●心血管系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)

1、心臟

2、血管

(1)動脈主動脈外周動脈

(2)靜脈●高脂血癥的研究●動脈粥樣硬化的研究●血管再狹窄的研究1編輯ppt2編輯ppt3編輯ppt4編輯ppt5編輯ppt6編輯ppt7編輯ppt8編輯ppt9編輯ppt10編輯ppt11編輯ppt12編輯ppt13編輯ppt14編輯ppt15編輯ppt16編輯ppt●高脂血癥的研究17編輯ppt血脂異常是血中總膽固醇〔TC〕、低密度脂蛋白—膽固醇〔LDL-C〕、甘油三酯〔TG〕超過正常范圍及〔或〕高密度脂蛋白膽固醇〔HDL-C〕低下。

高脂血癥是指TC或〔和〕LDL-C或〔和〕TG增高。血脂異常在動脈粥樣硬化〔AS〕的發(fā)生開展及其引起的心血管事件〔CVE〕中起非常重要的作用。18編輯ppt

高TC血癥，特別是LDL-C增高，是發(fā)生CHD的最重要的危險因素。流行病學(xué)資料顯示，芬蘭TC最高，CHD發(fā)病率也最高，日本TC最低，CHD發(fā)病率也最低。19編輯ppt

飲食療法開始標(biāo)準(zhǔn)藥物療法開始標(biāo)準(zhǔn)治療目標(biāo)值1、動脈粥樣硬化病（－）TC>5.72mmol/LTC>6.24mmol/LTC<5.72mmol/L其它危險因子（－）LDL-C>3.64mmol/LLDL-C>4.16mmol/LLDL-C<3.64mmol/L2、動脈粥樣硬化病（－）TC>5.20mmol/LTC>5.72mmol/LTC<5.20mmol/L其它危險因子（＋）LDL-C>3.12mmol/LLDL-C>3.64mmol/LLDL-C<3.12mmol/L3、動脈粥樣硬化病（＋）TC>4.68mmol/LTC>5.20mmol/LTC<4.68mmol/L

LDL-C>2.60mmol/LLDL-C>3.12mmol/LLDLC<2.60mmol/L高脂血癥患者的開始治療標(biāo)準(zhǔn)值及治療目標(biāo)值20編輯ppt降脂中藥篩選及藥理學(xué)研究○體外模型○體內(nèi)模型21編輯ppt體外篩選細胞模型(研究階段)肝細胞卵細胞膽固醇甘油三脂脂酰CoA轉(zhuǎn)移酶羥甲基戊二酰CoA(HMG-CoA)復(fù)原酶脂酰輔酶A：膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(ACAT)Y?22編輯ppt體內(nèi)篩選動物模型(用于降脂藥物篩選及機制研究)○家兔○大鼠○小鼠○金黃地鼠23編輯ppt家兔◎常用日本大耳兔或新西蘭白兔。◎兔是喂飼富含高膽固醇食物引起高脂血癥和動脈粥樣硬化病變的敏感動物。◎通過調(diào)整飼料可制作內(nèi)源性高脂血癥和外源性高脂血癥模型。◎造模后形成的主動脈斑塊及冠狀動脈粥樣硬化病變與人類相似。24編輯ppt◎灌胃給藥操作不便，灌胃不當(dāng)易造成死亡。◎高脂血癥模型及動脈粥樣硬化斑塊形成時間較長，消耗飼料，動物本錢較高。◎血清中VLDL占總膽固醇的比例過高，且兔為草食動物，其脂代謝與人差異較大。●因無較為理想的高脂血癥動物模型，目前有關(guān)調(diào)脂新藥和抗動脈粥樣硬化藥物的研究中，家兔仍然是一種常用的實驗動物。家兔高脂血癥造模25編輯ppt大鼠是目前國內(nèi)研究人類脂質(zhì)代謝使用最多的實驗動物。選用SD大鼠或Wister大鼠造模。◎易于飼養(yǎng)管理，抵抗力較強◎給藥容易◎采樣方便，血量豐富，便于一次較多指標(biāo)的檢測◎在國外高脂血癥研究中，大鼠的使用逐漸減少。

