期末復習達標試題一、單選題1．下列關于泡菜和酸奶制作的敘述正確的是（

）A．制作泡菜和酸奶時加入適量的糖會使發酵效果更好B．泡菜發酵的溫度略高于酸奶發酵的溫度C．泡菜食材和牛奶需要經過消毒再進行接種D．制作泡菜和酸奶的主要菌種分別為真核生物和原核生物2．藍莓果酒和藍莓果醋中含有大量的花青素、維生素和礦物質，具有提高視力、抗氧化、抗衰老和美容養顏等功能，深受人們的喜愛。下列有關藍莓果酒和果醋制作的敘述，錯誤的是（

）A．制作果酒和果醋利用的主要微生物分別是酵母菌和醋酸菌B．藍莓果酒發酵液可能使酸性重鉻酸鉀溶液由藍變綠再變黃C．對藍莓果醋的發酵液稀釋涂布，可檢測醋酸菌的種群數量D．在藍莓果酒發酵基礎上進行果醋制作，需改變溫度和通氣性3．發酵工程包括菌種的選育、擴大培養等多個環節。下列關于發酵工程的說法，錯誤的是（

）A．在菌種選育的過程中，可以利用人工誘變等手段B．在利用發酵工程生產青霉素的過程中仍然需要嚴格滅菌C．發酵過程要隨時檢測培養液中的微生物數量等，但不需要再添加營養成分D．發酵工程的產品可以采用過濾、沉淀或其他適當方法提取4．土壤中分解尿素的細菌的分離和計數過程如圖，相關敘述不正確的是（

）

A．需要配制以尿素為唯一氮源的培養基，從功能上來說這屬于選擇培養基B．5號試管的結果表明每克土壤中的活菌的菌株數為1.7×108個C．除了用稀釋涂布平板法對尿素分解菌計數外，還可以用顯微鏡直接計數D．若培養高效分解尿素的細菌，可在固體培養基中額外添加酚紅進行篩選5．微生物菌種的性能是決定發酵產物品質的重要因素。如圖表示從土壤中篩選菌種的過程。下列敘述正確的是（

）

A．獲得目的菌純培養物的關鍵是防止雜菌污染，故應對土壤、培養基及用具進行滅菌B．若步驟④平板上的平均數量為16個，推測1g土壤中酵母菌數最多為1．6×106個C．除圖示方法外，還可用顯微鏡直接測定微生物數量，統計結果是活菌數D．微生物在瓊脂固體培養基表面或內部生長，可以形成肉眼可見的菌落6．飲用被細菌污染的水后，細菌在消化道內會第哨并產生毒素，引起急性腸胃炎。某同學利用下圖所示方法，穩測飲用水的細菌含量，以下敘述正確的是（）

A．為保證統計的菌落更加準確，同一稀釋度下需要培養三個培養皿B．三個培養量菌落數的平均值乘以103即為10mL樣品中的細菌數C．培養基的配制需考慮微生物的適宜PH，應在滅南后進行PH調整D．可用伊紅美藍對大腸桿菌進行鑒定，同時抑制雜菌的生長7．微生物產生的脲酶能分解尿素，在農業、食品加工業和污水處理中用途廣泛。例如在飲料酒的生產過程中會產生少量尿素，使酒體呈酸性，廠家常用脲酶分解酒體中的尿素以改善飲料酒的品質。下列敘述錯誤的是（）A．從土壤中篩選產脲酶菌時，所配制的培養基為選擇培養基B．利用稀釋涂布平板法準確估算菌落數目的關鍵是恰當的稀釋度C．統計產脲酶菌的數目時，對菌落數在30～300以內的平板進行計數D．脲酶可將酒體中的尿素分解成氨，從而使培養基的pH降低8．科研人員利用莖尖培育脫毒馬鈴薯，測得馬鈴薯莖尖外植體大小對幼苗的成苗率和脫毒率的影響如圖。下列敘述正確的是（

）

A．該實驗中設置了1個自變量和2個因變量B．培育脫毒苗的過程中需要制備原生質體C．根據本實驗可知，大規模生產脫毒苗時莖尖越小越好D．經培養獲得的脫毒苗具有較強的抗病毒的能力9．研究發現，生長素能夠維持擬南芥bZIP59蛋白的穩定性，并增強其與LBD形成復合物的能力，bZIP59LBD復合物可直接作用于FADBD基因，促進其轉錄，這有助于愈傷組織的形成。下列相關敘述錯誤的是（

）A．生長素通過調控植物細胞的基因表達來影響植物細胞全能性的表現B．脫分化期間一般不需要光照，再分化時需要光照誘導葉綠素產生C．雜菌污染會影響植物組織培養，因此需要對培養基和離體的植物組織進行消毒處理D．植物組織培養的培養基中不需要加入有機物10．無菌操作是植物組織培養獲得成功的關鍵，下列說法錯誤的是（

