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DB61陜 西 省 地 方 標 準DB61/T1671—2023肉兔同期發情及人工授精技術規范TechnicalSpecificationforArtificialInseminationandEstrusSynchronizationinMeatRabbit20232023052520230625陜西省市場監督管理局發布DB61/T1671DB61/T1671—2023DB61/T1671DB61/T1671—2023目 次前 言 II范圍 1規范性引用文件 1術語和定義 1基本要求 2同期發情 2人工授精 3檔案管理 5附錄A（資料性）母兔同期發情記錄表 6附錄B（資料性）兔人工授精常用器械及藥品材料 7附錄C（資料性）公兔精液品質檢查記錄表 8附錄D（資料性）輸精記錄表 9II前??言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件由陜西省農業農村廳提出并歸口。本文件起草單位：商洛市畜牧產業發展中心、西北農林科技大學、洛南縣畜牧獸醫中心、陜西歐標新星兔業扶貧有限公司、陜西楊凌伊高樂兔業有限公司。本文件主要起草人：余超、孫秀柱、任戰軍、李象鼎、聶淼、宋新良、屈博、劉泉利。本文件由商洛市畜牧產業發展中心負責解釋。本文件首次發布。聯系信息如下：單位：商洛市畜牧產業發展中心電話址：陜西省商洛市商州區商中路22號郵編：726000IIII肉兔同期發情及人工授精技術規范范圍本文件規定了肉兔同期發情及人工授精技術基本要求、同期發情、人工授精和檔案管理的要求。本文件適用于人工養殖肉兔的同期發情處理和人工授精技術操作。規范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。NY/T3185-2018 家兔人工授精技術規程NY/T5133 無公害食品肉兔飼養管理準則術語和定義下列術語和定義適用于本文件。下列術語和定義適用于本文件。3.1肉兔meatrabbit在生產性能上用于生產兔肉的品種（系）。3.2同期發情 synchronizationofestrus利用激素或光照刺激等，人為控制并調整母兔發情進程，使其在一定時間內集中發情。3.3人工授精artificialinsemination采用輸精器械為發情母兔配種并使其受孕的過程。3.4精子密度spermconcentration單位體積精液中的精子數，單位為億個每毫升。[來源：NY/T3185-2018,3.4]3.5精子活力spermmotility在37℃環境下直線前進運動精子占總精子數的百分率。1[來源：NY/T3185-2018,3.5]3.6精子畸形率abnormalspermpercentage單位體積精液中形態異常精子占總精子數的百分率。基本要求母兔健康無病，體況適中，生長發育良好。初產母兔初配年齡：小型品種4.5月齡～5月齡，中型品種5月齡～6月齡，大型品種6月齡～7月齡，巨型品種8月齡～9月齡，初配體重一般達到該品種成年體重的75%。經產母兔一般不超過15胎次。公兔6月齡以上24月齡以下，符合種用品種特征，性欲旺盛，精液品質優良。飼養管理飼養管理飼養管理按NY/T5133的規定執行。人員身體健康、無人畜共患傳染病。經過專業技術培訓，取得家畜繁育相關資質。5同期發情光照誘導法兔舍具備避光性，保證通風良好。光源選擇220V的LED燈或燈帶。光照強度母兔籠內光照強度應大于60lux。光照時間配種前6d～7d至配種后7d，光照時間為16h/d。2激素注射法激素一般選用孕馬血清促性腺激素，宜現取現用。注射時間及注射量48h～60h30IU/只～50IU/只。使用其他激素按使用說明執行。發情鑒定7d～15d3d～5d。發情母兔通常表現精神興奮、食欲下降、撫摸溫順、外陰紅潤。發情鑒定以母兔外陰部為大紅色為發情標準。發情母兔做好標記，以備輸精。A。人工授精種公兔種公兔選擇應符合應符合4.2的規定。6.1.2種公兔調教應符合NY/T3185-2018中4.1的規定。器械與人員器械與藥品人工授精用的器械及藥品材料見附錄B。器械清洗消毒1min～120min。輸精套管采用臭氧熏蒸消毒。紗布、擦拭布和工作服用消毒藥液清洗或采用高壓蒸汽消毒。精液稀釋液應符合NY/T3185-2018中4.5.3的規定。保存溫度4℃，保存時間不宜超過24h。人員應符合4.4的規定。人工授精操作前應剪短指甲、磨平，著潔凈工作衣、帽，穿膠鞋，戴無毒塑料手套。