臨床檢驗基礎

第一章血液標本采集和血涂片的制作

1、皮膚采血的法的采血方法

（1）輕輕按摩采血部位（左手無名指指腹內側或耳垂）使局部自然

充血。

（2）消毒皮膚，待其干燥后緊捏采血部位兩側

（3）右手持一次性消毒采血針迅速刺入（深度以2到3cm為宜），第

一滴血因混入組織液，一般將其棄之不用。或根據檢測項目決定是否

（4）采血結束后用無菌干棉簽壓住采血部位以止血。

2、負壓采血法的的優點：有效保護有效成分，劑量準確，傳送方便，

封閉無塵，標識醒目，刻度清晰，容易保存，一次進針多管采血等

3、常用添加劑的用途與特點

①乙二胺四乙酸鹽【EDTA】：

作用：與血液中Ga2+結合形成螯合物凝血過程中斷與血液中Ga2+結

合。

用途：全血細胞計數。離心法HCT的測定。

注意事項：抗凝劑用量和血液的比例，采血后必須立即混勻。

②枸椽酸鈉：

作用：與血液中Ga2+結合

用途：血沉，凝血實驗，血液保養液。

注意事項：抗凝能力較弱，抗凝劑濃度，體積和血液的比例非常重要

③肝素

作用：加強抗凝酶滅活絲氨酸蛋白酶，阻止凝血酶形成。

用途：可用于血漿的生化，免疫項目，如血氣分析，肝素鋰適用于紅

細胞滲透脆性試驗注意事項：電極法測血鉀與血清結果有差異；不適宜

血常規檢查。

④草酸鹽

作用：草酸鹽與血液中中Ga2+形成草酸鈣沉淀

用途：草酸鉀干粉常用于血漿標本抗凝

注意事項：容易造成鉀離子污染其他檢測項目，現用的少。

4、血涂片的染色；

Wright染色的染色原理：物理吸附和化學親和作用

5、不同PH對血細胞染色結果的影響

①PH<PI導致蛋白質所帶正電荷增多，易與伊紅結合。染色結果偏

紅

②PH>PI導致蛋白質所帶負電荷增多，易與亞甲藍或天青結合，

染色結果偏藍

6、Wright染液是由伊紅和亞甲藍溶解于甲醇形成。

其中甲醇的作用為：

①溶解伊紅和亞甲藍

②具有很強的脫水作用，可以固定紅細胞形態，提高對染料的吸附作

用。增強染色效果。

7、血涂片染色的方法學評價

①Wright染色：最常見的染色法，尤其對于胞質成分及中性顆粒等染

色，可獲得滿意的染色效果，但對胞核的染色不如Giemsa染色。

②Giemsa染色：對胞核和寄生蟲著色較好，結構顯示更清晰，而胞質

和中性顆粒則著色較差

③Wright-Giemsa染色：廣泛使用的方法，所使用的緩沖液與Wright

染色法相同，該對血細胞胞核，胞質和胞質內顆粒均著色鮮明。

第二章血液一般檢查

1、紅細胞計數的方法有顯微鏡法和血液分析儀法

2、紅細胞計數的檢測原理：

顯微鏡法的檢測原理：采用等滲稀釋法將血液標本稀釋一定倍數（200

倍），沖入牛鮑血細胞計數板中，在顯微鏡下計數一定區域（體積）內的

紅細胞數量，經換算求出每升血液中紅細胞數量。

[N=5個中方格/HP】RBC/L=N3（25/5）31031063201=N31012

報告方式X.XX31012

3、血紅蛋白【Hb】

4、檢測原理以及方法學評價

檢測原理：

氟化高鐵血紅蛋白（HiCN）測定檢測原理，血紅蛋白（SHb除外）中

的亞鐵離子被高鐵氟化鉀氧化為高鐵離子，血紅蛋白轉化成高鐵血紅蛋白

[Hi],Hi與氟化鉀中的鼠離子反應生成HiCNoHiCN最大吸收波峰為540nm。

在特定條件下，HiCNmmol消光系數為44/（mmol2cm）。

方法學評價:

常用的比色法有：①氟化高鐵血紅蛋白【HiCN】，（HiCN測定法是WHO

和ICSH推薦的參考方法，）十二萬基硫酸鈉血紅蛋白測定法［SDS-Hb］堿

羥血紅蛋白【AHD575］測定法，疊氮高鐵血紅蛋白【HiN3】測定法，漠化

十六烷基三甲胺［CTAB］等。

方法學評價：

①：HiCN測定法：

優點：參考方法，操作簡單，反應速度快，可檢測除SHb之外的所有

Hb,產物穩定，便于質控。

缺點：KCN有劇毒，可是高白細胞高球蛋白血癥的標本渾濁，對HbCO

的反應慢,不能測定HbS。

②SDS-Hb

優點：次選方法，操作簡單，呈色穩定，試劑無毒，結果準確，重復

性好。

缺點：SDS質量差異大，消光系數未定，SDS溶血活力大，易破壞白

細胞，不適用于同時進行白細胞計數的血細胞分析儀。

③AHD575

優點：試劑簡易，無毒，呈色穩定，準確性與精密度較高

缺點：575nm波長比色，不便于自動檢測，HbF不能轉化，氟化血紅

素純度不夠。④HiCN測定法

優點：準確性精密度較高

缺點：試劑仍有毒性（為HiCN的1/7）、HbCO轉化慢（20分鐘）

5、異常紅細胞異常的機制及臨床意義

小紅細胞

直徑<6Rm

可能機制：①中央染色過淺；Hb合成障礙；②淡染色區消失（球形紅

細胞）

臨床意義：缺鐵性貧血，珠蛋白生成障礙性貧血，遺傳性球形紅細胞

增多癥

大紅細胞

直徑>10um中央染色深

可能機制：①早期脫核的年輕RBC②葉酸及維生素B12缺乏③胞膜膽

固醇/磷脂酰膽堿比值增高

臨床意義：RBC釋放加速，巨幼細胞性貧血，溶血性貧血等，肝病，

脾切除

靶型紅細胞

形狀改變：中央染色深門，外圍蒼白，邊緣又深染呈靶狀或牛眼狀

可能機制：①Hb組成和結構變異②脂質異常

臨床意義：各種低色素性貧血，尤其珠蛋白生成障礙性貧血，膽汁淤

積性黃疸，脾切除后，肝病。

1、紅細胞的異常結構和排列有哪些？

①豪焦小體②卡波環③嗜堿性點彩紅細胞④有核紅細胞

【血細胞比容】：一定條件下全血中的紅細胞經離心沉淀壓緊的紅細

胞在全血中所占體積的比值。

2、血細胞比容測定方法的方法學評價

【血細胞比容】一定容積全血中紅細胞所占的百分比。又稱紅細胞比

容（比積/壓積）溫氏法（wintrobe法）：

優點：應用廣泛，無需特殊儀器

缺點：血漿殘留量多；需標本量多；耗時；CV2%；淘汰方法。

微量法：

優點：WHO推薦的常規方法，CLSI推薦的參考標準，血漿殘留量少,

簡單快速，標本用量少，相對離心力高，結果準確，快速，重復性好

缺點：仍有殘留血漿，但較溫氏法少，需微量高速血液離心機

血細胞分析儀

優點：無需單獨才學，檢查快速，無血漿殘留，自動化程度高，簡單

快速，精密度好缺點：準確性不及微量離心法，需定期校正儀器。

放射性核素：

優點：ACSH推薦為參考方法，精確性最高

缺點：方法繁瑣，特殊，不適用于臨床常規檢查

PS：

2001年ICSH規定的HCT測定國際參考方法：

（1）先以HiCN法測定受檢者血Hb濃度；

（2）用微量離心法處理血標本，取離心后毛細管中間段的壓積紅細

胞，采用HiCN法測定Hb；

（3）按以下公式計算HCT：

HCT=離心前全血的Hb/微量管中間壓積紅細胞的Hb

3、紅細胞平均指數:

紅細胞平均容積【MCV］：紅細胞群體中單個紅細胞體積的平均值

MCV=Het/RBC(fl)

紅細胞平均血紅蛋白含量【MCH】：細胞群體中單個紅細胞血紅蛋白

含量的平均值MCH=Hb/RBC(pg)

紅細胞平均血紅蛋白濃度【MCHC】：全部血細胞平均每升紅細胞中所

含Hb的濃度。MCHC=Hb/Hct(g/L)

臨床意義：紅細胞平均指數可用于評學形態學分類及提示貧血的可能

與原因。

4、網織紅細胞

【網織紅細胞RET］：晚幼紅細胞脫核后到完全成熟紅細胞間的過渡細

胞，其胞質中殘存嗜堿性物質核糖核(RNA),經煌焦油藍等活體染色后，

嗜堿性物質凝聚成藍黑色顆粒，顆粒與顆粒連綴成線，線連接成網，故稱

為網織紅細胞。

網織紅細胞檢測的目的：

①鑒別貧血的類型(增生性，非增生性，增生增高性)

②檢查骨髓的功能

③檢測貧血的治療效果

④評價骨髓移植后，再生障礙性貧血細胞毒藥物誘導治療后或EPO治

療后的紅細胞造血情況

網織紅細胞計數方法：Miller窺盤法：普通顯微鏡法計數時為縮小分

布誤差，降低勞動強度，ICSH以及我國衛生臨床檢驗中心推薦方法，在A

區域計數紅細胞，B區域內計數網織紅細胞。

網織紅細胞計數方法臨床意義：是反應骨髓造血功能的重要指標。

5、紅細胞沉降率

【紅細胞沉降率ESR】離體抗凝血靜置后，紅細胞在單位時間內沉降

的速度。

影響血細胞沉降率的因素

（1）血漿因素

①血漿中各種蛋白比例改變

促進紅細胞形成緡錢狀：纖維蛋白原>球蛋白>膽固醇、甘油三

脂

抑制紅細胞形成緡錢狀：清蛋白、糖蛋白、卵磷脂

（2）紅細胞因素

①數量：

數量少，總面積減少，血漿逆阻力減小，血沉加快；反之，血沉減慢。

但紅細胞太少，不易形成緡錢狀，血沉減慢。

②紅細胞直徑和形狀：

直徑大，血沉快；而球型、鐮型不易聚集，則血沉減慢。

（3）其他因素

①血沉管與血沉架：

符合標準，血沉管應垂直，傾斜時，則血沉加快。血沉管傾斜3度,

則血沉可增加30%。②溫度：校正

第二節白細胞檢查

1、白細胞計數

【中性粒細胞N嗜堿性粒細胞B淋巴細胞L單核細胞M嗜酸性粒

細胞E]

白細胞檢查的方法有①顯微鏡法和②血液分析儀法

檢測原理：采用白細胞計數稀釋液（如冰乙酸）將血液標本稀釋一定

倍數，同時破壞紅細胞和固定白細胞，充入改良牛鮑血細胞計數板，在低

倍鏡下計數一定區域（體積內）的白細胞數量，經換算求出每升血液中白

細胞總數。

白細胞計數的計算

WBC（/L）=4個大方格內總數（N）/43103106320=N/203106

2、【中性粒細胞增多癥】：Nsg>70%,外周血中中性粒細胞絕對值

>73109/L

3、中性粒細胞反應性增多總論：

（1）急性感染或炎癥：

（2）廣泛組織損傷或壞死：

（3）急性溶血:

（4）急性失血：

（5）急性中毒:

（6）惡性腫瘤：

PS：當粒細胞<1.0*109/L時，極易發生感染

當粒細胞<0.5*109/L（急性粒細胞缺乏癥）時，嚴重感染和疾病復

發的危險增加患者出現發熱，咽痛，口腔潰瘍等感染時，甚至引起敗血

癥

4、骨髓增生性疾病：

臨床意義：

①慢性粒細胞白血病。真性紅細胞增多癥，原發性骨髓纖維化，原發

性血小板增多癥等，嗜堿性粒細胞輕度增高可作為骨髓增生性疾病的一個

早期征象

②外周血液嗜堿性粒細胞達10%~20%是慢粒的特征之一，若嗜堿性粒

細胞突然>20%,預示病情惡化

5、淋巴細胞減少（成人<1.0*109/L）

6、嗜堿性粒細胞計數

檢測原理：（顯微鏡法和血細胞計數儀）

顯微鏡檢測原理：采用嗜酸性粒細胞稀釋液（伊紅-丙酮）將血液稀釋

一定倍數后紅細胞和大部分其他白細胞被破壞，嗜酸性粒細胞則著色。

在低倍鏡下計數兩個計數池工10個大方格內的嗜酸性粒細胞，經換

算求出每升血液中嗜酸性粒細胞數量【絕對計數】

7、嗜酸性粒細胞計數的各種稀釋液的主要作用

①保護嗜酸性粒細胞（丙醇，乙醇）

②破壞紅細胞和中性粒細胞（碳酸鉀，草酸鏤）

③使嗜酸性粒細胞著色（伊紅，漠甲酚紫，固綠）

④甘油一一防止乙醇揮發

⑤抗凝劑一一防止血液凝固

8、中性粒細胞的異常形態包括

①毒性表現

大小不均中毒顆粒空泡形成杜勒小體退行性病變

②棒狀小體【白細胞胞質中出現的紫紅色細桿狀物質，主要見于急性

粒細胞性白血病，急性單核細胞白血病急性淋巴細胞型白血病無】

③中性粒細胞的核象變化

【核象】：指粒細胞的分葉狀況，分為核左移和核右移，反映了細胞

的發育階段。核左移

①【再生性核左移】：核左移伴WBC總數增高。

②【退行性核左移】：核左移，WBC總數不增高，甚至減低

【核右移】：外周血分葉核中性粒細胞增多，中性粒細胞核分5葉及5

葉以上者超過3%。稱為核右移。

9、【血小板（PLT）計數】：血小板計數是測定單位容積內的血液中血

小板的數量。檢測原理：

①普通光學顯微鏡計數法

1）破壞紅細胞稀釋法（溶血法）

2）不破壞紅細胞稀釋法

②相差顯微鏡計數法:立體，識別血小板形態

③血液分析儀法：阻抗法、光散射法

④流式細胞儀法:熒光素標記PLT單克隆抗體

方法學評價：

1.血液分析儀法：常用方法

速度快、重復性好，準確性高、參數多。

激光法（核酸染色）優于阻抗法。不能排除干擾

血小板數量明顯異常仍需顯微鏡計數-復檢標準。

2.流式細胞儀法：單克隆抗體標記PLT

血小板計數ICSH推薦參考方法

3.相差顯微鏡法：易于識別

草酸鹽稀釋液為手工法的參考方法。

4.普通光學顯微鏡法

草酸鏤稀釋液：紅細胞破壞力強，血小板形態清楚。首選方法

尿素稀釋法：尿素易分解。不能完全溶解紅細胞。

高鐵氟化鉀（赤血鹽）法；穩定，但不能完全溶解紅細胞

質量保證：

原則：避免血小板激活、破壞和污染。

1.檢測前：采血過程是否順利、抗凝劑（肝素不適用于PLT,EDTA鉀鹽

抗凝lh內不穩定）、存儲時間（過久PLT減低）、溫度（室溫）。

2.檢測中：手工法定期檢測試劑質量有無污染

儀器室內、室間質控合格

3.檢測后：核對（參考方法、血涂片、2次CV<10%）

（1）血涂片一聚集、碎片、體積、8-15/油鏡。

血涂片計數PLT=（PLT/視野）3RBC/（200RBC/視野）

（2）參考方法

（3）2次計數，誤差取均值。

血小板形態：

正常血小板形態:

兩面微凸的圓盤狀，直徑1.5?3um。淡藍或淡紅色，中心部分有細

小、分布均勻或分散的紫紅色顆粒

異常血小板

1.大小異常(生理情況以中和小型為主)

