ICS11.080.01

CCSC47

中華人民共和國國家標準

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

代替GB18281.3-2015

`

醫療保健產品滅菌生物指示物

第3部分：濕熱滅菌用生物指示物

Sterilizationofhealthcareproducts-Biologicalindicators-

Part3:Biologicalindicatorsformoistheatsterilizationprocesses

(ISO11138-3:2017,IDT)

（征求意見稿）

XXXX-XX-XX發布XXXX-XX-XX實施

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

引言

GB/T18281《醫療保健產品滅菌生物指示物》是有關生物指示物的通用性和專用性標準。GB/T

18281旨在提供生物指示物的要求、選擇和使用指南，擬由八個部分構成：

——第1部分：通則。目的在于提供生物指示物的通用要求。

——第2部分：環氧乙烷滅菌用生物指示物。目的在于提供環氧乙烷滅菌用生物指示物的專用要求。

——第3部分：濕熱滅菌用生物指示物。目的在于提供濕熱滅菌滅菌用生物指示物的專用要求。

——第4部分：干熱滅菌用生物指示物。目的在于提供干熱滅菌用生物指示物的專用要求。

——第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。目的在于提供低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物

的專用要求。

——第6部分：過氧化氫滅菌過程用生物指示物。目的在于提供過氧化氫滅菌用生物指示物的專

用要求。

——第7部分：選擇、使用和結果判斷指南。目的在于提供生物指示物的正確選擇和使用的指南。

——第8部分：縮短生物指示物培養時間的確認方法。目的在于提供縮短生物指示物培養時間的

確認方法。

GB/T18281.1規定了生物指示物生產、標簽、試驗方法和性能要求，這些指示物包含預期用于滅

菌過程的確認和常規監視的染菌載體和菌懸液。本文件規定了用于濕熱滅菌過程的生物指示物的專用要

求。

濕熱作為滅菌因子在本文件中被定義為干的飽和蒸汽。雖然空氣和蒸汽混合氣體可被使用在濕熱滅

菌過程中，但本文件規定的方法和性能要求，可能不適用于生物指示物在此類過程中的應用。

ISO11138系列標準代表了當前的最新技術水平，該標準由代表制造者、用戶與監管部門的專家共

同參與制定，目的不是為了促進生物指示物在沒有規定的場景使用，而是提供生物指示物生產的共同規

范。本文件的制定目的不是提倡在不推薦使用的場合使用生物指示物，而是為目前使用的生物指示物提

供規范。

濕熱滅菌的確認和控制要求見ISO17665系列。

有關生物指示物的選擇、使用和結果判讀部分，見ISO14161。

II

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

醫療保健產品滅菌生物指示物

第3部分：濕熱滅菌用生物指示物

1范圍

本文件規定了擬在評價使用濕熱作為滅菌介質的滅菌過程中的試驗微生物、菌懸液、染菌載體、生

物指示物的要求和試驗方法。

本文件適用于濕熱滅菌用生物指示物。

本文件不適用于其它類型的生物指示物。

注1：關于濕熱滅菌確認和常規控制的要求見ISO17665系列。

2規范性引用

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

ISO11138-1:2017醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（Sterilizationofhealthcare

products—Biologicalindicators—Part1:GeneralRequirements）

注：GB/T18281.1-20XX醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則(ISO11138-1:2017,IDT)

ISO18472-1:2018醫療保健產品滅菌生物與化學指示物測試設備（Sterilizationofhealthcare

products—Biologicalandchemicalindicators—Testequipment）

注：GB/T24628醫療保健產品滅菌生物與化學指示物測試設備(ISO18472-1:2018,IDT)