）①植物組織培養所利用的植物材料體積小、抗逆性差，對無菌操作的要求非常嚴格②培養基滅菌時采用的滅菌方法可以是高壓蒸汽滅菌③對培養材料進行表面消毒時，一方面要考慮藥劑的消毒效果，另一方面還要考慮植物材料的耐受能力④可用高壓蒸汽滅菌鍋對培養材料進行滅菌⑤如果不小心引起污染，可能會造成培養工作前功盡棄A．四項 B．三項 C．二項 D．一項11．如圖表示利用兩棲動物未受精的卵母細胞M和從蝌蚪N中提取的細胞核進行核移植，并培養為成蛙X的實驗過程。據圖分析，下列敘述正確的是（

）

A．成蛙X的性狀主要由細胞M遺傳物質決定，也受蝌蚪N遺傳物質的影響B．重組的蛙細胞相當于蛙的受精卵，通過細胞分裂和細胞分化形成組織和器官C．圖中重組蛙細胞進行培養時，一般要置于95%O2和5%CO2的混合氣體培養箱中D．該實驗過程采用了動物體細胞核移植技術、動物細胞融合技術及動物細胞培養技術12．某科研機構，致力于研究亞洲的一種珍稀的貓科動物的繁育問題，經過長期研究與實踐，取得了突破性進展，可以通過胚胎工程技術，讓家貓代孕而繁育，主要步驟如圖所示，下列相關敘述正確的是（）

A．代孕的家貓會對移植的胚胎產生免疫排斥所以移植前要給家貓服用免疫抑制劑B．早期胚胎需要培養至原腸胚期才能移植至家貓子宮C．在受精階段如果透明帶和卵細胞膜未及時發生相應的生理反應將會產生雙胞胎或多胞胎D．剛收集到的卵子和精子不能直接用于受精13．科研人員從小鼠的皮膚細胞中提取出干細胞，并將這些干細胞重新編程為原始態的胚胎干細胞（ESCs）。通過表達相關基因，將ESCs分化成為原始內胚層細胞和滋養層干細胞，并混合胚胎干細胞，將這三種細胞按照一定比例置入培養基培育3天，構建出胚胎模型，然后將其置于“人造機械子宮”中進行培養。這個小鼠的“合成胚胎”與自然胚胎非常相似，擁有一顆跳動的“心臟”、胎盤、卵黃囊，以及形成中的血管組織等，最終這個“合成胚胎”在存活了8天后死亡。下列說法正確的是（

）A．ESCs分化成原始內胚層細胞和滋養層干細胞的過程不受基因控制B．“合成胚胎”具有與自然胚胎具有相同的結構和功能C．“人造機械子宮”應為無菌、無毒并添加有血清的液體環境D．早期胚胎培養技術為將來合成器官組織用于移植和治療疾病提供了新途徑14．我國科研人員利用小鼠獲得了單倍體胚胎干細胞，流程如下圖所示。目前構建成功的單倍體胚胎干細胞，其細胞核內包含的性染色體全部都是X染色體，而無包含Y染色體的細胞。已知小鼠Y染色體比X染色體短小。下列敘述錯誤的是（

）A．精子頭部入卵后，透明帶迅速發生生理反應拒絕其它精子進入透明帶B．為得到只含精子染色體的胚胎干細胞需在核融合前剔除卵子的雌原核C．由圖可知，單倍體胚胎干細胞來自小鼠囊胚期的內細胞團細胞D．Y染色體比X染色體短小，可能缺少支持單倍體胚胎干細胞存活的基因15．據報道，我國科學家利用誘導性多能干細胞（iPS細胞）首次培育成功存活且具繁殖能力的小鼠。下列關于細胞工程和胚胎工程的敘述中正確的是（

）A．利用植物細胞培養可以獲得紫杉醇、核糖核酸等次生代謝物B．動物細胞培養時都要用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等方法處理，使細胞懸浮在培養液中生長C．iPS細胞可以分化成各種組織和器官甚至是完整的生物個體D．用含肝素或Ca2+載體A23187的專用獲能液處理精子，使其獲得能量，參與受精作用16．從目標生物提取分離DNA是進行基因工程操作的基礎。下列關于“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是（

）A．豬血可以作為“DNA的粗提取和鑒定”的實驗材料B．若以新鮮洋蔥為實驗材料，則研磨液過濾后保留沉淀C．實驗過程中加入預冷酒精溶液的作用是純化DNAD．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后呈紫色17．用XhoⅠ和SalⅠ兩種限制性核酸內切酶分別處理圖1DNA片段，酶切位點及酶切產物分離結果如圖1、圖2．以下敘述錯誤的是（）

A．圖1中兩種酶識別的核苷酸序列不同B．圖2中泳道②的酶切產物說明該限制酶斷開了4個磷酸二酯鍵C．若用兩種限制酶同時切割該DNA，在泳道中將出現7條帶D．泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產物18．科學家卡彭蒂耶和杜德納因利用CRISPR/Cas9系統編輯生物的基因組DNA而被授予諾貝爾化學獎。該技術需要向細胞中加入人工合成的引導RNA和一種來自細菌的Cas9蛋白，工作原理如圖所示。下列相關敘述錯誤的是（