大血小板：

年輕PLT(網織PLT)，直徑4?7Hm。

見于特發性PLT減少性紫瘢、巨大PLT綜合癥、骨髓異常增生綜合征

或PLT破壞增加的PLT減少癥、骨髓移植。

小血小板：

直徑<1.511m

缺鐵性貧血、再障、特發性血小板減少性紫瘢

2.形態異常(不規則和畸形>10%),正常人<2%

3.聚集性和分布異常

正常情況下非抗凝血，血小板3-5個成簇或成團，聚集與散在比例為

20：1

(1)血小板衛星現象：PLT粘附圍繞中性粒細胞周圍。

(2)血小板片狀聚集：特發性血小板增多癥呈大片聚集

(3)血小板減少：再障、特發性血小板減少性紫瘢PLT減少，PLT聚集

減少。

(4)血小板功能異常：血小板無力癥無聚集，散在分布

10、血栓和止血一般檢查

【出血時間BT】：在特定條件下，皮膚小血管被刺破后，血液自行流

出到自然停止的時間。TBT推薦，標準測定器。皮膚切口的深度、長度

固定重復性好，靈敏度高

臨床意義：

1.BT延長涉及血小板和血管壁的缺陷。血小板數量異常或功能缺陷。

某些凝血因子缺乏，如VWF、DIC、低（無）纖維蛋白原血癥。

2.BT縮短嚴重的血栓性疾病。

【凝血酶原時間測定PT】：是外源性凝血途徑的篩檢試驗，反映外源

性凝血途徑和共同途徑凝血因子是否異常。

檢測原理（一步凝固法）

37℃在待測血漿中，加入足夠量的組織凝血活酶和適量的鈣，滿足外

源性凝血的全部條件。從加鈣到血漿開始凝固所需要的時間。

檢測方法：光學法電流法磁珠法

3.ISI和INR

國際敏感度指數（internationalsensitivityindexISI）

組織凝血活酶參考品與每批組織凝血活酶PT校正曲線的斜率。

ISI值越小越接近0,試劑越敏感。

標準品：1967年人腦凝血活酶批號67/40ISI=1.0

現用參考品BCT/253,RBT/79o

PT試劑應有與檢測儀器整合的ISI

報告方式

檢測標本和正常對照PT時間（秒）

PTR=患者PT/對照PT

口服抗凝劑需報INR。應建自己的參考值

PTA：PT的百分活動度，評估肝受損程度。

PT的結果審核與復查，結合標本質量

臨床意義

1.PT延長；超過對照3秒。

見于先天性FH、FV、FVU、FX減低（&止;40%）及纖維蛋白缺乏；

獲得性凝血因子缺乏（DIC）,原發性纖溶，維生素K缺乏，雙香豆素

抗凝治療。

2.PT縮短：

見于先天性FV增多，高凝狀態，口服避孕藥，血栓前狀態及血栓性

疾病.

【D-二聚體】：由于繼發性纖溶中纖溶酶的主要作用底物是纖維蛋白，

生成特異性EDP即為D-D,D-D是繼發性纖溶特有帶鞋子產物。

PS：外周血中:M>N>E>B>L

溶血素作用：N>M>；L（M為中間細胞包括MEB幼稚細胞】

散射E>B>N>M>L

第三章血液分析儀

現代血液分析儀綜合應用了【電學】和【光學】兩大原理

電學檢測原理包括【電阻抗法】和【射頻電導法】

光學檢測原理包括【激光散射法】和【分光光度法】

必考題一XX派2、體積、電導、光散射（volumeconductivityscatterVCS）

在細胞近自然狀態下得出檢測結果。

V：用阻抗原理測定細胞體積。

C：根據細胞壁能產生高頻電流，采用高頻電針，測量細胞內部結構

(核漿比、顆粒)，辨別體積同，性質不同的細胞。

S：激光掃描細胞，產生不同角度的散射光，提供細胞形態、核結構，

并鑒別細胞顆粒。

必考題二

血液分析儀

1.0°——反映細胞大小、檢測細胞數量

2.7°——反映細胞內部結構及核染色質的復雜性

3.90°偏振光一一反映細胞內部顆粒及細胞核分葉情況

4.90°去偏振光一一“去偏振”是指垂直方向的激光光波運動隨光散

射結果而改變。嗜酸性粒細胞顆粒豐富，可消除偏振光，以中性粒細胞相

鑒別。

6、2005年國際實驗室血液學學會【ISLH】提出了顯微鏡復查的41條

建議性標準。全血計數(1-15)WBC分類和RET(16-23)可疑報警

(24-41)

9、白細胞直方圖的原理：在計數白細胞時，要加入溶血素使紅細胞

破壞，此時白細胞膜受到破壞，細胞漿流失，使白細胞體積大小發現變化，

因此需要強調的是在白細胞直方圖上細胞排列的順序不是細胞的原始大

小，而是經溶血液修飾的細胞大小

【中性粒細胞N嗜堿性粒細胞B淋巴細胞L單核細胞M嗜酸性粒

細胞E]

溶血素作用：N>M>；L(M為中間細胞包括MEB幼稚細胞】

16、尿液分析儀：

儀器組成：機械系統，光學系統，電路系統

.絨制層：含碘酸鹽和試劑層，碘酸鹽可破壞維生素C等物質的干擾

PS：維生素C影響的參數：

①【葡萄糖GLU】②【BIL膽紅素】③【NR■亞硝酸鹽】④【LEU白細

胞】

⑤【BLD隱血或紅細胞】

信號與意義：

FSC前向散射光強度一一顆粒大小，細胞大小

FI熒光強度一一從染色細胞發出的熒光，主要反映細胞染色質的強度

向前熒光脈沖寬度一一細胞染色質的寬度

向前散射光脈沖寬度一一細胞長度

電阻抗一一細胞體積成正比。

第五章尿液的一般檢查

【多尿】：指成人24小時尿量超過2.5L,兒童24小時尿量超過3L

少尿：<0.4L/24h或<17ml/h(兒童<0.8ml/Kg)

無尿:<0.1L/24h或12h無尿(兒童<30-50ml/24h)

閉尿：無尿發展至排不出尿稱為閉尿。

【血尿】：尿液含有一定量的紅細胞時稱為血尿。

1、尿比重的測量分為干化學試帶法，折射計法，尿比重計法超聲波

法稱重法折射計法:

①CLSI和中國臨床實驗室標準化委員會推薦參考方法

②易于標準化，標本用量少（1滴尿）可重復測定，尤其適用于少尿

患者和兒科患者③測定結果通常比尿比重計法低

臨床意義：尿比重可以粗略反映腎臟的濃縮于稀釋功能

低比重尿：尿比重常低于1.015時稱為低比重尿或低滲尿。

等滲尿:尿液比重常維持在1.010±0.003（與腎小球過濾液很接近）稱為

等滲液

2、尿滲量的臨床意義

①評價腎臟濃縮稀釋功能

②鑒別腎性和腎前性少尿

3、尿液酸堿度檢查的臨床意義

尿液酸堿度檢測主要用于了解機體酸堿平衡和電解質平衡情況，尿液

酸堿度是診斷呼吸性或代謝性酸堿中毒的重要指標。

4、正常尿液中蛋白質——30~130mg/24h

隨機尿----0-80mg/L陰性

尿液蛋白質----超過150mg/24h蛋白定性試驗為陽性

方法學評價：

①試帶法

主要用于尿液分析儀，操作簡單快速，易于標準化，適用于健康普查

或臨床篩檢，目前以廣泛應用于臨床。靈敏度70~100Mg/L,對白蛋白敏

感容易遺漏本周蛋白，采用單克隆抗體排除其他蛋白干擾存在干擾因素。

②磺基水楊酸

操作簡單，反應靈敏，結果顯示快，與白蛋白球蛋白等蛋白都可以

反應，靈敏度50mg,存在假陽性。CLSI推薦確證實驗。存在假陽性，假

陰性

③加熱乙酸法

方法經典而準確但操作復雜，特異性強，干擾因素小，靈敏度150mg

【組織性蛋白尿】：組織性蛋白尿是指來源于腎小管代謝產生的組織

破壞分解的炎癥或藥物刺激泌尿系統分泌的蛋白質，進入尿液而形成的蛋

白尿。反應腎小管功能。

5、尿糖測定的方法學評價：派※

1班氏法：

傳統方法；非特異性，可檢出多種糖；

簡便經濟，易受其他還原物質干擾。

2試帶法：

色原物質不同，反應不同；

大多數不與果糖、乳糖反應；

檢測葡萄糖特異性強，靈敏度高；

簡便迅速，適于自動化分析。

3薄層層析法：

操作復雜、費時；成本高，多用于研究。

6、尿酮體為：乙酰乙酸，8-羥丁酸，丙酮的檢測、主要為羥丁酸

檢測主要檢測的成分為：乙酰乙酸，丙酮

臨床意義:

當血酮體達到80mg/L時，尿酮體+,當尿酮體達到130mg/L時尿酮體

+++，

尿酮體檢查常被用于糖代謝障礙和脂肪不完全氧化性疾病或狀態的

輔助診斷。強陽性及如果具有醫學決定價值，只有約10%的患者體內僅有

8-羥丁酸而呈現陰性。

7、膽紅素的定性篩檢確證試驗一一偶氮法

偶氮法假陰性①尿液維生素定都達1.42mmol/L和存在亞硝酸鹽時。②

膽紅素遇光氧化。假陽性：藥物

8、不同類型黃疸的鑒別診斷

9、血紅蛋白測定的方法學評價

1試帶法

試劑穩定；

假陽性：過氧化物、氧化劑或細菌產生過氧化酶；

假陰性：大量還原物質(VitC)；不僅與游離Hb反應，也與完整RBC

反應；篩檢試驗。

2化學法

試劑穩定性差；

特異性低；

假陽性：混入鐵、硝酸、銅等；含過氧化物酶或對熱不穩定酶。

3免疫法

方便快捷靈敏度高特異性強確證實驗

臨床意義：尿液出現Hb使血管內溶血的證據之一

10、人絨毛膜促性腺激素【HCG】檢測原理大克隆免疫膠體金法：

尿中HCG與8-HCG單克隆抗體接觸后,形成抗原抗體復合物吸附

于固相載體，再加入辣根過氧化酶標記的B-HCG抗體，形成了抗體-抗原-

酶標抗體復合物（雙抗夾心復合物），洗滌去除未結合的酶標抗體，加

入酶底物和顯色劑，觀察顏色的改變。

方法學評價：

1ELISA：操作簡便；靈敏度高；特異性高；早期篩選試驗，可半定量；

應用廣泛。是妊娠早期篩檢實驗

2單克隆抗體膠體金試驗簡便快速；靈敏度好；特異性高；可

半定量；應用廣泛。是較理想的早早孕診斷方法。

11、乳糜液和脂肪

乳糜尿定性有機溶劑抽提法檢測原理：乙醛溶解并抽提乳糜微粒、脂

肪小滴，使渾濁尿液澄清，再用蘇丹III對抽提物染色，鏡下觀察染紅

色的球形小體。

抽提液呈現陽性可確診為乳糜尿，為確證實驗。

12、本周蛋白【BJP】：游離免疫球蛋白輕鏈

檢測尿液游離LC的最佳方法是免疫固定電泳法

13、尿液有形成分顯微鏡檢查

（一）尿液有形成分【細胞】【管型】【病原體】【結晶】

標準化尿液顯微鏡檢查法是尿液有形成分檢查的金標準，干化學檢查

或尿液理學檢查中紅細胞，白細胞，蛋白質和亞硝酸鹽4項中有一項異常

者，必須進行顯微鏡檢查，并以顯微鏡檢查為準。

混勻一滴尿法（直接涂片法）檢測原理：

直接取新鮮混勻尿液1滴涂片檢查先用低倍鏡（LP）觀察20個視野

的管型，再用高倍鏡（HP）觀察10個視野的細胞

報告方式］（半定量方式）

XX管型：最低數~最高數/LPF

XX細胞：最低數~最高數/HPF

XX結晶：1+-4+/HPF

標準化沉渣定量計數板法推薦的尿液有形成分定量檢查方法

PS：甲醛為尿液防腐劑

（二）1小時尿液有形成分排泄率

lh有形成分排泄率又稱lh尿液有形成分計數,是計數3h內尿中細胞、

管型的數量，再換算為訃的排出量

因留取定時尿液定量計數，能更準確地反映泌尿系統的狀況，故對腎

臟疾病的診斷可提供較為可靠的尿液檢查依據

紅細胞增多見于急性腎炎，白細胞增多見于腎盂腎炎

14、派※※※尿液細胞形態特征及臨床意義

（一）紅細胞

新鮮尿液中紅細胞形態與泌尿系統疾病有關，對鑒別腎小球性與非腎

小球性血尿有重要價值未染色的正常紅細胞為雙凹圓盤狀，淡黃色，直

徑大約7~8Um

尿液中紅細胞形態與尿液的酸堿度、滲透壓及在體外放置的時間等密

切關系，因此，必須加以鑒別

滲透壓及酸堿度等對RBC形態的影響

高滲尿紅細胞皺縮，體積變小，似鋸齒狀、棘形或桑根狀

低滲尿影紅細胞，大小不等的空影或面包圈樣

堿性尿紅細胞膜脂質外層面積增加或溶血

酸性尿紅細胞膜脂質內層面積增加，體積縮小

PS：新鮮尿液【晨尿】中紅細胞形態對于鑒別腎小球源性血尿和非腎

小球源性血尿有重要價值

【鏡下血尿】尿液外觀未見紅色，離心沉淀后鏡下RBC>3個/HPF

【肉眼血尿】如果1L尿中含血量在1mL以上，肉眼能觀察到尿呈紅

色

血尿分為三種類型

【均一性紅細胞血尿（非腎小球源性血尿）】

【非均一性紅細胞血尿（腎小球源性血尿）】

【混合性紅細胞血尿】

臨床意義：

［均一性紅細胞血尿（非腎小球源性血尿）】

主要見于腎小球以下部位和泌尿道毛細血管破裂的出血，紅細胞未受

到腎小球基底膜擠壓，紅細胞形態正常。來自腎小管的RBC可受pH及滲

透壓變化的作用，但時間短，變化輕微，故呈均一性紅細胞血尿。以紅細

胞為主，而尿蛋白不增多或增多不明顯。暫時性鏡下血尿；泌尿系統疾病

（血尿有時是泌尿系統惡性腫瘤的唯一表現）；生殖系統疾病；其他各種

原因引起的出血性疾病

【非均一性紅細胞血尿（腎小球源性血尿）】

紅細胞形態變化與腎小球基底膜病理改變對紅細胞的擠壓損傷、各段

腎小管內不斷變化的pH、滲透壓、介質張力、代謝產物對紅細胞的作用有

關

常伴有尿蛋白增多和顆粒管型、紅細胞管型、腎小管上皮細胞等

見于急性或慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎、紅斑狼瘡性腎炎、腎病綜合

征

非均一性紅細胞血尿與腎活檢的診斷符合率可達96.7%

【混合性紅細胞血尿】

提示出血不是起源于一個部位，有腎小球性，也可能伴有非腎小球性

的下尿道出血引起混合性血尿疾病不多，IgA系膜性腎炎居首位

鑒別血尿的來源：通過觀察和分析尿中紅細胞形態特征，可以幫助鑒

別血尿產生的來源

（二）白細胞

膿細胞[Pc]

【鏡下膿尿】：離心后尿液白細胞>5/HPF或白細胞排出>40000/h

【肉眼膿尿】：尿中含大量WBC,呈乳白色，甚至出現凝塊

【閃光細胞】：在低滲條件下可見到N胞質內顆粒呈布朗分子運動，

由于光折射在油鏡下可見灰藍色發光現象，其運動似星狀閃光，故稱為閃

光細胞。多見于急性腎盂腎炎臨床意義：

1.尿中N大量增多

主要見于泌尿系統炎癥急性期

“閃光細胞”常見于腎盂腎炎、膀胱炎

女性生殖系統炎癥分泌物污染尿液

2.淋巴細胞和單核細胞為主

腎移植后排斥反應、新月體性腎小球腎炎，應用抗生素和抗癌藥物

病毒感染時淋巴細胞增多

急性腎小管壞死時單核細胞減少或消失

3.尿嗜酸性粒細胞增多

急性間質性腎炎患者

藥物所致變態反應

泌尿系統非特異性炎癥

（三）吞噬細胞

小吞噬細胞來自中性粒細胞，多吞噬細菌等微小物體

大吞噬細胞

來自單核細胞稱為巨噬細胞，約為白細胞的2~3倍

提示泌尿系統急性炎癥。尿吞噬細胞的多少常與炎癥程度有密切相關

（四）上皮細胞

腎小管上皮細胞：較大的圓形細胞核，核膜很厚，小空泡、顆粒或脂

肪小滴，顆粒分布不規則，多少不定。

腎小管上皮細胞在尿中易變形，呈不規則鈍角，常為多邊形，故又稱

多邊形細胞或小圓上皮細胞

15、派※※※尿液管型形態特征及臨床意義

【管型】：是蛋白質，細胞及其崩解產物在腎小管，集合管內凝固而

成的圓柱形蛋白凝聚體。管型形成的三個條件:

