醫藥行業NK市場分析一、NK細胞療法簡介NK細胞是人體固有免疫的重要組成部分自然殺傷細胞（Naturalkillercell，NK細胞）是淋巴細胞的一個亞群，是人體固有免疫的重要組成部分，也是抵御病毒感染和腫瘤細胞的第一道防線。NK細胞無須抗原的預先刺激與活化即能夠直接殺傷被病毒感染的自身細胞或者腫瘤細胞，因此稱為自然殺傷細胞。常用的人類NK細胞表型標志是CD56+CD16+CD19-CD3-，不表達T細胞和B細胞所特有的膜表面分子。NK細胞體積較大，胞漿中含有較為粗大的嗜苯胺細胞顆粒，故又稱大顆粒淋巴細胞。NK細胞來源于造血干細胞，分布廣泛。NK細胞約占外周血淋巴細胞的10%~15%，由造血干細胞分化而來，具有獨立于T細胞和B細胞之外的發育途徑。NK細胞廣泛分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴結等。其中，以外周血和脾、淋巴結中NK細胞活性最高。NK細胞可以分為兩個亞群。根據人類NK細胞表達CD56分子的表面密度，可以將NK細胞分為CD56bright和CD56dim兩個亞群。CD56dimNK細胞占外周血NK細胞的90%，為終末分化的NK細胞亞群，以殺傷功能為主，具有很強的細胞毒性。CD56brightNK細胞約占外周血NK細胞的10%，為中間期過渡分化的NK細胞亞群，以分泌細胞因子為主，細胞毒活性較低。NK細胞通過多種機制實現殺傷功能NK細胞主要通過以下機制實現其殺傷功能：1.分泌殺傷介質：穿孔素（Perforin）、顆粒酶（Granzyme）、顆粒溶素（Granulysin）等具有細胞毒性的溶解性顆粒，誘導靶細胞凋亡。2.釋放可溶性NK細胞毒因子（NKCF）：NKCF與靶細胞表面的NKCF受體結合后，可選擇性殺傷和裂解靶細胞。3.通過表達膜TNF家族分子的殺傷效應：NK細胞可以通過膜TNF家族分子（FASL，TRAIL、mTNF等）與靶細胞膜配體結合誘導靶細胞凋亡。4.介導ADCC效應：NK細胞表面表達FcγR受體，與靶細胞表面的IgG抗體結合，產生抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用（ADCC）。5.分泌細胞因子，發揮免疫調節功能：合成多種小分子蛋白質，比如淋巴因子等，與其他免疫細胞相互作用形成免疫應答。NK細胞的活化需要活化性和抑制性受體的平衡調控NK細胞表面表達大量的受體蛋白，根據其功能可分為兩個亞群：活化性受體和抑制性受體，兩者信號的平衡，決定NK細胞最終的功能。①健康狀態下（穩態模式），自身MHCI類分子抑制NK細胞活性，使機體免受NK細胞的攻擊。②病毒感染時NK細胞通過其表面受體直接識別感染細胞表達的病毒蛋白，從而誘導NK細胞活化（“非我”模式）。③當病毒感染或腫瘤發生時靶細胞表面自身MHCI類分子水平下調，導致抑制性信號減弱，從而誘導NK細胞活化（“丟失自我"模式）。④在應激狀態下（如感染、腫瘤、炎癥、損傷等），靶細胞上調活化性受體的配體分子的表達，活化性信號“戰勝"抑制性信號從而誘導NK細胞活化（“誘導自我”模式）。人類NK細胞抑制性受體主要有免疫球蛋白樣殺傷受體（KIR）和C型凝集素樣受體（KLR）。NK細胞活化性受體包括天然細胞毒受體（NCR）、KLR、KIR、細胞因子受體、膜整合素分子和其他活化性受體。循環的NK細胞通常處于休眠狀態。一旦被活化，它們會滲透到組織中，分泌穿孔素及腫瘤壞死因子，攻擊腫瘤細胞和病毒感染細胞。二、基于NK細胞的創新性臨床治療策略隨著近年來腫瘤免疫療法、細胞療法、基因編輯等新技術不斷獲得突破，基于NK細胞的抗腫瘤創新療法逐漸展現出了巨大臨床潛力，可分為5種策略：1)細胞因子療法：向患者輸注IL-2、IL-15等細胞因子以激活體內NK細胞活性。2)NK細胞過繼性療法（AdoptiveCellTransferTherapy，ACT）：向患者輸注健康的經活化的NK細胞，其中回輸的NK細胞在體外經過IL-2、IL-15等細胞因子的活化處理。