補(bǔ)骨脂炮制品對環(huán)磷酰胺致小鼠白細(xì)胞減少癥的作用

補(bǔ)骨脂是豆科植物的psoriachelifollal。干燥成熟的果實被記錄在開寶草本植物，也被稱為破緣紙。古代文獻(xiàn)中記載的炮制方法有清炒、酒浸炒、鹽炙(制)、雷公炮炙等不同方法,現(xiàn)行藥典和地方性的炮制規(guī)范,均為“鹽炙法”。為了探討和評估古今主要炮制品的炮制方法及其制品的藥效強(qiáng)度,并為今后炮制工藝改進(jìn)提供基礎(chǔ),本實驗對不同產(chǎn)地的補(bǔ)骨脂炮制品在相同劑量條件下,以提升白細(xì)胞、雄性生殖器官重量為指標(biāo),進(jìn)行了平行比較。1實驗材料1.1藥材、藥品與成熟果實001-018號補(bǔ)骨脂藥材來自于全國18個不同的購買地,以上藥材由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室翟延軍教授鑒定均為豆科植物PsoraleacarylifollaL.的干燥成熟果實。1.2樣品制備1.2.1補(bǔ)骨脂鹽水制備18個不同來源的補(bǔ)骨脂生品均按下述方法進(jìn)行炮制:①雷公法:200g補(bǔ)骨脂加300mL黃酒浸泡3天,再用清水浸泡1天,濾過,蒸6h,晾干。②鹽蒸炙:100g補(bǔ)骨脂鹽水悶潤過夜(2gNaCl+100mLH2O),蒸2h,晾干。③清炒:100g補(bǔ)骨脂,炒。④鹽炙:100g補(bǔ)骨脂鹽水悶潤(2gNaCl+100mLH2O)4h,炒。⑤酒浸炒:200g補(bǔ)骨脂加300mL黃酒浸泡過夜,濾過,炒。1.2.2提取樣品、補(bǔ)重將18個不同來源的補(bǔ)骨脂生品及炮制品研磨,過40目篩。分別稱取1g,混勻,取混合樣品10g,加100mL水,回流提取2h后用水補(bǔ)重。得到濃度為0.1g(藥材)/mL的水提液備用。1.2.3提取樣品、補(bǔ)重將18個不同來源的補(bǔ)骨脂生品及炮制品研磨,過40目篩。分別稱取1g,混勻,取混合樣品12g,加160mL水,回流提取2h后用水補(bǔ)重。得到濃度為0.075g(藥材)/mL的水提液備用。1.3其他試劑和設(shè)備注射用環(huán)磷酰胺(山西泰盛制藥有限公司,批號:0501151),萬分之一電子分析天平(SHIMADZUAY220型)。1.4實驗動物昆明種小鼠,均購自遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心。2方法和結(jié)果2.1環(huán)磷酰胺解氨藥20g小鼠,每種炮制品組8只,雌雄各半。用濃度為0.1g/mL的水提液灌胃,每天2次,灌胃量0.02mL/g體重,共灌胃7天。灌胃第4天起除對照組外均注射環(huán)磷酰胺溶液(100mg/kg),每天1次,連續(xù)3天。給藥第7天稱重,眼眶取血,化驗各項相關(guān)指標(biāo)。同時處死后,取胸腺和脾稱濕重。2.2減少白色細(xì)胞疾病的模型給藥3天除空白對照組外均腹腔注射環(huán)磷酰胺溶液(0.01g/mL),每天1次,連續(xù)3天。2.3灌胃2次,灌胃2次20g小鼠,雄性,每種炮制品各8只,炮制品濃度0.075g/mL,每天灌胃2次,灌胃最0.02mL/g體重,共灌胃14天。處死后取睪丸、包皮腺、前列腺,稱濕重。2.4觀察指標(biāo)2.4.1出血給藥7天經(jīng)眼眶取血,測定白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白、血小板數(shù)(見表1)。2.4.2表2顯示了對體重脾指數(shù)和胸腺指數(shù)的影響2.4.3表3顯示了影響雄性器官的小鼠睪丸、包腺和前列腺的重量3結(jié)果3.1血紅蛋白含量小鼠注射環(huán)磷酰胺可使外周白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板數(shù)量明顯降低,與空白對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異。模型組血紅蛋白含量與空白對照組無明顯變化。補(bǔ)骨脂水提液可明顯提高白細(xì)胞和血小板數(shù),與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異。補(bǔ)骨脂水提液亦可明顯升高紅細(xì)胞數(shù),與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異。3.2影響雄性器官的損傷補(bǔ)骨脂可增加小鼠睪丸重量,但對前列腺、包皮腺影響不大。4對外周血紅細(xì)胞的影響環(huán)磷酰胺是臨床常用的治療腫瘤藥物,但其治療后引起一系列程度不同的副反應(yīng),造成白細(xì)胞減少癥。研究表明補(bǔ)骨脂可以提高模型小鼠的白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)及血小板數(shù)能對抗環(huán)磷酰胺引起的外周白細(xì)胞減少。說明補(bǔ)骨脂對白細(xì)胞減少癥小鼠有升白作用。雷公法制備的樣品升白作用最為明顯。鹽炙法制備的樣品升高血小板作用最顯著。資料記載補(bǔ)骨脂為補(bǔ)腎壯陽藥,但是經(jīng)過研究補(bǔ)骨脂僅增加小