①原尿中有白蛋白、Tamm-Horsfall蛋白

②腎小管有濃縮和酸化尿液的能力

③具有可供交替使用的腎單位

【顆粒管型】:基質內含大小不等的顆粒，含量占管型面積的1/3以上,

包括崩解變性的細胞殘渣、血漿蛋白及其他物質。

【紅細胞管型】：管型基質中嵌入RBC且多在10個以上，RBC形態完

整接近正常時，易于識別。

【白細胞管型】：管型基質中充滿白細胞（或膿細胞），多退化變性或

壞死白細胞。存在膜結構。中性粒細胞管型過氧化物酶染色（POX）呈陽

性。

【腎上皮細胞管型】：又稱上皮細胞管型，管型內含腎小管上皮細胞，

較WBC大且形態變化較WBC復雜，管型中形態典型的細胞呈瓦片狀排列，

可充滿管型，細胞大小不等，胞核模糊。

蠟樣管型：折光性強，質地厚，易折斷，有切跡或泡沫狀。

【脂肪管型】是由腎小管上皮細胞脂肪變性、崩解，大量脂肪滴進入

管型內而形成。管型內可見大小不等的折光性很強的脂肪滴，當脂肪滴較

大時，偏振熒光顯微鏡可見馬耳他十字，脂肪滴較小時則互相重疊，蘇丹

III染色染成橙紅色或紅色。提示腎小管損傷、腎小管上皮細胞發生脂肪變

性。

腎衰竭管型分為狹窄型、中等寬度型和寬大型

在異形輸血后溶血反應導致的急性腎衰竭，其尿液中可見褐色寬大的

血紅蛋白管型。管型形成機制

PS：實驗室應統一尿液檢查操作程序和方法，對所有標本處理的條件

應一致。

顯微鏡檢查：先在低倍鏡（10X10）下觀察尿液有形成分的分布情況，

管型在低倍鏡下觀察20個視野，再轉高倍鏡（10X40）仔細觀察10個視

野。

第六章糞便檢查

糞便檢查的主要目的：

①了解消化道有無感染、出血、惡性腫瘤等

②了解胃腸道和肝膽系統的功能狀況

③協助診斷腸道傳染病

④消化道惡性腫瘤的篩檢試驗

⑥有助于鑒別黃疸的類型

PS：糞便因含有糞膽原而呈現黃褐色

2、糞便性狀：

①稀汁便

膿樣，含有膜狀物一一偽膜性腸炎、隱抱子蟲感染

②米淚樣便

白色淘米水樣，含有黏液片塊，量多，膿細胞少一一霍亂、副霍亂

③膿血便

膿樣、膿血樣、黏液血樣、黏液膿血樣一一細菌性痢疾（以黏液及膿

細胞為主）、阿米巴痢疾（血為主）、結腸癌、急性血吸蟲病、慢性潰瘍性

結腸炎、腸結核

3、糞便隱血試驗

【糞便隱血試驗FOBT］：上消化道出血量＜5mL糞便中無可見的血液,

且RBC破壞，顯微鏡檢查也未見到RBC,需用化學法、免疫法等才能證實

的出血，稱為隱血，檢查糞便隱血的試驗稱為糞便隱血試驗。

方法學評價：

①化學法

②免疫學方法：

靈敏度：特異性和靈敏度相當于或優于愈創木酯法，不受食物因素影

響，無需禁食

特異性：具有高度特異性，不受動物血（500ug/mL）和辣根過氧化

酶（200mg/L）等干擾，不受新鮮蔬菜、鐵劑、維生素C的干擾。

【后帶現象】：消化道大量出血，糞便Hb濃度過高，即抗原過剩

FOBT主要用于消化道出血、消化道腫瘤篩檢和鑒別

【脂肪瀉】：脂肪消化吸收能力減退時，糞便總脂肪酸量大量增加，

若總脂肪量〉6g/24h糞便。

糞便脂肪增加見于：胰腺疾病，肝膽疾病，小腸病變及其他：胃、十

二直腸瘦

4、糞便的顯微鏡檢查【最常用的方法：生理鹽水涂片法】

（1）細胞

低倍鏡瀏覽全片：注意觀察有無寄生蟲卵、原蟲及其包囊等

高倍鏡：尋找、觀察和鑒定病理性成分的形態結構。要觀察10個以

上的高倍視野

①白細胞

腸易激綜合征、腸道寄生蟲病（尤其鉤蟲病、阿米巴痢疾）一一可見

較多嗜酸性粒細胞，伴有夏科-萊登結晶

細菌性痢疾和潰瘍性結腸炎一一大量白細胞或成堆出現膿細胞，伴有

吞噬異物的小吞噬細胞腸道炎癥一一增多不明顯，一般V15個/HP,分散

存在，數量與炎癥輕重程度及部位相關②紅細胞：呈草綠色、略有折光

性的圓盤狀，因pH影響而呈皺縮狀

紅細胞增加

下消化道炎癥或出血一一潰瘍性結腸炎、急性血吸蟲病、結腸癌、直

腸癌、直腸息肉、細菌性痢疾、阿米巴痢疾、痔瘡出血及其它出血性疾病

消化道炎癥：炎癥損傷出血，紅細胞常伴白細胞同時出現

細菌性痢疾一一以白（膿）細胞為主，紅細胞多分散存在且形態正常

阿米巴痢疾一一紅細胞多粘連成堆并有殘碎現象，其數量多于白（膿）

細胞

③吞噬細胞

吞噬較大異物的單核細胞，

糞便中出現吞噬細胞常見于：

急性細菌性痢疾

急性出血性結腸炎

偶見于潰瘍性結腸炎

④上皮細胞

⑤食物殘渣和結晶

糞便中脂肪可分為：中性脂肪游離脂肪酸結合脂肪酸

【破壞試驗】：用蒸儲水代替生理鹽水涂片迅速鏡檢，人芽胞子蟲遇

水即破壞消失，而白細胞與原蟲因不易破壞仍可看見。

【夏科-萊登結晶】：黃色棱形，兩頭尖長且折光性強，大小不等，提

示消化道出血，見于阿米巴痢疾、鉤蟲病及過敏性腸炎

甲醛-乙酸乙酯法，厚涂片透明法和加藤法為WHO推薦方法

隱抱子蟲一一改良抗酸染色卵囊一一玫瑰紅

隱抱子蟲臨床癥狀：急性水樣腹瀉，一般無膿血，2-20次/日；嚴

