④機體微量成分的測定

應用單抗結合其它技術，可對機體的多種微量成分進行測定。如放射免疫分析，即是利用了同位素的靈敏性和抗原-抗體反應的特異性而建立起來的方法，它可以測至10-9～10-12g，使原來難以測定的激素能夠進行定量分析。除了激素，還可檢測諸多酶類、維生素、藥物和其它生化物質。這對受檢者健康狀態判斷、疾病檢出、指導診斷和臨床治療均具有實際意義。

綜上所述，單克隆抗體在理論和實踐上的應用成為解決生物學和醫學等許多重大問題的重要手段。但是，上述應用的單抗屬于鼠源性，用于人類疾病的預防和治療時會產生異種蛋白變態反應，大大限制了其臨床應用價值。而且，鼠源性抗體在人體內半衰期縮短，生物活性降低。因此，人們一直致力于人源性抗體的研究，如用人脾細胞與鼠骨髓瘤細胞雜交；用EB病毒轉化人的B淋巴細胞；用基因工程法制備嵌合抗體等。但都遇到相當的困難。以分子生物學技術提取、擴增編碼人抗體的DNA，構建質粒，建立組合抗體文庫，再利用供者文庫建立針對某一特定抗原的子文庫是近年來形成的最新方法。以該技術制備的抗體片段(Fab)是人源抗體，具有建庫簡單、抗體表達穩定等特點。迄今已有多種抗體產生。可以預見，該技術具有良好的發展和應用前景[3]。1.3發展前景單克隆抗體的這些特征使它成為未來治療學上研究的熱點。在過去的三十年里,

