ICS71.100.40

CCSY42

GAIA

廣東省分析測試協會團體標準

T/XXXXXXX—XXXX

化妝品原料月桂酰甘氨酸（鹽）含量測定

高效液相色譜法

DeterminationofLaurylGlycine(Glycinate)inRawMaterialsforCosmeticUse

byHighPerformanceLiquidChromatography

（征求意見稿）

在提交反饋意見時，請將您知道的相關專利連同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX發布XXXX-XX-XX實施

廣東省分析測試協會發布

T/XXXXXXX—XXXX

化妝品原料月桂酰甘氨酸（鹽）含量測定

高效液相色譜法

1范圍

本標準規定了采用高效液相色譜法測定化妝品用原料中月桂酰甘氨酸（鹽）含量的方法。

本標準適用于月桂酰甘氨酸（鹽）和椰油酰甘氨酸（鹽）化妝品用原料產品。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析試驗室用水規格和試驗方法

GB/T6679-2003固體化工產品采樣通則

GB/T6680-2003液體化工產品采樣通則

GB/T16631-2008高效液相色譜法通則

GB/T8170數值修約規則與極限數值的表示和判定

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義。

4產品結構式

月桂酰甘氨酸（鹽）的化學結構通式為：

分子通式:C14H26NO3M;M為H，Na或K

5產品分類

月桂酰甘氨酸（鹽）表面活性劑按照產品形態分為液體產品和固體產品兩類。

6取樣

固體樣品按照GB/T6679-2003的要求執行。液體樣品按照GB/T6679-2003的要求執行。

7方法原理

原料樣品用乙腈-水混合溶液超聲振蕩溶解，過濾后注入高效液相色譜儀進行分離，采用紫外檢測

器檢測，通過比較樣品與標準樣品的保留時間來識別月桂酰甘氨酸，并用外標法進行定量。

8儀器和材料

a)分析天平：精度0.0001g；

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b)高效液相色譜儀：配有梯度洗脫系統和紫外檢測器或二極管陣列檢測器；

c)真空脫氣裝置或類似設備：用于流動相脫氣及過濾；

d)有機微孔濾膜：0.45μm，用于過濾流動相，標準樣品及樣品溶液；

e)超聲波振蕩儀；

f)容量瓶：100mL，10mL；

g)移液管：10mL；

h)燒杯：150ml。

9試劑

a)水：GB/T6682所規定的一級水；

b)乙腈：色譜純；

c)磷酸：色譜純；

d)乙腈-水混合溶液：乙腈：水（0.1%H3PO4）=6:4（體積分數），用于溶解樣品和標準樣品；

e)月桂酰甘氨酸標準樣品：質量分數≥98%。

10試驗方法

樣品的制備

準確稱取試樣（固體樣品量0.1±0.02g，液體樣品量0.25±0.02g，精確至0.0001g），加入適量乙

腈-水混合溶液于燒杯中溶解，超聲振蕩10分鐘，轉移至100mL容量瓶中定容，搖勻，0.45μm有機濾膜

過濾，即得測試溶液。

標準曲線的繪制

準確稱取0.08g（精確至0.0001g）月桂酰甘氨酸標準樣品，加入適量乙腈-水混合溶液于燒杯中溶

解，超聲振蕩10分鐘，轉移至100mL容量瓶中定容，搖勻，0.45μm有機濾膜過濾，得到濃度為800mg/L

標準樣品溶液，分別量取1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL濾液到10mL容量瓶中，用乙腈-水混合溶液

定容，得到濃度分別為80，160，320，480，640，800mg/L的系列標準溶液。系列標準溶液注入高效液

相色譜儀測試，以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

月桂酰甘氨酸的測定

10.3.1色譜條件

優化儀器工作條件，使測試樣品和標準品中各組分得到滿意的色譜分離，以下色譜條件供參考：

a)色譜柱：建議使用雙封端的C18色譜柱（150mm×4.6mm，5μm）或等效色譜柱。色譜柱的新舊

程度和使用情況、填料填裝狀態以及溫度會影響各組分的分離。

b)流動相：A相：1mL磷酸溶于1L純水中；B相：乙腈；

c)檢測器：紫外檢測器或二極管陣列檢測器；

d)檢測波長：205nm；

e)參比波長：360nm；

f)流速：1mL/min；

g)柱溫：35℃；

h)進樣量：10μL；

10.3.2梯度洗脫程序

建議的洗脫程序見表1，可根據色譜柱規格型號進行調整。

表1梯度洗脫程序

時間/min流動相A(%)流動相B(%)

0.04060

2.04060

8.0595

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時間/min流動相A(%)流動相B(%)

10.0595

11.04060

15.04060

10.3.3儀器測定

調整儀器色譜條件參數，使用至少20倍柱體積流動相平衡色譜柱，紫外檢測器預熱至少15min，待

液相色譜系統基線穩定后，分別注入10μL標準溶液和樣品溶液，作多點校準，通過比較試樣和標準溶

液中月桂酰甘氨酸的保留時間進行定性。

按外標法以色譜峰面積定量。在標準曲線范圍內，峰面積與濃度呈線性關系，要求線性相關系數在

0.999以上。若濃度超出標準曲線的上限，可通過稀釋的方式使濃度落在標準曲線范圍內。

結果計算

固體或液體原料產品中的月桂酰甘氨酸含量或月桂酰甘氨酸鹽含量（X）以質量分數（%）表示，按

式（1）計算:

?×V×10?3?

?=××100%·················································(1)

?257.37

式中：

C—未知樣品中月桂酰甘氨酸的濃度，單位為毫克每升（mg/L）；

V—進樣量（μL）；

m—試樣的質量，單位為g；

M—月桂酰甘氨酸或月桂酰甘氨酸鹽的相對分子質量，單位為克/摩爾（g/mol)，其中月桂酰甘氨酸

為257.37，月桂酰甘氨酸鈉為279.35，月桂酰甘氨酸鉀為295.46。

測定結果以兩次平行測定結果的算術平均值表示,保留至小數點后1位。

精密度

10.5.1重復性

在重復性條件下獲得的兩次獨立測試結果之差不超過平均值的1.5%。

10.5.2再現性

對同一個樣品，在兩個不同的實驗室中，所得結果之差不超過平均值的3%。

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A

A

附錄A

（資料性）

高效液相色譜圖

月桂酰甘氨酸

圖A.1月桂酰甘氨酸標準品液相色譜圖

月桂酰甘氨酸