解密23細(xì)胞工程

考點熱度★★★★★

與有易錯解密

1.植物的每個細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性。（X）

分析:只有離體的植物細(xì)胞才能表現(xiàn)出全能性。

2.利用物理法或化學(xué)法可以直接將兩個植物細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合。（x）

分析:植物細(xì)胞只有去掉細(xì)胞壁才能誘導(dǎo)融合

3.再生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志。（4）

4.制備肝細(xì)胞懸液時先用剪刀剪碎肝組織，再用胃蛋白酶處理。（x）

分析:動物細(xì)胞分散細(xì)胞時用胰蛋白酶處理,胃蛋白酶適合在強(qiáng)酸性環(huán)境中發(fā)揮作用。

5.肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的C02刺激細(xì)胞呼吸。（x）

分析:5%的二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液pH。

6.克隆動物的性狀與供體動物不完全相同。（Y）

7.與“多利”羊等克隆哺乳動物相關(guān)的技術(shù)有胚胎移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)。（Y）

8.雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎。（x）

分析:雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)是為了獲得大量單克隆抗體。

9.B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞融合后有三種細(xì)胞類型（若僅考慮兩兩融合的情況）。（7）

10.胚胎分割移植實現(xiàn)同卵多胎的成功率較低。（Y）

11.胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。（x）

分析:胚胎分割時需將囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。

12.雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力。（4）

13.胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下具有增殖而不發(fā)生分化的特點。（Y）

14.胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點。（x）

分析:胚胎干細(xì)胞核仁較為明顯。

15.胚胎干細(xì)胞在分化誘導(dǎo)因子的作用下可以向不同類型的組織細(xì)胞分化。（＜）

16.中國政府禁止生殖性克隆，但不反對治療性克隆。（Y）

黃育易混解密

易混1A:脫分化和再分化都需要在光照下進(jìn)行。（x）

B:再分化需要一定的光照條件誘導(dǎo)葉綠素和葉綠體的形成。（4）

A:誘導(dǎo)細(xì)胞融合的目的是獲得雜交個體。（x）

易混2

B:動物細(xì)胞融合主要應(yīng)用于單克隆抗體的制備。（x）

A:可以向動物體中反復(fù)注射某種抗原獲得大量單克隆抗體。（X）

易混3B:單克隆抗體是單個B淋巴細(xì)胞經(jīng)過克隆化培養(yǎng)后獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性

強(qiáng)的抗體。（＜）

A:動物體細(xì)胞核移植比胚胎細(xì)胞核移植成功率低。（＜）

易混4

B:分化程度較低的胚胎細(xì)胞細(xì)胞核的全能性相對較低。（x）

【對點解密】

1.比較植物組織培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng):

項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)

取材植物幼嫩部位動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織

f動物胚月療或幼齡j

織、器官

;動物的勢1J

剪碎胰蛋白降

:外相處理

施:單個:組胞J

分

化加培養(yǎng)液

O.；■細(xì)胞懸液：

和原代培養(yǎng),1?10代

過程再光工

種

分照掰胞避啻生長增殖；

皮

化11?50

傳代培養(yǎng)

試笆宣等,;好代左右

移栽部分細(xì)胞的

［理也h--------L綱膻核軍?發(fā)生變化：

住住挎蓑50代后

:細(xì)胞獲彳導(dǎo)不死性（

i（遺傳物質(zhì),發(fā)生改變）

結(jié)果獲得完整植株個體，可以體現(xiàn)全能性獲得新的細(xì)胞，不形成個體，無法體現(xiàn)全能性

①無菌①無菌、無毒

②營養(yǎng)物質(zhì)②營養(yǎng)物質(zhì)

條件

③適宜條件③適宜的溫度和pH

④植物激素

④氣體環(huán)境：。2、C02

①植株快速繁殖

①蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)

②脫毒植株的培養(yǎng)

②皮膚移植材料的培育

應(yīng)用③人工種子

③檢測有毒物質(zhì)

④生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等

④生理、病理、藥理等方面的研究

⑤轉(zhuǎn)基因植物的培育

2.明確克隆動物培育流程:

