項目三水產(chǎn)動物病害預(yù)防技術(shù)任務(wù)四免疫接種免疫接種

種類

水產(chǎn)疫苗使用方法操作注意事項

水產(chǎn)疫苗

傳統(tǒng)疫苗新型疫苗

傳統(tǒng)疫苗

滅活疫苗減毒活疫苗滅活疫苗優(yōu)點：安全性好、制備容易缺點：免疫效果不理想、免疫力持久性差

減毒活疫苗優(yōu)點：免疫效果好、免疫力較強且持久缺點：存在病原毒力返強的風險

亞單位疫苗

新型疫苗

DNA疫苗合成肽疫苗亞單位疫苗是將免疫有效成份從病原微生物中分離提取出來制成的疫苗。合成肽疫苗是將具有保護性免疫力的人工合成肽與適當載體結(jié)合后，加入佐劑制成的疫苗。DNA疫苗是將病原微生物中負責轉(zhuǎn)譯抗原蛋白的基因片段分離出來，在體外與載體連接形成重組DNA，然后轉(zhuǎn)入宿主細胞，在宿主細胞內(nèi)表達抗原蛋白，達到免疫效果。項目三水產(chǎn)動物病害預(yù)防技術(shù)任務(wù)四免疫接種我國獲國家新獸藥證書的水產(chǎn)疫苗有4種·草魚出血病細胞滅活疫苗，（有生產(chǎn)文號）·嗜水氣單胞菌敗血癥滅活疫苗，（有生產(chǎn)文號）·牙鲆溶藻弧菌、鰻弧菌、遲緩愛德華菌病多聯(lián)抗獨特型抗體疫苗，·草魚出血病疫苗。疫苗的使用草魚出血病滅活疫苗制備：毒株是草魚呼腸孤病毒ZV8909株，經(jīng)草魚腎臟細胞系(CIK)傳代、擴增后，收獲培養(yǎng)物，經(jīng)甲醛和熱滅活后制成。應(yīng)用：預(yù)防草魚出血病，免疫期12個月。用法與用量體長3cm左右草魚:尼龍袋充氧浸浴，疫苗濃度為0.5%，并在每升浸浴液中加入10mg莨菪，浸浴3h。體長10cm左右草魚:肌內(nèi)或腹腔注射，先將疫苗用生理鹽水稀釋10倍，每尾魚0.2-0.5ml。注意事項1、切忌凍結(jié)，凍結(jié)的疫苗嚴禁使用。2、使用前，應(yīng)先使疫苗恢復(fù)至室溫，并充分搖勻。注意事項3、開瓶后，限12h內(nèi)用完。4、如注射接種，應(yīng)對注射草魚作局部消毒處理。注意事項5、用過的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等應(yīng)收集，并進行消毒處理。6、對草魚出血病，本品只能預(yù)防，而不能用作治療。項目三水產(chǎn)動物病害預(yù)防技術(shù)任務(wù)四免疫接種草魚出血病活疫苗制備：本品系草魚呼腸孤病毒毒株GCHV-882/892(弱毒株)，接種于草魚吻端成纖維細胞系（PSF）培養(yǎng)擴增后，收獲培養(yǎng)物，加適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥而成。應(yīng)用：僅預(yù)防由草魚呼腸孤病毒引起的草魚出血病，不能用作治療。注射免疫健康草魚后，第5天開始產(chǎn)生免疫力，15天免疫保護率達90%以上，免疫期為15個月。用法與用量：預(yù)處理:本品為淡黃色海綿狀疏松團塊。根據(jù)瓶簽注明尾份數(shù)和每尾份注射液體量0.2mL，加0.65%滅菌生理鹽水將其稀釋成均勻一致的懸濁液待用(如瓶簽注明1000尾份，則用200ml將疫苗稀釋）。接種:肌內(nèi)或腹腔注射(注射針頭沿背鰭基部或腹鰭基部斜注入0.2厘米深)，·體重12-250g的草魚，一次量(預(yù)處理后的疫苗液)，每尾魚0.2mL;·體重250-750g的草魚，一次量(預(yù)處理后的疫苗液)，每尾魚0.3mL。注意事項1、避免陽光曝曬，以免失效，稀釋后的疫苗2h內(nèi)用完。2、疫苗注射后用含氯消毒劑全池潑灑一次，預(yù)防由于操作不慎造成魚體受傷而導(dǎo)致細菌感染。3、使用后疫苗瓶、器具和未用完的疫苗應(yīng)集中消毒處理。4、有效期:-10℃以下保存，18個月;4℃，6個月。5、對草魚出血病，本品只能預(yù)防，而不能用作治療。項目三水產(chǎn)動物病害預(yù)防技術(shù)任務(wù)四免疫接種嗜水氣單胞菌敗血癥滅活疫苗制備：本品系用致病性嗜水氣單胞菌J-1株接種于適宜的培養(yǎng)基培養(yǎng)，收獲培養(yǎng)物，經(jīng)甲醛溶液滅活后制成。預(yù)防由嗜水氣單胞菌引起的淡水魚細菌性敗血癥。免疫期為6個月。