從鼠源性單抗到全人源性抗體,

單抗在制備技術上取得了較大的進展。鼠源性單抗的免疫源性導致機體產生一系列的急性反應,

使藥物的功效降低。全人單克隆抗體是制備單克隆抗體的一種新技術。它減少了鼠基因序列,

減少了抗抗體反應,

提高了單克隆抗體的功效和安全性。而且,

當前全人源性單克隆抗體技術的靈活性,

可以選擇發揮單抗最優的藥動學和藥效學特性。在未來的幾年里,

全人源性單抗將作為一種新的產物更多地用于疾病的診斷、治療及研究。1.4生產技術的發展趨勢目前大規模生產單抗的方法有體內接種法、體外細胞培養的發酵罐法、微囊法、中空纖維培養法以及DNA重組法等。現階段，國內企業（含外企）單克隆抗體藥物生產設備主要有傳統型生產設備和一次性拋棄型生產設備兩種[4]。1.5單克隆抗體的生產工藝單克隆抗體制備工藝流程可大致分為四個階段：1.第一階段為上游工作細胞的復蘇、培養擴增；2.第二階段為中游培養產物的粗純分離；3.第三階段為下游粗純產物的精純分裝；4.第四階段為單抗藥物制劑生產。1.5.1上游工作細胞的復蘇、培養擴增上游工作細胞的復蘇、培養擴增該階段從工作細胞的復蘇開始，接種到搖瓶中恒溫條件下進行細胞擴增，經歷多級種子罐的的穩定擴增后，進入動物細胞生物反應器進行大量的細胞培養，細胞在擴增階段生長并形成產物，目標產物分泌到細胞培養上清液中。待細胞培養和產物的形成完畢后，整個培養物（細胞和產物的混合物）將經過深層過濾，細胞將截留在深層過濾器中。分離后的產物仍留在澄清后的上清液中，含目標產物的細胞培養上清液暫時貯存于溫度可控制的一次性儲存容器中。該生產過程生產周期長（以1000L細胞培養為例，從工作細胞的復蘇開始，經過擴增、培養，至目標產物收獲，整個過程須45~50天）、生產過程溫濕度控制嚴格（單抗的本質是糖基化蛋白質，生產過程中對溫度有嚴格的控制要求）。該階段以哺乳動物細胞作為表達載體，工作細胞中帶入病毒會影響到成品的質量、危害病人，也可能對生產操作人員產生危害。故在生產過程中還須有完整的病毒防范措施[5]。1.5.2中游培養產物的粗純分離上游收獲的培養液過濾后，首先進行ProteinA的高效捕獲親和層析，去除大部分的雜質蛋白；經低pH孵育，以滅活極小概率可能存在的病毒顆粒。過濾后經陰陽離子交換后疏水層析、納濾，以去除極小概率可能存在的病毒顆粒。該生產過程須有嚴格的溫濕度控制和較為完整的病毒防范措施[6]。1.5.3下游粗純產物的精純分裝粗純產物溶液經過切線流過濾超濃縮和緩沖液交換后，再按要求加入所需賦型劑和蛋白穩定劑后，將原液進行分散包裝（以匹配制劑生產用量）進行貯存。該生產過程須有嚴格的溫濕度控制，病毒及其他活性物質已在中游階段完全截留，此階段認為是相對潔凈的階段。1.5.4單抗藥物制劑的分裝生產單抗藥物制劑的形式一般為非最終滅菌的無菌制劑，主要為預充針、小水針和凍干粉針。該階段生產結束后送至車間成品庫冷藏。該生產過程須有嚴格的無菌環境和溫濕度控制。制劑區域在設計中為單獨一塊生產區域，在制劑配液前，原液須冷庫冷藏，中間檢驗合格后方可運至制劑區進行后續制劑工段的生產[8]。2市場預測與建設規模2.1市場需求盡管單克隆抗體-雜交瘤關鍵技術誕生于1975年，應用抗體治療淋巴癌的試驗也于1982年獲得成功，但由于藥物研發艱難，FDA審批時間長，直到1986年用于治療腎移植排斥反應的鼠源化抗體OrtholoneOTK3才宣告上市。