DB51DB51/T2166—2016微生物檢測領域培養基和試劑驗證指南2016-05-18發布2016-10-01實施四川省質量技術監督局發布I 1 1 1 3 4 7 9 1DB51/T2158實驗室服務和供應品注2：傾注到平皿內的固體培養基一般稱之為“平板”；倒入試管并擺放注：運輸培養基中通常不允許包含使微生物增殖的物質，但是培養基應能保護菌株。典型的運輸培養基如緩沖甘2選擇性增菌培養基selectiveenric非選擇性增菌培養基non-selectiveenri鑒別培養基(特異性培養基)differentia3通常用于培養基性能測試的微生物。注：國家標準中提到的培養基通常可以直接使用。但因其中一些培養基成分(4.2.2實驗室應按批量的不同，選擇適量的培養基在適當條件下培養，檢測其微生物污染。通44.2.3生長特性要求包括生長率、選擇性、生化特性。實驗室應根據培養基或試劑的用途，選4.2.4對不含指示劑和選擇劑的培養基，通常只需采用測試菌株進行生長率測試；對含有選擇劑的培注1：采用定量方法時，應使用參考培養基進行對照；采用半定量和定性方法時，使用參考培養基或能得到“陽性”結果的培養基進行對照有助于結果的解釋。參考培養基應選擇近期批次中質量良好的培養基或是來自其他供注2：試菌株具有其代表種的穩定特性，是能有效證明實驗室特定培養基最佳性能的一套菌株。測試菌株主要購置于標準菌種保藏中心，也可以是實驗室自己分離的具有良好特性的菌株。測試菌株的來源應盡量與檢測對象注3：測試菌株通常需要采用組合菌株進行驗證，如具典型反應特性的生長良好的陽性菌株；弱陽性菌株（對培養基中選擇劑等試劑敏感性強的菌株）；不具有該特性的陰性菌株；部分或完全受抑制的菌株，使用這四類菌通常要加入18mL～20mL瓊脂培養基），冷卻至47℃~50℃后添加試劑。傾注后將平板放c)選擇合適稀釋度的工作菌懸液0.1mL，均勻涂布接種于待測注：參比培養基的選擇，一般細菌采用TSA，一般霉菌和酵母采用沙氏葡萄糖瓊脂，對營養有特殊要求的微生物采5e)要求目標菌在培養基上應呈現典型的生長形態。對于非選擇性固體培養基、選擇性計數固體培養基上目標菌的生長率應不小于0.7；選擇性分離固體培養基上目標菌的生長率一般不小于5.2.2保藏培養基、運輸培養基和d)剩余已接種菌液的待測培養基置20℃~25℃放置45min后，再吸取1mL傾注平板，每管b)將測試菌株接種到非選擇性肉湯培養過夜或采用其他6f)對于選擇性增菌培養基，劃線接種后，目標菌在選擇性平板上的菌落應>10CFU。無選擇性的液體培養基和選擇性計數液體培養基，濁度值應為2,且有目標菌的生長特征。如乳糖膽鹽培養基，產氣應為1/3或以上。當實驗室采用商品化即用型固體培養基，以及使用新批次的商品化脫水合成培養基時，可采用半定量測試方法，按下列程序進行評價：a)按照5.1.1.a)的要求制備與保存平板。b)將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯培養過夜，此為工作菌懸液。按0.5cm的間隔劃4條平行線，再在D區域內劃一條連續的曲線。可在培養皿下面放一個模板圖，以便于準確劃線。按同樣的方法同時接種兩個平板，按檢測方法規定的培養條件培養。菌落生長，則此劃線的G值記為1;如果劃線上僅一半有稠密菌落生長，則G值為0.5;如果劃線上沒有菌落生長，或生長量少于劃線的一半，或菌落生長微弱，則G值為0。在培養皿上G值為10。d)目標菌在培養基上應呈現典型的生長，且目標菌的生長指數G大于或等于6時，培養基可接受。本方法通常作為液體培養基的補充測試。當實驗室使用商品化即用型液體培養基，以及使用新批次的商品化脫水合成培養基時，可采用本方法進行測試。5.4.2增菌培養基7注：有時可以觀察到微生物生長后聚集成細胞團，沉積在試管或瓶子底部5.4.3保藏培養基、運輸培養基和剩余已接種菌液的待測培養基置于20℃~25℃環境中8圖2非目標菌半定量劃線法接種模式圖d)培養后計算培養基的生長指數G。劃線上有比較稠密菌落生長，則此劃線的G值為1。培養皿上有6條線，故G值最多為6。如果劃線上僅一半有稠密菌落生長，則G值為0.5。如果劃線上沒有菌落生長，或生長量少于劃線的一半，或菌落生長微弱，則G值為0。記錄每個平板的得分總和便得到G值。e)非目標菌的生長指數G值一般小于或等于1,最多不大于5。6.2.2液體培養基按下列程序測試液體培養基的選擇性：將培養基分裝試管，每管10mL。按5.2.1b)的要求制備工作菌懸液。在裝有待測培養基的試管中接種1000CFU~5000CFU非目標菌，接種量為1mL,同時接種兩個平行管，混勻。同時將1mL菌懸液(比試管接種小10~100倍稀釋度)傾注平板，接種兩個平板，作接種量計數用。按檢測方法中規定的培養時間和溫度進行培養。吸取10μL經培養后的非目標菌培養液，均勻涂布接種到非選擇性平板(如TSA)上。同時每管接種一個平板。可使用傾注法進行接種，并按標準規定的培養條件培養平板。該步驟僅針對選擇性增菌液體培養基。對平板進行目標菌計數或目測培養液濁度值。非目標菌在非選擇性平板上的菌落數應<100CFU或非目標菌的濁度值應為0或1且無產氣等現象。