a.大鼠血清中高密度脂蛋白(HDL)是血漿膽固醇的主要載體。

b.對抗動脈粥樣硬化形成的能力大鼠26編輯ppt◎用高脂飼料喂養(yǎng)大鼠，一般7-10天可形成高脂血癥模型。◎影響因素：a.飼料中摻人了膽固醇、豬油等油膩的高脂物品，使飼料性質(zhì)發(fā)生改變，有異昧，動物易出現(xiàn)“厭食〞；而且不易于掌握精確的飼料用量。b.進口膽酸納價格昂貴。c.高脂乳劑黏稠，不易抽取，灌胃造模時，用量不易準(zhǔn)確控制。d.所造模型大多為外源性膽固醇攝入過量所致。大鼠高脂血癥造模27編輯ppt小鼠在調(diào)血脂藥臨床前研究中應(yīng)用越來越多。◎價格廉價，造模本錢低，采樣較方便。高脂飼料喂養(yǎng)可成功建立高脂血癥模型。基因缺損和基因敲除小鼠已成功地用于藥理學(xué)研究中。◎具有清楚的遺傳背景，繁殖力強，模型穩(wěn)定。◎血脂水平與人類接近，主動脈和冠狀動脈均有明顯的斑塊形成，可用于動脈粥樣硬化的實驗研究。◎apoE基因缺損小鼠及LDL基因敲除小鼠血脂升高不受人為因素影響。小鼠28編輯ppt◎急性高脂蛋白血癥的可用一種外表活化劑(TritonWR-1339)給小鼠尾靜脈注射，12～24h即可誘導(dǎo)出高脂蛋白血癥模型，可用作初篩新藥。◎正常小鼠用高脂飼料喂養(yǎng)造模時間長。◎采血量少，指標(biāo)的檢測受限。小鼠高脂血癥造模29編輯ppt◎普通飼料喂養(yǎng)時，成年鼠血清膽固醇水平是正常鼠的5～8倍。◎當(dāng)給予高脂負荷飼料(20%脂肪，0.3%膽固醇后)，血清中膽固醇濃度可達普通飼料喂養(yǎng)升高值的4～5倍。◎血脂升高穩(wěn)定。◎遺傳背景為C57BL/6品系。◎繁殖能力較強。apoE-/-小鼠30編輯ppt◎行動靈敏，易發(fā)生逃逸。◎性情較其他品系小鼠急，抓持不當(dāng)易被咬傷。◎成年雄鼠之間易發(fā)生撕咬。apoE-/-小鼠31編輯ppt◎較好地反映人類膽固醇代謝的調(diào)節(jié)。如肝臟合成膽固醇的比例，人內(nèi)源性膽固醇約有90%是肝外組織合成的，雄性金黃地鼠肝外合成比例約為85%，而雌性大鼠只有35%是肝外合成、雌性小鼠只有55%在肝外合成。◎較低的高脂負荷即可建立理想的動物模型。飼料中膽固醇含為0.2%即可成功造模。大鼠飼料中膽固醇的含量多為1-2%，超過自身合成量的10倍，且要在飼料中參加膽汁酸鹽才有能到達理想的血脂水平。◎建立高脂血癥模型所需時間短。喂飼高脂飼料后3-4周，血TC、TG可達較為穩(wěn)定的水平。金黃地鼠(hamster)32編輯ppt降脂中藥的藥理學(xué)研究(一)◎脂質(zhì)含量及酶的測定a.血脂含量的測定血清總膽固醇(TC)血清甘油三酯(TG)血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)b.血清酶活性測定羥甲基戊二酰CoA(HGM-CoA)復(fù)原酶肝脂酶(HL)脂蛋白脂酶(LPL)卵磷脂膽固醇酯酰轉(zhuǎn)移酶〔LCAT〕