雌性動一

物卵母

細(xì)胞券溜喘早期移入雌性

ZO/（顯微里組胚胎動?物

動物。藤?注射）細(xì)胞一分娩|

體細(xì)胞-----新個體

3.比較植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞融合:

項目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合

細(xì)胞膜的流動性、

原理細(xì)胞膜的流動性

細(xì)胞的全能性

細(xì)胞A、B

|去壁

細(xì)胞A、B

原生質(zhì)體A、B

［融合

［融合

雜交細(xì)胞

過程融合的原生質(zhì)體

［有絲分裂

1

多個相同

雜種細(xì)胞

雜交細(xì)胞

1植物組

1織培養(yǎng)

雜種植株

相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶

融合物理法:離心、電激、振動；除物理法和化學(xué)法外,還可以用滅活的病毒

方法化學(xué)法:聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)誘導(dǎo)

結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞

意義克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，獲得雜種植株突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成

為可能

4.記憶單克隆抗體的制備過程及其特點:

(1)制備過程:

滅活

給小鼠注從脾臟中

病毒未融合細(xì)

射特定的分離B淋巴

誘導(dǎo)胞、同種融

細(xì)胞一

抗原蛋白融合

合細(xì)胞、雜

［提取骨髓］擴(kuò)大河蕩交瘤細(xì)胞

|瘤細(xì)胞,1培養(yǎng)1臂J篩

|選

薪屋］「體內(nèi)培養(yǎng)］［產(chǎn)生特定

抗體保J交瘤

抗體上體外培養(yǎng)」處的雜

檢測細(xì)胞

交瘤細(xì)胞

(2)單克隆抗體的特點：

特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。

5.記住早期胚胎發(fā)育過程：

受精卵分裂方式：有絲分裂

分裂特點：只分裂、不生長,每個細(xì)

.，切胞體積逐漸變小，總體積

基本不變

__卵裂形成的細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個左右時

、桑產(chǎn)胚H的胚胎，每個細(xì)胞都屬于縛細(xì)胞

?組成:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層細(xì)胞、囊

網(wǎng)丕H胚腔

特點：細(xì)胞已分化，曳細(xì)胞里將來

_I發(fā)育為胎兒的各種組織

［原腸胚)一出現(xiàn)三個胚層和原腸腔

6.熟知胚胎工程的操作流程:

(1)胚胎移植過程中兩次使用激素，第一次常用生激素對供、受體進(jìn)行同期發(fā)情處理:第二次用促性腺激素對

供體做超數(shù)排卵處理。

(2)胚胎移植過程中的兩次檢查:第一次對收集的胚胎進(jìn)行檢查;第二次對受體母畜是查娃娘進(jìn)行檢查。

(3)胚胎移植是有性生殖還是無性生殖，取決于胚胎是由受精卵形成的(有性生殖)，還是由核移植技術(shù)形成的

重組細(xì)胞發(fā)育而成或胚胎分割形成的(無性生殖)。

(1)設(shè)計試管嬰兒比試管嬰兒多出的是過程④(填序號)。

(2)試管嬰兒主要是解決不孕夫婦的生育問題;設(shè)計試管嬰兒用于白血病、貧血癥等疾病的治療。

(3)兩者都需體外受精，并進(jìn)行體外早期胚胎培養(yǎng),都要經(jīng)過胚胎移植，都是有性生殖。

8.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：

(1)食物安全方面:可能合成毒蛋白、出現(xiàn)新的過敏原、改變食物的營養(yǎng)成分等。

(2)生物安全方面:有可能造成“基因污染”，危害生物的多樣性。

⑶環(huán)境安全方面:有可能打破物種的原有界限，改變生態(tài)系統(tǒng)的能量流動和物質(zhì)循環(huán);造成二次污染或產(chǎn)生

危害動植物和人類的病原微生物。

34考法解密】

【典例分析1】（2020?山東等級考）經(jīng)遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞注入囊胚，通過胚胎工程的相關(guān)技術(shù)可以獲

