高2022級高二下期期中考試（生物試卷）（答卷時間：75分鐘滿分：100分）一、單項選擇題（每題2分，共60分）1．基因工程自20世紀70年代起得到迅猛的發(fā)展，在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面得到廣泛的應用。下列敘述錯誤的是（

）A．將來源于某些病毒、真菌的抗病基因?qū)胫参镏?，可培育轉(zhuǎn)基因抗病植物B．目前利用基因工程技術可以生產(chǎn)細胞因子、抗體和疫苗等C．利用基因工程技術通過乳腺分泌乳汁生產(chǎn)藥物叫作乳腺生物反應器D．將乙烯合成相關基因?qū)敕眩@得的延熟番茄儲存時間大大延長2．科學家們已通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等。采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是（

）①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列③藍色熒光蛋白基因的合成④表達出藍色熒光蛋白A．①②③④ B．④②①③ C．②③①④ D．②①③④3．如圖①②③分別表示某種酶在DNA分子中的作用部位，則相應的酶依次是（

）A．DNA連接酶、限制酶、解旋酶B．解旋酶、限制酶、DNA連接酶C．限制酶、DNA連接酶、解旋酶D．限制酶、解旋酶、DNA連接酶4．近年來，人工智能(AI)算法在蛋白質(zhì)工程領域的應用已經(jīng)被開發(fā)，下列關于AI算法在蛋白質(zhì)工程領域應用的設想中，實現(xiàn)難度最大的是（

）A．根據(jù)人類對蛋白質(zhì)的功能需求設計蛋白質(zhì)的高級結構B．根據(jù)蛋白質(zhì)的空間結構推測其氨基酸序列C．按照設定的氨基酸序列推測mRNA的堿基序列D．按照設定的mRNA的堿基序列設計新基因5．目前將目的基因?qū)雱游锛毎畛Ｓ谩⒆钣行У姆椒ㄊ牵ǎ〢．顯微注射法B．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法C．Ca2＋處理D．花粉管通道法6．下圖為培育轉(zhuǎn)基因山羊生產(chǎn)人β-酪蛋白的流程圖下列敘述正確的是（

）

A．過程①所用的人β-酪蛋白基因不可以從人cDNA文庫中獲得B．過程②可選用囊胚期或原腸胚期的胚胎進行移植C．過程③可使用胚胎分割技術擴大轉(zhuǎn)基因山羊群體D．過程④人β-酪蛋白基因在細胞質(zhì)內(nèi)進行轉(zhuǎn)錄、翻譯7．為增加玉米的抗旱性，科研人員構建含有某微生物抗旱基因E的重組質(zhì)粒，并采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其轉(zhuǎn)人玉米幼胚組織細胞中，用E蛋白的抗體進行抗原—抗體雜交檢測后，經(jīng)進一步鑒定，篩選出抗旱的轉(zhuǎn)基因玉米。下列有關敘述錯誤的是（）A．通過逆轉(zhuǎn)錄得到的抗旱基因E中不含啟動子、內(nèi)含子和終止子B．抗原—抗體雜交檢測呈陽性的植株還要通過抗旱實驗進行篩選C．要得到轉(zhuǎn)基因植株還要用到植物細胞融合技術D．用CaCl2處理農(nóng)桿菌可讓其主動吸收重組質(zhì)粒8．研究人員用質(zhì)粒pBR322和目的基因構建基因表達載體，質(zhì)粒pBR322和目的基因的結構與相關限制酶的識別位點如圖所示。下列敘述錯誤的是（

）A．應選用酶B和酶C切割pBR322和目的基因B．氨芐青霉素抗性基因的作用是便于重組DNA的篩選C．圖中質(zhì)粒用限制酶切割后，會產(chǎn)生4個游離的磷酸基團D．導入重組質(zhì)粒的受體菌應接種于含四環(huán)素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)9．某同學選用新鮮洋蔥為實驗材料進行DNA的粗提取與鑒定實驗，下列敘述錯誤的是（

）A．研磨切碎的洋蔥時加入適量的纖維素酶有利于DNA釋放B．可用預冷的體積分數(shù)為75%的酒精粗提取DNAC．絲狀DNA能夠溶解于2mol/L的NaCl溶液D．沸水浴條件下DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色10．模型構建是生命科學教學、研究和學習的一種重要方法。下圖是生物概念模型，相關分析或理解錯誤的是（）A．若圖示為動物體細胞融合技術，則D可能是雜交瘤細胞B．若圖示為基因工程，則C為重組質(zhì)粒，D為受體細胞C．若圖示為核移植技術，則B可能為去核卵母細胞D．若圖示為試管嬰兒技術，D為嬰兒，C→D的過程在試管中進行11．下列關于基因工程基本工具的敘述，正確的是（

）A．限制酶能特異性地識別6個核苷酸序列B．限制酶切割DNA分子一次可斷開2個磷酸二酯鍵，產(chǎn)生2個游離的磷酸基團C．有些DNA連接酶既能連接雙鏈DNA片段互補的黏性末端，又能連接雙鏈DNA片段的平末端，從而恢復被限制酶切開的氫鍵D．用做分子運輸車的質(zhì)粒常有特殊的抗性基因，便于基因表達載體的構建12．HA蛋白是禽流感病毒的重要抗原。雞卵清蛋白是由輸卵管上皮細胞中卵清蛋白基因特異性表達后分泌至輸卵管內(nèi)，參與構成雞蛋清的蛋白質(zhì)。下圖是利用基因工程技術制備HA蛋白雞輸卵管生物反應器的過程。幾種可供選擇的限制酶識別序列如下，下列說法錯誤的是（

