ICS59.080.40CCSY47QBDeterminationofazocolourantsinleatherette中華人民共和國工業和信息化部發布QB/TXXXXX—XXXX本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件由中國輕工業聯合會提出。本文件由全國塑料制品標準化技術委員會（SAC/TC48）歸口。本文件起草單位：上海華峰新材料研發科技有限公司、合肥科天水性科技有限責任公司、麗水市質量檢測檢驗研究院、昆山阿基里斯新材料科技有限公司、中紡標（深圳）檢測有限公司、江蘇協孚新材料科技有限公司、山東同大海島新材料有限公司、浙江禾欣新材料有限公司、浙江羅星化學股份有限公司、天守（福建）超纖科技股份有限公司、湖北齊力聚合材料有限公司、安徽安利材料科技股份有限公司、四川大學輕工科學與工程學院、佛山市威士達新材料有限公司、廣東天安高分子科技有限公司、重慶雙象超纖材料有限公司、浙江梅盛新材料有限公司、東莞市眾標科技有限公司、蘇州瑞高新材料股份有限公司、蘇州貝斯特裝飾新材料有限公司、蘇州艾弛博特檢測科技有限公司、浙江深藍新材料科技有限公司、浙江嘉柯新材料科技有限公司、福建華夏合成革有限公司、福建天守紡織新材料有限公司。本文件主要起草人：周靜、唐勁松、李維虎、趙建明、陳沛、徐旭日、徐一剡、劉梅、姚督生、周文贄、劉愛明、賈義松、陳意、蘇紅偉、張華榮、陽文濤、錢國春、鄭鳳瓊、高金崗、匡建武、蔣普、酈向宇、鄭嗣銑、王漲、程娟娟。本文件為首次發布。QB/TXXXXX—XXXX人造革合成革中偶氮染料的測定本文件描述了測定人造革合成革及其制成品中可分解出致癌芳香胺的禁用偶氮染料的原理、試劑、設備和儀器、試驗方法及試驗報告。本文件適用于人造革合成革及其制成品中禁用偶氮染料的測定。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法GB/T34443-2017人造革合成革術語3術語和定義GB/T34443-2017界定的術語和定義適用于本文件。4原理樣品在煮沸的二甲苯中進行抽提，利用二甲苯蒸汽提取出樣品中的偶氮染料，將抽提后的溶液置于密閉容器中，一定溫度下在規定pH的緩沖液中用連二亞硫酸鈉還原處理，然后通過硅藻土吸附萃取柱的液-液萃取，將還原裂解產生的芳香胺提取到叔丁基甲醚中，濃縮后用適當的溶劑溶解、定容，通過氣相色譜-質譜聯用儀（GC-MS）或高效液相色譜儀-二極管陣列檢測器（HPLC-DAD）進行芳香胺的測定。5試劑5.1芳香胺標準物質：按附錄A所列的芳香胺，以及苯胺(CAS號:62-53-3)和1,4-苯二胺(CAS號：106-50-3)，標準物質。5.2水：符合GB/T6682中三級水的規定。5.3甲醇：色譜純。5.4叔丁基甲醚：色譜純或分析純，分析純的叔丁基甲醚在使用前進行蒸餾純化。5.5二甲苯(異構體混合物)。5.6連二亞硫酸鈉水溶液：200mg/mL水溶液，臨用時取干粉狀連二亞硫酸鈉（Na2S2O4，質量分數不小于87%）新鮮配制，在密閉容器中放置1h內立即使用。5.7檸檬酸/氫氧化鈉緩沖溶液：0.06mol/L，pH=6.0，預加熱到(70±2)℃。QB/TXXXXX—XXXX5.8氫氧化鈉：分析純。5.9標準溶液a)芳香胺標準儲備溶液（300mg/L）采用甲醇（5.3）或其他合適溶劑配制成芳香胺標準儲備溶液，其中每種胺的含量大于或等于300mg/L，標準儲備溶液保存在棕色瓶中，并放入少量的亞硫酸鈉。冰箱冷凍室中保存，有效期一個月。b)芳香胺標準工作溶液（15.0mg/L）從芳香胺標準儲備溶液（5.10.1）中取0.5mL置于容量瓶中，用甲醇或其他合適溶劑定容至10mL，芳香胺標準工作溶液應現配現用。