真菌的固體發酵工藝研究真菌是最早被發現引起昆蟲疾病的微生物，原因是它們可長出寄主體表，明顯可見蟲生真菌多從體壁侵入，自然擴散力強，對于防治刺吸口、鉆蛀性以及在地下生活的害目前,化學農藥(如P、呋喃丹等)仍是我國生產量最大、應用最廣的殺蟲劑。0世紀0年代曾在山東建廠生產農藥(二溴氯丙烷)來殺線蟲P的生產使工人患男性產丹產和使用會造成農產品農藥殘留和自然環境污染,因此,開發對環境友好的生物菌劑勢在必國視（m有屬有真菌在生物防治上雖然表現出巨大的潛力,市場前景廣闊,但大規模生產技術的不成熟一]酵再轉上試～藝1真菌固體發酵一般工藝流程12菌2小合3次)45持，在。2真菌劑生產培養基及儀器和生產設備1大米以%：（%；麩；2LL）1 目前國內真菌生物農藥工業生產的菌種擴大培養一般都采用實驗室和生產車間二級子培養流程。斜面菌種的培養是工業發酵工藝中的關鍵環節，操作必須在無菌室嚴格進在養斜面菌種不宜傳代過多，一般不超過三代，以防菌種退化。有時也可使用平板培養進行菌種培養。其表面積大，產孢多，菌落生長和雜菌污染易觀察，但無菌操作不如斜將固體培養基上培養出的孢子及菌絲轉入三角瓶液體培養基中培養，通過往復振蕩注意因菌種的不同而調節溫度、培養基的組成和初始H值、培養時間以及搖床的速度種子罐的大小和需要逐級擴大培養的次數根據固體培養物的量而定。例如，按%要L套L的三級種子罐系統。種子罐級數越少，越有利于簡化工藝和控制，并可減少由多次移種而發酵過程中應注意觀察，并將溫度、H值和溶氧等發酵參數控制在有利于菌絲生長的最佳范圍。另外還要通過在培養基中加入各種植物油及其他化學消泡劑（如聚二醇、八醇等高級醇類，聚氧丙烯甘油等聚醚類）或通過罐內的機械消泡裝置來控制發酵過程真菌農藥使用的都是好氣性真菌，它們在深層液體中培養只能利用溶解在水中的氧（通氣量控制的，而通氣量是由來自空壓機的高壓氣流（氣升式發酵罐）的速率或攪拌轉度于,2 保證真菌菌種生長的環境無其它雜菌,因此在生產前對固體發酵間及準備間進行徹底滅3 入好,溫～℃蒸汽壓力～,,溫凈4 將真菌固體發酵培養基陳大米,倒入塑料大桶內,向其注入清水,使大米完全浸沒在清水中,浸泡～,使大米完全吸飽水分,用鐵罩瀝控干水分平攤在清潔的方盤內,每盤裝量～粉的。將裝有真菌固體發酵培養基的方盤整齊地擺放在消毒車上,推送到消毒間的消毒柜內關閉柜門。采用常規消毒方式消毒滅菌,控制蒸汽壓力2～,溫度1～3℃,蒸煮,將消毒車推到固體發酵間的準備間內,用鐵鈀子將大米迅速打散降溫到8℃,準5 在真菌固體發酵間內,用L的無菌量杯接取真菌液體種子0～,均勻地淋在方盤內的固體發酵培養基上,用鐵鈀或小鐵鏟進行混拌,使真菌液體種子與固體發酵培養基充分混合均勻,再用無菌的雙層紗布蓋上固體發酵培養基,將方盤擺放到發酵間的架子6 固體發酵間內保持溫度為8±1℃,發酵1～d保持發酵間內的濕度為%～%,從不必加濕保持正常環境下的濕%～)在發酵第d時給固體發酵培養基上噴灑無菌的%葡萄糖溶液一次,發酵,孢子成熟,固體培養基形成菌塊,則固體發酵結表中燥風對固體發酵的全過程進行監控觀察每一時期孢子生長狀況h記錄一次記錄時間、溫度、濕度、固體培養基上的菌落(真菌孢子)狀態等固體發酵過程中菌落生長各時段狀態列于中真菌孢子提取干燥以活孢子作為產品的真菌發酵物必須盡快干燥，否則不僅孢子活力會迅速下降，而迅速發生的雜菌污染甚至有可能造成含孢量很高的產品成為廢品。然而，為了保持真菌孢子的活力，對發酵物不能使用高溫干燥；同時，真菌的孢子易隨風飛散，干燥過程中不能使用高速氣流或者高速攪拌。因此，干燥工藝和干燥設備的選擇一直是真菌農藥生冷凍干燥能較好地保持孢子活力，但成本較高，不適用于大量生產。真空干燥避免高溫和氣流問題，且要求的真空度不是很高；缺點是干燥速度較慢。各種氣流干燥器或轉快速干燥機（也稱旋轉閃蒸干燥機）可用于干燥的前期，使初始含水量很大的濕發酵～過～℃。在%制劑提取出來進行制劑或直接投入使用。圖9中左為我國常用的收孢機，加工起來成本低，可大量處理原菌劑，但無正式產品，且效率稍低。安徽農業大學省微生物防治重點I的rV制劑的目的是要將孢子或菌絲稀釋和保護起來，并將各種劑型成分正確地組合起來形成良好的理化性狀。由于真菌農藥的活性成分是活孢子，因此制劑首先要考慮的是盡保持孢子的活力不受各種劑型成分的影響。尤其是在研制加有表面活性劑的懸乳劑和可性粉劑時，須對表面活性劑對孢子的影響做仔細的考察，因為它們多數都會降低孢子的力。其次要注意了解孢子的親水性，蟲霉及座殼孢的孢子是親水的，而白僵菌和綠僵菌迄今已推出的劑型多為粉劑、油懸浮劑、顆粒劑等。在林業上常將純孢子粉不加制就直接超低量噴施，省去了制劑的工序，節省了儲存的空間，但用量難以控制，易造成結果與分析1 溫度對真菌發酵影響很大,溫度升高對真菌固體發酵有利產孢子量增加,因固體發酵是高過℃死于產見圖是℃2 真菌是喜氧的,因此適量增加通氣量有助于提高孢子生長速度,產孢子量隨通氣量的增加也隨之增大但在固體發酵間內通風量不易過大過大生長速度快內熱加大溫度不易控制～]為,密有利于3 大～]期(～)就越大,最佳濕度為%～%,從第d開始固體發酵培養基上的孢子已基本成熟,濕度就大芽量酵%～。6 結 論中試結果表明真菌固體發