）A．①為逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶、4種游離的脫氧核苷酸等組分B．啟動子是轉(zhuǎn)錄的起點，是RNA聚合酶識別和結合的部位C．目的基因與雞卵清蛋白基因啟動子拼接前應先在目的基因兩端分別引入HindⅢ和EcoRI的識別序列D．基因表達載體導入受精雞胚的胚盤可以使用顯微注射法13．下列有關DNA片段的擴增及電泳鑒定實驗的敘述，正確的是（

）A．PCR緩沖液中一般要加Mg2＋，用于激活RNA聚合酶B．瓊脂糖熔化后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置C．在凝膠中的DNA分子的遷移速率只與DNA分子大小有關D．電泳緩沖液加入電泳槽時，需要沒過凝膠1mm為宜14．下列有關目的基因?qū)胧荏w細胞和檢測的敘述，正確的是（

）A．將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ腔ǚ酃芡ǖ婪˙．將某種藥用蛋白基因?qū)雱游锶橄偌毎锌色@得乳腺生物反應器C．對目的基因進行擴增時，通過熒光標記技術實時定量測定產(chǎn)物的量D．驗證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，通過RNA分子標記檢測目的基因是否表達15．下圖為獲得抗蟲棉的技術流程。有關敘述正確的是（

）

A．形成轉(zhuǎn)基因抗蟲植株的變異類型屬于染色體變異B．卡那霉素抗性基因中應含有相關限制酶的識別位點C．重組質(zhì)粒構建過程中需要限制酶和DNA連接酶D．轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有性生殖的后代都能表現(xiàn)出抗蟲性狀16．基因工程中PCR擴增產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。下列關于PCR及電泳鑒定的敘述，錯誤的是（

）A．PCR通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚及模板與引物的結合B．DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度有關，與DNA分子的大小和構象無關C．因DNA分子在凝膠載樣緩沖液中帶正電荷或負電荷，可用于電泳D．采用PCR技術對一個DNA進行擴增，若每個DNA分子的每條鏈都做模板，則第n次循環(huán)共需要引物2n個17．下列關于基因工程技術的敘述，錯誤的是（

）A．基因工程的操作水平屬于分子水平，其原理為基因重組B．基因工程中的基因載體都是小型環(huán)狀DNA---質(zhì)粒C．基因工程中對基因的剪切和拼接過程是在生物體外完成的D．基因工程能定向改造生物遺傳性狀，實現(xiàn)了不同物種間的基因交流18．下圖是利用基因工程的方法生產(chǎn)人胰島素的示意圖。下列有關敘述錯誤的是（

）

A．可通過Ca2+處理法將重組質(zhì)粒導入細菌細胞B．人胰島素基因需插在質(zhì)粒的啟動子與終止子之間C．為檢測人胰島素基因是否插入，細菌細胞應含有標記基因D．細菌細胞合成的人胰島素不具有生物活性，不能降低血糖19．“黑寡婦”蜘蛛吐出的絲強過鋼絲，用其吐出的絲織成的布比制造防彈背心所用纖維的強度高很多。科學家把“黑寡婦”蜘蛛體內(nèi)蜘蛛絲蛋白基因，導入到山羊細胞內(nèi)，培育出轉(zhuǎn)基因“蜘蛛羊”乳腺生物反應器，獲得了堅韌程度極強的蜘蛛絲蛋白，取名為“生物鋼”，操作過程如下。下列說法錯誤的是（）A．在構建基因表達載體時，要在蜘蛛絲蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特異性表達的基因的啟動子B．通過顯微注射的方法將含有蜘蛛絲蛋白基因的表達載體導入山羊的受精卵中，進而發(fā)育成“蜘蛛羊”C．“蜘蛛羊”乳腺生物反應器生產(chǎn)的“生物鋼”會造成環(huán)境污染D．乳腺生物反應器具有產(chǎn)量高、成本低、產(chǎn)品質(zhì)量好和易提取等優(yōu)點20．某細菌DNA分子上有4個Sau3AⅠ的酶切位點，經(jīng)Sau3AⅠ處理后會形成4個大小不同的DNA片段。若是用BamHⅠ處理，則只會形成2個大小不同的DNA片段。Sau3AⅠ和BamHⅠ的識別序列及切割位點如表所示。下列敘述不正確的是（

）限制酶名稱識別序列及切割位點BamHⅠG↓GATCCSau3AⅠ↓GATCA．上述兩種限制酶切割后可形成相同的黏性末端B．該DNA分子上有兩個BamHⅠ的酶切位點C．黏性末端能通過T4DNA連接酶連接D．若用兩種酶共同處理，會形成6個大小不同的DNA片段21．下表為常用的限制酶及其識別序列和切割位點，由此推斷的以下說法中，正確的是（