6.3定性方法6.3.1本方法可作為液體培養基的補充測試。當實驗室使用商品化即用型液體培養基或采用新批次商品化脫水合成培養基產品時，可采用本方法進行測試。6.3.2培養基的制備將培養基分裝試管，每管10mL。本步驟不適用于商品化即用培養基。6.3.3工作菌懸液的制備按照5.3.1b)的要求進行。6.3.4接種按照5.3.1c)的要求進行。6.3.5結果觀察目測其濁度值：0表示無混濁；1表示很輕微的混濁；2表示嚴重的混濁。6.3.6結果解釋非目標菌的濁度值應為0或1。選擇性液體計數培養基還應無產氣現象。97.2.2.1平板的制備與保存,按照5.2.1a)的要求進行。本步驟不7.3.1.2工作菌懸液的制備,將標準儲備菌株接種注1：高層斜面培養基，取新鮮質控菌株斜面，用接種針挑取菌苔穿刺接注2：斜面培養基，取新鮮質控菌株斜面，用接種環挑取菌苔在斜面上劃“之將純度滿意的質控菌株培養物懸浮于TSB肉湯中，并調整濁度為0.5麥氏標準（約1×108CFU％～取干凈玻片，在玻片上劃出2個約1cm×2cm的區域，用接種環挑取1環測試菌株，各放1/2在無反射黑色背景下，觀察有無凝集現象。任何程度的凝集現象皆為陽性反應.大腸埃希氏菌Escherichiacoli單核細胞增生李斯特氏菌Listeri福氏志賀氏菌Shigellaflexne痢疾志賀氏菌Shigelladysenteriae小腸結腸炎耶爾森氏菌Yersiniaente宋內志賀氏菌Shigellasonnei弗氏檸阪崎腸桿菌Enterobactersakazakii嬰兒雙產氣腸桿菌Enterobacteraerogenes德氏乳桿菌保加利亞亞種Lactobacillusdelbrueckii肺炎克雷伯氏菌Klebsiellapneumoniae糞產堿桿菌Alcaligene傷寒沙門氏菌Salmonellatyphi植物乳桿菌Lactobacillus鼠傷寒沙門氏菌Salmonellatyphimur腸炎沙門氏菌Salmonellaen金黃色葡萄球菌Staphylococ表皮葡萄球菌Staphylococcusepidermidis艱難梭菌Clostridium嗜熱鏈球菌Streptococcusthermophilus釀酒酵母Sac胰蛋白胨大豆瓊脂固體非選擇性分離生長率36℃±1℃24h±2h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7—糞腸球菌ATCC29212 MC培養基固體非選擇性計數生長率36℃±1℃48h±2h嗜熱鏈球菌IFFI6038MC培養基定量PR≥0.7中等偏小，邊緣光滑的紅色菌落，可有淡淡的暈MRS培養基固體非選擇性計數生長率36℃±1℃48h±2h德氏乳桿菌保加利亞亞種CICC6032MRS培養基定量PR≥0.7無色不透明嗜熱鏈球菌IFFI6038無色不透明嬰兒雙歧桿菌CICC6069(厭氧培養）圓形，中等大小，邊緣整齊，瓷3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA)固體非選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h副溶血性弧菌ATCC178023%氯化鈉TSA定量PR≥0.7無色半透明菌落創傷弧菌落ATCC27562營養瓊脂固體非選擇性分離生長率36℃±1℃24h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7 金黃色葡萄球菌ATCC6538枯草芽胞桿菌ATCC6633含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂（TSA-YE)固體非選擇性分離生長率30℃±1℃24h～48h單核細胞增生李斯特氏菌ATCC19115TSA定量PR≥0.7 平板計數瓊脂固體非選擇性計數生長率36℃±1℃48h±2h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7—金黃色葡萄球菌ATCC6538枯草芽胞桿菌ATCC6633亞硫酸鉍瓊脂固體選擇性分離生長率36℃±1℃40h～48h傷寒沙門氏菌CMCC(B)50071TSA定量PR≥0.5黑色菌落，有金屬光澤鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028黑色或灰綠色菌落，有金屬光澤選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922—半定量G≤1—糞腸球菌ATCC29212HE瓊脂固體選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028TSA定量PR≥0.5綠-藍色菌落，有黑心福氏志賀氏菌CMCC(B)51572綠-藍色菌落選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922 半定量G＜5橙紅色菌落，可有膽酸沉淀糞腸球菌ATCC29212G≤1 