得具有不同遺傳特性的實驗小鼠。下列說法錯誤的是（）

A.用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子

B.體外受精前要對小鼠的精子進(jìn)行獲能處理

C.胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植

D.遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得

【信息提取與轉(zhuǎn)化】

關(guān)鍵信息轉(zhuǎn)化成解題突破口

用促性腺激選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。供體和受

素處理雌鼠體是同一物種，并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。

體外受精體外受精主要包括:卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精過程。

胚胎移植的基本程序：對供、受體的選擇和處理一配種或人工授精一對胚胎的收集、

胚胎移植

檢查、培養(yǎng)或保存T對胚胎進(jìn)行移植T移植后的檢查。

【答案】C

【解析】本題上耍考查胚胎工程。為了獲得更多卵子，需要用促性腺激素對雌性個體進(jìn)行超數(shù)排卵,A項正

確;剛排出的精子不能與卵子受精,必須進(jìn)行獲能處理即發(fā)生相應(yīng)的生理變化后才能獲得受精能力，因此在體

外受精前要對小鼠的精子進(jìn)行獲能處理,B項正確;胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量，一般動物在桑根胚或囊胚階

段移植,C項錯誤;可以通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)對小鼠胚胎干細(xì)胞進(jìn)行遺傳改造,D項正確。

【典例分析2】（2021?浙江等級考節(jié)選）斑馬魚是一種模式動物,體外受精發(fā)育，胚胎透明、便于觀察,可用于

水質(zhì)監(jiān)測，基因功能分析以及藥物毒性與安全性評價等。請回答：

（1）由于人類活動產(chǎn)生的生活污水日益增多，大量未經(jīng)處理的污水直接排入河流、湖泊會引起水體，導(dǎo)

致藻類大量繁殖形成水華。取水樣喂養(yǎng)斑馬魚，可用斑馬魚每周的體重和死亡率等指標(biāo)監(jiān)測水體污染程度。

（2）為了研究某基因在斑馬魚血管發(fā)育過程中的分子調(diào)控機(jī)制，用DNA連接酶將該基因連接到質(zhì)粒載體形

成，導(dǎo)入到大腸桿菌菌株DH5a中。為了能夠連接上該目的基因、并有利于獲得含該目的基因的

DH5a陽性細(xì)胞克隆，質(zhì)粒載體應(yīng)含有（答出2點即可）。提取質(zhì)粒后，采用法,將該基因?qū)?/p>

到斑馬魚受精卵細(xì)胞中,培養(yǎng)并觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚胚胎血管的發(fā)育情況。

（3）為了獲取大量斑馬魚胚胎細(xì)胞用于藥物篩選，可用分散斑馬魚囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，取分散細(xì)胞作為初

始材料進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加成纖維細(xì)胞作為，以提高斑馬魚胚胎細(xì)胞克隆的形成率。

【信息提取與轉(zhuǎn)化】

關(guān)鍵信息轉(zhuǎn)化成已有知識

當(dāng)水體中富含N、P等無機(jī)物時，水體富含營養(yǎng)化,導(dǎo)致大量藻類繁殖。在淡水中形成水華

水華現(xiàn)象

現(xiàn)象，在海洋中造成赤潮現(xiàn)象。

質(zhì)粒作為基因工程的常用載體，需要與目的基因連接,并將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選

基因工程

出來。其有與目的基因兩側(cè)相同的限制酶切割序列，其中的標(biāo)記基因的表達(dá)有利于篩選出

常用載體

已成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞。

動物細(xì)動物細(xì)胞培養(yǎng)需要將動物組織用胰蛋白酶處理分散為單個細(xì)胞，先進(jìn)行原代培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞

胞培養(yǎng)出現(xiàn)接觸抑制后再進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

【解析】(1)生活污水流入會導(dǎo)致水體含大量無機(jī)鹽，稱為富營養(yǎng)化。

(2)目的基因連接到質(zhì)粒載體形成重組DNA分子。質(zhì)粒載體應(yīng)含有限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列以便切割,

含有抗生素抗性基因以便篩選含目的基因的細(xì)胞?將目的基因?qū)雱游锸芫鸭?xì)胞采用顯微注射法。

(3)用胰蛋白酶分散動物細(xì)胞,從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞，初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶中

添加成纖維細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞,以維持細(xì)胞不分化。

【答案】(1)富營養(yǎng)化

(2)重組DNA分子限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列、抗生素抗性基因顯微注射

(3)胰蛋白酶原代飼養(yǎng)層細(xì)胞

J【變式解密】

【真題探究1](2021福建)科研人員利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育矮牽牛新品種，技術(shù)流程示意圖如下。

