ICS 65.020.01CCSB39

DB61陜 西 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB61/T1674—2023大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程TechnicalRegulationsforSpawnProductionofStrophariarugosoannulata20232023052520230625陜西省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB61/T1674DB61/T1674—2023DB61/T1674DB61/T1674—2023目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語(yǔ)和定義 1生產(chǎn)技術(shù) 2質(zhì)量控制 5記錄及貯存 5附錄A（規(guī)范性）常用母種培養(yǎng)基 6附錄B（規(guī)范性）常用原種和栽培種培養(yǎng)基 7II前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》給出的規(guī)則起草。本文件由陜西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件主要起草人：雷萍、張文雋、李雅茹、王遷、王周平、張盈科、樊玉萍、張偉兵、簡(jiǎn)紅忠、李會(huì)民、馬婧嘉、趙勝利、雷麗、李雪君、戴文婧。本文件由陜西省微生物研究所負(fù)責(zé)解釋。本文件首次發(fā)布。聯(lián)系信息如下：?jiǎn)挝唬宏兾魇∥⑸镅芯克]編：710043電話I郵編：710043電話I大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了大球蓋菇菌種生產(chǎn)的術(shù)語(yǔ)和定義、生產(chǎn)技術(shù)、質(zhì)量控制、記錄及貯存。本文件適用于大球蓋菇各級(jí)菌種的生產(chǎn)。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB3095 環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB4806.7 GB5749 生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB15618 NY/TGB15618 NY/T528 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1284 食用菌菌種中雜菌及害蟲(chóng)的檢驗(yàn)NY/T1742 食用菌菌種通用技術(shù)要求3術(shù)語(yǔ)和定義GB/T12728-2006、NY/T528-2010界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1大球蓋菇Strophariarugosoannulata（Basidiomycotina）（Hymenomycetes）（Agaricales）菇科（Strophariaceae）、球蓋菇屬（Stropharia），別名皺環(huán)球蓋菇、皺球蓋菇、酒紅球蓋菇、裴氏球蓋菇、裴氏假黑傘。3.2菌種culture生長(zhǎng)在適宜基質(zhì)上具有結(jié)實(shí)性的菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽培種。[來(lái)源：GB/T12728-2006,2.5.6]13.3母種stockculture經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱一級(jí)種，試管種。[來(lái)源：GB/T12728-2006,2.5.7]3.4原種motherspawn由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱二級(jí)種。[來(lái)源：GB/T12728-2006,2.5.8]3.5栽培種spawn[來(lái)源：GB/T12728-2006,2.5.9]3.6種性charactersofvariety要求。[來(lái)源：NY/T528-2010,3.9要求。[來(lái)源：NY/T528-2010,3.9有修改]4生產(chǎn)技術(shù)生產(chǎn)場(chǎng)地NY/T528中規(guī)定。GB3095GB5749GB15618。培養(yǎng)基質(zhì)磷酸二氫鉀、硫酸鎂等化學(xué)試劑類應(yīng)使用化學(xué)純或以上級(jí)別的試劑；酵母粉和蛋白胨等生物制劑，麥粒、玉米、高粱、麩皮、米糠、木屑等天然材料要求新鮮、潔凈、干燥、無(wú)蟲(chóng)、無(wú)螨、無(wú)霉、無(wú)異味。