食品和化妝品中抗氧化功效的測定 體外角質細胞SOD酶活法_第1頁
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3食品和化妝品中抗氧化功效的測定體外角質細胞SOD酶活性法本文件規定了角質細胞分泌物SOD活性測定試驗的本文件提供了一種經由角質細胞分泌物SOD活性的檢測方法，可作為化妝品、食品原料關于抗氧化是構成人體表皮的主體細胞，體內呈分層生長排列，可用于人表皮細胞5.1細胞培養涉及試劑及耗材胰蛋白酶/EDTA溶液（0.25%胰酶溶液與0.02mol/LEDTA溶液1:1混勻磷酸鹽緩沖液（PBS5.2檢測涉及試劑及耗材品溶液：二甲亞砜（dimethylsul46.16.2細胞培養板（規格24、12孔、6孔均可）。6.3細胞培養瓶。7.3恒溫水浴鍋7.5pH計：精度±0.1。7.6低溫離心機7.7渦旋振蕩器7.8微孔板酶標儀或分光光度計，配置450nm或560nm濾光片7.9高壓滅菌器8.1.1除非有穩定性數據證明儲備液可接受，否則受試物必須在使用前新鮮配置直接使用。8.1.5在使用溶劑前，應仔細評估它們的特殊性質，例如：是否與受試物發生反應，或溶液中的化學8.1.6可使用渦旋混合/或超聲處理和/或加熱到適當溫度等方法輔助溶解，除非這些操作會影響到受8.2.2受試物濃度應通過細胞毒性檢測確定受試物的濃度范圍。例如選擇細胞活力≥90%，且細胞形9.1每一次試驗都應同時使用陽性對照進行試驗。推薦陽性對照物，如250μg/mLT25培養瓶胰酶用量1mL，T75培養瓶胰酶用量3mL。510.2接種鋪板開展給藥操作。受試物孔中加入一定濃度受試物的培養基，陰性對照、空白對照和裸細胞孔10.4制備樣品溶液加液量為100μL。處理1-2s后抽打混勻，轉移到離心管中。

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