但由于鼠源單抗副作用大，部分臨床試驗效果不佳等原因，單抗市場一直不見起色，直到第一個單抗問世10年后的1996年，全球單抗市場仍不足10億美元。情況在1997年FDA批準Genentech的嵌合抗體Rituxan（國內商品名為美羅華）上市后得到了極大的改善。作為第一個治療腫瘤的嵌合抗體，Rituxan成為了單抗領域的首個明星藥物。未來與它一起躋身10億美元銷售俱樂部的還有次年上市的嵌合單抗Remicade以及人源單抗Herceptin、Synagis。與此同時，整個單抗行業也得到了迅速擴張，銷售額從1999年的12億美元到2011年的671億美元。截至2013年，經美國FDA批準上市的單抗藥物一共有34種，進入臨床試驗階段的單抗則接近350種，治療范圍涵蓋腫瘤、自體免疫疾病、抗感染、止血、呼吸道疾病等，其中又以腫瘤和自體免疫疾病藥物市場最大，種類最多，我們估算2010年這兩類產品的銷售額分別占到單抗銷售總量的30-40%，市場規模均達到或超過200億美元。目前，單抗藥物已經成為了生物藥中不可忽視一大類，而由于目前批準上市的單抗僅有34種，這就使得單抗藥物成為了重磅炸彈集中營，占據十大生物藥中的六席。20種年銷售額超過10億美元的重磅炸彈級生物藥中，單克隆抗體占8種。其中Avastin、Herceptin、Rituxan、Humira和Remicade五大單抗銷售額占到了單抗總銷量接近80%，Datamonitor預計五大單抗在2013年的年銷售量都將維持50億美元以上，仍將占據單抗市場的60%。而除此之外，人源化抗體類融合蛋白Enbrel2012年銷售金額接近80億美元，Synagis，Xolair等八種單抗（被稱為‘emergingeight’）[7]。2.2生產技術現狀與進展目前大規模生產單抗的方法有體內接種法、體外細胞培養的發酵罐法、微囊法、中空纖維培養法以及DNA重組法等。近年來，隨著分子生物學的發展，出現了嵌合單克隆抗體和由轉基因小鼠、噬菌體展示技術、核糖體展示技術所制備的單克隆抗體。這些技術的出現進一步的擴大了單克隆抗體的范圍，推廣了單克隆抗體的應用[9]。2.3建廠規模規劃生產規模為：單克隆抗體凍針劑：達產年產量達5000升，生產廠房嚴格按GMP規范要求設計，總廠區占地面積122,000平方米，生產用房面積50,000平方米，倉儲面積5000平方米，綠化面積60,000平方米。整體建筑分為普通粉針車間、頭孢類粉針車間、凍干粉針車間、小容量注射劑、口服固體制劑等多種劑型的生產凈化車間及倉庫，總投資約1億元，工廠設計年生產能力在產規模為5億元人民幣。利用混凝土框架二層建筑，屋面鋼結構彩板車間建筑面積約為1500m2進行單克隆抗體中試車間建設。本項目是在此基礎上按照新版GMP規范標準進行凈化裝修和生產線安裝。生產車間布置于第二層北側，設置單克隆抗體針劑生產線一條：達產年產量5000升。2.4勞動定員和工作制度單克隆抗體中試車間新增員工總數為25人，食宿均依托廠區現有基礎設施。工作制度為年生產300天，二班次/天。3廠址選擇與建廠條件3.1廠址選擇廠址的選擇具有非一般性，需綜合考慮很多方面的因素。

