冠心病中醫證候動物模型研究進展

冠狀動脈硬化是一種常見的臨床疾病。近年來，中醫在高血壓領域的動態模式建設和病理控制機制的研究方面取得了一些成果?，F概述于下。1冠狀動脈粥樣硬化的動物模型為1.1冠心病心陽虛證大鼠模型建立張明雪等予大鼠高脂飼料(2%膽固醇,10%豬油,0.2%甲基硫氧嘧啶,余為基礎飼料),連續6周,并每日冷藏于-2℃~-4℃冰柜中2h,連續6周,接著皮下多點注射腦垂體后葉素(pit)10U/kg,建立冠心病心陽虛證大鼠模型。結果造模各組大鼠血脂增高,光鏡下可見主動脈壁有附壁血栓等。該模型采用的造模方法一是給予高脂飲食,使痰濁內生;二是皮下注射pit使冠狀動脈痙攣、缺血,導致血運不暢,瘀血內生,同時,pit注射后大鼠表現的寒顫與寒邪傷陽證候類似;三是每日入冰柜冷藏2h,意在模擬寒邪內侵,痹阻氣血而致瘀滯內生,從而近似于冠心病陽虛為本、痰瘀為標的病機特點。1.2模型的制備章忱等采用給大鼠喂飼高脂飲食(4%膽固酵、10%豬油、0.4%丙基硫氧嘧啶、85.6%基礎飼料)喂養3周,然后用20%烏拉坦(1.2g/kg體重)腹腔注射麻醉動物,仰臥固定。分離左頸外靜脈,并注入垂體后葉素制備了胸痹痰濁凝滯證模型。采用以垂體后葉素合高分子右旋糖酐,造成胸痹心血瘀阻證模型。1.3造模前后耳緣靜脈放血張頁等給新西蘭大耳白兔高脂飼料60g(含1g膽固醇,15g蛋黃粉,5g豬油)加普飼喂養,并于造模第2周開始,每周2次耳緣靜脈放血15mL/只,至8周結束。認為給予兔高脂飼料喂養,以造成食餌性動脈粥樣硬化,同時根據中醫“氣血相依”、“氣為血帥”、“血為氣母”理論,于造模第2周放血,以達到放血耗氣目的,復制出理論上基本定性定位的氣虛痰濁冠心病模型。1.4灌服血府逐瘀湯合瓜白夏湯對大鼠心肌指標的影響朱麗紅等以高脂飼料(按膽固醇∶豬油∶丙硫氧嘧啶∶基礎飼料=4∶10∶0.2∶86的比例配制)和脂肪乳液(豬油20g溶化后,加膽固醇10g,膽酸鈉2g,甲基硫氧嘧啶1g攪勻,加入20mL吐溫-80,蒸餾水加至100mL充分混勻)10mL·kg-1·d-1,喂飼大鼠,連續7周,并于第35天施冠狀動脈結扎術。觀察造模前、后大鼠的心電圖改變,檢測血脂、心肌酶及血液流變學指標,動物處死后取心臟,稱質量計算心臟指數。結發現模型組心電圖顯示心肌嚴重缺血,膽固醇、甘油三酯、肌酸激酶、全血比黏度、紅細胞壓積及心臟指數均比正常組升高(P<0.001),而灌服血府逐瘀湯合瓜蔞薤白半夏湯的治療組對上述指標均有改善作用。提示采用高脂飲食加冠狀動脈結扎術方法復制的動物模型為冠心病痰瘀互結證動物模型。2ami對大鼠血液流變學指標的影響在冠心病及其中醫各證型實驗研究中,心肌酶、血液流變學、血脂、一氧化氮(NO)、內皮素(ET)、前列環素(PGI2)血漿6-酮-前列腺素(6-keto-PGFlα)、血栓素2(TXB2)、微循環、MDA、腫瘤壞死因子(TNF)、循環內皮細胞(CEC)等指標應用較多。多數實驗結果表明,AMI組TNF含量、血漿MDA、全血中CEC、心肌酶水平和血液流變學指標升高,血液黏滯度加大,均顯著高于空白對照組。血脂水平升高,NO降低、ET水平升高,血漿6-keto-PGFlα水平降低、TXB2水平升高、微循環障礙。中醫藥對上述指標有調整作用。2.1血壓及心功能指標檢測朱琳等采用大劑量異丙腎上腺素(ISOP,50mg/kg)皮下注射造成急性心肌缺血模型,并用欣怡膠囊預防。