3)基因工程NK細胞療法：向患者輸注基因改造的NK細胞，例如嵌合抗原受體修飾的NK細胞（CAR-NK）。4)單克隆抗體療法：根據抗體的靶向不同，可以分為兩類：a）采用靶向腫瘤相關抗原的治療性抗體，例如靶向表皮生長因子受體（EGFR）的西妥昔單抗（Cetuximab）、靶向CD20的利妥昔單抗（Rituximab），通過NK細胞誘導ADCC效應達到治療目的；b）采用直接靶向NK細胞抑制受體的抗體，例如靶向NKG2A的莫那利珠單抗（Monalizumab），增強NK細胞的殺傷力。5)NK細胞銜接器（Engager）：多特異性抗體同時靶向腫瘤細胞抗原以及NK細胞活化受體，將NK細胞和腫瘤細胞“拉攏”在一起，進而觸發NK細胞破壞腫瘤細胞和分泌細胞因子來殺傷腫瘤細胞。NK細胞免疫療法的作用和治療流程細胞免疫療法：采集人體自體或者異體免疫細胞，經過體外激活和培養，使其細胞活性化并增殖數百至數千倍，然后再通過點滴回輸到患者體內，從而直接殺傷腫瘤和突變細胞、或者激發增強機體免疫反應。傳統藥物研發，致力于研制可以規模化生產的產品以供所有適用的病人使用。而細胞治療是從一個或多個人體組織中提取有特定性能的細胞并加以適當數目擴增或功能改進，重新輸入患者體內，用以針對某一個特定的病人進行個性化治療的方案。NK細胞免疫療法的細胞來源PB-NK：從外周血單核細胞（PBMC）中擴增NK細胞。原代PB-NK可以通過采集抗凝人外周全血，再按標準流程離心分離后獲得。PBMC是NK細胞的主要來源，也是NK細胞過繼性療法最常使用的細胞源獲取法。然而PBMC中NK細胞的比例僅為10-15%。因此需要體外擴增，主要分為四種技術：無細胞純因子、飼養層細胞聯合細胞因子、膜顆粒以及基因修飾。NK細胞系：從細胞系中擴增NK細胞。有多種NK細胞系可選：NK-92,NKG,NKL,KHYG-1,YT,NKYS,SNK-6,和IMC-1。這些細胞系取自于白血病或淋巴瘤患者，同時它們便于獲取、培養和進行基因操。目前只有NK-92細胞系用于了NK細胞免疫治療的臨床研究，其余正在進行臨床前研究。NK-92細胞表達高水平的顆粒酶B和穿孔素等效應分子，并且表達相對大量的激活受體和較少的抑制受體，展現優異的細胞毒性。iPSC-NK：從誘導性多能干細胞（iPSC）或者胚胎干細胞（ESC）中擴增NK細胞。多能干細胞（PSC）衍生的NK細胞不僅具有原代NK細胞和NK細胞系的優點，而且規避了它們的問題。PB-NK和UCBNK細胞很容易獲得，但擴增的NK細胞的數量和純度受供體的影響很大，而且產物通常是異質的。NK細胞系的細胞是同質的，在治療患者時往往需要抑制此類細胞的增殖；然而，這種抑制也會影響抗腫瘤活性。iPSC或ESC衍生的NK細胞已受廣泛關注，因為它們可以提供均質的、具有高細胞毒性，允許現貨生產。UCB-NK：從臍帶血中擴增NK細胞。雖然相較于外周血來源的NK細胞（PB-NK），UCB-NK細胞表達了較低水平的激活性受體、粘附分子和IL-2Ra，以及較高水平的抑制性受體，但是UCB中的NK細胞占占高于外周血，約占15-20%。且在離體擴增的UCB-NK細胞的細胞毒性與PB-NK細胞相似。三、海外NK細胞療法產業的發展現狀NK細胞療法正成為資本中心近兩年來，NK細胞療法在全球都引發了不小關注，無論是大企業的交易合作還是新生企業的融資，其熱度都反映出這一賽道的前景。過去的25年里正不斷開展新的關于NK細胞治療方案的臨床試驗。截至2021年12月，全球共計開展了420項基于NK細胞療法的臨床試驗。尤其是自2016年起，NK細胞臨床試驗項目大幅度增加，平均每年達到47項。其中以I期、I/II期臨床為主，II/III期、III期臨床實驗很少；進入II期臨床試驗的產品即可屬于行業內相對領先。在近期的幾年內，預期會有幾款產品推進到關鍵性臨床階段并取得市場授權。NK細胞療法在日本應用較為廣泛——以瀨田診所為例東京“瀨田診所”成立于1999年，是日本第一家癌癥免疫細胞治療的專科醫療機構。