酸菌時，不能添加抗生素，因為抗生素會殺死乳酸菌，C錯誤；D、因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故用稀釋涂布平板法進行微生物的計數時，所得數據往往比實際數據偏小，但用平板劃線法不能對微生物計數，D錯誤。故選A。19．下列與檢測亞硝酸鹽含量有關的敘述，正確的是（

）A．亞硝酸鹽與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合后形成玫瑰紅色染料B．標準顯色液和樣品處理液的配制過程、顯色方法基本相同C．比色時選擇顏色最相近的標準顯色液并記錄對應的亞硝酸鹽含量D．亞硝酸鹽含量計算方法是：【答案】D【分析】測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合后形成玫瑰紅色染料。將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準顯色液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。【詳解】A、在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合后形成玫瑰紅色染料，A錯誤；B、標準顯色液需要利用亞硝酸鈉溶液，樣品處理液則不需要，B錯誤；C、比色時，觀察樣品顏色變化，并與標準顯色液比較，找出與標準液最相近的顏色，記錄對應的亞硝酸鹽含量，按照亞硝酸鹽含量計算公式進行計算，C錯誤；D、亞硝酸鹽含量計算方法是：，D正確。故選D。20．下圖甲為果酒和果醋制作裝置，圖乙表示制作過程中的物質變化，有關敘述正確的是（

）A．制作果酒時應關閉閥b，適時打開閥a排氣B．制作果醋時需打開閥a通氣，打開閥b排氣C．過程①②都只能發生在缺氧的條件下D．過程①～④所需的最適溫度基本相同【答案】A【分析】根據題意和圖示分析可知：甲是發酵裝置，乙是果酒、果醋制作的實驗原理，①是葡萄糖酵解形成丙酮酸的階段，發生的場所是細胞質基質，②是酵母菌無氧呼吸的第二階段，發生的場所是細胞質基質，③是有氧呼吸的第二、第三階段，發生的場所是線粒體，④是醋酸菌發酵形成醋酸的過程。【詳解】A、甲裝置中，閥b控制進氣，閥a控制排氣，制作果酒時應關閉閥b以創造缺氧環境，適時打開閥a幾秒鐘以排出產生CO2，A正確；B、醋酸菌是好氧性細菌，需要持續通氧，但a是排氣口，b是進氣口，故應打開閥b通氣，打開閥a排氣，B錯誤；C、過程①為葡萄糖酵解形成丙酮酸的階段，發生的場所是細胞質基質，有氧和無氧條件下都會發生，C錯誤；D、過程①～③所需的最適溫度基本相同，為18-30℃，而過程④所需的最適溫度為30-35℃，D錯誤。故選A。非選擇題：本題共4個小題，共40分。21．（10分）苯酚是含酚工業廢水的主要成分，具有致癌、致畸和致突變作用。某污水處理廠檢測出要處理的廢水中含有較高濃度的苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員欲從淤泥中篩選出能高效降解苯酚的菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，回答下列問題：(1)培養基甲和乙營養成分相同，都要加入________作為唯一的碳源，甲中還加入了_______使其與乙物理性質不同；甲、乙兩種培養基按用途劃分均屬于選擇培養基，其機理是____________。(2)圖中振蕩培養可以使_____________。將C培養基中的菌液稀釋并涂布在平板上，所得的菌落數比活菌數目偏少，原因是________。(3)在統計菌落數目時，要選取菌落數目穩定時的記錄數據作為結果，這樣可防止_____________。(4)實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理后才能丟棄。原因是________。【答案】(1)

苯酚

瓊脂或凝固劑

該培養基允許苯酚分解菌的生長，同時會抑制或阻止其他種類微生物的生長(2)