）限制酶名稱識別序列和切割位點限制酶名稱識別序列和切割位點BamHIG↓GATCCKpnIGGTAC↓CEcoRIG↓AATTCSau3AI↓GATCHindIIGTY↓RACSmaICCC↓GGG（注：Y＝C或T，R＝A或G）A．一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列B．若兩種限制酶的識別序列相同，則形成的末端一定能通過DNA連接酶相互連接C．不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端D．限制酶EcoRI進行一次切割，會切斷2個磷酸二酯鍵，形成1個游離的5’末端22．下圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)人類血清白蛋白的圖解，下列敘述錯誤的是（）A．圖中①一般經(jīng)胰蛋白酶處理可以得到③B．在②進入③之前要用限制酶、DNA連接酶和運載體等工具來構建基因表達載體C．一般情況下，用雌性激素處理良種母?？梢垣@得更多卵母細胞D．⑥是⑤生出的后代，但⑥的遺傳性狀和荷斯坦奶牛最相似23．生物技術與工程學相結合，可研究、設計和加工生產(chǎn)各種生物工程產(chǎn)品。下列有關敘述正確的是（

）①由于外植體在植物組織培養(yǎng)過程中不感染病毒，用任何外植體都可制備脫毒苗②由iPS細胞產(chǎn)生的特定細胞，可以在新藥的測試中發(fā)揮重要作用③胚胎移植作為胚胎工程的前端技術環(huán)節(jié)，推動了胚胎工程其他技術的研究和應用④PCR反應過程可以在PCR擴增儀中自動完成，而后常用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物⑤利用基因工程技術的乳腺生物反應器，可以讓哺乳動物批量生產(chǎn)相應的藥物⑥蛋白質(zhì)工程僅以蛋白質(zhì)結構為基礎逆中心法則進行，就可以改造或制造新的蛋白質(zhì)A．①③ B．②④⑤ C．②③④⑥ D．①③④⑤⑥24．當目的基因和質(zhì)粒都用HindⅢ處理、連接后，目的基因可能正向插入載體，也可能反向插入載體，為判斷目的基因的插入方向，可使用限制酶處理，并進行電泳檢測（如圖）。下列選項中能判斷目的基因插入方向的限制酶是（

）注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的識別序列、切割位點均不同，數(shù)字表示相鄰兩個限制酶切點之間的堿基對數(shù)（bp），質(zhì)粒全長20000bp。A．HindⅢ B．EcoRI C．BamHI D．EcoRⅠ和HindⅢ25．圖1為某種質(zhì)粒簡圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切核酸酶EcoRI、BamHI、HindⅢ的酶切位點。下列有關敘述錯誤的是（

）

A．在基因工程中若只用一種限制酶完成對質(zhì)粒和外源DNA的切割，則可選EcoRIB．如果將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoRI酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRI酶切點有1個C．使用EcoRⅠ處理外源DNA分子時需消耗4分子H2OD．一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRI切割后，含有2個游離的磷酸基團26．為使玉米獲得抗除草劑性狀，科研人員進行了相關操作(如圖所示)。含有內(nèi)含子的報鑒基因不能在原核生物中正確表達，但能在真核生物中正確表達，其正確表達產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K變?yōu)樗{色物質(zhì)。轉(zhuǎn)化過程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，殘留的農(nóng)桿菌會導致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織也可在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。下列敘述錯誤的是（

）

A．T-DNA可將基因G轉(zhuǎn)移并整合到愈傷組織細胞的染色體DNA上B．利用物質(zhì)K和抗生素進行篩選1，可獲得藍色的農(nóng)桿菌菌落C．利用物質(zhì)K和除草劑進行篩選2，易于獲得抗除草劑的轉(zhuǎn)基因植株D．題中愈傷組織重新分化為芽、根等器官的過程中，需要添加植物激素27．下圖表示培育轉(zhuǎn)基因抗病毒農(nóng)作物的過程圖，正確的是（）

A．過程a需要限制酶和RNA連接酶的參與B．過程b需要用CaCl2處理，以提高農(nóng)作物細胞壁的通透性C．抗病毒基因一旦整合到農(nóng)作物細胞的染色體上，就能正常表達D．轉(zhuǎn)基因抗病毒農(nóng)作物是否培育成功可通過接種特定病毒進行鑒定28．下圖是研究人員利用生物工程技木培育能產(chǎn)生人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛的過程。下列敘述正確的是（

）人的生長激素基因重組DNA→受精卵轉(zhuǎn)基因牛A．基因工程是在DNA分子水平上進行的B．接受了重組DNA的受精卵，可直接移植到代孕母牛的子宮C．若在②過程中培養(yǎng)到囊胚階段，對胚胎進行酶處理，可培育出多頭相同的轉(zhuǎn)基因牛D．胚胎干細胞具有全能性，故受體細胞可用胚胎干細胞代替受精卵29．基因工程操作離不開三種工具，下列有關說法不正確的是（

）A．用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒，可獲得相同的黏性末端B．常用載體質(zhì)粒的基本單位是脫氧核糖核苷酸，另外兩種工具的基本單位是氨基酸C．DNA聚合酶能夠催化形成磷酸二酯鍵，是基因工程中的“分子縫合針”D．限制性核酸內(nèi)切酶主要從原核生物中分離獲得，具有識別特定核苷酸序列的能力30．圖1表示的是細胞內(nèi)DNA復制的過程，圖2表示圖1中RNA引物去除并修復的過程，下列有關敘述錯誤的是（

）

A．DNA體內(nèi)復制和PCR過程所需的引物不同，且PCR反應引物不需要去除B．細胞內(nèi)核酸形成過程中都存在A//U堿基對C．酶3為DNA聚合酶，其在“被修復鏈”上的移動方向是5'→3'，DNA聚合酶還能夠從引物的3'開始連接脫氧核苷酸D．酶4能催化磷酸二酯鍵的形成，PCR反應也需要酶4的參與二、非選擇題（共4題，40分）31．2019年新冠疫情爆發(fā)以來，疫情防控成為社會關注的熱點問題。下圖所示某科研團隊運用基因工程研制新冠病毒疫苗的過程。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼的酶可以分解X-gal產(chǎn)生藍色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落為白色?；卮鹣铝袉栴}：