）

A．Cas9是一種能使磷酸二酯鍵發生斷裂的蛋白質分子B．細菌可憑借細胞中的CRISPR/Cas9抵抗噬菌體入侵C．在引導RNA中存在著AT、GC堿基互補配對方式D．人為改變引導RNA的序列可改變Cas9的切割部位19．野生果蠅為正常翅，卷翅為突變性狀。用PCR技術獲取野生型及突變型果蠅的相關控制基因并進行電泳，結果如圖甲。分析卷翅果蠅互交后代的早期胚胎及成蟲的基因組成，結果如圖乙。下列分析錯誤的是（

）

A．基因A相對于基因B為顯性基因B．基因B可能源自基因A中插入了DNA片段C．基因組成為BB的個體可能在胚胎期致死D．卷翅果蠅的互交后代中卷翅果蠅占2/320．某科研小組的PCR產物鑒定結果如圖所示：1號泳道為標準（Marker），2號泳道為陽性對照（提純的目的基因片段），3號泳道為實驗組。標準（Marker）的實質為不同已知長度的DNA片段混合物，3號泳道的雜帶出現的原因不可能是（）A．模板受到污染B．引物的特異性不強C．退火溫度偏低D．退火溫度偏高二、非選擇題21．楊梅果實風味獨特，酸甜適中，具有很高的營養價值。下列是制作楊梅酒和楊梅醋的流程。制備發酵液（向楊梅汁中加入白砂糖，將糖的質量分數調至8%）→滅菌→酒精發酵（接種酵母菌）→果醋發酵（接種醋酸菌）→取樣檢測（對發酵產物進行檢測）(1)傳統果酒發酵中，發酵液雖然未經過嚴格的滅菌處理，但雜菌卻不能正常生長繁殖，這是由于果酒發酵罐中的等條件抑制了雜菌的生長。(2)果酒制作過程中，酵母菌無氧呼吸產生酒精的場所是，該階段應該將溫度控制在，溫度適宜時果酒發酵時間較短，原因是。(3)本題楊梅醋的發酵過程中，除了向發酵液中加入必需的營養物質外，還需要往發酵液中持續地通入，發酵的反應簡式是。除了題述方法外，還可利用楊梅汁和白砂糖直接制作果醋，其理論依據是，對應的反應簡式為。(4)如圖表示果酒發酵過程中，發酵液的糖度（葡萄糖的質量分數）和酒精度（酒精的體積分數）隨時間變化的關系。發酵前24h，酒精度上升很慢，其原因是。96h后酒精度和糖度的變化都趨于平緩，其原因是。22．對生活垃圾進行分類處理，是提高垃圾的資源價值和改善生活環境的重要措施。垃圾主要分為可回收物、廚余垃圾、有害垃圾和其他垃圾四類。廚余垃圾中淀粉、脂肪、纖維素、蛋白質含量較高，利用微生物發酵技術將廚余垃圾變成綠色有機肥，可有效實現廚余垃圾無害化和資源化處理。研究人員擬篩選出能高效降解這些有機物的菌株，用以處理廚余垃圾，部分流程如下圖：

(1)從常年堆放廚余垃圾的場所取樣，溶解在適量無菌水中，振蕩搖勻使菌體分散開后，將菌液進行梯度稀釋，接種。根據X培養基上菌落的生長情況，推測該接種方法是。(2)在篩選產淀粉酶的菌株時首先將稀釋的微生物樣品接種在以淀粉為唯一碳源的培養基上，目的是。(3)培養、加入碘液后，部分菌落周圍出現透明圈，圖中能最高效降解淀粉的細菌是（填編號）。經檢測③菌落為硝化細菌，③菌落能在此培養基上生長但沒有形成透明圈的原因是。(4)為進一步從常年堆放廚余垃圾的場所取樣獲得的菌液中，篩選出能同時降解脂肪、纖維素兩種成分的微生物，某同學進行了相關實驗，請簡要寫出實驗思路：。23．如圖是制備分泌抗X(H1N1流感病毒)抗體的過程，根據圖解回答問題：(1)給小鼠注射抗原的目的是。(2)在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，是因為它們融合后的雜交瘤細胞具有的特性。(3)由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運用了和的動物細胞工程技術手段。(4)動物細胞培養液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等，與植物細胞培養基有所不同的是還含有。(5)在動物細胞融合過程中，需要將所選取的組織細胞分散開，以利于細胞融合，可用處理離體組織細胞使之分散。(6)圖中有兩次篩選過程，其中步驟④的目的是篩選出，步驟⑤⑥的目的是篩選出。(7)請根據以下信息，設計一方法(不考慮機械方法)，從培養液中篩選出雜交瘤細胞。已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管只有D途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，加入聚乙二醇促融，獲得雜種細胞。方法：。原理：。24．在體細胞克隆猴培育過程中，為提高胚胎的發育率和妊娠率，研究人員將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構胚，同時用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）處理，具體培育流程如圖所示。請回答下列問題：