下列敘述正確的是()

A.愈傷組織是幼嫩葉片通過細(xì)胞分化形成的

B.獲得的雜種植株都能表現(xiàn)雙親的優(yōu)良性狀

C,可用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體甲和乙的融合和細(xì)胞壁再生

D.用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織以獲得原生質(zhì)體

【答案】D

【解析】

【分析】分析題圖：首先用醐解法去壁，一般使用纖維素酶和果膠酶處理；然后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，采用

的方法一般包括物理法（離心、振蕩、電激）、化學(xué)法（用聚乙二醇處理）；培養(yǎng)融合的原生質(zhì)體再生出新

的細(xì)胞壁，形成雜種細(xì)胞。然后雜種細(xì)胞經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以培養(yǎng)形成雜種植株。

【詳解】A、愈傷組織是幼嫩葉片通過細(xì)胞脫分化形成的，A錯誤；

B、由于基因的選擇性表達(dá)和基因間的互作效應(yīng)，獲得的雜種植株不?定能夠表現(xiàn)親本的優(yōu)良性狀，B錯

誤；

C、可用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體甲和乙的融合，但不能誘導(dǎo)細(xì)胞壁的再生，C錯誤；

D、由于植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，故可以用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織以獲得原生質(zhì)

體，D正確。

故選D。

【真題探究2X2021T月浙江選考）下圖為動物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）

①切取組織②制備細(xì)胞懸浮液③原代培養(yǎng)④傳代培養(yǎng)

A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行

B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離

C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理

D.步驟④培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化

【答案】C

【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊一剪碎組織一用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞一制成細(xì)胞懸液一轉(zhuǎn)入培

養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)一貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液一

轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

A、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要無菌操作，故步驟①的操作需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行，A錯誤；

B、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，分散成單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，B

錯誤：

C、傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞，使之分散成單個細(xì)胞，再分瓶培養(yǎng)，c正確；

D、步驟④為傳代培養(yǎng)過程，該過程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化，核型改變，D錯誤。

故選C。

【真題探究3］（2021遼寧）下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡易流程圖，有關(guān)敘述正確的

是（）

乙牛

A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定

B.過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體

C.過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進(jìn)行處理

D.過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至原腸胚后移植

【答案】B

【解析】

【分析】分析圖解：圖示過程為體細(xì)胞克隆過程，取乙牛體細(xì)胞，對處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞

去核，然后進(jìn)行細(xì)胞核移植；融合后的細(xì)胞激活后培養(yǎng)到早期胚胎，再進(jìn)行胚胎移植，最終得到克隆牛。

【詳解】A、后代丁的細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來自甲，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來自于乙牛，則丁的遺傳性狀由甲和

乙的遺傳物質(zhì)共同決定，A錯誤；

B、動物細(xì)胞培養(yǎng)中需要提供95%空氣（保證細(xì)胞的有氧呼吸）和5%CO2（維持培養(yǎng)液的pH）的混合氣

體，B正確：

C、過程②常使用顯微操作去核法對卵母細(xì)胞進(jìn)行處理，C錯誤；

D、過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至囊胚或桑根胚后移植，D錯誤。

故選B。

【真題探究4］（2021山東高考15）一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機(jī)體

產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白P72注入小鼠體

內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法

正確的是（）

A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大

B.單抗制備過程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合

C.利用該小鼠只能制備出一種抗P72的單抗

D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況

【答案】D

【解析1根據(jù)題干信息”一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗

體”，非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多個抗原決定簇，所以可以刺激機(jī)體產(chǎn)生多種抗體。每個抗原決定

簇刺激產(chǎn)生的抗體是單抗。單抗的制作需要篩選，而多抗不需要篩選，抗原純度越高，產(chǎn)生的多抗純度越

高，因此原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響小，A錯誤；單抗制備過程中通常將分離出的B淋巴

細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B錯誤；

非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多種抗原決定簇，一個抗決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以向小

鼠體內(nèi)注入p72后，可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗p72的單抗，C錯誤；p72部分結(jié)構(gòu)改變只改變了部分抗原決