(1)獲取目的基因時，首先提取新冠病毒的RNA，再通過過程獲得cDNA（互補DNA），然后借助特異性引物進行擴增，PCR體外擴增的原理是，其中PCR需要酶。(2)圖中過程①有兩種限制酶選擇方案（注：圖中幾種限制酶切割產(chǎn)生的末端不同）：方案一：選用一種限制酶；方案二：選用兩種限制酶；方案二優(yōu)于方案一的原因是。(3)若將重組質(zhì)粒導入大腸桿菌，需要用一定濃度的（離子）處理大腸桿菌，使細胞處于能吸收周圍DNA分子的生理狀態(tài)；若將重組質(zhì)粒導入雙子葉植物細胞和裸子植物，則最常用的方法是。(4)篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌時，須在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中加入，培養(yǎng)一段時間后，挑選出色的菌落進一步培養(yǎng)獲得大量目的菌。若想在分子水平上檢測目的基因是否翻譯為蛋白質(zhì)，則通常采用方法。32．白色污染問題已引起全社會廣泛關注，降解塑料的研究和開發(fā)是解決白色污染的理想途徑之一。地膜的主要成分是聚乙烯[化學式為（C2H4）n]。殘留在土壤中的地膜難以被降解，為篩選出高效降解地膜的細菌，研究人員進行了如圖所示的操作。X培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，聚乙烯分解菌在該培養(yǎng)基上會形成抑菌圈。回答下列同題：(1)在篩選聚乙烯分解圖過程中，應選擇的土壤，制作培養(yǎng)基時，應將作為X培養(yǎng)基中的唯一碳源。(2)為了證明所配制X培養(yǎng)基具有選擇作用，在恒溫培養(yǎng)前，需要將接種后的X培養(yǎng)基平板和接種后的完全培養(yǎng)基平板同時進行培養(yǎng)，待兩種培養(yǎng)基平板上的菌落生長穩(wěn)定時，比較兩種平板培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。若結果為，則可證明上述觀點。(3)可挑選X培養(yǎng)基中的（填序號）中的單菌落接種到Y培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。配制Y培養(yǎng)基時，其pH一般調(diào)至。(4)在5個平板上各接種稀釋倍數(shù)為103的菌液樣品0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上的菌落數(shù)分別為28、50，52，54，313，則每升原菌液樣品中細菌數(shù)為個。33．“中天楊”是由我國科學家采用生物轉(zhuǎn)基因技術，歷經(jīng)8年時間培育成功的抗鹽堿、耐干旱的楊樹新品種。該品種以八里莊楊為實驗材料，經(jīng)轉(zhuǎn)mtl-D基因培育獲得。如圖為培育“中天楊”的操作流程，①～⑥表示操作過程，該過程中可能用到的限制酶如表所示?；卮鹣铝袉栴}。

注：Ti質(zhì)粒中的Tetr為四環(huán)素抗性基因，Ampr為氨芐青霉素抗性基因。限制酶BclIEcoRIXbaISau3AIBamHI切割位點T↓GATCAG↓AATTCT↓CTAGA↓GATCG↓GATCC(1)與雜交育種相比，基因工程育種的優(yōu)點有(填序號)。①操作方法簡便

②目的性強，能定向改造生物性狀

③育種周期短

④不受生殖隔離限制，能克服遠緣雜交不親和障礙

⑤安全性高，對生態(tài)沒有威脅(2)過程①需要的酶是，過程②需要的工具是。(3)采用PCR技術擴增目的基因時，在PCR反應體系中需加入引物，引物的作用是，至少經(jīng)過次循環(huán)，可獲取與目的基因等長的DNA片段。PCR完成以后，常采用法來鑒定PCR的產(chǎn)物。(4)培育轉(zhuǎn)基因楊樹的核心工作是，在進行該工作時，應在mtl-D基因的兩側添加限制酶的識別序列。(5)將目的基因?qū)胧荏w細胞除圖示方法外，我國科學家還獨創(chuàng)了一種方法是。為了確認目的基因在植物細胞中是否成功表達，從分子水平通常使用法進行檢測。34．下圖是轉(zhuǎn)乳糖酶基因試管牛和克隆牛的培育過程，回答下列問題：細胞1為，是動物基因工程中常用的受體細胞，可通過法導入目的基因。(2)胚胎移植前需要將細胞1在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)成胚胎，培養(yǎng)時的氣體環(huán)境條件為。胚胎移植前可對早期胚胎進行胚胎分割和性別鑒定，性別鑒定一般用發(fā)育到囊胚期的細胞，對囊胚期胚胎進行分割時，要注意將均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育。(3)克隆牛的培育是通過技術實現(xiàn)的，屬于（填“有性”或“無性”）生殖。從進化角度分析，試管牛相比于克隆牛的優(yōu)勢是。