(1)圖中選用胎猴而非成年期猴的體細胞，原因是。從母猴卵巢采集的卵母細胞需在體外培養至MⅡ期，再通過法進行去核操作。在重組細胞培養的過程中，需要創造的氣體環境是。(2)注入組蛋白去甲基化酶的mRNA并用組蛋白脫乙酰酶抑制劑處理的機理和目的是(3)進行胚胎移植前，通過操作可以增加克隆胚胎的數量。此外，胚胎移植之前還需對接受外來胚胎的代孕母猴進行處理。25．野生型黑麥草細胞壁中較高的木質素含量會降低其作為青儲飼料的品質。D蛋白是催化木質素合成的關鍵酶，某研究小組通過構建含D基因部分序列正、反向片段的表達干擾載體（如下圖所示），在細胞內產生雙鏈RNA分子，誘導D基因的mRNA持續降解，培育得到低木質素含量的黑麥草。(1)D基因的正、反向目的片段的克隆：提取野生型黑麥草葉片全部mRNA，成cDNA。根據cDNA序列選取合適的片段，分別設計正、反向目的片段的上下游引物，正向片段和反向片段引物的擴增序列（相同/不同），酶切位點（相同/不同），以使目的片段定向插入載體的特定位置。擴增產物經，切下目的條帶回收后與載體連接，形成克隆載體以用于正、反目的片段的擴增。(2)構建D基因的表達干擾載體：I．對含有正向片段的克隆載體和反向片段的克隆載體分別進行雙酶切，將回收片段與經相同酶切的中間載體用酶進行連接，獲得含有干擾片段的重組中間載體；為使干擾片段能在受體細胞中復制，中間載體需有。Ⅱ．將干擾片段和超表達啟動子插入Ti質粒的得到D基因的表達干擾載體，插入超表達啟動子的目的是。(3)導入和培養：將D基因的表達干擾載體導入農桿菌。黑麥草愈傷組織在菌液中浸沒5min，先置于無菌濾紙上吸去多余的菌液，再轉入無菌水浸潤的濾紙上共培養3天，共培養的目的是。篩選得到的愈傷組織經過程，培育得到再生植株。(4)鑒定和篩選：對轉基因植株與植株進行木質素含量測定與分析，篩選保留木質素含量顯著的植株。26．人胰島素基因表達的最初產物是一條肽鏈構成的前胰島素原，經加工后形成兩條肽鏈（A鏈和B鏈）的有生物活性的胰島素。此后科學家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產人胰島素的兩種方法：“AB”法是根據胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段，利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素；“BCA”法是利用人體某細胞中的mRNA得到胰島素基因，表達出胰島素原后再用特定酶切掉C肽段。這兩種方法使用同一種質粒作為載體。請據圖分析并回答下列問題：