使菌體與培養液、空氣充分接觸，利于菌體獲得更多的營養物質

兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落(3)培養時間不足而導致計數時遺漏部分菌落(4)為了避免微生物污染環境【分析】1.在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱為選擇培養基。雖然各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質）、氮源（提供氮元素的物質）和無機鹽。另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。例如，培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素，培養霉菌時需將培養基的pH調至酸性，培養細菌時需將pH調至中性或微堿性，培養厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。2.稀釋涂布平板法，（1）原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。（2）操作：①設置重復組，增強實驗的說服力與準確性；②為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數。（3）計算公式：每克樣品中的菌株數=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數。【詳解】（1）培養基甲的作用是通過選擇作用初步獲得能夠分解苯酚的菌株，培養基乙的作用是進一步的純化培養，故培養基甲和乙營養成分相同，都要加入苯酚作為唯一的碳源，甲中還加入了瓊脂或凝固劑使其與乙物理性質不同；甲、乙兩種培養基按用途劃分，均屬于選擇培養基，因為在該培養基上只有分解苯酚的微生物能生長，其他微生物的生長被抑制。（2）圖中振蕩培養的目的是使菌體與培養液、空氣充分接觸，利于菌體獲得更多的營養物質，以達到擴大培養的目的。因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所得菌落數比活菌數目偏少，因此，統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示。（3）在統計菌落數目時，一定要選取菌落數目穩定時的記錄數據作為結果，這樣可以避免培養時間不足而導致計數時遺漏部分菌落，從而導致實驗數據不準確。（4）實驗結束后，使用過的培養基需要進行滅菌處理后才能丟棄，這樣可避免培養的菌種污染環境。22．（12分）釀酒酵母菌性能的優劣會影響所釀葡萄酒的口感、風味和產量。篩選優質釀酒酵母菌、提高葡萄酒的質量，是葡萄酒工業發展的重點。回答下列問題：(1)參與蘋果酒發酵的酶主要位于酵母菌細胞的__________中。傳統發酵中，發酵液雖然未經過嚴格的滅菌處理，但雜菌卻不能正常生長繁殖，這是由于___________________。(2)葡萄汁裝入發酵瓶要留________，這種做法的目的是_____________________（出兩點即可）。(3)實驗用的培養皿常用的滅菌方法是___________；為了避免滅菌后器皿被污染，滅菌前應該___________，為了從土壤中篩選出酵母菌，培養基中添加了青霉素，目的是___________。(4)研究發現，經葡萄里面的糖分自然發酵而成的酒精，含量一般在10%~13%為最佳，發酵時的溫度和時間會影響果酒發酵產生的酒精的含量。為了找到適合生產的最佳發酵溫度和時間。請設計出探究的思路：___________________________。【答案】(1)

細胞質基質

果酒發酵液缺氧呈酸性的條件抑制了雜菌的生長(2)

1/3的空間

為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發酵旺盛時發酵液溢出(3)

干熱滅菌

用牛皮紙包扎器皿

抑制細菌生長(4)設置不同的溫度，分別在不同的發酵時間測定發酵液中酒精的含量，酒精含量最快達到10%-13%的溫度和相應時間為最佳【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。【詳解】（1）酵母菌是真核生物，其無氧呼吸產生酒精的場所是細胞質基質，因此參與蘋果酒發酵的酶主要位于酵母菌細胞的細胞質基質；隨著發酵液pH值會逐漸降低，會使發酵液變酸，這種缺氧、酸性條件能抑制雜菌的生長。（2）酵母菌為兼性厭氧型生物，適當進行有氧呼吸能使其大量繁殖。酵母菌無氧發酵過程中能產生二氧化碳，導致體積改變，故留出1/3的空間可以為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，也能防止發酵旺盛時發酵液溢出。（3）培養皿等玻璃器皿常進行干熱滅菌；將培養皿放入滅菌鍋之前通常用牛皮紙或報紙包扎，避免滅菌后的再次污染；青霉素是抗生素，可以抑制細菌生長，有助于酵母菌的生長，因此為了從土壤中篩選出酵母菌，培養基中常添加青霉素。（4）實驗目的是為了找到適合的最佳發酵溫度和時間，故溫度和時間是自變量，需設置不同的溫度，分別在不同的發酵時間測定酒精含量，酒精含量最快達到10%~13%的溫度和相應時間為最佳。23．（9分）下