木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂（XLD)固體選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028TSA定量PR≥0.5黑色菌落福氏志賀氏菌CMCC(B)51572無色菌落，無黑心選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922—半定量G＜5黃色菌落金黃色葡萄球菌ATCC6538G≤1—沙門氏菌顯色培養基固體選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028TSA定量PR≥0.5按說明書判定特異性大腸埃希氏菌ATCC25922—定性—按說明書判定奇異變形桿菌CMCC(B)49005—按說明書判定選擇性糞腸球菌ATCC29212半定量G≤1PALCAM瓊脂固體選擇性分離生長率36℃±1℃24h～48h單核細胞增生李斯特氏菌ATCC19115TSA定量PR≥0.5灰綠色菌落，中心凹陷黑色，周圍有黑色選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922—半定量G≤1—糞腸球菌ATCC29212麥康凱瓊脂(MAC)固體選擇性分離生長率36℃±1℃20h～24h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.5鮮桃紅色或粉紅色，可有膽酸沉淀福氏志賀氏菌CMCC(B)51572無色至淺粉紅色，半透明棕色或綠色菌落選擇性金黃色葡萄球菌ATCC6538—半定量G≤1—類阪崎腸桿菌顯色培養基固體選擇性分離特異性36℃±1℃24h±2h阪崎腸桿菌ATCC29544TSA定量PR≥0.5按說明書判定特異性普通變形桿菌CMCC(B)49027—定性 按說明書判定大腸埃希氏菌ATCC25922—按說明書判定選擇性糞腸球菌ATCC29212半定量G≤1 CIN-I培養基固體選擇性分離生長率26℃±1℃48h±2h小腸結腸炎耶爾森氏菌CMCC(B)52204TSA定量PR≥0.5紅色牛眼狀菌落特異性大腸埃希氏菌ATCC25922-定性-圓形、粉紅色菌，邊緣有膽汁沉淀環選擇性金黃色葡萄球菌ATCC6538半定量G≤1-改良Y培養基固體選擇性分離生長率26℃±1℃48h±2h小腸結腸炎耶爾森氏菌CMCC(B)52204TSA定量PR≥0.5無色透明不粘稠菌落特異性大腸埃希氏菌ATCC25922-定性-粉紅色菌落選擇性金黃色葡萄球菌ATCC6538半定量G≤1-伊紅美藍瓊脂（EMB)固體選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.5黑色菌落，具金屬光澤特異性鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028-定性-菌落呈無色，半透明選擇性金黃色葡萄球菌ATCC6538-半定量G＜5-改良山梨醇麥康凱瓊脂（CT-SMAC)固體選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h大腸埃希氏菌O157：H7NCTC12900TSA定量PR≥0.5無色菌落特異性大腸埃希氏菌ATCC25922-定性-粉紅色菌落，周圍有膽鹽沉淀選擇性金黃色葡萄球菌ATCC6538半定量G≤1-類O157顯色培養基固體選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h大腸埃希氏菌O157：H7NCTC12900TSA定量PR≥0.5按說明書判定特異性大腸埃希氏菌ATCC25922-定性-按說明書判定選擇性糞腸球菌ATCC29212半定量G≤1-奇異變型桿菌CMCC(B)49005-半定量G≤1-李斯特氏菌顯色培養基固體選擇性分離生長率36℃±1℃24h～48h單核細胞增生李斯特氏菌ATCC19115TSA定量PR≥0.5藍綠色菌落，帶白色暈環特異性英諾克李斯特氏菌ATCC33090-定性-藍綠色菌落，無白色暈環選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922半定量G≤1-糞腸球菌ATCC29212志賀氏菌顯色培養基固體選擇性分離生長率36℃±1℃20h～24h福氏志賀氏菌CMCC(B)51572TSA定量PR≥0.5白色，突起，無色素沉淀圈痢疾志賀氏菌CMCC(B)51105白色，突起，有清晰環，無色素沉淀圈特異性大腸埃希氏菌ATCC25922-定性-黃色，有清晰環，無色素沉淀圈產氣腸桿菌ATCC13048綠色菌落，無環和沉淀圈選擇性金黃色葡萄球菌ATCC6538半定量G≤1-改良CCD(mCCD)瓊脂固體選擇性分離生長率42℃±1℃24h～48h微需氧空腸彎曲菌ATCC33291無抗生素的CCD定量PR≥0.5菌落有光澤、潮濕、扁平，呈擴散生長傾向選擇性42℃±1℃24h～48h大腸埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