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文檔簡介
實驗三
食品中微生物菌落總數的測定一、實驗目的學習并掌握標準平皿活菌計數(SPC)的基本原理和方法明確菌落總數測定對被檢樣品進行衛生學評價的意義二、實驗原理菌落總數:食品檢樣經過處理,在一定條件下(如培基基、培養溫度和培養時間等)培養后,所得每g(mL)檢樣中形成的微生物菌落總數。標準平皿活菌計數法(SPC法)是最常用的活菌計數法將微生物細胞充分稀釋到單個分散,把這些單個分散的細胞通過混菌法或涂布法使其均勻分布在平皿培養基上,培養后長出的菌落肉眼可見,每個菌落都由原液中單個細胞發育而來。反映食品被細菌污染的程度由于傾注平板法的局限,會有一部分細菌在該實驗條件下不生長,故計數結果要比實際值低。三、實驗器材(一)培養基平板計數瓊脂培養基(二)實驗材料市售飲料(三)其他
1、無菌培養皿7套
2、無菌吸管(1支10mL,5支1mL)
3、無菌生理鹽水(225mL三角瓶1個,9mL試管5支)(四)儀器
超凈工作臺四、實驗步驟1、樣品處理:以無菌操作,先用酒精棉球擦拭樣品表面后,用無菌剪刀將包裝剪破,量取檢樣25mL放入225mL滅菌生理鹽水當中,充分振蕩,混合均勻,制成10-1稀釋度樣品2、梯度稀釋法依次稀釋樣品到10-4菌落總數操作流程圖3、選擇10-2、10-3、10-4三個稀釋度的樣品均液,用無菌移液管分別吸取1mL到無菌平皿中,每個稀釋度做2個平皿;同時,吸取1mL無菌生理鹽水到1個平皿中作為空白對照4、熔化培養基5、及時將已冷卻到46℃的培養基傾入到平皿中
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