用法與用量

高濃度短時間浸浴

·在100kg清潔水中，加入食鹽2kg，·加入增效劑1g和疫苗1000mL，混勻后浸浴魚種5-10min，可連續(xù)浸洗5-6批魚種。

高濃度短時間浸浴法適用于魚種放養(yǎng)前進行免疫預(yù)防

低濃度長時間浸浴法

·在100kg清潔水中，加入食鹽1kg，·加入增效劑1g和菌苗200ml，混勻后浸浴魚種1-3h。

低濃度長時間禁浴法適用于魚種調(diào)運放養(yǎng)途中進行免疫預(yù)防

注意事項1、切忌凍結(jié)，凍結(jié)的疫苗嚴禁使用。疫苗稀釋后，限當日用完。2、使用前，應(yīng)先使疫苗恢復(fù)至室溫，并充分搖勻。

注意事項3、接種時，應(yīng)作局部消毒處理。4、用過的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等應(yīng)集中進行消毒處理。

注意事項5、疫苗使用時水溫最好在10℃以上。6、對淡水魚細菌性敗血癥，本品只能預(yù)防，而不能用作治療。項目三水產(chǎn)動物病害預(yù)防技術(shù)任務(wù)四免疫接種

牙鲆溶藻弧菌、鰻弧菌、遲緩愛德華菌病多聯(lián)抗獨特型抗體疫苗制備分泌溶藻弧菌抗獨特型單克隆抗體的雜交瘤細胞1B2株和2F4株分泌鰻弧菌抗獨特型單克隆抗體的雜交瘤細胞1E10株和1D1株分泌遲緩愛德華菌抗獨特型單克隆抗體的雜交瘤細胞1E11株

分別接種適宜的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)入生物反應(yīng)器培養(yǎng)，收獲培養(yǎng)物，離心取上清，混合后凍干制成。應(yīng)用預(yù)防牙鲆的溶藻弧菌、鰻弧菌、遲緩愛德華菌病。免疫期為5個月。用法與用量注射型疫苗預(yù)處理每瓶疫苗用生理鹽水稀釋到25mL，將25mL的不完全佐劑與25mL疫苗混合攪勻;接種采用1mL注射器。接種體重5-7g、4-5月齡的幼魚，腹腔注射，一次量(預(yù)處理后的疫苗液)，每尾50μL(含疫苗量為3.75μL)。項目三水產(chǎn)動物病害預(yù)防技術(shù)任務(wù)四免疫接種