高2022級高二下學期期中考試生物答案1．D【詳解】A、將來源于某些病毒、真菌的抗病基因?qū)胫参镏?，利用植物組織培養(yǎng)技術，可培育轉(zhuǎn)基因抗病植物，A正確；B、利用基因工程技術可以將相關基因?qū)胛⑸?，通過培養(yǎng)微生物來生產(chǎn)細胞因子、抗體和疫苗等，B正確；C、動物乳腺生物反應器是基于轉(zhuǎn)基因技術平臺，使外源基因?qū)雱游锘蚪M中并定位表達于動物乳腺，利用動物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在動物的乳汁中生產(chǎn)一些具有重要價值產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因動物的總稱，C正確；D、若將乙烯合成相關基因?qū)敕眩@得的轉(zhuǎn)基因番茄能合成更多的乙烯，使得果實成熟加快，不利于儲存，D錯誤。故選D。2．D【詳解】蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設計預期的蛋白質(zhì)結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列→相應基因的修飾改造或人工合成→相應的表達，因此，采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是：②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計→①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列→③藍色熒光蛋白基因的合成→④表達出藍色熒光蛋白，D正確，ABC錯誤。故選D。3．B【詳解】①為氫鍵，是體內(nèi)DNA復制時解旋酶的作用位點；②為磷酸二酯鍵，是基因工程中限制酶的作用位點；③是斷裂開的磷酸二酯鍵，可用DNA連接酶、DNA聚合酶連接形成磷酸二酯鍵，即B正確，ACD錯誤。故選B。4．A【詳解】根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預期蛋白質(zhì)功能→設計預期的蛋白質(zhì)結構→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）。其中根據(jù)人類對蛋白質(zhì)的功能需求設計蛋白質(zhì)的高級結構是最難實現(xiàn)的。A正確，BCD錯誤。故選A。5．A【詳解】A、顯微注射法是迄今為止轉(zhuǎn)基因動物中采用最多、最有效的一種將目的基因?qū)雱游锛毎姆椒?，符合題意，A正確；B、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ玫姆椒ㄖ唬环项}意，B錯誤；C、Ca2＋處理微生物的目的是使其處于感受態(tài)，感受態(tài)細胞容易被轉(zhuǎn)化，進而提高目的基因?qū)氲某晒β剩环项}意，C錯誤；D、花粉管通道法是將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ玫姆椒ㄖ唬环项}意，D錯誤。故選A。6．C【詳解】A、由圖可知，①過程表示基因表達載體的構建，獲取目的基因（人β-酪蛋白基因）的方法之一就是從人cDNA文庫中獲取，A錯誤；B、過程②為胚胎移植，山羊的胚胎移植應選用桑椹胚（桑葚胚）或囊胚期的胚胎進行移植，B錯誤；C、③表示胚胎分割移植，胚胎分割技術可以得到多個遺傳性狀相同的個體，在③過程中可以應用，C正確；D、④表示人β-酪蛋白基因表達，包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程，對于真核生物而言，轉(zhuǎn)錄主要發(fā)生在細胞核中，翻譯過程發(fā)生在細胞質(zhì)中，D錯誤。7．C【詳解】A、由mRNA（經(jīng)剪切加工，無啟動子、終止子和內(nèi)含子對應的序列）經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄得到的抗旱基因E中不含啟動子、內(nèi)含子和終止子，A正確；B、抗原一抗體雜交檢測呈陽性只能說明E基因成功表達，植物是否具有抗旱能力，還要通過抗旱實驗進行篩選，B正確；C、要得到轉(zhuǎn)基因植物，會用到植物組織培養(yǎng)技術，不需要用到植物細胞融合技術，C錯誤；D、用CaCl2處理農(nóng)桿菌可讓其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，使其主動吸收重組質(zhì)粒，D正確。故選C。8．D【詳解】A、據(jù)圖可知，目的基因的兩側有酶A、酶B和酶C識別序列，質(zhì)粒上也含有這三種酶識別序列，但酶A能把質(zhì)粒上2個標記基因都破壞，因此不能用酶A，因此應選用酶B和酶C切割質(zhì)粒pBR322和目的基因，A正確；BD、用酶B和酶C切割pBR322和目的基因后，只有氨芐青霉素抗性基因保留下來，其作用是便于重組DNA的篩選，導入重組質(zhì)粒的受體菌應接種于含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，B正確，D錯誤；C、限制酶每一次切割后會得到2個單核苷酸的末端，會有2個游離的磷酸基團，而圖中的質(zhì)粒含有2個酶A切割的切割位點，則會產(chǎn)生4個游離的磷酸基團，C正確。故選D。9．B【詳解】A、植物細胞壁的成分主要是纖維素和果膠，研磨切碎的洋蔥時加入適量的纖維素酶有利于破壞細胞壁，有利于DNA釋放，A正確；B、DNA在95%的冷酒精中溶解度小，故向含DNA的濾液中加入預冷的體積分數(shù)為95%的酒精溶液，更有利于DNA析出，不是體積分數(shù)為75%的酒精，B錯誤；C、DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度大，故溶解白色絲狀物DNA時需要加入2mol/L的NaCl溶液，C正確；D、二苯胺試劑可作為鑒定DNA的試劑，DNA和二苯胺在沸水浴的條件下反應呈藍色，D正確。故選B。10．D【詳解】A、若圖示為動物體細胞融合技術，D是C經(jīng)過篩選得到的，則D可能是雜交瘤細胞，A正確；B、若圖示為基因工程，則C為重組質(zhì)粒，是目的基因和載體相連形成的，D為受體細胞，為重組質(zhì)粒的表達提供條件，B正確；C、動物核移植需要將供體的細胞核或細胞移植到去核卵母細胞中，若圖示為核移植技術，則B可能為去核卵母細胞，此時A可能是細胞核供體細胞，C正確；D、若圖示為試管嬰兒技術，D為嬰兒，C→D的早期胚胎發(fā)育過程在試管中進行，但胚胎移植之后的過程在母體子宮中進行，D錯誤。