2.工業(yè)發(fā)酵菌種的選育2.3.3菌種保藏方法斜面保藏法斜面保藏法03適用：細(xì)菌、放線菌、酵母菌02保存期：1~6個月01條件：4℃冰箱，相對濕度50%~70%04影響因素：培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件05優(yōu)點(diǎn)：簡單、成本低，隨時觀察菌株性狀06缺點(diǎn)：自發(fā)突變、染菌、菌種退化沙土管保藏法保存期：數(shù)年適用：產(chǎn)孢子或形成孢芽的微生物010203缺點(diǎn)：存活率低礦物油浸沒保藏法123礦物油浸沒保藏法原理為了防止菌種培養(yǎng)基失水，并隔絕氧氣，以降低微生物的代謝作用，在無菌條件下向培養(yǎng)成熟的菌種斜面注入一層滅過菌的礦物油，油層高出斜面1cm，然后保存于冰箱中適用不能利用礦物油作為碳源的細(xì)菌、霉菌和酵母菌等微生物的保藏。保藏期1年左右懸液保藏法原理保藏時間適用010302懸液保藏法寡營養(yǎng)保藏，是將微生物混懸于不含養(yǎng)分的媒液中，如蒸餾水、生理鹽水、0.25mol/L磷酸緩沖液(pH6.5)等，加以保藏的方法。1年左右大部分的放線菌、酵母菌、霉菌以及腸道科細(xì)菌等真空冷凍干燥保藏法處理安瓿管制備混懸液預(yù)凍保護(hù)劑冷凍干燥真空分口安瓿管的保藏保存期：4℃冰箱，保存5~10年適用：廣泛缺點(diǎn)：繁瑣，設(shè)備技術(shù)要求高低溫保藏法1234請在此處添加關(guān)鍵字方法使用密封性能好的螺旋口小管，裝入1～2mL的菌液，直接放人低溫冰箱中保藏。一般以較高濃度的菌懸液進(jìn)行保藏為宜，溫度低時保藏效果好，如果低溫冰箱發(fā)生溫度變化，引起懸液融化就會影響保藏效果。優(yōu)點(diǎn)在工業(yè)生產(chǎn)中，該法比真空冷凍干燥保藏法方便。適用大多數(shù)微生物可在-20℃以下的低溫中保藏。保藏期約為1年，某些菌可長達(dá)10年。真空冷凍干燥保藏法分裝入安瓿管封口預(yù)凍置液氮內(nèi)保存期：-150℃~-169℃，保存15年適用：最為廣泛優(yōu)點(diǎn)：高效缺點(diǎn)：購置設(shè)備、費(fèi)用高干燥-載體保藏法123干燥-載體保藏法適用適用于產(chǎn)孢子或芽孢的微生物保藏，一般細(xì)菌芽孢常用砂管保藏，霉菌的孢子多用麩皮管保藏。保藏期1~10年方法是將菌種接種于適當(dāng)?shù)妮d體上，如河砂、土壤、硅膠、濾紙及麩皮等，以保藏菌種。寄主保藏法、基因工程菌保藏法此方法適用于一些難以用常規(guī)方法保藏的動植物病原菌和病毒。寄主保藏法

取細(xì)菌培養(yǎng)物，加入滅菌甘油(甘油應(yīng)在1.034×105Pa高壓下蒸汽滅菌20min），振蕩培養(yǎng)物使甘油分布均勻，然后轉(zhuǎn)移至標(biāo)記好的、帶有螺口和空氣密封圈的保存管內(nèi)，在乙醇-干冰或液氮中凍結(jié)后轉(zhuǎn)至-70℃長期保存。復(fù)蘇菌種時，用滅菌的接種針刮拭凍