2024-2025學年湖南省古丈縣一中高三3月統一考試（一模）生物試題考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內，不得在試卷上作任何標記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔。考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．對下列四幅圖的敘述，錯誤的是（）A．圖1中c＋d階段可以表示一個細胞周期B．圖2中的溫度為b時酶分子結構受到破壞，活性喪失C．圖3中引起bc段和de段的變化因素都是C3化合物含量下降D．圖4中造成cd段下降的原因在有絲分裂和減數分裂中相同2．科學家對某人工魚塘生態系統的能量流動進行了定量分析，得出了下圖數據（數值代表能量值，單位為：J/cm2·a）。下列相關分析正確的是（）A．該生態系統營養結構簡單，只有一條食物鏈B．植食魚類與肉食魚類之間的能量傳遞效率約為1．3%C．肉食魚類通過側線感知水流完成取食說明化學信息能調節種間關系以維持生態系統的穩定D．人類活動不利于維持該系統內部結構與功能的協調3．下圖為某突觸的結構示意圖，下列相關敘述錯誤的是（）A．該突觸一定存在于兩個神經元之間B．乙酰膽堿與突觸后膜上的受體結合后，突觸后膜不一定會產生動作電位C．每個突觸小泡中含有幾萬個乙酰膽堿分子D．突觸后膜上的乙酰膽堿受體會影響通道蛋白4．在一個水族箱中生活著兩種原生動物，它們之間用一屏障隔開，經過一段時間的養殖后，兩個種群的數量都達到最大值。這時將屏障撤掉。兩個種群的數量變化曲線如圖所示，下列分析錯誤的是（）A．種群B捕食種群AB．該圖表示在后期水族箱中資源和其他條件較穩定C．若環境發生劇烈改變，最終可能種群B存在，種群A不存在D．若一直保留屏障，則種群A的數量變化曲線符合“S型”增長5．用光學顯微鏡觀察洋蔥根尖分生組織，下列敘述錯誤的是（）A．能觀察到部分細胞的染色體出現聯會現象 B．能觀察到部分細胞的染色體形態比較清晰C．能觀察到部分細胞的兩極各有一套染色體 D．能觀察到部分細胞中有兩個成形的細胞核6．如圖表示在錐形瓶中用不同方式培養酵母菌時的種群增長曲線。圖中曲線⑤是對照組，其余曲線代表每3h、12h、24h換一次培養液及不換培養液但保持pH恒定，4種不同情況下酵母菌種群增長曲線。下列敘述不正確的是（）A．①②③分別代表每3h、12h、24h換一次培養液的種群增長曲線B．在保持培養液的更換頻率不變的情況下，曲線①將保持“J”型增長C．造成曲線⑤K值較小的原因可能是代謝產物的積累、pH變化、溶解氧不足等D．若用血細胞計數板統計細胞數量，不能直接從靜置的培養瓶中取出培養原液進行計數7．下列有關酶和ATP的說法，正確的是（）A．合成ATP一定需要酶，酶促反應一定消耗ATPB．ATP的某種水解產物可以作為合成某些酶的原料C．細胞呼吸中釋放的能量大部分轉化并儲存于ATP中D．用淀粉溶液、蔗糖溶液及淀粉酶驗證酶的專一性，可用碘液檢測8．（10分）下列關于激素、酶和神經遞質的敘述，正確的是（）A．激素和酶一經靶細胞接受并起作用后就被滅活了B．激素和神經遞質都可以作為信息分子調節生命活動C．激素和酶都是蛋白質，能產生酶的細胞一定能產生激素D．酶和神經遞質都能降低化學反應活化能，因此具有高效性二、非選擇題9．（10分）胚胎干細胞的分離、培養體系的研究是當前生命科學的熱門課題之一。下圖表示分離小鼠胚胎干細胞的簡要過程，請回答下列問題。（1）從妊娠3?5天的雌鼠輸卵管中沖出胚胎的實驗操作，叫做_________。此時期，之所以能沖出胚胎，是因為早期胚胎是_________。（2）上圖所示的胚胎是_________，分離的胚胎干細胞來源于結構_________（填“①”或“②”）。分離胚胎干細胞群后應用_________處理，以分散細胞。（3）圖中加入的細胞A是_________，加入的藥劑B是_________。（4）胚胎干細胞應用廣泛，因為其具有_________，即能分化成成體動物的各種組織細胞。10．（14分）圓褐固氮菌能將大氣中的氮氣轉化為氨，是異養需氧型的原核生物。某同學利用稀釋涂布平板法從土壤中分離獲得圓褐固氮菌。回答下列問題。（1）圓褐固氮菌與硝化細菌在同化作用過程上的最主要區別在于圓褐園氮菌_____。培養圓褐固氮菌時不能隔絕空氣，其原因是__________(答出兩點)。（2）稀釋涂布平板法常用來統計樣品中活菌的數目，分離不同的微生物需要不同的稀釋倍數，原因是_______________________________________________。（3）工作者將三個接種了等量同樣稀釋倍數培養液的培養基置于37°C的恒溫箱中培養。24h后觀察到三個平板上的菌落數目分別為19、197、215，該結果出現的可能原因是__________________。為獲得更科學的三個平板上的數據，請提出解決方案：________________________。（4）若用固定化酶技術固定圓褐固氮菌產生的固氮酶，和一般酶制劑相比，其優點是_________，且利于產物的純化；固定化目的菌細胞常用______法固定化。11．（14分）真核生物基因中通常含有內含子，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內含子對應的RNA序列的機制。下圖表示從基因文庫提取胰島素基因的過程。回答下列問題：（1）從基因結構分析，與基因組文庫中的基因相比，cDNA文庫中獲得的目的基因少了________等結構（至少寫兩個）。基因文庫中cDNA文庫與基因組文庫相比，前者較小，原因是______。（2）將獲得的胰島素基因導入受體菌內，并在受體菌內維持穩定和表達的過程，在基因工程中稱為______。（3）過程⑤需將纖維素膜上的細菌裂解，釋放出__________，再用32P標記的__________作為探針進行雜交。依據雜交結果，應選取培養基上____（填字母）菌落繼續培養，才能獲得含有胰島素基因的受體菌。（4）經過目的基因的檢測和表達，從大腸桿菌中獲得的“胰島素”未能達到期待的生物活性，導致這種差異的原因可能是__________。（5）與從基因組文庫獲取目的基因相比，圖示方法獲得的目的基因在受體菌中更容易表達，原因是_____。12．2019年6月17日，新華社發布《屠呦呦團隊放“大招”：“青蒿素抗藥性”等研究獲新突破》，屠呦呦團隊近期提出應對“青蒿素抗藥性”難題的切實可行治療方案，并在“青蒿素治療紅斑狼瘡等適應癥”方面取得新進展。某課題組為得到青蒿素產量高的新品系，讓青蒿素合成過程的某一關鍵酶基因fps在野生青蒿素中過量表達，其過程圖如下：回答下列問題：（1）圖中酶1是____________，酶2分別是____________。利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90-95℃，目的是破壞了DNA分子中的______鍵。在構建重組Ti質粒的過程中，需將目的基因插入到Ti質粒的____________中。（2）檢驗目的基因是否整合到青蒿素基因組，可以將放射性同位素標記的________________做成分子探針與青蒿素基因組DNA雜交。理論上，與野生型相比，該探針與轉基因青蒿素DNA形成的雜交帶的量_________（填較多或較少）。（3）據圖分析，農桿菌的作用是____________________________________。判斷該課題組的研究目的是否達到，必須檢測轉基因青蒿素植株中的________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