一般有潔凈廠房，廠址宜選在大氣含塵、含菌濃度低，無有害氣體，周圍環境較潔凈或綠化較好的地區。藥廠選擇在農村市郊含塵濃度低的地方，對空氣的凈化處理是有益處的。但并不是要意味強求，還要考慮其他諸如交通，能源，市場等因素的影響。

有潔凈廠房的廠址應遠離碼頭、鐵路、機場、交通要道以及發散大量粉塵和有害氣體的工廠，

儲倉，堆場等嚴重空氣污染，水質污染，震動或噪聲干擾的區域。不不能遠離時，應位于其最大頻率風向的上風側，或全年最小頻率風向的下風側。廠址選擇總原則：盡可能利用當地有力的條件，不免或克服不利的條件。盡可能利用當地的人力、物力、財力、自然資源，和保護環境。盡可能是企業接近原料、能源產地和產品消費地。經濟效益好，能加快國名經濟的發展和人民生活水平的提高。本設計廠址選擇在攀枝花市東區金沙江旁邊。3.2建廠條件3.2.1自然條件攀枝花屬南方亞熱帶為基帶的立體氣候類型，旱、雨季分明，晝夜溫差大，氣侯干燥，降雨量集中（全年815毫米），日照長（全年2443小時），太陽輻射強，蒸發量大，小氣候復雜多樣。年平均氣溫20.3℃，是四川年熱量值最高的地區，日照時數是四川盆地的2~3倍，最熱月為5月，最冷月為12月或1月，6~10月為雨季，11月至翌年5月為旱季，無霜期達300天以上；海拔低于1500米的河谷地帶，全年無冬，無霜期長（全年達300天以上），被譽為天然的“大溫室”；最冷月1月平均氣溫高于13℃，接近熱帶氣溫與熱量水平；夏季氣溫不高，最熱月平均氣溫約26℃左右，夏季最高溫度可達40攝氏度。總體而言，攀枝花氣候具有春季干熱、夏季濕熱，秋季涼爽、冬季溫暖、四季不分明的特點。??3.2.2交通、經濟條件攀枝花市，四川省省轄市，是全國唯一以花名命名的地級市，位于中國西南川、滇交界部，北距成都749km，南至昆明351km，西連麗江，東接昭通。是四川通往華南、東南亞沿邊、沿海口岸的最近點，為"南方絲綢之路"上重要的交通樞紐和商貿物資集散地。攀枝花面積7440平方公里，人口123萬，2012年，攀枝花地區生產總值(GDP)實現740.03億元，全市城鎮居民人均可支配收入僅次于成都居全省第二。攀枝花市轄三區兩縣。也是中國西部最大的移民城市，攀枝花是四川省除成都外唯一的勞動力輸入城市，流動人口高達30萬。城市人口占全市總人口的60.1%，是成渝地區城市化率僅次于成都的城市。攀枝花市是四川一座得天獨厚的自然資源寶庫，有著豐富的礦產、水力和農業資源，綜合競爭力高于綿陽、德陽等城市，半山地區有發展畜牧業的優良草場;高山地區森林資源豐富，林木可采伐量達一千七百萬立方米。同時也是川西南，滇西北的區域中心城市和交通樞紐。2014年，攀枝花市人均地區生產總值(GDP)首次突破7萬元，達70646元，位居全省第一位。4原材料與主要設備4.1基本原料單克隆抗體中試車間原輔料使用情況名稱年用量(kg)原輔料物化性質儲存方式動物細胞50CHO動物細胞外購磷酸鈉鹽（藥用級）330NaH2PO4袋裝100g/袋氯化鈉鹽（藥用級）3780白色晶體狀，其來源主要是在海水中，是食鹽的主要成分。用途最多的是工業和餐飲；易溶于水、甘油，微溶于乙醇、液氨；不溶于濃鹽酸袋裝1000g/袋醋酸鈉鹽（藥用級）80無色透明晶體。密度1.45克/厘米3。熔點58℃。123℃時失去結晶水。無水物的密度1.528克/厘米3，熔點324℃（在324度時分解）。溶于水（76g/100ml(0°C)加熱后溶解度暴漲），呈弱堿性。稍溶于乙醇。也稱“熱冰”。袋裝100g/袋碳酸鈉鹽（藥用級）130化學式Na2CO3分子量105.99；白色粉末或細粒結晶(無水純品)相對密度(水=1)2.532；熔點851℃...袋裝100g/袋檸檬酸鈉鹽（藥用級）220C6H5Na3O7無色結晶或白色結晶性粉末，無臭，味咸、微酸。易溶于水，不溶于乙醇袋裝100g/袋氫氧化鈉（藥用級）720氫氧化鈉，化學式為NaOH，俗稱燒堿、火堿、苛性鈉，為一種具有高腐蝕性的強堿，一般為片狀或顆粒形態，易溶于水并形成堿性溶液，另有潮解性，易吸取空氣中的水蒸氣袋裝1000g/袋氨基酸（藥用級）180桶裝20kg/桶葡萄糖（藥用級）180桶裝20kg/桶4.2主要設備各個生產車間的主要生產設備選擇詳見下表“生產設備一覽表”。單克隆抗體中試車間設備一覽表序號設備名稱生產廠家型號或規格單位數量單價