c)4-氨基偶氮苯標準儲備溶液（500mg/L)采用甲醇（5.3）或其他合適溶劑配制成4-氨基偶氮苯標準儲備溶液標準儲備溶液保存在棕色瓶中，并放入少量的亞硫酸鈉。冰箱冷凍室中保存，有效期一個月。d)4-氨基偶氮苯標準工作溶液（25.0mg/L)從4-氨基偶氮苯標準儲備溶液（5.10.3）中取0.5mL置于容量瓶中，用甲醇或其他合適溶劑定容至10mL，4-氨基偶氮苯標準工作溶液應現配現用。e)內標物標準溶液（1.0mg/mL）采用甲醇（5.3）或其他合適溶劑將下列內標化合物配制呈濃度約為1.0mg/mL的內標物標準溶液。在氣相色譜-質譜法定量分析的情況下，使用以下內標化合物之一：—萘-d8，CAS號1146-65-2—2,4,5-三氯苯胺，CAS號636-30-6—蒽-d10，CAS號1719-06-846設備和儀器1.1抽提裝置，如圖1所示。QB/TXXXXX—XXXX圖1抽提裝置示意圖6.2超聲波浴，有控溫裝置，超聲頻率大于2000Hz，功率大于160W。6.3反應容器：具密閉塞，約60mL，由硬質玻璃制成管狀。6.4恒溫水浴：能控制溫度（70±2）℃。6.5分析天平，最小分度值為0.1mg。6.6硅藻土吸附萃取柱：20cm×2.5cm（內徑）玻璃柱或聚丙烯柱，能控制流速，填裝時，先在底部墊有少許玻璃棉，然后加入20g硅藻土，輕擊提取柱，使填裝結實；或其他經驗證明符合芳香胺物質純化要求的硅藻土吸附萃取柱。6.7真空旋轉蒸發器。6.8氮氣吹掃裝置。6.9氣相色譜質譜聯用儀(GC-MS)。6.10高效液相色譜儀，配有二極管陣列檢測器(HPLC-DAD)。7試驗步驟7.1取樣宜從整張人造革合成革上取足夠樣品量，如直接從鞋、服裝等上取樣，樣品應具有代表性，并在試驗驗報告中注明取樣部位和樣品量。QB/TXXXXX—XXXX對于印花、多色拼接樣品，應盡可能地考慮人造革合成革的各種顏色并分別進行測試；若樣品由不同性質的人造革合成革構成，應分別測試。宜將樣品表面的附著物去除干凈。7.2抽提取有代表性樣品，垂直于人造革合成革平面裁剪成條狀，混合，稱取質量為1.0g（精確至0.01g用無色紗線扎緊，在抽提裝置的蒸汽室內垂直放置，使冷凝溶劑可從樣品上流過。加入25mL二甲苯，煮沸溶劑抽提40min，抽提液冷卻至室溫，在真空旋轉蒸發器中45℃~75℃濃縮至約1mL，將殘余物用少量的甲醇在超聲波浴中進行分散處理，然后定量地轉移到反應容器中（如果最終體積大于2mL，將其濃縮至2mL），得到抽提溶液。如果樣品經抽提后沒有完全脫色，應按照上述要求重新制備新的樣品，并直接放入新的反應容器中，與抽提制備的溶液平行進行后續處理步驟。兩種處理方式的測試結果取值較大者報告結果。7.3還原裂解向步驟7.2中得到的抽提溶液中加入15mL預熱至(70±2)℃的檸檬酸/氫氧化鈉緩沖溶液，將反應容器放入（70±2）℃的恒溫水浴中處理約30min，然后加入3.0mL連二亞硫酸鈉水溶液，并立即混合劇烈振搖，在（70±2）℃恒溫水浴中保溫30min，隨后在3min內冷卻至室溫，得到還原溶液。7.4液-液萃取向步驟7.3中得到的還原溶液中加入0.2mL質量分數為10%的氫氧化鈉水溶液并劇烈搖晃后轉移至硅藻土吸附萃取柱中吸附15min。同時，在還原溶液的反應容器中加入10mL叔丁基甲醚，并劇烈搖晃，15min后將叔丁基甲醚緩慢倒入硅藻土吸附萃取柱中，用250mL圓底燒瓶收集洗脫液。用10mL叔丁基甲醚漂洗反應容器并將叔丁基甲醚轉移至硅藻土吸附萃取柱中，然后用60mL叔丁基甲醚洗脫硅藻土吸附萃取柱，收集叔丁基甲醚洗脫液。在低于50℃的條件下，將收集到的全部洗脫液旋蒸濃縮至約1mL，用氮氣吹掃裝置吹干剩余的溶劑得到待測物。待測物用合適的溶劑配制成2.0mL的樣品分析溶液，并立即進行樣品分析。如果在24h內不能進行完整的分析，則應將提取液儲藏在-18℃以下。7.5芳香胺的定性和定量分析7.5.1色譜條件色譜分析條件見附錄B。