重時為噴射性水樣瀉幽門螺桿菌Hp——金標記13c2尿素呼吸試驗

第七章體液檢查

第一節腦脊液檢查

【腦脊液CSF】是來源于腦室、珠網膜下腔和脊髓中央管中的無色透

明液體

【腦積液循環】：大腦凸面的珠網膜顆粒將CSF吸收進入靜脈竇一靜

脈系統

腦脊液分別收集于3個無菌容器中

第一管：細菌學檢查

第二管：臨床化學或免疫學檢查

第三管：常規檢查

如疑為惡性腫瘤，再采集1管進行脫落細胞檢查

腦脊液顏色變化及意義

紅色（出血）一一穿刺損傷出血，蛛網膜下腔或腦室出血

黃色（黃變癥）一一陳舊性出血、黃疸、淤滯和梗阻，黃色素、胡蘿卜

素、黑色素、脂色素增高

乳白色（WBCt）——化膿性腦膜炎（腦膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性

鏈球菌）

淡綠色（膿性分泌物）一一銅綠假單胞菌，肺炎雙球菌，甲型鏈球菌感

染

黑褐色（色素f）——腦膜黑色素瘤，高膽紅素血癥

腦脊液新鮮出血和陳舊性出血比較

凝固性臨床意義

【稱為Froin-Nonne（農-弗二氏）綜合征】蛛網膜下腔梗阻的腦脊液

特點，腦脊液黃色膠凍狀，腦脊液同時存在膠樣凝固，黃變癥，蛋白質-

細胞分離。

蛋白質檢查

Pandy實驗：

臨床意義：

陽性常見于腦組織和腦膜炎癥性病變，如化膿性腦膜炎、結核性腦膜

炎、脊髓灰質炎、流行性腦炎等

強陽性：腦出血，腦外傷

腦組織炎性病變:化腦>結腦>病腦

神經根病變：蛋白-細胞分離現象（梗阻性腦水腫GuillainBarre綜合

征）

椎管內梗阻：蛋白-細胞分離現象（脊髓腫瘤轉移癌黏連性蛛網膜

炎）

其它

葡萄糖檢查臨床意義

正常CSF內葡萄糖含量僅為血糖50%~80%,早產兒及新生兒因血-腦

屏障通透性增高，葡萄糖含量比正常人高，一般無意義

增高：①飽餐或靜脈注射葡萄糖后；

②腦出血；

③影響到腦干急性外傷或中毒；

④糖尿病等

減

①急性化膿性腦膜炎、結核性腦膜炎、真菌性腦膜炎；葡糖糖含量越

低，則愈后越差②神經梅毒

③低血糖

氯化物的測定

成人：120~130mmol/L

兒童：

lll-123mmol/L低

腦脊液細胞計數主要分為顯微鏡法和儀器法

顯微鏡分類計數

腦脊液細胞：辨別成份一一注意紅細胞、淋巴細胞與新型隱球菌的鑒

別

參考區間：腦脊液白細胞平【有括號】

成人(0~8)3106/L

兒童(0~15)3106/L

常用：【玻片離心法】，【沉淀室法】，【微孔薄膜篩慮法】，【纖膜蛋白

網細胞捕獲法】收集細胞進行染色

常見中樞神經系統疾病的腦脊液檢查特點

第二節漿膜腔積液

漏出液多為雙側性、非炎癥性積液

①毛細血管流體靜壓增高

②血漿膠體滲透壓降低

③淋巴回流受阻

④鈉水潴留

滲出液多為單側性、炎性積液

①微生物毒素、缺氧炎性介質一一結核性和細菌性感染

②血管活性物質增高、癌細胞浸潤一一轉移性肺癌、乳腺癌、淋巴瘤、

卵巢癌

③外傷、化學物質刺激一一血液、膽汁、胰液和胃液等刺激，外傷

中間性積液一一即既具有漏出液的性質，又有滲出液的特點

如標本溢出應立即采用0.2%過氧乙酸溶液互毆75%乙醇溶液消毒。及

時送檢，否則應在標本中加10%乙醇，置4°C冰箱，但不超過2h。

由臨床醫師經胸腔、腹腔和心包腔等穿刺收集

最好留取中段液體于無菌容器，每管廣2ml

第一管細菌學檢查（厭氧菌培養留取lml）

第二管化學檢查（肝素抗凝）、免疫學檢查

第三管常規及細胞學檢查采用EDTA-K2抗凝

第四管不加抗凝劑的標本，觀察有無凝固現象

漿膜腔積液

理學檢查：

正常胸腔，腹腔和心包腔內均有少量液體，病理條件下液體增多，其

量與病變部位和病情嚴重程度有關，可有數毫升至上千毫升。

顏色：清涼，淡黃色。

血性積液可為淡紅色、紅色或暗紅色一一結核病急性期，惡性腫瘤,

風濕性疾病等黃色一一黃疸

淡黃色膿性一一化膿菌感染

綠色一一銅綠假單胞菌感染

乳白色一一化膿性胸膜炎絲蟲病。淋巴結腫瘤，淋巴結結核，慢性腎

炎腎變期，肝硬化，腹膜癌等

咖啡色一一內臟損傷，惡性腫瘤，出血性疾病及穿刺損傷

黑色一一曲霉素感染

透明度

臨床意義：

積液透明度常與其所含的細胞、細菌和蛋白質數量有關

漏出液因所含細胞和蛋白質少而呈透明或微渾

滲出液因含細胞、細菌等成分較多而呈不同程度渾濁

比重

漏出液<l&15,滲出液>1.018

臨床意義：

積液比重高低與其所含的溶質有關

漏出液因含細胞、蛋白質少而比重低于1.015

滲出液因含細胞、蛋白質多而比重大于1.018

黏蛋白定性試驗檢測原理

【黏蛋白定性檢查（Rivalta試驗）】明解

黏蛋白是一種酸性糖蛋白，漿膜間皮細胞在炎癥反應刺激下分泌黏蛋

白增加，其等電點為pl3.0~5.0,在稀乙酸溶液中產生白色霧狀沉淀。

肝硬化腹膜腔積液因球蛋白增高而不溶于水可呈云霧狀渾濁，假陽性。

用純凈水