在ISOP造模前、造模后5min、30min、60min時,分別測定實驗各組心率(HR)、平均動脈壓(MAP)、左室內壓峰值(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)、±dp/dtmax(左室壓力上升/下降的最大變化速率)等血流動力學指標,作為心功能評價。結果表明與基礎值比較,空白對照組心臟舒縮功能減退,MAP、LVSP及±dp/dtmax下降,HR、LVEDP上升(P<0.01)。而欣怡膠囊不同劑量組各項指標均有一定改善,高劑量組更為顯著(P<0.05~0.01);提示欣怡膠囊具有改善急性心肌缺血大鼠血流動力學,保護心功能的作用。2.2圖結構影響圖于震等利用結扎冠狀動脈左前降支的方法造成大鼠急性心肌缺血—再灌注損傷,觀察九香氣霧劑(麝香、冰片為主)對急性心肌缺血—再灌注損傷大鼠心電圖的影響。結果表明九香氣霧劑能明顯降低大鼠因冠脈結扎所致急性心肌缺血期和再灌注期心電圖ST段抬高或壓低的幅度,與生理鹽水組比較均有統計學差異(P<0.05)。謝人明等以垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血為模型,以恬爾心為對照,觀察中藥益氣通脈口服液對心肌缺血的作用。結果表明垂體后葉素所致的大鼠急性心肌缺血心電圖ST段升高和T波升高;益氣通脈口服液具有抗急性心肌缺血作用,且在一定用量范圍內有劑量依賴性的對抗作用。2.3中藥止血湯對急性心肌缺血兔循環no和et的影響宮麗鴻采用結扎麻醉兔冠狀動脈左前降支中段的方法,造成實驗性急性心肌缺血的模型,探討中藥活血化瘀湯(人參、黃芪、當歸、川芎、桃仁、水蛭、生地、炙甘草)對急性心肌缺血兔循環NO和ET的濃度的影響。結果顯示,急性心肌缺血時ET明顯升高,NO明顯下降,中藥活血化瘀湯可以提高NO濃度和降低ET水平。2.4對心肌缺血的作用童延清等觀察了心血通注射液(大血藤、丹參、山楂3種中藥的水溶性提取物按照8:4:3的比例組成)對大鼠垂體后葉素實驗性心肌缺血的血清肌酸磷酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)。結果表明心血通注射液可以抑制CK和LDH的溢出,減小實驗性心肌缺血的范圍。孫曉紅等探討仙人活心膠囊(淫羊藿、人參、瓜蔞、三七、丹參等)對冠心病心肌缺血心肌損傷的保護作用及其作用機制。結果表明仙人活心膠囊能明顯降低血清LDH、α-羥基丁酸酶(α-HBD)、CK及CK-MB活性;能明顯改善垂體后葉素所致的大鼠心電圖ST-T段的偏移。譚達全等采用垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血模型,觀察血府逐瘀湯對大鼠血清乳酸脫氫(LDH)、肌酸激酶(CK)的影響。結果證明,血府逐瘀湯能明顯降低CK、LDH的含量,與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。2.5益心膠囊對3、6-keto-pgf1表達的影響周亞濱等觀察了益心膠囊(丹參、瓜蔞、乳香、五靈脂、延胡索、積殼、柴胡、白芍)對急性心肌缺血家兔模型血漿PGI2及心肌組織6-keto-PGF1α含量的影響。結果顯示,模型組6-keto-PGF1α水平明顯低于假手術組,兩組比較差異顯著(P<0.05);益心膠囊組6-keto-PGF1α水平均較模型組升高,差異顯著(P<0.05)。提示益心膠囊能夠顯著提高實驗性心肌缺血損傷家兔血漿及心肌組織PGI2含量,對血管內皮細胞功能具有保護作用。2.6克心絞痛滴鼻劑對大鼠心肌生化指標的影響司秋菊等采用腦垂體后葉素20U/kg腹腔注射誘發心肌缺血,并觀察了蜈蚣有效成分的作用。