(1)由于，“AB”法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列。“BCA”法是利用人體細胞中的mRNA，再由mRNA經得到的胰島素因，（填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”）法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動子。(2)如圖是利用基因工程生產人胰島素過程中使用的質粒及目的基因的部分結構。為使目的基因與載體正確連接，在設計PCR引物時可添加限酶識別序列，PCR引物應該添加在識別序列的（填“3’或5’）端。通過上述方法獲得人的胰島素基因后，需要通過PCR技術進行擴增，若計劃用1個胰島素基因為模板獲得m（m大于2）個胰島素基因，則消耗的引物總量是個。引物序列中的的GC含量越高，對PCR過程中的步驟（寫出具體過程）影響最大，越（填“有利于”或“不利于”）目標DNA的擴增。(3)PCR擴增的產物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，下列敘述中正確的有____________。A．PCR反應體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶主要在退火過程起作用B．待測樣品中DNA分子的大小和構象、凝膠的濃度等都會影響DNA在電泳中的遷移速率C．進行電泳時，帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動D．瓊脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外燈下被檢測(4)β半乳糖苷酶可以分解無色的Xgal產生藍色物質使菌落呈現藍色，否則菌落為白色。經鈣離子處理大腸桿菌后，與重組質粒混合培養一段時間，將大腸桿茵接種到添加了和Xgal的培養基上篩選出色的菌落即為工程菌種。參考答案：1．AA、糖類是生物的直接能源物質，加入糖有利于微生物的生長繁殖，則制作泡菜和酸奶時加入適量的糖會使發酵效果更好，A正確；B、泡菜發酵與酸奶發酵都是利用了乳酸菌，則發酵溫度應該一致，B錯誤；C、制作泡菜時，利用了食材中自帶的菌種所以不能消毒，牛奶需要消毒，C錯誤；D、制作泡菜和酸奶的主要菌種—乳酸菌，是原核生物，D錯誤。2．BA、制作果酒的微生物是酵母菌，制作果醋利用的主要微生物是醋酸菌，A正確；B、藍莓果酒發酵液可能使酸性重鉻酸鉀溶液變為灰綠色，B錯誤；C、可通過稀釋涂布平板法檢測微生物種群的數量，C正確；D、果酒發酵的適宜溫度是18～30℃，而果醋發酵的適宜溫度為是30～35℃，因此若果酒發酵結束后進行果醋發酵，需升高發酵溫度，D正確。3．CA、在菌種選育過程中，性狀優良的菌種可以從自然界中篩選出，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；B、青霉素是抗生素，但其并不能殺滅所有微生物，所以其生產過程也要嚴格滅菌，B正確；C、發酵過程要隨時檢測培養液中的微生物數量、產物濃度等，還要及時添加必需的營養成分，C錯誤；D、若發酵工程的產品是微生物細胞本身，可在發酵結束后采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥，若產品是代謝物，可以根據產物的性質采取蒸餾、萃取、離子交換等方法提取、分離和純化產品，D正確。4．BA、只有分解尿素的細菌能產生脲酶，在以尿素為唯一氮源的培養基中能生存下來，A正確；B、5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數為（168+175+167）/3/0.1×106=1.7×109個，B錯誤；C、除了用稀釋涂布平板法對尿素分解菌計數外，還可以用顯微鏡直接計數，C正確；D、細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，pH升高，可使含有酚紅的培養基變紅，可根據變紅的范圍、直徑大小篩選出高效降解尿素的細菌，D正確。5．DA、獲得目的菌純培養物的關鍵是防止雜菌污染，應對培養基及用具進行滅菌，但土壤不能進行滅菌處理，否則會殺死菌種，A錯誤；B、據圖可知，將10g土壤加到90ml無菌水后，稀釋了10倍，步驟③中的稀釋梯度分別為102、103、104倍，實驗中取樣進行培養的是稀釋倍數為104倍，但微生物計數時應選擇菌落在30300之間的進行計數，若步驟④平板上的平均數量為16個，不符合計數原則，不應用于計數，B錯誤；C、顯微鏡直接測定微生物數量是將所有的活菌和死菌數目一起統計，C錯誤；D、微生物在瓊脂固體培養基表面生長時，可以形成肉眼可見的單個細菌菌落，故固體培養基可用于微生物的分離和計數，D正確。6．AA、用稀釋涂布平板法統計樣本菌落數時，同一稀釋度下需要培養三個培養皿，可以分別計數3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠，A正確；B、三個培養量菌落數的平均值乘稀釋倍數再乘10即為10mL樣品中細菌數，B錯誤；C、培養基的配制需考慮微生物的適宜pH，應在滅菌前進行pH調整，C錯誤；D、可用伊紅美藍培養基對大腸桿菌進行鑒定，但不能抑制雜菌的生長，D錯誤。7．