3術語和定義

ISO11138-1界定的術語和定義適用于本文件。

4通則

ISO11138-1的要求適用。

5試驗微生物

5.1試驗微生物應是嗜熱脂肪地芽孢桿菌或其它證明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。

注1：嗜熱脂肪芽孢桿菌已重新分類為嗜熱脂肪地芽孢桿菌。

注2：目前被認為適用的嗜熱脂肪地芽孢桿菌，如ATCC7953（NCTC10007,DSM22和CIP52.81）和ATCC

12980（同NRRLB-4419）。

5.2如使用嗜熱脂肪地芽孢桿菌或枯草芽孢桿菌ATCC35021(5230)以外的試驗菌株，應確定試驗微

生物的抗力的適宜性。

注：在低于121℃的情況下，可能使用枯草芽孢桿菌ATCC35021(5230)等菌株，尤其是對熱敏液體進行的滅菌

過程。

1

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

6菌懸液

ISO11138-1的要求適用。

7載體與初級包裝

7.1用于濕熱滅菌過程生物指示物的載體與初級包裝的材料適用性應證明符合ISO11138-1中5.2

和附錄B的要求。

7.2確定符合性的暴露條件應為：

a)最低暴露溫度：制造商標稱的最高暴露溫度的5℃或以上。

b)滅菌因子：干飽和蒸汽。在未使用干飽和蒸汽的濕熱滅菌過程，例如使用空氣/蒸汽的混合物

時，應選擇適宜條件并加以注明，以區別于本文件。

c)最高暴露溫度：由制造商標稱。如制造商未標稱，應采用140℃。

d)暴露時間：≥30min。

注：只要載體處于濕熱滅菌的實用范圍之內，這些條件就代表了對載體的實際檢驗。

8染菌載體和生物指示物

GB/T18281.1的要求適用。

9菌數和抗力

9.1制造商應聲明抗力特性應按ISO11138-1的6.4要求標稱。

9.2生物指示物上每單位活菌數應以≤0.1×10n的整數倍標稱（如：每毫升菌懸液、每個染菌載體

或每個生物指示物）。

9.3染菌載體和生物指示物的活菌數應≥1.0×105。

9.4抗力應以121℃時的D值表示，單位為分鐘。制造商可以選擇其它溫度。每一批次的生物指示

物或染菌載體的D值應以60℃下分鐘數進行標稱，并保留一位小數。

9.5在根據附錄A進行試驗時，用于檢驗的菌懸液、染菌載體和生物指示物所使用的嗜熱脂肪地芽

孢桿菌芽孢的D121值應≥1.5min。其他微生物的D值應支持其應用。菌懸液、染菌載體和生物指示物

上的試驗微生物z值，應在110–138℃范圍內不小于3個溫度下測定。這些數據用于計算z值，

z值應≥6℃（見附錄B）。

9.6在本文件和ISO11138-1任何其它部分規定的抗力特性應使用其所用滅菌過程的特定關鍵變量來

定義。

9.7按GB/T18281.1-20XX附錄C和附錄D所給方法測定D值。

9.8D值和存活-殺滅反應特性的確定需要使用抗力儀，并在規定的過程參數下應用（見附錄A）。

9.9存活-殺滅區間能用ISO11138-1附錄E中的公式計算。

注：此信息對使用者在比較同一制造商不同批次產品是有價值的。

示例：使用ISO11138-1中附錄E中的公式要結合本文件規定的最小菌數和最小D值，存活-殺滅反應特性為：

——在121℃時,存活時間≥4.5min，殺滅時間≤13.5min。

2

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

A

A

附錄A

（規范性）

濕熱滅菌抗力的測試方法

A.1通用要求

本文件所述方法需要特定的設備：抗力儀。濕熱滅菌所用抗力儀的過程參數見ISO18472。

對測試方法的具體要求見A.2。

A.2步驟

A.2.1將測試樣品置于合適的載樣器材上。

A.2.2讓抗力儀腔室預熱到操作溫度，如121℃±0.5℃。

A.2.3把裝有樣品的載樣器放入反應室內，關閉腔室，并啟動試驗循環。

A.2.4按以下程序進行操作：

第一步：腔室抽真空，2min內達到4.5kPa±1kPa。

第二步：向腔室內通入蒸汽，使溫度和壓強在10s內達到規定值。暴露時間為0min時，應不通入

蒸汽。

第三步：在規定的暴露時間內維持該條件。

第四步：在暴露階段結束后，通入過濾的空氣直至到外界大氣壓。應在10s內將腔室內壓力減到

100kPa以下。

第五步：測試周期結束后，迅速從腔室中取出裝有樣品的載樣器，并迅速冷卻，把樣品轉移到生長