結果表明,模型組LDH、MDA明顯升高,SOD、NO水平顯著降低,蜈蚣治療組SOD、NO含量顯著提高,LDH、MDA明顯降低。且蜈蚣大劑量(5g/kg)較小劑量(2.5g/kg)治療組作用更加明顯。王華等采用垂體后葉素及冰水應激法致大鼠心肌缺血模型,并觀察克心痛滴鼻劑對模型大鼠心電圖、心肌酶、SOD、MDA的影響。結果表明克心痛滴鼻劑可改善心肌缺血大鼠心電圖表現,降低LDH、CK及MDA的含量,升高SOD含量。提示克心痛滴鼻劑可改善心肌供血,防治心肌損傷,提高抗氧化能力,從而起到防治冠心病心絞痛的作用。韓麗華等用高脂高膽固醇飼料致兔動脈粥樣硬化模型,觀察寬胸丹(瓜蔞、陳皮、枳實、川芎、水蛭、蒼術、甘草)的作用。結果表明,模型組較正常組SOD活性降低,LPO、oxLDL值增高,差異有顯著性(P<0.05);寬胸丹大、小劑量組均能明顯增加SOD活性、降低LPO、oxLDL值,與模型組比較差異有顯著性(P<0.05),且優于多烯康組(P<0.05)。2.7各組大鼠血漿通脈顆粒干預前后主動脈、冠狀動脈的變化肖純等采用高脂飲食(含5%豬油、0.5%膽固醇)復制成動脈粥樣硬化模型,觀察通脈顆粒(制首烏、紅參,麥冬、川芎、郁金、枳實等)治療前后血脂水平變化及主動脈和冠狀動脈病理形態改變。結果表明各模型組動物在實驗結束時血漿甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白均明顯上升,但通脈顆粒干預組上升幅度低于模型組,其中大劑量組上升幅度最小,與其他各組比較有顯著性差異(P<0.05);空白對照組主動脈、冠狀動脈正常,其余各組均有不同程度粥樣斑塊形成和冠狀動脈狹窄;主動脈斑塊厚度、斑塊覆蓋面積占整條主動脈面積的百分比以及狹窄冠狀動脈百分比,大小劑量組均比模型組小,而大劑量組最小(P<0.05)。提示通脈顆粒可顯著降低動脈粥樣硬化免模型的血脂水平、延緩動脈粥樣斑塊的發生發展。2.8對水肌缺血的作用張賽英等采用結扎冠狀動脈所致心肌缺血的大鼠模型,觀察心痛靈對實驗性心肌缺血的作用。結果表明心痛靈能降低血清酶活性,調節內皮素/降鈣素基因相關肽(ET/CGRP)之間的平衡。2.9治療組采用治療法,增加生物組織化學細胞增殖,提高表型轉變陳可冀等用球囊擴張損傷豬冠狀動脈左前降支中段的方法建立再狹窄模型,并在術前2天開始給芎芍膠囊(川芎總酚和赤芍總苷制成芎芍膠囊)小劑量(0.02g·kg-1·d-1)、大劑量組(0.04g·kg-1·d-1),持續至術后4周。結果表明,芎芍膠囊可通過抑制平滑肌細胞的增殖和表型轉變(影響平滑肌細胞增殖相關基因蛋白表達和細胞跨膜信號轉導),誘導新生內膜中增生的細胞發生凋亡,對動脈損傷后內膜中細胞增殖水平進行調控;減少球囊損傷后新生內膜中的膠原沉積,使其排列趨于規則;抑制動脈損傷術后病理性血管重塑,從而共同起到抑制豬冠狀動脈球囊損傷后內膜增厚、減少管腔喪失、預防最狹窄形成的作用。2.10總皂苷對isop所致大鼠心肌缺血病理損傷程度的作用機制探討張騰等應用異丙腎上腺素(ISOP)復制心肌缺血損傷的動物模型,采用光、電鏡技術和基因表達芯片技術驗證三七總皂苷的作用并探索其分子作用機制。結果發現三七總皂苷能夠顯著減輕ISOP所致的大鼠心肌缺血病理損傷程度;在基因表達譜的研究中共篩選出80條差異表達基因,其中模型/正常基因表達譜中篩選出58條差異表達基因,模型/治療基因表達譜中篩選出24條差異表達基因。認為三七總皂苷可能是通過多條途