7.5.2定性分析方法分別取1μL芳香胺標準工作溶液和7.4中得到的樣品分析溶液注入氣相色譜質譜聯用儀，按7.5.1條件操作。必要時，選用高效液相色譜儀對異構體進行確認。若檢測到其中的一種或幾種胺含量超過5mg/kg，則應使用至少三個點的標準曲線進行定量分析。QB/TXXXXX—XXXX4-氨基偶氮苯（CAS號：60-09-3）在7.2至7.4條件下生成苯胺和1,4-苯二胺，如果苯胺含量超過5mg/kg，偶氮染料種分解出的4-氨基偶氮苯采用附錄C方法檢測。7.5.3定量分析方法7.5.3.1GC-MS法準確移取20.0μL內標物標準溶液加入7.4中得到的樣品分析溶液中，再加入甲醇或其他合適溶劑將其定容至2mL，混勻，靜置，得到樣品定量溶液。分別取10μL標準工作溶液和樣品定量溶液注入氣相色譜質譜聯用儀中，按B.2條件操作，可選用選擇離子方式進行定量。7.5.3.2HPLC-DAD法分別取10μL標準工作溶液和7.4中得到的樣品分析溶液注入液相色譜儀中，按B.3條件操作，外標法定量。7.5.4陽性確認用GC-MS法檢測到任何芳香胺，應使用HPLC-DAD法進行確認，只有當兩種方法均呈陽性結果時，結果才為陽性。出具測定結果前，應考慮假性情況。假性結果的驗證過程按照附錄D進行，必要時按照附錄E進行游離芳香胺的檢測。8結果計算和表示8.1外標法樣品中分解出芳香胺的含量按式（1）計算：·······················································(1)式中：——樣品中分解出芳香胺i的含量，單位為毫克每千克（mg/kg——樣品溶液中芳香胺i的峰面積（或峰高）；——標準工作溶液中芳香胺i的濃度，單位為毫克每升（mg/L）;——樣品溶液的最終體積，單位為毫升（mL）；——標準工作溶液中芳香胺i的峰面積（或峰高——樣品量，單位為克（g）。8.2內標法樣品中分解出芳香胺的含量按式（2）計算：QB/TXXXXX—XXXX·····················································(2)式中：——樣品中分解出芳香胺i的含量，單位為毫克每千克（mg/kg——樣品溶液中芳香胺i的峰面積；——標準工作溶液中芳香胺i的濃度，單位為毫克每升（mg/L）;——樣品溶液的最終體積，單位為毫升（mL）；——標準工作溶液中內標的峰面積；——標準工作溶液中芳香胺i的峰面積；——樣品量，單位為克（g）；——樣品溶液中內標的峰面積。8.3結果表示試驗結果以每一種芳香胺的檢測結果分別表示，計算結果表示到個位數。9檢出限本方法的檢出限為5mg/kg。10試驗報告試驗報告應至少給出下述內容：f)樣品來源及描述；g)采用的定性方法；h)采用的定量方法；i)測試結果；j)本文件編號；k)收樣日期和試驗日期；l)任何偏離本文件的細節。QB/TXXXXX—XXXX（規范性）致癌芳香胺名稱及其標準物質的GC-MS定向選擇特征離子表A.1給出禁用偶氮染料可分解出的24種致癌芳香胺。表A.1致癌芳香胺名稱及其標準物質的GC-MS定向選擇特征離子1234a789烷QB/TXXXXX—XXXX（資料性）色譜分析B.1通則由于測試結果取決于所使用的儀器，因此不可能給出色譜分析的普遍參數。下列操作條件是典型的，不同型號的儀器可對給出的操作條件做調整以獲得最佳效果。B.2GC-MS分析條件GC-MS分析條件設置如下：——毛細管色譜柱：以苯基硅烷為主要的固定相材料，30m×0.25mm×0.25μm，或相當者；——進樣口溫度：260℃;——柱溫程序：100℃(2min),10℃/min升溫至220℃（1min），15℃/min升溫至260℃（2），——MS傳輸線溫度：280℃;——質量掃描范圍：35amu~350amu;——進樣方式：脈沖分流進樣，分流比為10:1，進樣脈沖壓力：50psi（1psi=6894.76Pa脈沖持續時間：0.5min；——載氣：氦氣（99.999%），流量為1.0mL/min;——進樣量：1μL;——離子化方式：EI;——離子化電壓：70eV;采用上述分析條件時，致癌芳香胺標準物GC-MS總離子流圖參見圖B.1。