浸浴型疫苗

預(yù)處理用生理鹽水將3瓶疫苗溶解混合后，倒入裝有90L海水的容器內(nèi)充分攪勻。

接種體重5-7g、4-5月齡的幼魚，每1000尾魚，分2-3批放入預(yù)處理的疫苗液中浸浴，每批30min。每尾魚所獲得的疫苗量為11-25μg。

注意事項1、本品只能預(yù)防，而不能用作治療。2、接種、浸浴前應(yīng)停食至少24h。浸浴時應(yīng)向浸浴的容器內(nèi)充氣。

注意事項3、注射型疫苗使用時，應(yīng)將疫苗和等量的不完全佐劑充分混合。浸浴型疫苗倒入海水后也要充分攪拌，使疫苗均勻分布于海水中。

注意事項4、不完全佐劑應(yīng)在2-8℃儲藏。疫苗開封后，應(yīng)限當日用完。

注意事項5、注射接種時，帶上細線布手套抓魚，輕抓輕放，避免因操作對魚造成損傷。

注意事項6、接種疫苗時，應(yīng)使用1mL的一次性注射器。注射中應(yīng)注意避免針孔堵塞。

注意事項7、浸浴的海水溫度在15-20℃。項目三水產(chǎn)動物病害預(yù)防技術(shù)任務(wù)四免疫接種免疫接種

種類

水產(chǎn)疫苗使用方法操作注意事項

水產(chǎn)疫苗

傳統(tǒng)疫苗新型疫苗

傳統(tǒng)疫苗

滅活疫苗減毒活疫苗滅活疫苗優(yōu)點：安全性好、制備容易缺點：免疫效果不理想、免疫力持久性差

減毒活疫苗優(yōu)點：免疫效果好、免疫力較強且持久缺點：存在病原毒力返強的風險

亞單位疫苗

新型疫苗

DNA疫苗合成肽疫苗亞單位疫苗是將免疫有效成份從病原微生物中分離提取出來制成的疫苗。合成肽疫苗是將具有保護性免疫力的人工合成肽與適當載體結(jié)合后，加入佐劑制成的疫苗。DNA疫苗是將病原微生物中負責轉(zhuǎn)譯抗原蛋白的基因片段分離出來，在體外與載體連接形成重組DNA，然后轉(zhuǎn)入宿主細胞，在宿主細胞內(nèi)表達抗原蛋白，達到免疫效果。我國獲國家新獸藥證書的水產(chǎn)疫苗有4種·草魚出血病細胞滅活疫苗，（有生產(chǎn)文號）·嗜水氣單胞菌敗血癥滅活疫苗，（有生產(chǎn)文號）·牙鲆溶藻弧菌、鰻弧菌、遲緩愛德華菌病多聯(lián)抗獨特型抗體疫苗，·草魚出血病疫苗。疫苗的使用草魚出血病滅活疫苗制備：毒株是草魚呼腸孤病毒ZV8909株，經(jīng)草魚腎臟細胞系(CIK)傳代、擴增后，收獲培養(yǎng)物，經(jīng)甲醛和熱滅活后制成。應(yīng)用：預(yù)防草魚出血病，免疫期12個月。用法與用量體長3cm左右草魚:尼龍袋充氧浸浴，疫苗濃度為0.5%，并在每升浸浴液中加入10mg莨菪，浸浴3h。體長10cm左右草魚:肌內(nèi)或腹腔注射，先將疫苗用生理鹽水稀釋10倍，每尾魚0.2-0.5ml。注意事項1、切忌凍結(jié)，凍結(jié)的疫苗嚴禁使用。2、使用前，應(yīng)先使疫苗恢復(fù)至室溫，并充分搖勻。注意事項3、開瓶后，限12h內(nèi)用完。4、如注射接種，應(yīng)對注射草魚作局部消毒處理。注意事項5、用過的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等應(yīng)收集，并進行消毒處理。6、對草魚出血病，本品只能預(yù)防，而不能用作治療。草魚出血病活疫苗制備：本品系草魚呼腸孤病毒毒株GCHV-882/892(弱毒株)，接種于草魚吻端成纖維細胞系（PSF）培養(yǎng)擴增后，收獲培養(yǎng)物，加適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥而成。應(yīng)用：僅預(yù)防由草魚呼腸孤病毒引起的草魚出血病，不能用作治療。注射免疫健康草魚后，第5天開始產(chǎn)生免疫力，15天免疫保護率達90%以上，免疫期為15個月。用法與用量：預(yù)處理:本品為淡黃色海綿狀疏松團塊。根據(jù)瓶簽注明尾份數(shù)和每尾份注射液體量0.2mL，加0.65%滅菌生理鹽水將其稀釋成均勻一致的懸濁液待用(如瓶簽注明1000尾份，則用200ml將疫苗稀釋）。接種:肌內(nèi)或腹腔注射(注射針頭沿背鰭基部或腹鰭基部斜注入0.2厘米深)，·體重12-250g的草魚，一次量(預(yù)處理后的疫苗液)，每尾魚0.2mL;·體重250-750g的草魚，一次量(預(yù)處理后的疫苗液)，每尾魚0.3mL。注意事項1、避免陽光曝曬，以免失效，稀釋后的疫苗2h內(nèi)用完。2、疫苗注射后用含氯消毒劑全池潑灑一次，預(yù)防由于操作不慎造成魚體受傷而導(dǎo)致細菌感染。3、使用后疫苗瓶、器具和未用完的疫苗應(yīng)集中消毒處理。4、有效期:-10℃以下保存，18個月;4℃，6個月。5、對草魚出血病，本品只能預(yù)防，而不能用作治療。嗜水氣單胞菌敗血癥滅活疫苗制備：本品系用致病性嗜水氣單胞菌J-1株接種于適宜的培養(yǎng)基培養(yǎng)，收獲培養(yǎng)物，經(jīng)甲醛溶液滅活后制成。預(yù)防由嗜水氣單胞菌引起的淡水魚細菌性敗血癥。免疫期為6個月。