培養基中并培養（見ISO11138-1第七章）。

A.2.5樣品的轉移過程應做書面記錄。所有的測試需使用相同的時間周期。

A.3抗力的確定

應按照ISO11138-1中附錄C，附錄D和附錄E部分規定的方法測定抗力。

3

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

B

B

附錄B

（規范性）

z值和相關系數r2值的計算

B.1根據ISO11138-1中附錄C或附錄D中提供的方法獲得數據，通過log10D值對暴露溫度作圖

可求得z值，單位為攝氏度（℃）。在使用線性回歸分析法時，z值等于“最佳擬合曲線”斜率的負倒

數。

注：z值和相關系數r2值的計算方法參見9.5。

B.2通過式（B.1）計算最佳擬合曲線的斜率

m(nG)(AB)

(nG)(A2).......................................................(B.1)

式中：

m—最佳擬合曲線的斜率：

n—（D值/溫度）的組數：

G=∑[t(lgy)]：

A=∑(t)：

B=∑(lgy)：

C=∑(t2)。

計算所需要的數據見表B.1：

表B.1示例線性回歸分析法計算數據

22

D值（y）min暴露時間（t）℃log10ytt（log10y）（log10y）

22

y1t1log10y1t1t1（log10y1）（log10y1）

22

y2t2log10y2t2t2（log10y2）（log10y2）

22

y3t3log10y3t3t3（log10y3）（log10y3）

22

yntnlog10yntntn（log10yn）（log10yn）

inininin

in2

iiiiE

AtBlog10y2D(tlog10y)(log10yi)

i1Ci1i1

i1ti

i1

賦值變量ABCGE

B.3表B.2給出具體的最佳擬合曲線斜率的計算示例。

表B.2斜率的計算示例

22

D值（y）min暴露時間（t）℃log10ytt（log10y）（log10y）

4

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

22

y1=2.0t1=121log10y1=0.3010t1=14641t1（log10y1）=36.4210(log10y1)=0.0906

22

y2=1.1t2=124log10y2=0.0414t2=15376t2（log10y2）=5.1336(log10y2)=0.0017

22

y3=0.4t3=129log10y3=?0.3979t3=16641t3（log10y3）=?51.3291(log10y3)=0.1583

i3i3i3i3i5

22

iiCD(tilogyi)E

AtBlgyti10(log10yi)

i1

i1i1i1i1

賦值變量A=374B=?0.0555C=46658G=?9.7745E=0.2506

m(nG)(AB)

(nG)(A2)

m[(3)(0.97745)][(374)(0.0555)]

[(3)(46658)](3742)

(29.3235)(20.7570)

m(139974)(139876)

8.5665

m98

m0.0874

B.4z值為上述斜率的負對數，可用下列公式求得：

1

z1(m)

使用上面的公式計算斜率，得到z值:

1

z1(0.0874)11.4416，

保留一位小數，得到z值為11.4℃。

B.5相關系數r2使用下列公式計算：

2{(G)[(A)(B/n)]}2

r

[(C)(A2/n)][(E)(B2/n)]

2

公式中所有的變量都同B.2，E=(lgy)。

B.6下面是計算z值相關系數的示例，使用B.2相同數據：

5

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

2

2{(9.7745)[(374)(0.0555/3)]}

r

[(46658)(3742/3)][(0.2506)(0.05552/3)

2

2{(9.7745)[(6.9190)]}

r[(46658)(46625.3333)][(0.2506)(0.0010)

2

2(2.8555)

r(32.6667)(0.2496)