DA、從土壤中篩選產脲酶菌時，在配制培養基時需要以尿素為唯一氮源，所配制的培養基為選擇培養基，A正確；B、利用稀釋涂布平板法準確估算菌落數目的關鍵是恰當的稀釋度，稀釋倍數太低，菌落太多會長在一起，稀釋倍數太高，平板上菌落數目過少，B正確；C、統計產脲酶菌的數目時，對菌落數在30~300以內的平板進行計數，求其平均值，C正確；D、脲酶將尿素分解成氨使培養基的pH升高，D錯誤。8．AA、該實驗中設置了1個自變量（莖尖大小）和2個因變量（成苗率和脫毒率），A正確；B、培育脫毒苗的過程是植物組織培養的過程，不需要制備原生質體，B錯誤；C、根據本實驗可知，大規模生產脫毒苗時莖尖適宜時成苗率和脫毒率均相對較高時最好，莖尖過小，成苗率過低，C錯誤；D、經培養獲得的脫毒苗是自身不帶病毒，但不具有抗病毒的能力，D錯誤。9．DA、生長素通過促進bZlP59LBD復合體的形成進而促進FADBD基因的轉錄，這有助于愈傷組織形成。愈傷組織是一團未分化的細胞，全能性較強，說明生長素通過調控植物細胞的基因表達而影響植物細胞全能性的表達，A正確；B、脫分化形成愈傷組織期間一般不需要光照，再分化時需要適當光照，以誘導葉綠素產生，B正確；C、離體的植物組織需消毒，但培養基一般需要滅菌處理，C正確；D、在具有葉片分化之前植物細胞不能進行光合作用，所以植物組織培養的培養基中需要加入有機營養物質，D錯誤。10．D①植物組織培養的植物材料體積小、抗性差，滅菌不好就會導致整個技術的失敗，①正確；②培養基滅菌時采用的滅菌方法可以是高壓蒸汽滅菌，該滅菌方法是濕熱滅菌的一種，②正確；③對培養材料進行表面滅菌時，一方面要考慮藥劑的消毒效果，另一方面還要考慮植物材料的耐受能力，避免對培養材料造成傷害，③正確；④培養中不同藥劑、不同植物材料，甚至不同器官要區別對待，對培養材料需要采用合適的方法進行消毒，④錯誤；⑤如果不小心引起污染，將可能造成培養工作前功盡棄，導致整個技術的失敗，⑤正確；11．BA、由題圖分析可知：成蛙X的細胞核來自蝌蚪N，所以其性狀主要由蝌蚪N遺傳物質決定，A錯誤；B、重組的蛙細胞相當于蛙的受精卵，通過細胞分裂和細胞分化形成組織和器官，B正確；C、圖中重組蛙細胞進行培養時，O2是細胞代謝所需的，CO2的主要作用是維持培養液的pH，所以一般要置于95%空氣和5%CO2的混合氣體培養箱中，C錯誤；D、該實驗過程采用了動物體細胞核移植技術、及動物細胞培養技術，但未涉及動物細胞融合技術，D錯誤。12．DA、同種生理狀態相同的受體一般對移入的胚胎不發生免疫排斥，A錯誤；B、原腸胚分化程度太高不利于著床，移植后不易成活，一般培養至桑葚胚或囊胚進行胚胎移植，B錯誤；C、沒有透明帶和卵細胞膜未發生相應的反應會導致多精入卵，從而使胚胎無法正常發育，不會產生雙胞胎或多胞胎，C錯誤；D、精子需進行獲能處理，卵母細胞需要培養至MII期才具備受精作用的能力，D正確。13．CA、ESCs分化成原始內胚層細胞和滋養層干細胞的過程是受基因控制的，A錯誤；B、“合成胚胎”只存活了8天后就死亡，則與自然胚胎不同，B錯誤；C、“人造機械子宮”應為無菌、無毒的液體環境，動物細胞的培養還應該添加血清，C正確；D、胚胎工程為將來合成器官組織用于移植和治療疾病提供了新途徑，D錯誤。14．AA、在精子觸及卵細胞膜的瞬間，卵細胞膜外的透明帶會迅速發生生理反應，阻止后來的精子進入透明帶。然后，精子入卵。精子入卵后，卵細胞膜也會立即發生生理反應，拒絕其他精子再進入卵內，A錯誤；B、精子入卵后，尾部脫離，原有的核膜破裂并形成一個新的核膜，最后形成一個比原來精子的核還大的核，叫作雄原核。與此同時，精子入卵后被激活的卵子完成減數分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核。為得到只含精子染色體的胚胎干細胞需在核融合前剔除卵子的雌原核，B正確；C、聚集在胚胎一端的細胞形成內細胞團，將來發育成胎兒的各種組織，內細胞團的細胞具有全能性，所以單倍體胚胎干細胞可以來自小鼠囊胚期的內細胞團細胞，C正確；D、Y染色體比X染色體短小，所以Y染色體上的基因相對較少，可能缺少支持單倍體胚胎干細胞存活的基因，D正確。15．CA、利用植物細胞培養可以獲得紫杉醇，紫杉醇屬于紫草細胞的次生代謝物，而核糖核酸是細胞生活動的必需物質，屬于初級代謝物，A錯誤；B、動物細胞培養時需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，獲得單細胞懸液，進而對細胞進行培養，而細胞培養過程中可能表現出懸浮生長，有的會表現出貼壁生長的現象，B錯誤；C、iPS細胞具有全能性，因而經過誘導可分化成各種組織和器官，甚至可誘導成完整的生物個體，C正確；D、用含肝素或Ca2+載體A23187的專用獲能液處理精子，對其進行獲能培養，此后才具有和卵細胞完成受精作用的能力，D錯誤。16．CA、豬是哺乳動物，其成熟紅細胞內沒有細胞核，所以豬血不能用于DNA的粗提取，A錯誤；B、若以新鮮洋蔥為實驗材料，則研磨液過濾后保留上清液，B錯誤；C、由于DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質溶于酒精，故在DNA粗提取與鑒定的實驗中，95%的冷酒精可提取出含雜質較少的DNA分子，C正確；D、DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后呈藍色，D錯誤。17．