（萬元）金額

（萬元）負荷

（KW）一、單克隆抗體凍干粉針劑制備1配液系統套465260242500升生物反應器組套210202040123分離純化系統套6115690604深層過濾系統套255110125超濾系統套450200506納米過濾系統套25010020二、無菌配液系統（CIP、SIP）套158586三、凍干灌裝生產線12000瓶/小時套12802801全自動洗瓶機臺162隧道式滅菌干燥機臺1703緩沖轉盤臺214高速液體灌裝機臺145軋蓋機臺146輸瓶軌道及軌道百級層流裝置套147燈檢機套12四、凍干設備真空冷凍干燥機（CIP、SIP）10m3臺123023050五、其他1立式圓瓶貼標機450瓶/分臺1141422全自動裝盒包裝線180套16565163全自動濕法超聲波膠塞清洗機4萬/每次臺13939355潔凈小車臺22.5526消毒液配制罐臺40.351.47列管換熱器臺28168脈動真空滅菌器0.36m3臺18869變頻高效水冷式臭氧發生器50Kg/小時臺12.82.8610VHP發生器臺1464611對開門（百級）電熱滅菌烘箱1m3臺2193817六、車間設備安裝（含工藝管道）項1100100七、公用工程及檢驗設備1開利冷水機組30HR-225臺148481802冷卻塔200噸/小時臺3離心水泵200噸/小時臺20.91.8444空調風柜25000m3/小時臺15.85.8225空調風柜15000m3/小時臺14.34.3116空調風柜5000m3/小時臺13.23.247空調風柜20000m3/小時臺14.94.918.58配電屏臺4149空壓機6m3/min臺166305高效液相色譜儀臺1808016酶標儀臺165657電泳設備臺153538質譜儀臺110510549水分滴定儀0.001PH,0.1mV,0.1℃臺18810紫外分光光度計190-1100nm六檔臺19911氣相色譜儀臺1303012傅利葉紅外光譜儀臺1202013無線熱驗證系統精度：0.05度臺1252514套冒式風量計臺13315塵埃粒子計數器1m3臺1141416高效過濾器檢漏系統臺1232317集菌儀臺14418濾芯完整性檢測儀臺11212八、合計4835.7723.5上表生產廠家略。公用工程（1）供水：水源來自市政給水管網提供。（2）供電：電源來自市政供電管網，廠區內設有10KV中壓配電網，380V/220V低壓配電壓。（3）排水：采用雨污分流制原則。糞便污水經三級化糞池消化處理后與其它生活污水一起排入區內污水處理站處理達到《混裝制劑類制藥工業水污染物排放標準》（GB21908-2008）中表2標準后，廢水處理達標后排入秀英溝。5單抗工藝車間設備設計5.1生產工藝流程及指標單抗藥物的生產一般有以下幾個特點：（1）生產周期長：以750L的細胞培養罐為例，從種子的復蘇、經過幾級的種子擴增，再到達生產罐培養，整個發酵過程歷時43～47d。（2）多產品：隨著單克隆抗體藥物研發水平的發展，單抗的表達量獲得了很大的提高。因單抗生產投資巨大，隨著表達量的增加，多產品共線將成為必然的選擇。但因生產周期太長，對于一條多產品的抗體生產線來說，沒有良好的設計，換品種時，為防止不同品種的交叉污染將會浪費大量的生產能力[11]。（3）須有完整的病毒防范措施：因采用了哺乳動物細胞作為表達載體，如何防止種子或者原材料中帶入的病毒影響到成品的質量，危害病人，顯得尤為重要。（4）生產過程的溫度控制嚴格：單抗的本質為糖基化蛋白質，部分單抗在室溫下不穩定，生產過程中（包括下游和制劑）對溫度需要有較高的控制。（5）單抗藥物的制劑形式一般為凍干粉針、水針和預充式水針。如何提高生產線的使用效率，減少潔凈區的面積，節約建設資金，且符合GMP，保證產品質量，就需要依賴良好的設計。本文通過分析單抗的生產工藝和車間特點以及國內外GMP，得出設計草案[12]。5.1.1生產工藝流程單抗的生產工藝流程：種子復蘇→擴增→多級種子罐→生產罐→離心過濾→純化1（proteinA捕獲）→低pH孵育→純化2→純化3→除病毒過濾→超濾→除菌過濾→原液分裝→制劑配料→灌裝→凍干→壓蓋→包裝→入庫。按照生產工藝流程，整個生產過程可分為3個大的階段：上游（種子復蘇到收獲）、下游（純化到原液灌裝）、制劑。5.1.2用細胞培養或發酵來生產原料藥或中間體涉及諸如細胞培養，或從活體組織提取和純化物料等生物過程，還有一些附加的隸屬于生產工藝一部分的物理化學修飾，使用的原材料（培養基、緩沖成分）可能為微生物污染提供了可能性。