定簇，因此由這部分抗原決定簇產(chǎn)生的抗體失效，但由于還存在由其他抗原決定簇刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，

所以多抗仍有效，D正確。

【真題探究5］（2020?山東等級考?T13）兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一

個細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會被全部排出，未排出

的染色體片段可以整合到另一個細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)

的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過程如下圖所示。下列說法錯誤的是（）

普通小麥普通小麥

細(xì)胞一原生質(zhì)體、③雜種培雜種篩耐耕

中間偃麥瓜中間偃麥草""2~"細(xì)胞養(yǎng)植株后小麥

草細(xì)胞原生質(zhì)體

不同劑量的_?J

紫外線照射

A.過程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞

B.過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂

C.過程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合

D.耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段

【答案】C

【解析】本題主要考查植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。由題圖信息可知，①為細(xì)胞去掉細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的過程,

去掉細(xì)胞壁一般用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞,A項正確;兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會導(dǎo)致?方的染色體

被排出，需要將中間偃麥草細(xì)胞染色體斷裂,所以②為用不同劑量的紫外線照射斷裂中間偃麥草細(xì)胞的染色

體,B項正確;圖中③為兩種原生質(zhì)體的融合，常用融合手段為物理法和化學(xué)法，滅活的病毒通常用來融合動物

細(xì)胞,C項錯誤;普通小麥不具有耐鹽性狀，因此篩選出的耐鹽小麥中控制耐鹽性狀的基因來自中間偃麥草的

染色體片段,D項正確。

【真題探究6］（2020?山東等級考?T14）經(jīng)遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞注入囊胚,通過胚胎工程的相關(guān)技術(shù)可

以獲得具有不同遺傳特性的實驗小鼠。下列說法錯誤的是（）

A.用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子

B.體外受精前要對小鼠的精子進(jìn)行獲能處理

C.胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植

D.遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得

【答案】C

【解析】本題主要考查胚胎工程。為了獲得更多卵子，需要用促性腺激素對雌性個體進(jìn)行超數(shù)排卵,A項正

確;剛排出的精子不能與卵子受精,必須進(jìn)行獲能處理即發(fā)生相應(yīng)的生理變化后才能獲得受精能力，因此在體

外受精前要對小鼠的精子進(jìn)行獲能處理,B項正確;胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量，一般動物在桑根胚或囊胚階

段移植，小鼠可在更早的階段移植,C項錯誤;可以通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)對小鼠胚胎干細(xì)胞進(jìn)行遺傳改造,D項正確。

【真題探究7］（2022?全國甲卷?高考真題）某牧場引進(jìn)一只產(chǎn)肉性能優(yōu)異的良種公羊，為了在短時間內(nèi)獲

得具有該公羊優(yōu)良性狀的大量后代，該牧場利用胚胎工程技術(shù)進(jìn)行了相關(guān)操作。回答下列問題，

（1）為了實現(xiàn)體外受精需要采集良種公羊的精液，精液保存的方法是。在體外受精前要對精子

進(jìn)行獲能處理，其原因是;精子體外獲能可采用化學(xué)誘導(dǎo)法，誘導(dǎo)精子獲能的藥物是

（答出1點即可）。利用該公羊的精子進(jìn)行體外受精需要發(fā)育到一定時期的卵母細(xì)胞，因為卵

母細(xì)胞達(dá)到時才具備與精子受精的能力。

（2）體外受精獲得的受精卵發(fā)育成囊胚需要在特定的培養(yǎng)液中進(jìn)行，該培養(yǎng)液的成分除無機(jī)鹽、激素、血清

外，還含的營養(yǎng)成分有（答出3點即可）等。將培養(yǎng)好的良種囊胚保存?zhèn)溆谩?/p>

（3）請以保存的囊胚和相應(yīng)數(shù)量的非繁殖期受體母羊為材料進(jìn)行操作，以獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的后代。

主要的操作步驟是。

【答案】（1）冷凍保存剛排出的精子必須在雌性生殖道內(nèi)發(fā)生相應(yīng)生理變化后才能獲得受精能

力肝素或鈣離子載體A23187MH中期

（2）維生素、氨基酸、核昔酸

（3）對受體母羊進(jìn)行發(fā)情處理，將保存的囊胚進(jìn)行胚胎移植，對受體母羊進(jìn)行是否妊娠的檢查，一段時間后

受體母羊產(chǎn)下具有該公羊優(yōu)良性狀的后代

【解析】

【分析】

試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，

再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù).