28.1539

r8.1536

2

r1.0000

6

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

參考文獻

[1]ISO14161,Sterilizationofhealthcareproducts-Biologicalindicators-Guidancefortheselection,use

andinterpretationofresults

[2]ISO17665-1,Sterilizationofhealthcareproducts-Moistheat-Part1:Requirementsforthe

development,validationandroutinecontrolofasterilizationprocessformedicaldevices

7

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規

定起草。

本文件是GB/T18281《醫療保健產品滅菌生物指示物》系列標準的第3部分。GB/T18281已

經發布了以下部分：

——第1部分:通則；

——第2部分:環氧乙烷滅菌用生物指示物；

——第4部分:干熱滅菌用生物指示物；

——第5部分:低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物；

——第7部分:選擇、使用和結果判斷指南；

——第8部分:縮短生物指示物培養時間的確認方法

本文件代替GB/T18281.3-2015《醫療保健產品滅菌生物指示物第3部分：濕熱滅菌用生物指

示物》與GB/T18281.3-2015相比，主要技術變化如下：

——更改了z值測定的溫度范圍（9.5，見2015版的9.5）

——增加了微生物數量和抗力的要求（9.7，見2015版的9.7）

——刪除了范圍中的注2（見1.范圍）

本文件等同采用ISO11138-3:2017《醫療保健產品滅菌生物指示物第3部分：濕熱滅菌用生物

指示物》。

與本文件中規范性引用的國際文件有一致性對應關系的我國文件如下，

GB/T18281.3醫療保健產品滅菌生物指示物第3部分濕熱滅菌用生物指示物（ISO1138-3IDT）

GB/T24628醫療保健產品滅菌生物與化學指示物測試設備（ISO18472，IDT）

本部分做了下列編輯性修改：

——刪除了范圍中注2的內容（范圍，見2015版的范圍）

本文件由國家藥品監督管理局提出。

本文件由全國消毒技術與設備標準化技術委員會（SAC/TC200）歸口。

本文件主要起草單位：

本文件主要起草人：

本文件所代替標準的歷次版本發布情況為：

——2000年首次發布為GB18281.3—2000；

——2015年第一次修訂為GB18281.3—2015；

——本次為第二次修訂。

I

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

醫療保健產品滅菌生物指示物

第3部分：濕熱滅菌用生物指示物

1范圍

本文件規定了擬在評價使用濕熱作為滅菌介質的滅菌過程中的試驗微生物、菌懸液、染菌載體、生

物指示物的要求和試驗方法。

本文件適用于濕熱滅菌用生物指示物。

本文件不適用于其它類型的生物指示物。

注1：關于濕熱滅菌確認和常規控制的要求見ISO17665系列。

2規范性引用

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

ISO11138-1:2017醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則（Sterilizationofhealthcare

products—Biologicalindicators—Part1:GeneralRequirements）

注：GB/T18281.1-20XX醫療保健產品滅菌生物指示物第1部分：通則(ISO11138-1:2017,IDT)

ISO18472-1:2018醫療保健產品滅菌生物與化學指示物測試設備（Sterilizationofhealthcare

products—Biologicalandchemicalindicators—Testequipment）

注：GB/T24628醫療保健產品滅菌生物與化學指示物測試設備(ISO18472-1:2018,IDT)