-金黃色葡萄球菌ATCC6538Skirrow瓊脂固體選擇性分離生長率42℃±1℃24h～48h微需氧空腸彎曲菌ATCC33291無抗生素的CCD定量PR≥0.5菌落灰色、扁平、濕潤有光澤，呈沿接種線向外擴散傾向選擇性42℃±1℃24h～48h大腸埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-金黃色葡萄球菌ATCC6538改良纖維二糖-多粘菌素B-多粘菌素E(mCPC)瓊脂固體選擇性分離生長率39.5℃±0.5℃或36℃±1℃18h～24h創傷弧菌ATCC275623%氯化鈉TSA定量PR≥0.1圓型扁平，中心不透明，邊緣透明的黃色菌落特異性霍亂弧菌VBO-定性-紫色菌落選擇性副溶血性弧菌ATCC17802半定量G≤1-纖維二糖－多粘菌素E(CC)瓊脂固體選擇性分離生長率39℃~40℃或36℃±1℃18h～24h創傷弧菌ATCC275623%氯化鈉TSA定量PR≥0.5圓型扁平，中心不透明，邊緣透明的黃色菌落特異性霍亂弧菌VbO-定性-紫色菌落選擇性副溶血性弧菌ATCC17802半定量G≤1-硫代硫酸鈉-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂（TCBS）固體選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h副溶血性弧菌ATCC178023%氯化鈉TSA定量PR≥0.2綠色菌落選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-弧菌顯色培養基固體選擇性分離生長率36℃±1℃18h～24h副溶血性弧菌ATCC178023%氯化鈉TSA定量PR≥0.5按說明書判定特異性霍亂弧菌VbO-定性-按說明書判定溶藻弧菌ATCC33787按說明書判定選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-類Baird-Parker固體選擇性計數生長率36℃±1℃18h～24h或45h~48h金黃色葡萄球菌ATCC25923TSA定量PR≥0.7菌落黑色凸起，周圍有一混濁帶，在其外層有一透明圈特異性表皮葡萄球菌CMCC(B)26069-定性-黑色菌落，無混濁帶和透明圈選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）固體選擇性計數生長率36℃±1℃18h～24h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7有或無沉淀環的紫紅色或紅色菌落弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864選擇性糞腸球菌ATCC29212-半定量G＜5-VRB-MUG瓊脂固體選擇性計數生長率36℃±1℃18h～24h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7帶有沉淀環的紫紅色或紅色菌落，有熒光特異性弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864-定性-可帶有沉淀環的紅色菌落，無熒光選擇性糞腸球菌ATCC29212半定量G＜5-馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）固體選擇性計數生長率28℃±1℃5d釀酒酵母ATCC9763沙氏葡萄糖瓊脂定量PR≥0.7奶油色菌落黑曲霉ATCC16404白色菌絲，黑色孢子選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-金黃色葡萄球菌ATCC6538孟加紅培養基固體選擇性計數生長率28℃±1℃5d釀酒酵母ATCC9763沙氏葡萄糖瓊脂定量PR≥0.7奶油色菌落黑曲霉ATCC16404白色菌絲，黑色孢子選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-金黃色葡萄球菌ATCC6538莫匹羅星鋰鹽（Li-Mupirocin）改良MRS培養基固體選擇性計數生長率36℃±1℃48h±2h厭氧培養嬰兒雙岐桿菌CICC6069MRS培養基定量PR≥0.7圓形凸起，邊緣整齊，無色不透明選擇性德氏乳桿菌保加利亞亞種CICC6032-半定量G≤1-嗜熱鏈球菌IFFI6038甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂（MYP）固體選擇性計數生長率30℃±2℃24h～48h蠟樣芽胞桿菌CMCC(B)63303TSA定量PR≥0.7菌落為微粉紅色，周圍有淡粉紅色沉淀環特異性枯草芽胞桿菌ATCC6633-定性-黃色菌落，無沉淀環選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922半定量G≤1-胰胨-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂(TSC)固體選擇性計數生長率36℃±1℃20h～24h厭氧培養產氣莢膜梭菌ATCC13124TSA定量PR≥0.7黑色菌落選擇性艱難梭菌ATCC43593-半定量G≤1-含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉湯（TSB-YE）液體非選擇性增菌生長率30℃±1℃24h～48h單核細胞增生李斯特氏菌ATCC19115TSA半定量混濁度2液體硫乙醇酸鹽培養基（FTG）液體非選擇性增菌生長率36℃±1℃18h～24h產氣莢膜梭菌ATCC13124哥倫比亞瓊脂半定量混濁度2緩沖蛋白胨水（BP）液體非選擇性增菌生長率36℃±1℃8h鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028TSA半定量取10μL增菌液傾注TSA平板36℃±1℃培養18h～24h，在TSA上＞100CFU腦心浸出液肉湯（BHI）液體非選擇性增菌生長率36℃±1℃18h～24h金黃色葡萄球菌ATCC6538TSA半定量混濁度2布氏肉湯液體非選擇性增菌生長率42℃±1℃48h±2h微需氧空腸彎曲菌ATCC33291無抗生素的CCD半定量混濁度1～2標李氏增菌肉湯（LB1,LB2)液體選擇性增菌生長率30℃±1℃24h單核細胞增生李斯特氏菌ATCC19115+大腸埃希氏菌ATCC25922+糞腸球菌ATCC29212TSA半定量（LB2目標菌接種量為300CFU~500CFU）在PALCAM上>10CFU，培養基變黑灰色至黑色菌落帶有黑色暈環選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-糞腸球菌ATCC29212Bolton肉湯液體選擇性增菌生長率42℃±1℃24h～48h微需氧培養空腸彎曲菌ATCC33291+金黃色葡萄球菌ATCC6538+大腸埃希氏菌ATCC25922無抗生素的CCD半定量空腸彎曲菌在改良CCD平板上＞10CFU菌落呈灰白色選擇性金黃色葡萄球菌ATCC6538TSA在TSA上<100CFU-大腸埃希氏菌ATCC25922四硫磺酸鈉煌綠增菌液（TTB）液體選擇性增菌生長率42℃±1℃18h～24h鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028+大腸埃希氏菌ATCC25922+銅綠假單胞菌ATCC27853TSA半定量在XLD上＞10CFU菌落無色半透明，有黑心選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-糞腸球菌ATCC29212亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC）液體選擇性增菌生長率36℃±1℃18h～24h鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028+大腸埃希氏菌ATCC25922+銅綠假單胞菌ATCC27853TSA半定量在XLD上＞10CFU菌落無色半透明，有黑心選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-糞腸球菌ATCC2921210%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯液體選擇性增菌生長率36℃±1℃18h～24h金黃色葡萄球菌ATCC6538+大腸埃希氏菌ATCC25922TSA半定量在Baird-Parker上＞10CFU菌落黑色凸起，周圍有一混濁帶，在其外層有一透明圈選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-7.5%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯液體選擇性增菌生長率36℃±1℃18h～24h金黃色葡萄球菌ATCC6538+大腸埃希氏菌ATCC25922TSA半定量在Baird-Parker上＞10CFU菌落黑色凸起，周圍有一混濁帶，在其外層有一透明圈選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-改良磷酸鹽緩沖液液體選擇性增菌生長率26℃±1℃48h～72h小腸結腸炎耶爾森氏菌CMCC(B)52204+糞腸球菌ATCC29212+銅綠假單胞菌ATCC27853TSA半定量在改良Y平板上>10CFU菌落圓形、無色透明，不粘稠選擇性金黃色葡萄球菌ATCC6538在TSA上<100CFU-糞腸球菌ATCC29212改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬古霉素液體選擇性增菌生長率44℃±0.5℃24h±2h阪崎腸桿菌ATCC29544+大腸埃希氏菌ATCC25922+糞腸球菌ATCC29212TSA半定量在阪崎腸桿菌顯色培養基上＞10CFU綠－藍色菌落或按說明書判定選