1999~2021年的20多年里，累及治療患者超過2.3萬人，并且保持"零醫療事故”，在東京、橫濱、大阪、福岡都設有醫療機構，向全日本的55家醫療機構(包括綜合醫院)提供免疫細胞治療。NK細胞療法在日本應用較為廣泛——法律制度及監管體系2013年日本先后頒布了《促進再生醫療安全并迅速推進法》、《再生醫療安全確保法》和《醫藥品和醫療器械質量、有效性及安全性確保法》，大大縮短了再生醫療產品的審批時間，使日本成為最早將干細胞等再生醫療技術用于臨床的國家。同時，日本通過立法建立完備的再生醫療監管體系，根據風險高低對臨床再生醫療技術進行分類審批，率先將再生醫療產品單列為第四類醫療產品，獨立于藥品、醫療器械及化妝品之外，并根據其自身生物特性建立專門審批制度，兼顧科學性、安全性和臨床需要。四、國內NK細胞療法的代表企業濟民醫療濟民醫療主營業務目前分為三大板塊：藥品、醫院大健康、醫療器械。博鰲國際醫院是公司旗下一家集醫療、教學、科研、預防、保健、康養為一體的三級綜合性醫院，醫院位于海南博鰲樂城國際醫療旅游先行區。博鰲國際醫院主要業務：腫瘤精準治療：通過日本CanTect癌癥風險評估、ctDNA檢測技術、MicroRNA檢測技術，以功能醫學檢查和基因組學檢查為核心為患者提供超早期篩查，消除腫瘤致病因素。通過以PET-CT為核心的檢查手段，為患者提供腫瘤早期診斷，并予以NK-ODAtherapy早期治療，通過日本CanTect癌癥風險評估、ctDNA檢測技術等評估治療效果，及時調整治療方案。CTC循環腫瘤細胞檢測通過血液檢測鑒定異常細胞是否存在癌細胞特有的蛋白（腫瘤標志物）、染色體異倍體等異常情況，從而有效判斷身體狀況，早期發現腫瘤蹤影。NK+anti-PD1/CTLA4防復發治療。充分利用先行區特許藥械政策，引進靶向藥、特效藥結合免疫治療，為腫瘤患者提供綜合診治。國健呈諾公司以CD244骨架為基礎，繼續開發篩選出了含有NKG2D、CD226、4-1BB、CD28等不同排列組合的多種共刺激結構CAR骨架。2021年11月，獲得NMPA對“晚期上皮性卵巢癌治療的靶向間皮素（MSLN）CAR-NK注射液”的臨床研究許可。2022年4月，獲得CDE對治療急性缺血性腦卒中的iPSC來源細胞藥物產品ALF201注射液的臨床試驗默示許可（CXSL2200090）。在ClinicalT上注冊的臨床項目還有其他五項，分別是PMSA、CD19、CD22、CD19/22嵌合抗原受體NK細胞藥物。重慶精準生物精準生物新的現貨性CAR-NK平臺中，用獨特的NK.affi-LVvector可高效的將外源基因導入NK細胞，并保證外源基因高效穩定表達，用NK.affi-LV（MOI=3）轉導時，CAR的陽性率可以達到80%以上，并在體外和體內保持穩定。CAR-NK陽性率穩定在50%以上。此外NK.affi-LVvector的外源基因裝載量可達到4,300bp以上，已成功用于3-4個外源基因的同時導入，擁有更強復雜場景的應用能力。臨床前研究顯示，該CAR結構修飾的NK細胞在體內藥效方面顯著優于經典的CD137+CD3ζ的胞內信號組合；在體內存續方面，在無需額外外源因子輔助的條件下，相比于經典結構的CAR-NK，新的CAR-NK體內擴增功能提升了兩倍以上。優凱瑞優凱瑞成立于2019年，位于杭州。是由瑞典、新加坡等海外科學家為核心團隊創立的高科技醫藥公司。優凱瑞致力于靶向性抗腫瘤的細胞藥物的研發、轉化及應用，以原創性和持續性的研發創新為核心驅動力，專注于建立新一代非病毒方法的免疫治療平臺，高效地產業化尖端抗腫瘤細胞藥。2021年11月宣布，在河北燕達陸道培醫院開展的CAR-NK臨床研究項目取得重要突破。首例復發難治性急性髓系白血病（r/rAML）患者在輸注CAR-NK細胞30天后骨髓形態報告顯示：患者骨穿形態未見異常，流式殘留為0%，達到完全緩解。患者未出現細胞因子釋放綜合征（CRS）、CAR相關腦病、移植物抗宿主病(GvHD)等不良反應；僅出現輕微