用法與用量

高濃度短時間浸浴

·在100kg清潔水中，加入食鹽2kg，·加入增效劑1g和疫苗1000mL，混勻后浸浴魚種5-10min，可連續(xù)浸洗5-6批魚種。

高濃度短時間浸浴法適用于魚種放養(yǎng)前進行免疫預(yù)防

低濃度長時間浸浴法

·在100kg清潔水中，加入食鹽1kg，·加入增效劑1g和菌苗200ml，混勻后浸浴魚種1-3h。

低濃度長時間禁浴法適用于魚種調(diào)運放養(yǎng)途中進行免疫預(yù)防

注意事項1、切忌凍結(jié)，凍結(jié)的疫苗嚴禁使用。疫苗稀釋后，限當日用完。2、使用前，應(yīng)先使疫苗恢復(fù)至室溫，并充分搖勻。

注意事項3、接種時，應(yīng)作局部消毒處理。4、用過的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等應(yīng)集中進行消毒處理。

注意事項5、疫苗使用時水溫最好在10℃以上。6、對淡水魚細菌性敗血癥，本品只能預(yù)防，而不能用作治療。

牙鲆溶藻弧菌、鰻弧菌、遲緩愛德華菌病多聯(lián)抗獨特型抗體疫苗制備分泌溶藻弧菌抗獨特型單克隆抗體的雜交瘤細胞1B2株和2F4株分泌鰻弧菌抗獨特型單克隆抗體的雜交瘤細胞1E10株和1D1株分泌遲緩愛德華菌抗獨特型單克隆抗體的雜交瘤細胞1E11株

分別接種適宜的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)入生物反應(yīng)器培養(yǎng)，收獲培養(yǎng)物，離心取上清，混合后凍干制成。應(yīng)用預(yù)防牙鲆的溶藻弧菌、鰻弧菌、遲緩愛德華菌病。免疫期為5個月。用法與用量注射型疫苗預(yù)處理每瓶疫苗用生理鹽水稀釋到25mL，將25mL的不完全佐劑與25mL疫苗混合攪勻;接種采用1mL注射器。接種體重5-7g、4-5月齡的幼魚，腹腔注射，一次量(預(yù)處理后的疫苗液)，每尾50μL(含疫苗量為3.75μL)。

浸浴型疫苗

預(yù)處理用生理鹽水將3瓶疫苗溶解混合后，倒入裝有90L海水的容器內(nèi)充分攪勻。

接種體重5-7g、4-5月齡的幼魚，每1000尾魚，分2-3批放入預(yù)處理的疫苗液中浸浴，每批30min。每尾魚所獲得的疫苗量為11-25μg。