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-糞腸球菌ATCC29212胰酪胨大豆多粘菌素肉湯液體選擇性增菌生長率30℃±1℃24h～48h蠟樣芽胞桿菌CMCC(B)63303+大腸埃希氏菌ATCC25922TSA半定量在MYP上＞10CFU菌落為微粉紅色，周圍有淡粉紅色沉淀環選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-志賀氏菌增菌肉湯（Shigellabroth）液體選擇性增菌生長率41.5℃±0.5℃18h±2h厭氧培養福氏志賀氏菌CMCC（B）51572+金黃色葡萄球菌ATCC6538金黃色葡萄球菌ATCC6538TSA半定量在XLD上＞10CFU無色至粉紅色，半透明菌落選擇性在TSA上<100CFU標基GN增菌液液體選擇性增菌生長率36℃±1℃8h福氏志賀氏菌CMCC（B）51572+糞腸球菌ATCC29212TSA半定量在HE瓊脂上＞10CFU菌落呈綠－藍色選擇性糞腸球菌ATCC29212在TSA上<100CFU-3%氯化鈉堿性蛋白胨水液體選擇性增菌生長率36℃±1℃8h副溶血性弧菌ATCC17802+大腸埃希氏菌ATCC259223%TSA半定量在弧菌顯色培養基平板上＞10CFU品紅色菌落或按說明書判定選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922TSA在TSA上<100CFU-改良EC肉湯（mEC+n）液體選擇性增菌生長率36℃±1℃18h～24h大腸桿菌O157：H7NCTC12900+糞腸球菌ATCC29212TSA半定量在CT-SMAC上＞10CFU菌落無色，中心灰褐色選擇性糞腸球菌ATCC29212在TSA上<100CFU-改良麥康凱（CT-MAC）肉湯液體選擇性增菌生長率36℃±1℃17h～19h大腸桿菌O157：H7NCTC12900+大腸埃希氏菌ATCC25922+金黃色葡萄球菌ATCC6538TSA半定量在CT-SMAC上＞10CFU菌落無色，中心灰褐色選擇性大腸埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-金黃色葡萄球菌ATCC6538月桂基磺酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST）液體選擇性液體計數生長率36℃±1℃24h～48h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA半定量混濁度2，且氣體充滿管內1/3弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864選擇性糞腸球菌ATCC29212混濁度0（不生長）煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）液體選擇性液體計數生長率36℃±1℃24h～48h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA半定量混濁度2，且氣體充滿管內1/3弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864選擇性糞腸球菌ATCC29212混濁度0（不生長）或渾濁度1（微弱生長）不產氣EC肉湯液體選擇性液體計數生長率44.5℃±0.2℃24h～48h大腸埃希氏菌ATCC25922TSA半定量混濁度2，且氣體充滿管內1/3選擇性糞腸球菌ATCC29212混濁度0（不生長）磷酸鹽緩沖液（PBS）液體懸浮培養基生長率20℃~25℃45min大腸埃希氏菌ATCC25922TSA定量接種前后菌落數變化在±50%金黃色葡萄球菌ATCC65383%氯化鈉溶液液體懸浮培養基生長率20℃~25℃45min副溶血性弧菌ATCC178023%TSA定量接種前后菌落數變化在±50%0.1%蛋白胨水液體懸浮培養基生長率20℃~25℃45min產氣莢膜梭菌ATCC13124哥倫比亞瓊脂定量接種前后菌落數變化在±50%緩沖甘油-氯化鈉溶液液體運輸培養基生長率-60℃24h產氣莢膜梭菌ATCC13124哥倫比亞瓊脂定量接種前后菌落數變化在±50%MuellerHinton血瓊脂固體藥敏試驗培養基生化特性36℃±1℃22h±2h微需氧培養空腸彎曲菌ATCC33291定性頭孢唑啉鈉紙片無抑菌圈，萘啶酮酸紙片有抑菌圈三糖鐵瓊脂（TSI）高層斜面鑒定生化特性36℃±1℃24h大腸埃希氏菌ATCC25922定性生長良好，A/A；產氣；不產硫化氫腸炎沙門氏菌CMCC(B)50335生長良好，K/A；產氣；產硫化氫福氏志賀氏菌CMCC(B)51572生長良好，K/A；不產氣；不產硫化氫銅綠假單胞菌ATCC27853生長良好，K/K；不產氣；不產硫化氫西蒙氏檸檬酸鹽培養基斜面鑒定生化特性36℃±1℃24h±2h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性生長良好，培養基變藍宋內