6.3采精36.5精液稀釋6.5精液稀釋根據精液品質檢驗和評估結果確定稀釋倍數，精液的品質評估及稀釋標準應符合表2的規定。精液15min111～（1:2），30s后再加入余下的稀釋液。2兔精液的品質評估及稀釋標準4采精前準備將配制所需量的稀釋液，置于水浴鍋中預熱至35℃備用。調節好質檢用顯微鏡于200倍～400倍視野。假陰道組裝假陰道組裝按NY/T3185-2018中4.5.2的規定執行。采精方法采精方法按NY/T3185-2018中5.1的規定執行。采精頻率前或16:002次，青年公兔每周1次。6.4精液品質檢驗精液品質檢驗項目與方法應符合表1的規定。詳細記錄精液品質檢查的各項指標，見附錄C。表1公兔精液品質檢驗項目與方法編號項目指標方法1外觀乳白色或灰白色，均勻一致目測2氣味無味或略帶腥味，無異味鼻嗅3采精量/mL0.3～2.5刻度集精管讀取4精子活力/%≥60在200倍～400倍顯微鏡下觀察5精子密度/（108個/mL）≥1血細胞計數板計數或精液密度儀測定6精子畸形率/%≤20采用伊紅或姬姆薩染色后在200倍～400倍顯微鏡下觀察或者采用相差顯微鏡直接觀察評估結果160倍顯微鏡觀測精子活力精子密度最大稀釋倍數稀釋后優秀呈濃云霧狀，快速渦旋，無法看到單個精子，見似黑云狀。0.753～4億/mL15活力＞0.60良好呈云霧狀，快速渦旋，偶見單個精子閃現。0.70≈2億/mL10合格呈薄云狀，快速運動，可見全數單個精子閃現。≥0.60≈1億/mL5不合格不動、運動慢，精子間距大于一個精子頭長等情況的。＜0.60精液分裝將精液分裝至精液瓶或集精瓶中，標明公兔品種、耳號、精子活力、生產日期、保存有效期、場名等。精液保存和運輸精液保持和運輸按NY/T3185-2018中第8章的規定執行。輸精輸精時間24h內完成輸精。批次化生產中，一般同期發情處理后直接輸精。輸精槍校準與使用定期對輸精槍進行校準，每次輸精結束后應將輸精槍調整至最大刻度。輸精槍吸取精液前，用精液稀釋液沖洗兩遍并甩干，輸精前排盡槍內空氣，調整好輸精的刻度。11只母兔。輸精方法輸精方法按NY/T3185-2018中第9章的規定執行。做好輸精記錄，見附錄D。6.8.4輸精次數及輸精量6.8.4輸精次數及輸精量一般1次，若2次，間隔8h～10h。每次輸入0.5mL～1.0mL精液。7檔案管理各項檔案記錄應及時、準確，定期進行統計分析，至少保留2y。5A.2激素注射法同期發情記錄表激素注射法同期發情記錄表見表A.2激素注射法同期發情記錄表激素注射法同期發情記錄表見表A.2。表A.2激素注射法同期發情記錄表6附錄A（資料性）母兔同期發情記錄表A.1光照誘導法同期發情記錄表光照誘導法同期發情記錄表見表A.1。表A.1光照誘導法同期發情人工授精記錄表組別母兔數補光日期光照時間光照強度結束補光日期發情母兔數發情率技術員備注組別母兔數激素激素有效期注射日期注射時間注射量發情母兔數發情率技術員備注附錄B（資料性）兔人工授精常用器械及藥品材料兔人工授精常用器械及藥品材料見表B.1。表B.1兔人工授精常用器械及藥品材料序號名稱規格（技術參數）用途備注1干燥箱實驗室用干燥、預熱和消毒器皿2冰箱冷藏室0℃～4℃保持試劑和剩余稀釋液3恒溫水浴鍋雙孔或四孔等溫精液與稀釋液4假陰道外殼、內胎兔用組裝采精器5集精瓶兔用，帶刻度收集精液6顯微鏡40倍～1600倍觀測精子數、活力和畸形率7載玻片、蓋玻片精子活力測定8精子密度儀50mill/mL～1400mill/mL測定精子密度選用9血球計數板25×16測定精子密度選用10計數器0～999精子計數11恒溫保溫箱16℃～18℃保存精液12溫度計0℃～100℃測量精液、稀釋液等溫度13天平秤（0.01～100）g稱量藥品14一次性注射器5mL配制促排卵素等15量筒500ml量取液體16三角瓶1000mL配置稀釋液17燒杯500ml精液稀釋18玻璃棒稀釋液配制或精液稀釋19標簽紙精液、稀釋液標簽20連續輸精槍兔用輸精21輸精套管兔用輸精22連續注射器兔用注射促排卵素23紗布、擦拭布清洗擦拭24醫用手套、滅菌工作服技術人員防護25酒精75%消毒26促排卵素促黃體素釋放激素A3促進母兔排卵27激素孕馬血清激素催情28精液稀釋液（粉）兔用配制稀釋液29生理鹽水、葡萄糖配制稀釋液30蒸餾水配制稀釋液77DB61/T1671—2023附錄C（資料性）公兔精液品質檢查記錄表見表C.1。公兔精液品質檢查記錄表見表C.1。表B.1公兔精液品質檢查記錄表8采精日期采精時間品種公兔耳號采精員顏色氣味采精量mL精子活力%精液密度108個/mL精子畸形率%稀釋倍數稀釋后精子活力%是否合格質檢員備注注