菌種選擇母種每年在種源進(jìn)入擴(kuò)大生產(chǎn)程序前應(yīng)進(jìn)行菌種質(zhì)量和種性檢驗(yàn)，包括純度、活力、菌絲長(zhǎng)勢(shì)的一致性、菌絲生長(zhǎng)速度、菌落外觀等，并做出菇試驗(yàn)，性狀穩(wěn)定的方可投入生產(chǎn)使用。4.4移植擴(kuò)大8袋1（45瓶（袋。2工藝流程培養(yǎng)基備料→培養(yǎng)基配制→分裝→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)（檢查）→成品。母種生產(chǎn)使用18mm×180mm或20mm×200mm的玻璃試管。試管塞采用棉塞（梳棉或化纖棉）或硅膠塞。培養(yǎng)基按照附錄A規(guī)定配制。分裝配制好的培養(yǎng)基應(yīng)立即分裝，分裝量為試管長(zhǎng)度的1/4～1/5。試管口應(yīng)保持干凈，隨后封口，并用牛皮紙包扎。將分裝和包扎好的試管直立排放在高壓滅菌鍋內(nèi)，壓力達(dá)到0.105MPa～0.15MPa121℃～12630min。冷卻（斜面培養(yǎng)基擺放）壓力表指針自然降至“壓力表指針自然降至“0”時(shí)，打開(kāi)排氣閥，自然降溫20min～30min。取出試管擺成斜面，斜面長(zhǎng)度為試管長(zhǎng)度的2/3。滅菌效果檢查按2%隨機(jī)抽取母種培養(yǎng)基置于28℃恒溫培養(yǎng)48h，檢查有無(wú)細(xì)菌或霉菌感染。接種按照NY/T528的規(guī)定執(zhí)行。培養(yǎng)接種后將試管置于25℃±1℃培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室中遮光培養(yǎng)10d～15d，當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿試管斜面，即可用于生產(chǎn)原種。原種生產(chǎn)使用650mL～750mL、耐126℃高溫的無(wú)色或近無(wú)色玻璃菌種瓶，或850mL耐126℃高溫白色半透明符合GB4806.7衛(wèi)生規(guī)定的高溫塑料菌種瓶，或12cm×24cm耐126℃高溫符合GB4806.7衛(wèi)生規(guī)定的聚乙（丙）烯塑料袋。使用棉塞或滿足濾菌和透氣要求的無(wú)棉塑料蓋封口。培養(yǎng)基按照附錄B規(guī)定配制。分裝320min～30min2/3（袋口（袋滅菌將分裝好的原種瓶（袋）移入高壓鍋內(nèi)，排盡空氣，在壓力達(dá)到0.105MPa～0.15MPa121℃～1262h～2.5h。冷卻壓力表指針自然降至“0”時(shí)，取出菌種瓶（袋）移入冷卻室，瓶（袋）內(nèi)溫度冷卻至25℃以下準(zhǔn)備接種。接種按照NY/T528的規(guī)定執(zhí)行。培養(yǎng)將原種瓶（袋）置于25℃±1℃培養(yǎng)室內(nèi)通風(fēng)、遮光培養(yǎng)30d～40d，空氣相對(duì)濕度保持在栽培種生產(chǎn)容器按照4.7.1規(guī)定執(zhí)行。培養(yǎng)基栽培種生產(chǎn)容器按照4.7.1規(guī)定執(zhí)行。培養(yǎng)基按照附錄B規(guī)定配制。分裝按照4.7.3規(guī)定執(zhí)行。滅菌4.7.42.5h～3h。98℃～1008h～12h。冷卻4.7.57025℃以下準(zhǔn)備接種。接種按照NY/T52825袋～45袋栽培種。培養(yǎng)4置于25℃±135d45d55～65％，菌絲長(zhǎng)滿瓶（袋）時(shí)結(jié)束培養(yǎng)。質(zhì)量控制質(zhì)量要求各級(jí)菌種感官及微生物學(xué)要求應(yīng)符合NY/T1742中規(guī)定。菌種檢驗(yàn)各級(jí)菌種雜菌及害蟲(chóng)檢驗(yàn)按照NY/T1284的規(guī)定執(zhí)行。留樣3支～55袋（袋4℃～℃條件下貯存，貯存至使用者在正常生產(chǎn)條件下該批菌種出第一茬菇。記錄及貯存記錄生產(chǎn)各環(huán)節(jié)應(yīng)詳細(xì)記錄。6.2貯存6.2貯存完成培養(yǎng)的菌種應(yīng)及時(shí)登記入庫(kù)貯存。貯存場(chǎng)所應(yīng)干燥、低溫、無(wú)陽(yáng)光直射、無(wú)污染。母種貯存于4℃～61℃～4℃冰箱或冷庫(kù)貯存。5附錄A（規(guī)范性）常用母種培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL。加富馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯200用浸出汁葡萄糖2010.5520mg，水1000mL。MYA培養(yǎng)基（麥芽糖酵母瓊脂培養(yǎng)基）麥芽糖20g，酵母膏2g，大豆蛋白胨1g，瓊脂20g，水1000mL。DYA培養(yǎng)基（馬鈴薯葡萄糖酵母瓊脂培養(yǎng)基）馬鈴薯300g10g2g1，瓊脂20g100L。A.1.5A.1.5DMYA（燕麥粉麥芽糖酵母瓊脂培養(yǎng)基）80g10g2g20g1000mL。6附錄B（規(guī)范性）常用原種和栽培種培養(yǎng)基常用原種和栽培種培