CA、不同的限制酶識別并切割的核苷酸序列不同，因此圖1中兩種酶識別的核苷酸序列不同，A正確；B、泳道②是限制酶XhoⅠ的酶切結果，共有2個限制酶切位點，所以斷開了4個磷酸二酯鍵，B正確；C、若用兩種限制酶同時切割該DNA，如果DNA的每個酶切位點都被切割，則將該DNA切成6個片段，如果6個片段分子大小不同則在泳道中將出現6條帶，如果其中有片段分子大小相同，則條帶數目小于6條；如果有的DNA分子酶切位點沒有斷開，則可能條帶數目超過6條，數目不確定，C錯誤；D、限制酶SalⅠ有三處切割位點，切割后產生4個DNA片段，泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產物；限制酶XhoⅠ有2處切割位點，切割后產生3個DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產物，D正確。18．CA、據圖可知，Cas9蛋白功能類似于基因工程中限制酶的作用，Cas9能夠切割DNA，是一種能使磷酸二酯鍵斷裂的酶，化學本質為蛋白質，A正確；B、Cas9蛋白功能類似于限制酶，可切割外源DNA，保護自身，B正確；C、據圖可知，引導RNA有折疊成雙鏈的片段，故在單鏈引導RNA中也存在堿基互補配對，但RNA沒有堿基T，不存在AT配對，C錯誤；D、引導RNA能識別并結合特定的DNA序列，人為改變引導RNA的序列可實現對特定基因的切割，D正確。19．AA、野生果蠅為正常翅，卷翅為突變性狀，野生型果蠅只含有基因A，表現為正常翅，卷翅型果蠅含有基因A、基因B，表現為卷翅，說明基因B為顯性性狀，基因A為隱性性狀，A錯誤；B、DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越慢，故基因B的片段長度較長，故可推測基因B源自基因A中插入了DNA片段，B正確；C、由圖乙可知，在早期胚胎時含有BB的個體，在成蟲時不含有BB個體，故可推測基因組成為BB的個體在胚胎期致死，C正確；D、卷翅果蠅（AB）的互交，后代的基因型為AA：AB：BB=1：2：1，基因B為顯性性狀，基因A為隱性性狀，且基因組成為BB的個體在胚胎期致死，因此后代中表型的比例為正常翅：卷翅=1：2，卷翅果蠅的互交后代中卷翅果蠅占2/3，D正確。20．D鑒定通過PCR技術形成的DNA常用瓊脂糖凝膠電泳法。標準（Marker）的實質為不同已知長度的DNA片段混合物，若實驗的模板受到污染、引物的特異性不強、退火（復性）溫度偏低，則3號泳道會出現雜帶。故選D。21．(1)缺氧、酸性、含有酒精(2)細胞質基質1830℃此時與果酒發酵相關的酶活性高，發酵快(3)無菌空氣C2H5OH+O2→酶→CH3COOH（醋酸）+H2O+能量當O2，糖原都充足時，醋酸菌能將糖分解成醋酸C6H12O6+2O2→酶→2CH3COOH（醋酸）+2H2O+2CO2+能量(4)此階段酵母菌主要進行有氧呼吸，繁殖快營養物質幾乎消耗殆盡，高濃度酒精和代謝廢物會抑制酵母菌代謝（1）分析題意可知，果酒發酵時需要無氧條件，且發酵液pH值會逐漸降低，即發酵液變酸，這種缺氧、酸性條件能抑制雜菌的生長。（2）酵母菌是真核生物，其無氧呼吸產生酒精的場所是細胞質基質。利用酵母菌進行發酵時，應將溫度控制在18~30℃，在此溫度條件下，酵母菌內與果酒發酵相關的酶活性高，發酵速度快，所以溫度適宜時果酒發酵時間較短。（3）醋酸菌是一種好氧細菌，故楊梅醋的發酵過程中，需要向發酵液中持續通入無菌氧氣（無菌空氣），此時發生的化學反應式是C2H5OH+O2+CH3COOH+H2O。當O2，糖原都充足時，醋酸菌能將糖分解成醋酸，所以還可利用楊梅汁和白砂糖直接制作果醋，反應式為C6H12O6+2O2→2CH3COOH（醋酸）+2H2O+2CO2+能量。（4）分析題圖可知，隨著發酵的進行，發酵液的糖度逐漸降低，酒精度逐漸升高然后保持相對穩定。發酵前24h，酵母菌主要進行有氧呼吸，大量增殖，消耗葡萄糖較少，因此糖度變化很小，酒精度上升很慢。隨著發酵的進行，酵母菌進行無氧呼吸消耗葡萄糖產生酒精，96h后，營養物質消耗殆盡，高濃度的酒精和代謝廢物會抑制酵母菌的代謝而影響發酵，導致酒精度和糖度的變化都趨于平緩。22．(1)稀釋涂布平板法(2)允許能降解淀粉的微生物生長，而抑制或阻止其他微生物生長（或篩選得到能高效降解淀粉的微生物）(3)②硝化細菌為自養細菌能夠利用空氣中的二氧化碳合成有機物（或硝化細菌能通過化能合成作用合成有機物），但硝化細菌不能產生淀粉酶分解淀粉，所以無透明圈(4)首先取菌液進行梯度稀釋，之后接種在以脂肪為唯一碳源的培養基上，篩選出脂肪分解菌；再將篩選出的脂肪分解菌接種到以纖維素為唯一碳源的培養基上，篩選出能同時降解脂肪和纖維素的菌種（1）由題干可知，進行接種前對菌液進行了梯度稀釋操作，并且由圖中X培養基上生長的單菌落布滿培養基的分布狀態，可以推知，該接種方法是稀釋涂布平板法。（2）由題干可知，X培養基含有淀粉作為唯一碳源，在該培養基上，能分解淀粉的微生物可以生長繁殖形成菌落，不能分解淀粉的微生物因缺乏碳源而無法生長，達到篩選淀粉分解菌的目的。（3）由于淀粉遇碘變藍，因此在X培養基上，能分解淀粉的微生物形成的菌落周圍因淀粉被分解而產生透明圈，透明圈直徑越大，說明該菌降解淀粉的能力越強，由圖可知，菌落②周圍的透明圈直徑最大，引起能最高效降解淀粉的細菌是②。硝化細菌是自養型生物，雖然其不能分解淀粉作為碳源（因此無法產生透明圈），但是可以利用空氣中CO2作為碳源來合成有機物進行生長繁殖，因此仍然能在該培養基上生長。（4）由于該實驗需要篩選能同時降解脂肪、纖維素兩種成分的微生物，但是不能在培養基中同時加入脂肪和纖維素進行篩選，否則無法區分在這樣的培養基上生長的是能利用脂肪的微生物還是能利用纖維素的微生物，因此達不到實驗目的。