根據物料來源、制備方法和原料藥或中間體的預期用途，有必要在制造和工藝監測的適當階段控制微生物、病毒污染和/或內毒素。應當采取合適的預防措施來防止病毒去除/滅活前的步驟對病毒去除/滅活后的步驟的潛在病毒污染。因此，開口工藝應當在與其他操作活動分開的、有獨立的空氣處理裝置的區域內進行。依據ICH的要求，在生產線的設計中針對封閉系統和開口系統，在人物流的組織和空調系統分區上均存在巨大差異。5.1.3對于較大規模的單抗生產車間來說，物料在車間內的流動主要是液體形式。培養基的配制、添加，緩沖液的配制儲存和使用，以及物料自上道工序流轉到下道工序，均通過大量的衛生級管道進行。如何合理組織這些復雜的物料系統，使之在空間上排布合理，便于物料的輸送和清洗，是方案設計階段需要重點解決的問題之一。5.1.4由于哺乳動物細胞培養的生產周期長達一個半月之久，在此過程中任何保障系統的故障均會導致生產的失敗。因此，在單抗生產車間的設計中，公用工程的保障系統設計尤為重要。在目前的設計中，均采用備用機組和備用系統，保證系統的穩定性和可靠性。5.2單抗的生產車間車及思路單抗藥物生產車間包括原料車間和制劑車間，本文參考的法規依據為GMP（1998版）、《醫藥工業潔凈廠房設計規范》（GB50457—2008）以及ICH的Q7A，Q5A等。GMP要求車間平面布局遵循以下特點：平面布局合理、嚴格劃分區域、防止交叉污染、方便生產操作[14]。5.2.1生產區域劃分單抗藥物生產車間包括原料車間和制劑車間，本文參考的法規依據為GMP（1998版）、《醫藥工業潔凈廠房設計規范》（GB50457—2008）以及ICH的Q7A，Q5A等。GMP要求車間平面布局遵循以下特點：平面布局合理、嚴格劃分區域、防止交叉污染、方便生產操作。5.2.2人物流設計為了合理利用空間，將按照人流和物流單向流的理念進行整體空間布局。分別設計清潔物料、不潔物料的進入口；人員的進入通道和出車間通道分開，以避免人員退出時對清潔區域造成污染；設立獨立的污物出口。在單向流的設計中，利用門禁系統輔助控制人員和物料的流動方向，當工作人員由萬級清潔走道進入到工作區，如種子、發酵或者純化區后，門禁系統將不允許從這些區域返回到萬級清潔走道，工作人員只能通過人出緩沖進入到十萬級的污物走廊，再由專設的人出通道走出車間。如空間允許，最好能在相反的方向或位置設置人流、物流入口，如生產車間的東面安排人流入口，則可以考慮在生產車間的西面安排物流入口；當從同方向設置人流、物流入口時，二者之間應保持相對較遠的距離，不得相互影響或者妨礙。人流設計圖見附圖3物流設計圖見附圖55.2.3開口系統和密閉系統ISPE認為密閉系統須進行SIP或在使用前被封閉后進行SIP，并可以通過真空或者加壓等手段對系統進行檢漏；在系統的完整性被破壞前，能夠按照預期的目標進行無菌液體的轉入或者轉出，并能保持其無菌性，且能夠和其他的封閉系統連接形成一個完善的封閉系統。不是封閉系統的統稱為開口系統。由于開口系統可能存在不同批次間活生物體的相互污染，同時也存在未除病毒中間體污染已除病毒中間體的風險，要求使用開口生產系統工序之間在空間上完全隔離，即需要用不同的操作間處理不同的工序，且空調系統相對獨立。封閉系統由于本身系統的封閉性已經排除了不同序間以及除病毒前和除病毒后的相互污染的可能性，而允許在同一操作空間內進行。封閉系統在同一空間內，也可以進行兩個不同品種產品的生產[13]。在大大減少工程費用和運行費用的同時，大大縮短了更換產品的間隔期。因此，在工藝設計時，盡可能選用封閉系統。開口系統一般應用于小規模（350L以下）的中試或者研究性車間。因開放系統的車間設計較為復雜，本文重點討論開放系統情況下的車間設計。5.2.4車間的豎向設計將培養基和緩沖液的配制和儲存放置在三層，發酵和純化等主要生產區放置在二層，制劑區可設置在一層或者二層，CIP工作站、生物廢水殺滅系統以及清潔公用工程（純化水、注射用水、純蒸汽、工藝氧氣、CO2和工藝壓縮空氣等）安置在一層。這樣布置有利于利用重力傳輸物料，并可將物料與生產工位的距離縮至最短。同時，還有利于合理安排生產設備和管線的CIP。豎向布置示意圖見附圖15.2.5空調進化系統設計空調系統將依據生產區的分區原則和防止交叉污染的原則進行分區。培養基配置和緩沖液配置定義為一個區，人進和清潔走道、種子、發酵、收獲、純化以及污物走道和清洗間分別設立獨立的空調系統。因考慮到純化采用開放系統，因此不同的純化工段，包括超濾和除病毒過濾均設置在一個空調分區內[14].