3術語和定義

ISO11138-1界定的術語和定義適用于本文件。

4通則

ISO11138-1的要求適用。

5試驗微生物

5.1試驗微生物應是嗜熱脂肪地芽孢桿菌或其它證明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。

注1：嗜熱脂肪芽孢桿菌已重新分類為嗜熱脂肪地芽孢桿菌。

注2：目前被認為適用的嗜熱脂肪地芽孢桿菌，如ATCC7953（NCTC10007,DSM22和CIP52.81）和ATCC

12980（同NRRLB-4419）。

5.2如使用嗜熱脂肪地芽孢桿菌或枯草芽孢桿菌ATCC35021(5230)以外的試驗菌株，應確定試驗微

生物的抗力的適宜性。

注：在低于121℃的情況下，可能使用枯草芽孢桿菌ATCC35021(5230)等菌株，尤其是對熱敏液體進行的滅菌

過程。

1

GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

6菌懸液

ISO11138-1的要求適用。

7載體與初級包裝

7.1用于濕熱滅菌過程生物指示物的載體與初級包裝的材料適用性應證明符合ISO11138-1中5.2

和附錄B的要求。

7.2確定符合性的暴露條件應為：

a)最低暴露溫度：制造商標稱的最高暴露溫度的5℃或以上。

b)滅菌因子：干飽和蒸汽。在未使用干飽和蒸汽的濕熱滅菌過程，例如使用空氣/蒸汽的混合物

時，應選擇適宜條件并加以注明，以區別于本文件。

c)最高暴露溫度：由制造商標稱。如制造商未標稱，應采用140℃。

d)暴露時間：≥30min。

注：只要載體處于濕熱滅菌的實用范圍之內，這些條件就代表了對載體的實際檢驗。

8染菌載體和生物指示物

GB/T18281.1的要求適用。

9菌數和抗力

9.1制造商應聲明抗力特性應按ISO11138-1的6.4要求標稱。

9.2生物指示物上每單位活菌數應以≤0.1×10n的整數倍標稱（如：每毫升菌懸液、每個染菌載體

或每個生物指示物）。

9.3染菌載體和生物指示物的活菌數應≥1.0×105。

9.4抗力應以121℃時的D值表示，單位為分鐘。制造商可以選擇其它溫度。每一批次的生物指示

物或染菌載體的D值應以60℃下分鐘數進行標稱，并保留一位小數。

9.5在根據附錄A進行試驗時，用于檢驗的菌懸液、染菌載體和生物指示物所使用的嗜熱脂肪地芽

孢桿菌芽孢的D121值應≥1.5min。其他微生物的D值應支持其應用。菌懸液、染菌載體和生物指示物

上的試驗微生物z值，應在110–138℃范圍內不小于3個溫度下測定。這些數據用于計算z值，

z值應≥6℃（見附錄B）。

9.6在本文件和ISO11138-1任何其它部分規定的抗力特性應使用其所用滅菌過程的特定關鍵變量來

定義。

9.7按GB/T18281.1-20XX附錄C和附錄D所給方法測定D值。

9.8D值和存活-殺滅反應特性的確定需要使用抗力儀，并在規定的過程參數下應用（見附錄A）。

9.9存活-殺滅區間能用ISO11138-1附錄E中的公式計算。

注：此信息對使用者在比較同一制造商不同批次產品是有價值的。

示例：使用ISO11138-1中附錄E中的公式要結合本文件規定的最小菌數和最小D值，存活-殺滅反應特性為：

——在121℃時,存活時間≥4.5min，殺滅時間≤13.5min。

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GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

A

A

附錄A

（規范性）

濕熱滅菌抗力的測試方法

A.1通用要求

本文件所述方法需要特定的設備：抗力儀。濕熱滅菌所用抗力儀的過程參數見ISO18472。

對測試方法的具體要求見A.2。

A.2步驟

A.2.1將測試樣品置于合適的載樣器材上。

A.2.2讓抗力儀腔室預熱到操作溫度，如121℃±0.5℃。

A.2.3把裝有樣品的載樣器放入反應室內，關閉腔室，并啟動試驗循環。

A.2.4按以下程序進行操作：

第一步：腔室抽真空，2min內達到4.5kPa±1kPa。

第二步：向腔室內通入蒸汽，使溫度和壓強在10s內達到規定值。暴露時間為0min時，應不通入

蒸汽。

第三步：在規定的暴露時間內維持該條件。

第四步：在暴露階段結束后，通入過濾的空氣直至到外界大氣壓。應在10s內將腔室內壓力減到

100kPa以下。

第五步：測試周期結束后，迅速從腔室中取出裝有樣品的載樣器，并迅速冷卻，把樣品轉移到生長

培養基中并培養（見ISO11138-1第七章）。

A.2.5樣品的轉移過程應做書面記錄。所有的測試需使用相同的時間周期。

A.3抗力的確定

應按照ISO11138-1中附錄C，附錄D和附錄E部分規定的方法測定抗力。

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GB/T18281.3—20XX/ISO11138:2017

B

B

附錄B

（規范性）

z值和相關系數r2值的計算

B.1根據ISO11138-1中附錄C或附錄D中提供的方法獲得數據，通過log10D值對暴露溫度作圖

可求得z值，單位為攝氏度（℃）。在使用線性回歸分析法時，z值等于“最佳擬合曲線”斜率的負倒

數。

注：z值和相關系數