要想達到實驗目的，需要先將適量菌液進行梯度稀釋后首先接種在以脂肪為唯一碳源的培養基上，篩選出脂肪分解菌，然后將在該培養基上獲得的脂肪分解菌再接種到以纖維素為唯一碳源的培養基上，在該培養基上能生長的微生物就能同時降解脂肪和纖維素。23．(1)獲得能產生相應抗體的B淋巴細胞(2)既能無限增殖，又能產生特定抗體(3)動物細胞融合動物細胞培養(4)動物血清(5)胰蛋白酶(6)雜交瘤細胞能產生特定抗體的雜交瘤細胞(7)方法：培養液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細胞原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖，但人的淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞可以利用B淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖（1）根據抗原抗體特異性結合的原理，為獲得特定抗體，用特定抗原刺激，小鼠體內便可產生能產生特定抗體的漿細胞，即可獲得相應的B淋巴細胞。（2）雜交瘤細胞具有兩種細胞的遺傳物質，既能產生特定的抗體，又能無限增殖。（3）從圖中看出，單克隆抗體技術實際是應用了動物細胞融合（獲得雜交瘤細胞）和動物細胞培養（獲得大量的細胞）技術。（4）動物細胞培養液與植物組織培養基相比，除物理狀態不同外，成分也不相同，動物細胞培養液中含動物血清。（5）細胞融合時是單個細胞和單個細胞的融合，為將細胞從動物組織中離散，可用胰蛋白酶處理。（6）在單克隆抗體制備過程中，由于從小鼠體內提取的B淋巴細胞可能有多種，以及細胞融合方式有多種。從而產生多種融合細胞以及多種雜交瘤細胞，因此需多次篩選。從圖中可看出，④是用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，⑤⑥是篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞。（7）據題干信息可知，可在培養液中加入氨基嘌呤，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞不能增殖，而B淋巴細胞一般不增殖，但人淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞可以利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖。方法：培養液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細胞。原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖，但人的淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞可以利用B淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖。24．(1)胎猴的體細胞分裂次數少，端粒長，顯微操作法5%空氣和5%CO2(2)調節相關基因的表達，利于重構胚的分裂和發育，提高胚胎的發育率和妊娠率(3)胚胎分割同期發情（1）胎猴的體細胞分裂次數少，細胞能分裂更多次數，重構胚發育而來的個體壽命更長；目前普遍使用的去核方法是顯微操作法，動物細胞培養過程中需要營造的氣體條件是95%空氣和5%CO2，CO2主要作用是維持培養液的pH。（2）將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構胚，使其翻譯成組蛋白去甲基化酶Kdm4d，能夠降低組蛋白的甲基化水平；用組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA處理重構胚，可以通過抑制組蛋白脫乙酰酶的作用，提高組蛋白的乙酰化水平，故注入組蛋白去甲基化酶的mRNA并用組蛋白脫乙酰酶抑制劑處理的目的是調節相關基因的表達，利于重構胚的分裂和發育，提高胚胎的發育率和妊娠率。（3）進行胚胎移植前，通過胚胎分割技術操作可以增加克隆胚胎的數量胚胎，一般發育至桑葚胚或囊胚期時進行胚胎移植，為使供體和受體的生理狀態相同，為胚胎移入受體提供相同的生理環境，確保胚胎移植后能正常發育，需對代孕母猴進行同期發情處理。25．(1)逆轉錄相同不同瓊脂糖凝膠電泳（或電泳）(2)DNA連接酶復制起點TDNA促進正、反向目的片段(干擾片段)的轉錄，得到足量的相應RNA分子(體現出足量（超表達）(3)使攜帶干擾片段(目的片段)的TDNA整合到受體細胞(黑麥草愈傷組織細胞)染色體DNA上再分化(4)野生型(或非轉基因)降低（1）提取野生型黑麥草葉片全部mRNA，通過逆轉錄過程合成cDNA。根據cDNA序列選取合適的片段，由于正反向的D基因片段的堿基序列是相同，因而設計正、反向目的片段的上下游的引物和限制酶切位點是不相同的，正向片段和反向片段引物的擴增序列相同，即含有相同的限制酶切序列，進而可以使目的片段定向插入載體的特定位置。擴增產物經切下目的條帶回收后與載體在DNA連接酶的作用下實現連接，此后可用于正、反目的片段的擴增。（2）I.對含有正向片段的克隆載體和反向片段的克隆載體分別進行雙酶切，將回收片段與經相同酶切的中間載體用DNA連接酶進行連接，獲得含有干擾片段的重組中間載體；中間載體需有復制起點，這樣可以使干擾片段能在受體細胞中穩定存在。Ⅱ.將干擾片