B.3HPLC-DAD分析條件HPLC-DAD分析條件設置如下：——色譜柱：以碳鏈長度為C18的疏水性鏈烷基化硅膠為固定相材料，250mm×4.6mm×5μm，或相當者；——流量：0.8mL/min~1.0mL/min;——柱溫：40℃;——進樣量：10μL;——檢測器：二極管陣列檢測器(DAD);QB/TXXXXX—XXXX——檢測波長：240nm，280nm，305nm;——流動相A：甲醇；——流動相B：0.575g磷酸二氫胺＋0.7g磷酸氫二鈉，溶于1000mL二級水中，pH=6.9;——梯度：起始時用15％流動相A和85％流動相B，保持3min，然后在45min內線性地轉變為80％流動相A和20％流動相B，保持5min，再在2min內線性轉變為15％流動相A和85%流動相B，保持5min。采用上述分析條件時，致癌芳香胺標準物HPLC-DAD色譜圖參見圖B.2。B.4氣相色譜質譜聯用法示例氣相色譜質譜聯用法示例見圖B.1。圖B.1芳香胺標準物質GC-MS總離子流圖QB/TXXXXX—XXXXB.5液相色譜法示例液相色譜法示例見圖B.2。圖B.2芳香胺標準物質HPLC色譜圖QB/TXXXXX—XXXX4-氨基偶氮苯的測定C.1原理樣品在堿性介質中用連二硫酸鈉還原，用適當的液-液分配方法提取分解出的4-氨基偶氮苯，用配有質量選擇檢測器的氣相色譜儀（GC-MS）進行定性測定，必要時，用高效液相色譜-二極管陣列檢測器（HPLC-DAD）進行異構體確認，用氣相色譜-質譜內標法或高效液相色譜外標法定量。C.2試劑和設備C.2.1氯化鈉，分析純。C.2.2水平振蕩器。C.3試驗步驟C.3.1取樣按7.1執行。C.3.2抽提按7.2執行。C.3.3還原裂解在上述反應器中加入9mL質量分數為2%的氫氧化鈉水溶液，劇烈振搖后加入1.0mL連二亞硫酸鈉水溶液，并立即混合劇烈振搖，在(40±2)℃水浴中保溫30min，隨后在1min內冷卻至室溫。C.3.4液-液萃取在反應溶液中加入5mL叔丁基甲醚或5mL內標物標準溶液，再加入7g氯化鈉（C.2.2），在水平振蕩器（C.2.3）中振蕩45min，靜置，待兩相分層后，取上層清液，并立即進行色譜分析。如果在24h內不能進行完整的分析，則應將提取液儲藏在-18℃以下。C.3.5色譜分析色譜分析見附錄B。若含量超過5mg/kg，則應使用至少三個點的標準曲線進行定量分析。C.4結果計算和表示按8.1和8.2進行結果計算，按8.3進行結果表示。QB/TXXXXX—XXXXC.5檢出限本方法的檢出限為5mg/kg。QB/TXXXXX—XXXX假性結果的驗證方法D.1異構體的影響提高色譜分離效果，區分目標胺和異構體。D.2由氣相色譜進樣器的高溫產生假陽性表A.1中胺9、12、18、19和21在高溫條件下由染料、聚氨酯或其他成分分解生成，使用HPLC-DAD方法確認并定量。D.3由其他物質來源產生的假陽性表A.1中胺9、15、16和19，由于其他來源如聚氨酯、交聯劑或其他物質導致假陽性，使用水代替連二亞硫酸鈉水溶液進行步驟7.3的操作，如果結果與使用連二亞硫酸鈉水溶液一致，則陽性胺物質為非偶氮染料來源。D.4由不含偶氮鍵染料產生的假陽性表A.1中胺1、4和8，由于不含有偶氮鍵的染料間接通過連二硫酸鈉還原過程生成，只能通過其他證據證明樣品中是否含有禁用偶氮染料。1QB/TXXXXX—XXXX游離芳香胺的測定E.1原理樣品通過溶劑在適當的條件下進行萃取，游離芳香