志賀氏菌CMCC(B)51592生長不良或不長，培養基不變色尿素瓊脂(pH7.2)斜面鑒定生化特性36℃±1℃24h普通變形桿菌CMCC(B)49027定性生長良好，培養基變桃紅色大腸埃希氏菌ATCC25922生長良好，培養基變黃色醋酸鹽利用試驗斜面鑒定生化特性36℃±1℃24h～48h大腸埃希氏菌ATCC25922定性陽性，培養基變藍色宋內志賀氏菌CMCC(B)51592陰性，培養基不變色（綠色）3%氯化鈉三糖鐵瓊脂（TSI）高層斜面鑒定生化特性36℃±1℃18h～24h副溶血性弧菌ATCC17802定性生長良好，斜面變紅，底部變黃溶藻弧菌ATCC33787生長良好，斜面或底部均變黃改良克氏雙糖高層斜面鑒定生化特性26℃±1℃24h小腸結腸炎耶爾森氏菌CMCC(B)52204定性生長良好，A/A；不產氣；不產硫化氫鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028生長良好，A/A；產氣；產硫化氫福氏志賀氏菌CMCC(B)51572生長良好，K/A；不產氣；不產硫化氫糞產堿桿菌CMCC(B)40001生長良好，K/K；不產氣；不產硫化氫鄰硝基酚β-D半乳糖苷培養基（ONPG）液體鑒定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌CMCC(B)46117定性陽性，培養基變深黃色傷寒沙門氏菌CMCC（B）50071陰性，培養基無色或淺黃色蛋白胨水（靛基質試驗）液體鑒定實驗試劑生化特性36℃±1℃18h～24h大腸埃希氏菌ATCC25922定性陽性，滴加靛基質試劑，顯紅色產氣腸桿菌ATCC13048陰性，滴加靛基質試劑，黃色氰化鉀培養基（KCN）液體鑒定生化特性36℃±1℃24h普通變形桿菌CMCC(B)49027定性生長良好，培養基混濁傷寒沙門氏菌CMCC（B）50071不生長，澄清氰化鉀對照培養基（KCN）液體鑒定生化特性36℃±1℃24h普通變形桿菌CMCC(B)49027定性生長良好，培養基混濁傷寒沙門氏菌CMCC（B）50071生長良好，培養基混濁葡萄糖銨培養基斜面鑒定生化特性36℃±1℃20h～24h鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028定性生長良好，培養基變黃福氏志賀氏菌CMCC(B)51572不生長，培養基不變色緩沖葡萄糖蛋白胨水（甲基紅(MR)和V-P試驗）液體鑒定實驗試劑生化特性36℃±1℃48h大腸埃希氏菌ATCC25922定性生長良好，滴加MR試劑1滴，培養基變紅。滴加VP甲液0.5mL和乙液0.2mL，20min內液面不顯紅色產氣腸桿菌ATCC13048生長良好，滴加MR試劑1滴，培養基變紅。滴加P甲液0.5mL和乙液0.2mL，20min內液面顯紅色鼠李糖發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h±2h單核細胞增生李斯特氏菌ATCC19115定性陽性，培養基變黃傷寒沙門氏菌CMCC（B）50071陰性，培養基顏色不變0.5%蔗糖發酵管0.5%纖維二糖發酵管0.5%麥芽糖發酵管0.5%甘露醇發酵管0.5%水楊苷發酵管0.5%山梨醇發酵管0.5%棉子糖發酵管七葉苷發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h植物乳桿菌GIM1.140定性陽性，培養基變黃德氏乳桿菌保加利亞亞種CICC6032陰性，培養基紫色不變L-賴氨酸脫羧酶培養基液體鑒定生化特性36℃±1℃24h±2h以滅菌液體石蠟覆蓋培養基表面鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028定性陽性，培養基呈紫色普通變形桿菌CMCC(B)49027陰性，培養基呈黃色L-鳥氨酸脫羧酶培養基液體鑒定生化特性36℃±1℃24h±2h以滅菌液體石蠟覆蓋培養基表面鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028定性陽性，培養基呈紫色普通變形桿菌CMCC(B)49027陰性，培養基呈黃色氨基酸脫羧酶對照液體鑒定生化特性36℃±1℃24h±2h以滅菌液體石蠟覆蓋培養基表面與各種氨基酸脫羧酶的陽性和陰性質控菌株對應定性生長良好，培養基呈黃色L-精氨酸雙水解酶培養基液體鑒定生化特性36℃±1℃24h±2h以滅菌液體石蠟覆蓋培養基表面鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028定性陽性，培養基呈黃色普通變形桿菌CMCC(B)49027陰性，培養基呈黃色精氨酸雙水解酶對照液體鑒定生化特性36℃±1℃24h±2h以滅菌液體石蠟覆蓋培養基表面鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028定性生長良好，培養基呈黃色硝酸鹽肉湯液體鑒定生化特性30℃±1℃24h～48h蠟樣芽胞桿菌CMCC(B)63303定性陽性，滴加硝酸鹽還原試劑甲、乙液各2～