根據題意和圖示分析可知：圖1中c表示分裂間期，b和d表示分裂期；圖2表示溫度對酶活性的影響，低溫時酶活性降低，不會失活，高溫時，酶會變性失活；圖3中bc段是由于氣溫高，蒸騰作用強，氣孔關閉，二氧化碳吸收量下降，導致C3化合物合成的速率下降，de段是光照強度下降導致光合速率下降，C3化合物的還原減少，導致C3化合物積累；圖4中造成cd段下降的原因1條染色體的2條姐妹染色單體分離。【詳解】A、細胞周期是指從一次分裂完成時開始到下一次分裂完成時為止，圖1中c表示分裂間期，d表示分裂期，c＋d階段可以表示一個細胞周期，A正確；B、高溫時酶的空間結構被破壞，活性喪失，B正確；C、圖3中bc段是由于氣溫高，蒸騰作用強，氣孔關閉，二氧化碳吸收量下降，C3的生成速率減小，短時間內C3的還原速率不變，所以C3化合物的含量下降，de段是光照強度下降導致光反應速率下降，ATP和還原氫生成減少，C3化合物的還原速率降低，短時間內C3的生成速率不變，所以C3化合物含量增加，C錯誤；D、圖4中cd段下降的原因是著絲點分裂導致1條染色體的2條姐妹染色單體分離，在有絲分裂和減數分裂中形成原因相同，D正確。故選C。本題結合圖解，考查酶、有絲分裂、光合作用等知識，要求考生識記影響酶活性的因素，掌握相關曲線圖；識記有絲分裂不同時期的特點；識記掌握光合速率的因素，能結合曲線圖準確判斷各選項。2、B【解析】