空調分布示意圖見附圖45.2.6生產過程溫度控制單抗因其產品對溫度的敏感性，對生產環境的溫度有較高的要求。為了防止生產過程產生過多的二聚體或者多聚體，原液的加工溫度控制在4～12℃。要求儲存和處理設備均有嚴格的溫度控制，如儲存罐、超濾等。單抗藥物的長期儲存條件為2～8℃，無論是凍干粉針還是水針。在制劑的生產過程中，為了充分保護產品，在采灌裝線時，需要選購帶溫度控制的cRABS，RABS的溫度控制在14～16℃，確保藥品在灌裝過程中其溫度不會超過12℃。在開口生產系統中，因規模較小，部分中間產品和緩沖體系需要存放在2～8℃的冷庫中，因此車間內須設立冷庫（2～8℃）[10]。5.2.7綜述綜上所述，風壓平衡既可利用人工調節風門的開度大小改變排風系統阻力特性曲線實現，又可利用自動控制的方式改變風機運行頻率，從而改變風機的運行特性曲線。在欠載情況下讓瓶子在熱風循環滅菌干燥機加熱段停留一段時間或者減緩瓶子通加熱段的速度也可采用手動操作和自動操作兩種方式。現實中有相當數量的熱風循環滅菌干燥機都是采用手動方式操作，建議用戶在操作規程SOP中對上述影響熱風循環滅菌干燥機滅菌效果的操作過程作出相應的規定。手動操作有下列不足之處：首先人工調整，操作不太方便；其次由于操作不及時，可能出現失控；再者由于人的精神、身體狀態等因素難以一致，往往達不到效果。另外，在風壓平衡關小閥門時，不僅增大了管路系統流動阻力，而且使風機的效率下降，經濟上不太合理。相比手動操作，自動控制將是新產品設計的發展方向，它可以動態、實時地對生產過程進行控制，具有PAT過程控制的優點。5.3物料平衡物料平衡如下圖：入方出方物料名稱年用量(kg)物料名稱數量動物細胞50成品單克隆抗體凍干粉針劑300kg磷酸鈉鹽（藥用級）330廢水細胞收集澄清液560kg氯化鈉鹽（藥用級）3780細胞培養液520kg醋酸鈉鹽（藥用級）80細胞培養緩沖液1620kg碳酸鈉鹽（藥用級）130固廢滅活后的細胞殘碎片20kg檸檬酸鈉鹽（藥用級）220廢培養基2700kg氫氧化鈉（藥用級）720廢氣細胞呼吸廢氣--氨基酸（藥用級）180葡萄糖（藥用級）180動物細胞50合計5720合計5720kg6環境問題與污染情況6.1污染物類別項目主要污染物產生及預計排放情況如下表：內容類型排放源（編號）污染物名稱處理前（單位）處理后（單位）產生濃度產生量排放濃度排放量大氣污染物1、運營期鍋爐廢氣煙塵17.91mg/m33.8×10-2kg/h；17.91mg/m33.8×10-2kg/h；NO2140mg/m30.3kg/h164.68mg/m30.3kg/h水污染物2、運營期生活污水CODSSCOD進口濃度為167mg/l，產生量為114.2kg/a，SS產生濃度為17mg/l，產生量為11.6kg/a滿足GB21908-2008《混裝制劑類制藥工業水污染物排放標準》中表2新建企業水污染物排放限值。3、運營期生產廢水CODSS固體廢物4、運營期生活垃圾生活垃圾12.5kg/a；3.75t/a由環衛部門統一收集處理。5、運營期生產垃圾包裝廢棄物廢藥品等廢活性碳滅活后細胞1t/a0.86t/a175kg/a20kg/a包裝廢棄物回收利用。危險廢物委托具有危廢處理資質的單位運走處理（海南寶來工貿有限公司）。噪聲6、運營期設備噪聲：洗瓶機、灌裝機、軋蓋機、包裝機、鍋爐等設備運行時產生的設備噪聲。聲壓級在60-85分貝之間。6.1.1大氣環境污染大氣污染物主要是鍋爐廢氣及無組織顆粒物。項目的熱源來自一臺6t/h的燃氣鍋爐，鍋爐型號為FH6000，2臺2t/h燃氣鍋爐，型號分別為FH-2000、WNS2-1.25-YQ，燃料均為天然氣。項目主要大氣污染源為鍋爐廢氣主要污染物為煙塵、NOx。根據建設項目環境保護驗收監測報告結果（詳見附件）顯示：鍋爐廢氣的煙塵平均排放濃度為17.91mg/m3，平均排放速率為3.8×10-2kg/h。全部達標；氮氧化物平均排放濃度為140mg/m3，平均排放速率為0.3kg/h。全部達標；二氧化硫為末檢出，全部達標；煙氣黒度均為1.0級，全部達標。項目鍋爐每天平均使用8小時計，年工作日300天，根據業主資料項目現有鍋爐供汽能力富余，足以滿足本次擴建車間需求。鍋爐的煙氣產生量為6438Nm3/d，煙塵產生量為7.6×10-2kg/h，NOx產生量為0.6kg/h。6.1.2水環境水環境：（1）制劑車間洗滌廢水和食堂排出的有機廢水，排入污水處理站處理。（2）糞便污水采用三級化糞池厭氧消化再經污水處理站處理。