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文檔簡介

④.37①.與單鏈結合，保持單鏈穩定、介導單鏈入侵(2分)②.磷酸二酯(4)①.5%CO2和95%空氣②.抗原-抗體雜交③.能增殖，較長時間刺激免疫系統【解析】【分析】過程①為攜帶有CP530R和F317L基因的質粒經PCR獲得帶有重組酶識別序列的目的基因，②為同源重組后形成病毒載體2，病毒載體2上的基因位點保留有CmR，但沒有AmpR、CcdB。【小問1詳解】引物F除需與CMV啟動子序列3′端部分配對外，還需在其5′端加上的TK1序列以便后面的同源重組。PCR最后72℃3min的目的是使子鏈充分延伸，補完合成不完全的片段，保證產物的完整性。【小問2詳解】因大腸桿菌中的pSC101是一種溫度敏感質粒(在30°C下能復制、在37C下不能復制)，其上的recET基因和ccdA基因的啟動子分別受鼠李糖和阿拉伯糖誘導，故大腸桿菌先接種在含鼠李糖和阿拉伯糖的培養基中，在30°C下培養一段時間，加入目的基因并電激；同源重組后的質粒上還保留有CmR，但沒有AmpR、CcdB了，故一段時間后將大腸桿菌接種在含氯霉素的培養基中，在37℃下培養以清除pSC101質粒，獲得含病毒載體2的大腸桿菌。【小問3詳解】據圖可知，重組蛋白RecT的功能有與單鏈結合，保持單鏈穩定、介導單鏈入侵，重組過程涉及磷酸二酯鍵的水解和形成。【小問4詳解】動物細胞培養需在含5%CO2和95%空氣的氣體條件的培養箱中培養。收獲細胞及上清液，利用抗原-抗體雜交技術可鑒定重組病毒表面的蛋白質。重組病

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