(1)精液可以冷凍保存，使用前再將精液解凍離心分離。剛排出的精子必須在雌性生殖道內(nèi)發(fā)生相應(yīng)生理變

化后才能獲得受精能力，故在體外受精前要對精子進(jìn)行獲能處理。通常采用的體外獲能方法有培養(yǎng)法和化

學(xué)誘導(dǎo)法，化學(xué)誘導(dǎo)法是將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中，用化學(xué)藥物誘導(dǎo)精子

獲能。卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期(MH中期)才能具備與精子受精的能力。

(2)進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中，除了無機(jī)鹽、激素、血清外，還含有維生素、氨基酸、核甘酸等。

(3)要利用保存的囊胚和相應(yīng)數(shù)量的非繁殖期受體母羊為材料，獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的后代，主要是利

用胚胎移植技術(shù)，即對受體母羊進(jìn)行發(fā)情處理，將保存的囊胚進(jìn)行胚胎移植，對受體母羊進(jìn)行是否妊娠的

檢查，一段時間后受體母羊產(chǎn)下具有該公羊優(yōu)良性狀的后代。

【真題探究8](2021?湖南高考真題)M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)。現(xiàn)設(shè)計實

驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基

因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A,流程如圖所示。回答下列問題：

成纖維細(xì)胞去核卵母細(xì)胞

I核移植

\胚胎培養(yǎng)

早期胚胎

!胚胎移植

代孕母親

克隆動物A

(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是,這類酶能將特定部位

的兩個核昔酸之間的斷開。

（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目

的是。

（3）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是。從早期胚胎中分

離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為（答出兩點即可），功能上具有o

（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制

備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路o

【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）磷酸二酯鍵

（2）清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害

（3）動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困

難細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯（任選兩點作答）發(fā)育的全能性

（4）B用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，看篩選出雜交瘤細(xì)胞

能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，如果不能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動物A中己失活

【分析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)

記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的

方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;

將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因

-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)：③檢測目的基因是否翻譯成

蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)，個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2、核移植：

（1）概念：將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個

新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物；

（2）原理：動物細(xì)胞核的全能性；

（3）動物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核

移植。原因：動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性

十分困難。

【詳解】

（1）基因工程中切割DNA的工具能是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），故在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過

程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）。限制性內(nèi)切核酸內(nèi)切酶是作用于其所識別

序列中兩個脫氧核行酸之間的磷酸二酯鍵。不同的限制酶可以獲得不同的末端，主要分為黏性末端和平末

端。

（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目

的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。

（3）由于動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十

分困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率低。胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞

體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。

另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

（4）先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取己經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B

細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利川選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體；若要利用此抗體

確定克隆動物A中M基因是否失活，如果M基因已經(jīng)失活，則克隆動物A中無法產(chǎn)生M蛋白的單克隆

抗體，則可利用抗原一抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測。用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨

髓瘤細(xì)胞融合，看篩選出雜交瘤細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，如果不能產(chǎn)生，說明M基因在克隆

動物A中已失活。

【點睛】

本題結(jié)合圖示考查基因工程、核移植、胚胎移植、單克隆抗體的相關(guān)知識，涉及知識點較多，但難度不大，

要求考生掌握基礎(chǔ)知識，屬于考綱中識記與理解層次。

【真題探究9］（20211月浙江高考真題）回答下列（二）小題：

（二）三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對生長環(huán)境要求非常苛刻，以及生態(tài)環(huán)境的

破壞和過度的采挖，目前我國野生三葉青已十分珍稀。

（1）為保護(hù)三葉青的多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用

技術(shù)，實現(xiàn)了三葉青的林下種植。

（2）依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類化合物，誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)

桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成和限制性核酸內(nèi)切酶等，進(jìn)而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)

移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上，T-DNA上rH系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相

應(yīng)的植物激素，促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成,再分化形成毛狀根。

（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭抱類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的

主要目的是。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過控制搖床的

和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的,獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。

【答案】（二）（1）遺傳間種

（2）DNA聚合酶愈傷