分析題圖：肉食性動物同化的能量（5.1+2.1+0.05）×103kJ/m2?y=7.25×103kJ/m2?y，而能量來源是有機物輸入5和植食性動物，則來源于植食性動物的能量為2.25×103kJ/m2?y，植食性動物同化的能量（9+4+0.5+2.25）×103kJ/m2?y=15.75×103kJ/m2?y，而能量來源是有機物輸入2和生產者，則來源于植食性動物的能量為13.75×103kJ/m2?y，生產者同化的能量（70+23+3+13.75）×103kJ/m2?y=1.975×105kJ/m2?y。【詳解】A、該生態系統中生產者的種類有多種，故該生態系統的食物鏈不止一條，A錯誤；

B、由以上分析可知：植食魚類同化的能量為（9+4+0.5+2.25）×103kJ/m2?y=15.75×103kJ/m2?y，肉食魚類來源于植食性動物的能量為2.25×103kJ/m2?y，故兩者之間的能量傳遞效率為2.25×103÷15.75×103=1.3%，B正確；

C、肉食魚類通過側線感知水流完成取食說明物理信息能調節種間關系以維持生態系統的穩定，C錯誤；

D、人類可以通過向生態系統投入有機物，故人類活動有利于維持該系統內部結構與功能的協調，D錯誤。

故選B。能量的來源：①生產者的能量主要來自太陽能②其余各營養級的能量來自上一營養級所同化的能量；能量去路：①自身呼吸消耗；②流向下一營養級；③殘體、糞便等被分解者分解；④未被利用；消費者同化能量=呼吸消耗+分解者分解利用+下一營養級同化+未被利用。3、A【解析】

據圖分析，圖示為突觸的結構示意圖，由突觸前膜、突觸間隙和突觸后膜組成，突觸前膜的突觸小泡中含有神經遞質；神經遞質只能由突觸前膜釋放到突觸間隙并作用于突觸后膜，引起突觸后膜興奮后抑制，因此興奮在神經元之間的傳遞具有單向性；興奮在突觸處的傳導過程的信號轉換方式是：電信號→化學信號→電信號。【詳解】A、在反射弧中，神經元與肌肉細胞或腺體細胞之間也存在突觸，A錯誤；B、乙酰膽堿分子必須達到一定的結合數量才能使得突觸后膜產生動作電位，B正確；C、每個突觸小泡中含有幾萬個乙酰膽堿分子，C正確；D、乙酰膽堿與突觸后膜上的受體結合后，會引起鈉離子通道打開，鈉離子內流，進而產生動作電位，D正確。故選A。4、A【解析】

種間關系包括互利共生、捕食、競爭、寄生，其中互利共生的兩種生物的數量變化是同步的；捕食關系中，兩種生物的數量變化不同步，先增加者先減少，后增加者后減少，即一種生物的數量隨另一種生物的數量變化而變化；競爭關系中，兩者的數量呈同步性變化。據此答題。【詳解】A、據圖兩者數量變化可判斷兩者為捕食關系，其中種群A捕食種群B，A錯誤；B、該圖后期兩者數量變化趨于穩定，可判斷后期水族箱中資源和其他條件較穩定，B正確；C、若環境發生劇烈改變，最終可能被捕食者B存在，捕食者A不存在，C正確；D、據題干分析可知，若一直保留屏障，經過一段時間的養殖后，兩個種群的數量都達到最大值，則種群A的數量變化曲線符合“S型”增長，D正確。故選A。5、A【解析】