故選D。11．B【詳解】A、大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成，少數(shù)限制酶的識別序列由4個、8個或其他數(shù)量的核苷酸組成，A錯誤；B、限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，即一條鏈斷1個磷酸二酯鍵，產(chǎn)生1個游離的磷酸基團，所以限制酶切割DNA分子一次可斷開2個磷酸二酯鍵，產(chǎn)生2個游離的磷酸基團，B正確；C、T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補的黏性末端，又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端，恢復被限制酶切開的磷酸二酯鍵，而不是氫鍵，C錯誤；D、作為載體的質(zhì)粒通常采用抗性基因（四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因）作為標記基因，便于成功導入重組DNA分子的受體細胞的篩選，D錯誤。故選B。12．C【詳解】A、圖中①以禽流感病毒RNA形成目的基因DNA過程，為逆轉(zhuǎn)錄過程，需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，逆轉(zhuǎn)錄合成的是DNA，需要4種脫氧核苷酸作為原料，A正確；B、啟動子是一段特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是轉(zhuǎn)錄的起點，它是RNA聚合酶識別和結合的部位，B正確；C、要使目的基因能夠與啟動子結合，目的基因應連接在啟動子下游，并借助啟動子啟動轉(zhuǎn)錄過程，按照圖中啟動子上的箭頭方向推測，在重組質(zhì)粒中目的基因插入的位置位于BamHI和EcoRI限制酶切位點之間，故引物應具有BamHI和EcoRI限制酶識別序列，C錯誤；D、受體細胞為動物細胞時通常采用顯微注射法，因此基因表達載體導入受精雞胚的胚盤可以使用顯微注射法，D正確。故選C。13．D【詳解】A、DNA聚合酶需要Mg2＋激活，PCR緩沖液中一般要加Mg2＋，用于激活DNA聚合酶，A錯誤；B、瓊脂糖熔化，要稍冷卻后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置，B錯誤；C、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象等有關，C錯誤；D、電泳緩沖液加入電泳槽時，需要沒過凝膠1mm為宜，D正確。故選D。14．C【詳解】A、將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，A錯誤；B、將某種藥用蛋白基因?qū)雱游锸芫阎屑纯色@得乳腺生物反應器，B錯誤；C、對目的基因進行擴增時，可通過熒光標記技術，利用熒光基團和淬滅基團制成探針，實時定量測定產(chǎn)物的量，C正確；D、驗證轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否成功時，應該通過接種實驗驗證，即為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉接種相應抗的害蟲，檢測抗蟲棉是否表現(xiàn)出抗蟲特性，D錯誤。故選C。15．C【詳解】A、形成轉(zhuǎn)基因抗蟲植株是通過基因工程技術來實現(xiàn)的，原理是基因重組，變異類型屬于基因重組，A錯誤；B、卡那霉素抗性基因是標記基因，用來鑒別含有目的基因的受體細胞，不應應含有相關限制酶的識別位點，否則會被破壞，不能起到鑒別作用，B錯誤；C、重組質(zhì)粒構建過程中需要限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，產(chǎn)生黏性不相關，再用DNA連接酶連接起來，構建基因表達載體，C正確；D、轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有性生殖的后代可能會發(fā)生性狀分離而不表現(xiàn)出抗蟲性狀，D錯誤。故選C。16．B【詳解】A、PCR通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚及模板與引物的結合，如PCR通過90℃以上的高溫解旋，72℃左右的溫度下模板與引物結合，A正確；B、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象等有關，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，B錯誤；C、NA分子具有可解離的基團，在一定的pH下，這些基團可以帶上正電荷或負電荷，在電場的作用下，這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動，C正確；D、PCR技術大量擴增目的基因時，第n-1次生成2n-1個DNA分子，第n次復制形成2n個DNA，所以需要的引物數(shù)目為（2n-2n-1）×2=2n，D正確。故選B。17．B【詳解】A、基因工程又叫基因拼接技術或DNA重組技術，操作水平屬于分子水平，其生物學原理是基因重組，A正確；B、在基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外，還有入噬菌體的衍生物、動植物病毒等，B錯誤；C、基因工程中獲取目的基因、構建基因表達載體和將目的基因?qū)胧荏w細胞是在細胞外進行，即基因工程中對基因的剪切和拼接過程是在生物體外完成的，C正確；18.【詳解】A、可通過Ca2＋處理細菌細胞，使其處于易于接受外來DNA片段的感受態(tài)，將重組質(zhì)粒導入細菌細胞，A正確；B、人胰島素基因需插在質(zhì)粒的啟動子與終止子之間，才能啟動轉(zhuǎn)錄過程，B正確；C、細菌細胞不能含有標記基因，以免影響目的基因的檢測與鑒定，C錯誤；D、細菌細胞合成的是胰島素原，胰島素原沒有生物活性，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體的作用下轉(zhuǎn)化為胰島素才具有生物活性，細菌為原核細胞，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，細菌細胞合成的人胰島素不具有生物活性，不能降低血糖，D正確。故選C。19．