3滴，培養基變紅棕色硝酸鹽陰性不動桿菌CMCC(B)25001陰性，滴加硝酸鹽還原試劑甲、乙液各2～3滴，培養基不變色葡萄糖發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h大腸埃希氏菌ATCC25922定性陽性，培養基變黃糞產堿桿菌CMCC(B)40001陰性，培養基不變色甘露醇發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h大腸埃希氏菌ATCC25922定性陽性，培養基變黃色普通變形桿菌CMCC(B)49027陰性，培養基顏色不變木糖發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性陽性，培養基變黃色單核細胞增生李斯特氏菌ATCC19115陰性，培養基顏色不變蔗糖發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h普通變形桿菌CMCC(B)49027定性陽性，培養基呈黃色鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028陰性，培養基顏色不變纖維二糖發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性陽性，培養基呈黃色大腸埃希氏菌ATCC25922陰性，培養基顏色不變麥芽糖發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h傷寒沙門氏菌CMCC（B）50071定性陽性，培養基呈黃色銅綠假單胞菌ATCC9027陰性，培養基顏色不變水楊苷發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性陽性，培養基變黃傷寒沙門氏菌CMCC（B）50071陰性，培養基不變色山梨醇發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性陽性，培養基變黃色宋內志賀氏菌CMCC(B)51592陰性，培養基顏色不變棉籽糖液體鑒定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性陽性，培養基呈黃色普通變形桿菌CMCC(B)49027陰性，培養基顏色不變粘液酸利用試驗液體鑒定生化特性36℃±1℃24h～48h大腸埃希氏菌ATCC25922定性陽性，培養基呈黃色福氏志賀氏菌CMCC(B)51572陰性，培養基顏色不變含鐵牛乳培養基液體鑒定生化特性46℃±0.5℃2h與5h均觀察產氣莢膜梭菌ATCC13124定性（接種生長旺盛的FT培養液1mL）暴烈發酵大腸埃希氏菌ATCC25922不發酵無鹽胨水液體鑒定生化特性36℃±1℃24h霍亂弧菌VbO定性生長良好，混濁副溶血性弧菌ATCC17802不生長，澄清3%氯化鈉胨水液體鑒定生化特性36℃±1℃24h副溶血性弧菌ATCC17802定性生長良好，混濁創傷弧菌ATCC27562生長良好，混濁6%氯化鈉胨水液體鑒定生化特性36℃±1℃24h副溶血性弧菌ATCC17802定性生長良好，混濁嗜水氣單胞菌As1.172不生長，澄清8%氯化鈉胨水液體鑒定生化特性36℃±1℃24h副溶血性弧菌ATCC17802定性生長良好，混濁創傷弧菌ATCC27562不生長，澄清10%氯化鈉胨水液體鑒定生化特性36℃±1℃24h溶藻弧菌ATCC33787定性生長良好，混濁副溶血性弧菌ATCC17802不生長，澄清3.0%氯化鈉甘露醇液體鑒定生化特性36℃±1℃24h～48h副溶血性弧菌ATCC17802定性陽性，培養基呈黃色普通變形桿菌CMCC(B)49027陰性，培養基顏色不變3.0%氯化鈉賴氨酸脫羧酶液體鑒定生化特性36℃±1℃24h～48h以滅菌液體石蠟覆蓋培養基表面副溶血性弧菌ATCC17802定性陽性，培養基變紫色普通變形桿菌CMCC(B)49027陰性，培養基變黃色3.0%氯化鈉氨基酸脫羧酶對照液體鑒定生化特性36℃±1℃24h～48h副溶血性弧菌ATCC17802定性生長良好，培養基變黃色普通變形桿菌CMCC(B)49027生長良好，培養基變黃色七葉苷發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性陽性，培養基變棕黑色奇異變形桿菌CMCC(B)49005陰性，培養基顏色不變3.0%氯化鈉MR-VP培養基液體鑒定生化特性36℃±1℃48h產氣腸桿菌ATCC13048定性MR試驗陰性，滴加MR試劑1滴培養基呈黃色副溶血性弧菌ATCC17802MR試驗陽性，滴加MR試劑1滴培養基V-P試驗陰性，滴加0.6mL甲液及0.2mL乙液，培養基不變色溶藻弧菌ATCC33787V-P試驗陽性，滴加0.6mL甲液及0.2mL乙液，培養基呈紅色乳糖發酵管液體鑒定生化特性36℃±1℃24h大腸埃希氏菌ATCC25922定性陽性，培養基變黃色傷寒沙門氏菌CMCC（B）50071陰性，培養基顏色不變Koser氏檸檬酸鹽肉湯液體鑒定生化特性36℃±1℃18h～96h弗氏