采用洋蔥根尖分生區細胞為實驗材料，目的是觀察植物細胞的有絲分裂過程，實驗需要制作臨時裝片，步驟為：解離（鹽酸和酒精混合液）→漂洗→染色（堿性染料，如龍膽紫或醋酸洋紅）→制片，其中經過解離步驟后，細胞已經死亡，因此該實驗中不會觀察到細胞有絲分裂的動態變化過程。【詳解】A、用洋蔥根尖制成裝片不能觀察到同源染色體聯會現象，因為洋蔥根尖分生區細胞進行有絲分裂，而同源染色體聯會現象發生在減數分裂，A錯誤；B、有絲分裂中期的細胞，染色體形態比較穩定，數目比較清晰，可以選擇分裂中期的細胞觀察染色體的形態和數目，B正確；C、處于有絲分裂后期的細胞，由于著絲粒分裂，姐妹染色單體分開成為染色體，在紡錘絲的牽引下兩條子染色體移向兩極，可以選擇有絲分裂后期的細胞觀察到兩極各有一套染色體，C正確；D、真核細胞有絲分裂末期，核膜、核仁重建，一個細胞中存在兩個細胞核，可以選擇有絲分裂末期的細胞，能觀察到細胞中有兩個成形的細胞核，D正確。故選A。本題考查觀察有絲分裂實驗，對于此類試題，需要考生掌握的細節較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗選取的材料、采用的試劑及試劑的作用、實驗現象及實驗結果等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。6、B【解析】

本題考查種群數量相關知識，意在考察考生對知識點的理解和對圖形分析能力。【詳解】A、培養液中有營養物質，更換時間短種群因為營養豐富而發生數量增長，分析圖可知①②③分別代表每3h、12h、24h換一次培養液的種群增長曲線，A正確；B、在保持培養液的更換頻率不變的情況下，曲線①不會呈“J”型增長，因為有空間的限制，B錯誤；C、造成曲線⑤K值較小的原因可能是代謝產物的積累、pH變化、溶解氧不足等，C正確；D、如果用血細胞計數板統計細胞數量，應搖勻后再取出培養液進行計數，D正確。故選B。K值變動的示意圖（1）同一種生物的K值不是固定不變的，會受到環境的影響。在環境不遭受破壞的情況下，K值會在平均值附近上下波動；當種群偏離平均值的時候，會通過負反饋調節機制使種群密度回到一定范圍內。（2）環境遭受破壞，K值會下降；當生物生存的環境改善，K值會上升。7、B【解析】

1、酶是由活細胞產生的一類具有生物催化作用的有機物，大多數是蛋白質，少數是RNA。2、ATP中文名叫三磷酸腺苷，結構式簡寫A-P~P~P，其中A表示腺苷，T表示三個，P表示磷酸基團，ATP水解掉兩個磷酸基團后形成AMP（腺嘌呤核糖核苷酸），AMP是RNA的基本組成單位之一。【詳解】A、合成ATP時需要酶（ATP合成酶）的參與，但酶促反應不一定消耗ATP，如消化道內蛋白質的水解，A錯誤；B、若ATP水解脫去2個磷酸基團可形成AMP（腺嘌呤核糖核苷酸），AMP是RNA的基本組成單位之一，而某些酶的化學本質是RNA，B正確；C、細胞呼吸中釋放的能量只有少部分轉化儲存在ATP中，大部分以熱能的形式散失了，C錯誤；D、蔗糖及其水解產物遇碘液均不發生顏色變化，無法判斷蔗糖是否被淀粉酶水解了，因此該實驗不能用碘液檢測，D錯誤。故選B。本題考查了酶和ATP的有關知識，要求掌握代謝過程中ATP和酶的生理作用，識記酶的化學本質，識記ATP的結構特點等，再結合所學知識準確判斷各項。8、B【解析】