C【詳解】A、啟動子具有特異性，在構建基因表達載體時，要在蜘蛛絲蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特異性表達的基因的啟動子，A正確；B、受精卵的全能性較高，通過顯微注射的方法將含有蜘蛛絲蛋白基因的表達載體導入山羊的受精卵中，進而發(fā)育成“蜘蛛羊”，B正確；C、“蜘蛛羊”乳腺生物反應器生產(chǎn)的“生物鋼”，可以被生物降解，不會造成環(huán)境污染，C錯誤；D、乳腺生物反應器具有產(chǎn)量高、成本低、產(chǎn)品質(zhì)量好和易提取等優(yōu)點，D正確。故選C。20．D【詳解】A、BamHI和Sau3AI兩種限制酶切割后形成的黏性末端均為GATC，A正確；B、該DNA分子上有4個Sau3AI的酶切位點，經(jīng)Sau3AI處理后形成4個DNA片段，可知該DNA分子為環(huán)狀DNA，用BamHI處理后，得到2個DNA片段，說明該DNA分子上有兩個BamHI的酶切位點，B正確；C、T4DNA連接酶能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間連接起來，此外還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低，C正確；D、該DNA分子上有4個Sau3AI的酶切位點，有2個BamHI的酶切位點，但是BamHI識別序列中包含Sau3AI的識別序列，所以同時用兩種酶共同處理，不會形成6個大小不同的DNA片段，D錯誤。故選D。21．C【詳解】A、由圖可知，由于Y＝C或T，R＝A或G，因此HindII可以識別多種核苷酸序列，A錯誤；B、若兩種限制酶的識別序列相同，則形成的末端不一定能通過DNA連接酶相互連接，如BamHⅠ和Sau3AⅠ，B錯誤；C、不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端，如BamHⅠ和Sau3AⅠ，C正確；D、一個限制酶切割一次，使DNA雙鏈斷開，會有兩個磷酸二酯鍵斷裂，形成2個黏性末端或平末端，形成2個游離的5'末端，D錯誤。故選C。22．C【詳解】A、用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，可以獲?、蹎蝹€細胞，A正確；B、將目的基因?qū)胧荏w細胞之前，要構建基因表達載體，需要使用限制酶、DNA連接酶和運載體等工具，B正確；C、一般情況下，用促性腺激素處理良種母?？梢垣@得更多卵母細胞，即進行超數(shù)排卵處理，C錯誤；D、⑥是⑤通過胚胎分割產(chǎn)生的后代，⑥的遺傳性狀和（供核一方）荷斯坦奶牛最相似，D正確。故選C。23．B【詳解】①雖然外植體在植物組織培養(yǎng)過程中不感染病毒，但外植體可能本身攜帶病毒，因此不是用任何外植體都可制備脫毒苗，一般用莖尖制備脫毒苗，①錯誤；②iPS細胞為多功能干細胞，能分裂分化產(chǎn)生的特定細胞，可以在新藥的測試中發(fā)揮重要作用，②正確；③胚胎移植作為胚胎工程的最后技術環(huán)節(jié)，推動了胚胎工程其他技術的研究和應用，③錯誤；④PCR反應過程可以在PCR擴增儀中自動完成，PCR的產(chǎn)物的分子量大小等不同，因此常用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物，④正確；⑤利用基因工程技術的乳腺生物反應器，可以利用哺乳動物源源不斷地批量生產(chǎn)相應的藥物，⑤正確；⑥蛋白質(zhì)工程師指以蛋白質(zhì)的結構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要，⑥錯誤。故選B。24．B【詳解】A、識圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶HindⅢ處理，并進行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：5000+4000=9000bp和1000+2000+5000+3000=11000bp，因此用該限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，A錯誤；B、識圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶EcoRI處理，并進行電泳后，正向插入的質(zhì)粒會出現(xiàn)的DNA片段為：1000+2000+5000=8000bp和5000+4000+3000=12000bp，而反向插入的質(zhì)粒切割后會出現(xiàn)的DNA片段為：1000+2000+4000=7000bp和5000+3000+5000+3000=13000bp，因此正向插入和反向插入用還限制酶EcoRI處理電泳后得到的DNA片段大小不同，可以判斷目的基因的插入方向，B正確；C、識圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶BamHI處理，并進行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：5000+1000=6000bp和4000+2000+5000+3000=14000bp，因此用該限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，C錯誤；D、識圖分析可知，圖中質(zhì)粒用限制酶EcoRⅠ和HindⅢ共同處理，并進行電泳后，無論正向插入還是反向插入的均會出現(xiàn)的DNA片段為：2000+1000=3000bp、5000bp、4000bp、5000+3000=8000bp，因此用EcoRⅠ和HindⅢ限制酶處理后不能判斷目的基因的插入方向，D錯誤。故選B。25．B【詳解】A、目的基因兩側都有且質(zhì)粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一種限制酶完成對質(zhì)粒和外源DNA的切割，可選EcoRⅠ，A正確；B、若將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后再用DNA連接酶連接，則形成的重組DNA中，目的基因兩端應各含1個EcoRⅠ酶切位點，即重組DNA中EcoRⅠ酶切點有2個，B錯誤；C、使用EcoRⅠ處理外源DNA分子時（兩個切口，斷裂4個磷酸二酯鍵）需消耗4分子H2O，C正確；D、環(huán)狀質(zhì)粒無游離磷酸基團，一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRI切割后，含有2個游離的磷酸基團（環(huán)狀質(zhì)粒稱為鏈狀DNA分子），D正確。故選B。26．