33編輯ppt◎載脂蛋白含量的測定

apoAIapoBapoC◎LDLR活性測定放射性配基法酶聯(lián)免疫吸附法激光共聚焦顯微鏡測定法◎LDLR基因表達降脂中藥的藥理學(xué)研究(二)34編輯ppt●動脈粥樣硬化的研究35編輯ppt與動脈粥樣硬化形成有關(guān)的細胞和分子36編輯pptFatty-StreakFormationinAtherosclerosisEndothelialDysfunctioninAtherosclerosis37編輯pptUnstableFibrousPlaquesinAtherosclerosisFormationofanAdvanced,ComplicatedLesionofAtherosclerosis38編輯pptApoEKnockoutMice061218wksofageHighFat0.3%CholesterolT-Chol1500-1800mg/dlNormalChowT-Chol500-700mg/dlAtheroscleroticLesion39編輯ppt抗動脈硬化中藥的藥理學(xué)研究(一)◎血脂的測定◎病理形態(tài)學(xué)研究制作主動脈弓病理切片染色及斑塊面積的測定，測定斑塊面積用imageproplus軟件◎分子病理學(xué)研究通過免疫組織化學(xué)，用特定的抗體檢測斑塊組織中相關(guān)分子的表達40編輯ppt抗動脈硬化中藥的藥理學(xué)研究(二)◎分子生物學(xué)研究巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)及其受體c-fms的基因表達血小板來源的生長因子(PDGF)受體的基因表達凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體(LOX-1)的基因表達趨化因子(cxcl16、MCP-1及其受體CCR2等)41編輯ppt●血管再狹窄的研究42編輯ppt動物模型三種小鼠血管再狹窄模型◎塑料微導(dǎo)管損傷模型〔Cuff植入模型〕◎金屬絲頸動脈損傷模型◎金屬直彈簧絲股動脈損傷模型43編輯ppt塑料微導(dǎo)管損傷模型44編輯ppt金屬絲頸動脈損傷模型(據(jù)Lindner醫(yī)師等所著論文的圖例局部引用〕45編輯ppt金屬直彈簧絲股動脈損傷模型〔據(jù)Sada醫(yī)師等所著論文引用〕46編輯pptC57BL/6Mice(Recipient)BMcells=5X105BoneMarrowTransplantationGFP+/LDLR-/-Mice(Donor)Irradiation(9Gy)①②47編輯pptPolyethyleneCuffShamOperationLeftFemoralArteryRightFemoralArteryMouseVascularInjuryModelCuffPlacement48編輯pptCuff-placedArterySham-operatedArteryBoneMarrow-derivedGFP-positiveCellsinC57Bl/6MouseVascularRemodelingLesion49編輯pptAnti-MacrophageBM8MacrophagelikeCellsinC57Bl/6MouseVascularRemodelingLesionCuff-placedArterySham-operatedArtery50編輯pptGFPMergedBoneMarrow-derivedSmoothMuscleCellsinCuffedFemoralArteryofC57Bl/6MiceAnti-aactin(2weeks)SM1(2weeks)Cy3Anti-aactin(1week)51編輯pptCuff-placedArterySham-operatedArteryCD31-positiveCellsinC57Bl/6MouseVascularRemodelingLesion52編輯pptBoneMarrow-derivedECsinC57Bl/6MouseVascularRemodelingLesionAnti-vWF1week2weeks53編輯pptAnti-PDGFRbAnti-c-fmsControlIgG〔1mg/day〕9CuffPlacementDay210CuffPlacementandAdministrationofanti-c-fmsandanti-PDGF-RbmAbC57Bl/6♀(8weeksofAge)onNormalChowDietSacrifice8Age(wk)54編輯pptAnti-PDGF-Rb

treatedStainingofMacrophageandSmoothMusclecellsinMiceInjectedwithanti-c-fmsandanti-PDGF-RbmAbAnti-c-fms

treatedImmunostainedwithBM8Immunostainedantia-actinAnti-RatIgGtreated55編輯pptDistinctC