（3）制水站純水制備中采用的是二級反滲透工藝制備，生產工藝如下：原水 活性炭過濾一級反滲透 二級反滲透 精制儲水槽純水輸送泵用水點 （4）海口市制藥廠污水處理站處理情況污水處理站的設計參數為：pH值為6.5-8.5、CODcr為450mg/l，污水處理量為160m3/d（按兩班計，每班8小時）。污水處理達標后，廢水排入秀英溝。其工藝流程如下：活性污泥氧化池中和池格柵井廢水活性污泥氧化池中和池格柵井廢水空氣上清液空氣上清液污泥消化池鼓風機污泥消化池鼓風機污泥污泥排放斜管沉淀池排放斜管沉淀池污水處理站工藝流程圖根據攀枝花金沙江附近的用水現狀調查，項目現狀年用水量為21180m3/a，按生產天數為300天計，用水量約70.6m3/d。項目廢水排放按用水量85%計，則污水排放量為60m3/d（18000m3/a），項目現有一座處理能力為160m3/d的污水處理站。根據廢水監測報告監測結果，污水處理站的水污染物進水濃度為pH：7.99，SS：17mg/L，COD:167mg/L，氨氮：0.372。污水均能滿足GB21908-2008《混裝制劑類制藥工業水污染物排放標準》表2新建企業水污染物排放限值。6.1.3固體廢物污染源固體廢物污染源：生產固廢：生產固廢主要為損耗廢棄的玻璃，塑料、鋁箔、鋁桶、紙箱等內外包裝材料的廢棄物等，年廢棄量約90t，廢品統一收集集中后送往廢品收購站回收利用。生活垃圾：生活垃圾進行分類收集，對廢舊塑料、金屬、玻璃等可回收利用的送往廢品收購站回收利用。不可回收利用的生活垃圾及時運往垃圾處理場處理。固體廢物均得到妥善處理。（3）活性碳：車間精制工序使用的活性碳作為吸附過濾介質。年用量約178kg。失效后的廢活性碳，還有抗生素污粉、抗生素污瓶、污膠塞，危廢類別編號為HW02；廢藥品危廢類別編號為HW03；廢機油危廢類別編號為HW08；實驗廢液、活性淤泥危廢類別編號為HW49。6.1.4聲環境污染噪聲主要發生在制粒、混合、整粒、總混充填、裝囊等工序中。噪聲大的設備為空壓機、振動機、軋蓋機、粉碎機、混合機、整粒機、充填機、壓片機等。6.2防治措施單克隆抗體廢物處理及防范措施：工藝步驟相關廢料及排放物危害評估處理及應變措施細胞種子制備，初級種子擴增,生物反應器培養基高BOD,含細胞,非生物危害,pH中性廢料經滅活后交由有資質單位處理細胞收集液澄清塑料廢物含細胞,非生物危害收集液濃縮培養基,廢水中BOD,非生物危害pH中性至微堿廢水經滅活、過濾純化后排入項目自建污水處理站處理達標排放層析純化(1)廢水低BOD,非生物危害pH中性層析純化(2)廢水低BOD,非生物危害pH中性層析純化(3)廢水低BOD,非生物危害pH中性除病毒過濾塑料廢物非生物危害廢料經滅活后交由有資質單位處理恆濾制劑廢水,塑料廢物極低BOD,非生物危害pH中性無菌灌封包裝塑料廢物非生物危害固體廢物處理、處置建議:1、不斷改進技術、完善工藝，貫徹清潔生產原則，從源頭削減不合格產品（液）產生量。2、危險固廢在廠內暫存期間，設置獨立危險廢物暫存間，并設置醒目標識。嚴格按照《危險廢物貯存污染控制標準》(GB18597-2001)實施，采取防滲透、防泄漏、防流失措施，并落實管理責任，建立固體廢物產生、外運、處置及最終去向的詳細臺賬，按危險廢物轉移交換處置管理辦法實施跟蹤管理，避免二次污染。6.3清潔生產原輔材料：由之前對單克隆抗體中試車間的生產工藝分析可知，生產所用的原輔材料的提煉、加工不在本廠、本車間。本項目所有原輔材料都是從市場購進，本項目車間內的整個生產過程基本屬于原料與溶劑按一定比例相溶的物理過程。項目已和相關企業就原輔料購買達成協議。原輔料來源有保證。可保證正常生產需求。工藝路線：項目采用國內成熟工藝生產，其合成技術較為先進，流程短，產品收率有較大提高，原材料利用率高，污染較小。無高毒物質、惡臭物質使用和有害氣體污染物的產生、排放。設備先進性：單克隆抗體中試車間項目設備的選用、安裝、檢驗和管道連接均嚴格執行我國現行技術標準規范。各類物料輸送管線專管專用，一般不需切換和清洗。有效減少物料的跑、冒、滴、漏。7生產組織、勞動定員和人員培訓一、企業體制與組織機構攀枝花學院生物化工研究所為國有企業。組織機構為董事會領導下的總經理負責制，下設部門經理，負責生產、擴建、營銷等工作。二、生產班制及勞動定員1．生產班制全廠年生產天數為300天，其余為法定節假日及大、中修時間。車間生產部門及輔助生產部門按需要實行一班—三班，每班按8小時工作制，某些生產工段根據具體情況實行四班三轉運。2．勞動定