B【詳解】A、農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，將目的基因（基因G）插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因（基因G）整合到愈傷組織細胞的染色體DNA上，A正確；B、農(nóng)桿菌屬于原核生物，含有內(nèi)含子的報告基因不能在原核生物中正確表達，故不會出現(xiàn)農(nóng)桿菌的藍色菌落，B錯誤；C、根據(jù)題意可知，報告基因的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色，而愈傷組織表面殘留的農(nóng)桿菌會導致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長，因此利用物質(zhì)K和除草劑進行篩選2，更易于獲得抗除草劑的轉(zhuǎn)基因植株，C正確；D、愈傷組織重新分化為芽、根等器官的過程中，需要添加植物激素，如生長素和細胞分裂素，D正確。故選B。27．D【詳解】A、圖中過程a為構建基因的表達載體，需要用到限制酶和DNA連接酶，A錯誤；B、CaCl2處理能提高農(nóng)桿菌細胞的細胞壁的通透性，B錯誤；C、抗病毒基因整合到農(nóng)作物細胞的染色體上后，不一定能表達（需要進行轉(zhuǎn)錄和翻譯過程），C錯誤；D、轉(zhuǎn)基因抗病毒農(nóng)作物是否培育成功可通過接種特定病毒，觀察番茄是否被感染的實驗進行鑒定，D正確。故選D。28．A【詳解】A、基因工程是在DNA分子水平上進行的，A正確；B、接受了重組DNA的受精卵需要在體外培養(yǎng)至桑葚胚或者囊胚階段，再移植到代孕母牛的子宮，B錯誤；C、若在②過程中培養(yǎng)到囊胚階段，對胚胎進行胚胎分割處理，可培育出多頭相同的轉(zhuǎn)基因牛，C錯誤；D、胚胎干細胞具有發(fā)育的全能性，能夠形成所需的各種組織和器官，但是一般不易形成個體，因此不能用胚胎干細胞代替受精卵，D錯誤。故選A。29．C【詳解】A、構建基因表達載體時，常用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒，以產(chǎn)生相同的黏性末端，以便于二者連接，A正確；B、在三種工具中最常用載體--質(zhì)粒的化學本質(zhì)是DNA，其基本單位是脫氧核糖核苷酸；另外兩種工具酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)，其基本單位是氨基酸，B正確；C、DNA連接酶能夠催化形成磷酸二酯鍵，是基因工程中的“分子縫合針”，C錯誤；D、限制性核酸內(nèi)切酶主要從原核生物中分離獲得，具有識別特定核苷酸序列的能力，即具有專一性，D正確。故選C。30．D【詳解】A、結合題意可知DNA體內(nèi)復制需要的引物是短單鏈RNA，PCR過程所需的引物為短單鏈DNA，因此PCR過程的引物不需要去除，A正確；B、根據(jù)題干可知，細胞中DNA復制過程中存在A//U堿基對，逆轉(zhuǎn)錄過程、轉(zhuǎn)錄、RNA復制也都存在A//U堿基對，B正確；C、依據(jù)題干可知酶3為DNA聚合酶，在“被修復鏈”上的移動方向是5'→3'，DNA聚合酶能夠從引物的3'開始連接脫氧核苷酸，C正確；D、依據(jù)題干可知，酶4是DNA連接酶，DNA連接酶能催化磷酸二酯鍵的形成，PCR過程不需要酶4的參與，D錯誤。故選D。31．(1)逆轉(zhuǎn)錄/反轉(zhuǎn)錄DNA半保留復制耐高溫的DNA聚合酶(2)BamHⅠBamHⅠ、KpnⅠ或SalⅠ和KpnⅠ既能防止質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化，又能保證目的基因和質(zhì)粒的正向連接(3)Ca2＋農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(4)青霉素和X－gal白抗原－抗體雜交【詳解】（1）首先提取新冠病毒的RNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA。PCR的原理是DNA半保留復制，其中PCR需要耐高溫的DNA聚合酶。（2）含目的基因的DNA和質(zhì)粒上都有BamHⅠ的酶切位點，可以用BamHⅠ切割DNA分子獲得目的基因，再切割質(zhì)粒，可得到重組質(zhì)粒，由于基因的轉(zhuǎn)錄存在方向性，如果用一種限制酶，可能切割后的目的基因會自連，同時會使目的基因反接在質(zhì)粒上。為避免目的基因在質(zhì)粒反向連接，可選用兩種不同的限制酶切割，而用ScaⅠ切割質(zhì)粒會破壞青霉素抗性基因，結合圖中轉(zhuǎn)錄方向和限制酶切割位點，可選用BamHⅠ和KpnⅠ或SalⅠ和KpnⅠ來切割質(zhì)粒和目的基因，既防止了目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化，又能保證目的基因和質(zhì)粒的正向連接。（3）將重組質(zhì)粒導入大腸桿菌之前，需要用一定濃度的Ca2+處理大腸桿菌，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，便于重組DNA導入；將重組質(zhì)粒導入雙子葉植物細胞和裸子植物，常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。（4）目的基因拼接在質(zhì)粒的lacZ基因上，打破了lacZ基因的序列，而單獨導入空質(zhì)粒的細胞內(nèi)質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼的酶可以分解X-gal產(chǎn)生藍色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍色，故篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌時，須在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中加入青霉素和X-gal，培養(yǎng)一段時間后，挑選出白色的菌落進一步培養(yǎng)獲得大量目的菌。若想在分子水平上檢測目的基因是否翻譯為蛋白質(zhì)，通常采用抗原-抗體雜交技術。32．(1)含廢舊地膜豐富聚乙烯(2)X培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)明顯少于完全培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)(3)⑤中性或弱