酶和激素的區別和聯系：區別酶激素來源所有活細胞植物：一定部位的活細胞產生；動物：由內分泌腺細胞產生本質有機物，大多數酶是蛋白質，少量的酶屬于RNA有機物，如蛋白質、多肽、氨基酸的衍生物等生理作用催化功能調節功能作用范圍與特點在細胞內或分泌到細胞外催化特定的化學反應，具有功能的專一性通過體液運輸，作用于相應的靶器官，具有作用部位的特異性，但一種激素可以有多種功能作用條件受pH、溫度等因素的影響與神經系統密切聯系相同點微量，作用大，屬于高效能物質，聯系激素對新陳代謝具有調節作用，離不開酶的催化；激素可以激活酶的活性；酶和激素的合成與分泌在一定程度上相互影響。【詳解】A、激素一經靶細胞接受并起作用后就被滅活了，而酶作用后不被滅活，A錯誤；B、激素是體液中重要的信息分子，而神經遞質是興奮在細胞間傳遞的化學信號，二者都可以作為信息分子調節生命活動，B正確；C、激素和酶不都是蛋白質，能產生激素的細胞一定能產生酶，C錯誤；D、酶能降低化學反應活化能，而神經遞質能傳遞調節生命活動的信號，D錯誤。故選B。二、非選擇題9、沖卵游離的囊胚②胰蛋白酶（膠原蛋白酶）飼養層細胞牛磺酸（丁酰環腺苷酸）發育的全能性【解析】

1、干細胞分為全能干細胞（如胚胎干細胞）、多能干細胞（如造血干細胞）和專能干細胞。其中全能干細胞的全能性最高，可被誘導分化為多種細胞和組織；其次是多能干細胞，如造血干細胞可以分化形成各種細胞；最后是專能干細胞。細胞具有全能性，原因是細胞中含有該生物全套的遺傳物質。2、胚胎干細胞的主要用途是：（1）可用于研究哺乳動物個體發生和發育規律；（2）是在體外條件下研究細胞分化的理想材料。ES細胞在飼養層細胞上或在添加抑制因子的培養液中，能夠維持不分化的狀態。在培養液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段；（3）可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合癥、糖尿病、老年癡呆癥、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各種組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。3、胚胎發育過程：（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂，數量增加，胚胎總體積不增加；（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎；（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現囊胚腔；（4）原腸胚：內細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔。【詳解】（1）沖卵是指將供體雌性輸卵管或者子宮內的胚胎沖出來；沖卵的生理基礎是早期胚胎形成后，處于游離狀態，未與母體子宮建立組織上的聯系。（2）圖中所示胚胎為囊胚，此時細胞開始分化形成①滋養層細胞和②內細胞團細胞。其中個體較大的細胞叫內細胞團，將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現囊胚腔。內細胞團（②）和原始性腺中含有胚胎干細胞。動物細胞培養過程中，常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶消化組織細胞間的蛋白質，使動物細胞分散開來，以得到單個細胞進行培養。（3）胚胎干細胞具有發育的全能性，可被誘導分化為多種細胞和組織。一般在培養胚胎干細胞時可以采用胚胎成纖維細胞作為飼養層細胞來實現ES細胞分化。在培養液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向分化。所以圖中加入的細胞A是飼養層細胞，藥劑B是牛黃酸或丁酰環腺苷酸等。（4）胚胎干細胞的特點：在形態上表現為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發育的全能性，可分化為成年動物的各種組織。另外，在體外培養的條件下，可以增殖而不發生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。本題結合圖解，綜合考查細胞工程和胚胎工程等知識，要求考生識記動物細胞培養的條件，識記胚胎干細胞的特點和運用，結合所學知識答題。特別要區分“沖卵”、“排卵”、“滋養層”、“飼養層”幾組相近名稱的內涵，避免混淆。10、不能將CO2轉化為含碳有機物圓褐固氮菌為需氧型生物，且其需要空氣中的氮氣作為氮源(單位質量)土壤中不同種類的微生物數量不同涂布第一個平板時涂布器未冷卻就涂布平板重做實驗可重復利用；既能與反應物接觸，又能與產物分離包埋【解析】

稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特征設計的計數方法，即一個菌落代表一個單細胞。計數時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養基內。經培養后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統計菌落數目，即可計算出樣品中的含菌數。此法所計算的菌數是培養基上長出來的菌落數，故又稱活菌計數。一般用于某些成品檢定（如殺蟲菌劑等）、生物制品檢驗、土壤含菌量測定及食品、水源的污染程度的檢驗。【詳解】（1）硝化細菌屬于自養型細菌，可以利用化學反應放出的能量將CO2還原為糖類。圓褐固氮菌能將大氣中的氮氣轉化為氨，是異養需氧型的原核生物。圓褐固氮菌與硝化細菌在同化作用過程上的最主要區別在于圓褐園氮菌不能將CO2轉化為含碳有機物。培養圓褐固氮菌時不能隔絕空氣，其原因是圓褐固氮菌為需氧型生物，且其需要空氣中的氮氣作為氮源。（2）稀釋涂布平板法常用來統計樣品中活菌的數目，(單位質量)土壤中不同種類的微生物數量不同，因此分離不同的微生物需要不同的稀釋倍數。（3）三個平板上的菌落數目分別為19、197、215，19這個結果特別少偏離正常，該結果出現的可能原因是涂布第一個平板時涂布器未冷卻就涂布平板。因為含有19這個異常數據，為獲得更科學的三個平板上的數據，只能重做實驗。（4）固定化酶是將水溶性酶用物理或化學方法處理，使之成為不溶于水的，但仍具有酶活性的狀態的一種技術。一般酶制劑和產物混合在一起，難分離，且再次利用變得困難，固定化酶技術固定圓褐固氮菌產生的固氮酶，其優點是可重復利用；既能與反應物接觸，又能與產物分離，且利于產物的純化。目的菌體積較大，固定化目的菌細胞常用包埋法固定化。熟悉微生物的培養、固定化技術以及稀釋平板計數法是解答本題的關鍵。11、啟動子、終止子、內含子cDNA文庫是通過某種生物發育的某個時期mRNA反轉錄產生的，在這個時期并不是每個基因都進行轉錄，而基因組文庫包含該生物所有的基因轉化DNA目的基因（或胰島素基因）a受體菌中基因表達獲得的蛋白質未加工（或大腸桿菌中沒有內質網、高爾基體等細胞器，無法對核糖體合成的肽鏈進行有效的折疊、加工）cDNA中不含有內含子，轉錄出的RNA不需要經過加工，可直接作為合成蛋白質的模板【解析】

1.基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2.分析題圖：①表示逆轉錄過程，需要逆轉錄酶的催化；②表示基因表達載體的構建過程；③表示將目的基因導入受體細胞；④表示將細菌轉移到纖維素膜上；⑤表示目的基因的檢測。【詳解】（1）cDNA是以mRNA為模板逆轉錄形成的，由于基因中的啟動子、內含子、終止子等結構不表達，因此與基因組文庫中的基因相比，cDNA文庫中獲得的目的基因少了啟動子、終止子、內含子

等結構。基因文庫中cDNA文庫是通過某種生物發育的某個時期mRNA反轉錄產生的，在這個時期并不是每個基因都進行轉錄，而基因組文庫包含該生物所有的基因，因此基因文庫中cDNA文庫與基因組文庫相比較小。（2）將獲得的胰島素基因導入受體菌內，并在受體菌內維持穩定和表達的過程，在基因工程中稱為轉化。（3）過程⑤需將纖維素膜上的細菌裂解，釋放出細菌的DNA，再用32P標記的目的基因（胰島素基因）作為探針進行雜交。依據雜交結果中雜交帶出現的位置可知，應選取培養基上a落繼續培養，才能獲得含有胰島素基因的受體菌。（4）胰島素屬于分泌蛋白，其合成和分泌過程中需要內質網和高爾基體的加工，而大腸桿菌細胞屬于原核生物，細胞中沒有內質網和高爾基體，不能對其進行加工，因此經過目的基因的檢測和表達，從大腸桿菌中獲得的“胰島素”