臨床PCR試劑盒的選用和質檢PCR或RT-PCR試劑盒的組成核酸提取試劑核酸擴增或逆轉錄-核酸擴增試劑產物檢測試劑（有些使用全自動分析儀的PCR方法因其核酸擴增和檢測同時完成，故無專門的產物檢測試劑）影響PCR試劑盒質量的因素內在因素:原材料、核酸提取方法、方法學設計影響PCR試劑盒質量的因素：擴增所需的原材料寡核苷酸引物和探針緩沖液和dNTP聚合酶、逆轉錄酶等PCR反應混合物寡核苷酸引物和探針其對試劑盒質量的影響首先是純度。純度的判斷可根據260/280吸光度比值來判斷，如＜2.0,則需重新純化。另一種方法是將其在聚丙烯酰胺凝膠上電泳，如出現一條以上的帶或遷移位置錯誤，則需重新純化。是否有污染。結合特異性（濃度）dNTP和緩沖液dNTP（包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP或dUTP）的濃度緩沖液：在儲存和擴增循環中穩定、作為聚合酶活性所必須的Mg++（或用于rTth的Mn++）的濃度以及pH等逆轉錄酶、DNA聚合酶酶的濃度酶的活性核酸擴增方法PCRRT－PCR轉錄依賴的擴增（TMA）連接酶鏈反應（LCR）鏈替代擴增（SDA）等影響PCR試劑盒質量的因素：核酸提取核酸提取的有效性核酸提取的簡便性影響PCR試劑盒質量的因素：產物檢測雜交固相特異探針及其標記物影響PCR試劑盒質量的因素內在因素:原材料、核酸提取方法、方法學設計外在因素：試劑盒的運輸和貯存外在因素：試劑盒的運輸和貯存試劑盒的運輸和貯存PCR試劑盒的有效期一般為6個月，這是指在適當的貯存溫度下。核酸擴增部分的試劑一般要貯存于-20℃下；產物檢測部分試劑則貯存于2?8℃。試劑盒從廠家到用戶手中，均要經歷運輸及運輸中的貯存，任一環節的不當，均會影響試劑盒的臨床使用質量。PCR試劑盒的分類定性測定：PCR-ELISA、PCR-膜上雜交（雜交梳）、熒光PCR（分子信標和TaqMan等）定量測定：PCR-ELISA、TaqMan和Amplisensor熒光定量、AmplicorPCR-ELISA定量等。PCR試劑盒的選用原則參考試劑生產廠家的信息廣告參考同行對有關試劑盒的使用效果參考有關機構的綜合評價根據使用目的根據所在實驗室的技術特點根據所在醫院患者的承受能力PCR試劑盒的質檢外包裝：廠家名稱、檢測目的、批準文號、批號和有效期等。內包裝：試劑瓶是否漏液、真空包裝是否破損以、試劑是否齊全以及是否有使用說明書等。PCR試劑盒的質檢采用血清（樣本）盤（Panel）質檢：PCR試劑血清（樣本）盤由一定數量的原血清陰、陽性樣本、2?3份純化核酸（DNA或RNA或cDNA）樣本以及3?5份系列稀釋陽性樣本所組成。樣本總數可定在20份左右。原血清樣本用于判斷試劑盒對特定病原體核酸檢出的特異性、靈敏度和符合率；純化核酸樣本用于判斷DNA擴增或逆轉錄及DNA擴增的有效性；系列稀釋陽性樣本用于判斷試劑的測定下限。試劑特異性、靈敏度和符合率計算公式試劑特異性、靈敏度和符合率計算公式靈敏度(