血清糖鏈抗原153(CA153)定量檢測標準操作規(guī)程××醫(yī)院檢驗科臨床免疫室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號:XXX生效日期：共頁第頁1.目的規(guī)范操作流程，保證血清糖鏈抗原153(CA153)定量檢測的準確性和可靠性。2.原理采用雙抗體夾心法原理，整個過程18min完成?？寺A153特異抗體混勻，形成夾心復(fù)合物。2．2·第2步孵育：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復(fù)合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學發(fā)光，通過光電倍增管進行測定。檢測結(jié)果由機器自動從標準曲線上查出。此曲線由儀器通過2點定標校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標準曲線而得。3.標本要求3．1．1血清標本采集用標準樣本試管或含分離膠的試管。標本在2~8℃可穩(wěn)定7天，－20℃可穩(wěn)定3個月。含沉淀的標本使用前需離心。心 (大約15000g，10min或2000~3500r／min，5~10min)澄清，方可進行檢測。3．3·患者準備的一般要求：患者在采血前24h內(nèi)應(yīng)避免運動和飲酒，不宜改變飲食習慣和睡眠習慣。一般主張在禁食12h后空腹取血，門診患者提倡靜坐15min后再采血。4.試劑與儀器4．2·試劑使用：試劑盒中的試劑是一個整體，打開后可立即使用，不能被分開。正確操作需要的所有信息可通過相應(yīng)的試劑條碼讀取。素結(jié)合能力：470ng生物素／mg粒子。含防腐劑。shSysCleanProCellM緩沖液、ProbeWashM清洗液、廢物袋。4．5．1存放在2~8℃。為了確保使用前自動混勻期間提供足夠量的磁性微粒，試劑盒5.操作步驟5．1．1在使用前分析儀自動使微粒處于懸浮狀態(tài)。通過各試劑條形碼可讀取其詳細實驗參數(shù)。在少數(shù)情況下，分析儀無法自動讀取信息時，請輸入標簽上的15位數(shù)字序列。儀將自動調(diào)節(jié)反應(yīng)溫度及各試劑瓶瓶蓋的開關(guān)狀態(tài)。6.校準153檢測又可溯源至酶免CA153檢測法和FujirebioDiagnostics的CA153RIA。每批CA153Ⅱ試劑有一條形碼標簽，含有該批試劑定標所需的特殊信息。應(yīng)用CA153ⅡCalSet定標液定標校正母定標曲線。6．2·定標頻率：須使用新鮮試劑對每個試劑批進行一次定標(即試劑盒上機登入后的24h內(nèi))。下列情況建議重新定標：使用同一批試劑的1個月后(28天)；7天后(在分析儀上使用同一試劑盒)；根據(jù)需要：質(zhì)控結(jié)果超出范圍時，比如質(zhì)控結(jié)果在規(guī)定的限值外；若兩水平質(zhì)控均在控，則定標曲線可延至試劑及質(zhì)控批號更換。6．3·定標驗證：分析儀的軟件會自動檢查定標曲線的有效性及任何偏離。7.質(zhì)控該測試適用的質(zhì)控液PreciControlTumorMarker1和2；也可以用其他合適的質(zhì)控液，如××LyphochekTumorMarkerPlusControl。各濃度區(qū)域的質(zhì)控至少每24h、每一個新批號試劑盒或每一次定標后測定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適用于各實驗室的具體要求。檢測值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如果出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應(yīng)采取糾正措施。8.結(jié)果判斷8．1·結(jié)果計算：對每一個標本，免疫分析儀會自動計算CA153含量，單位是U／ml8．2·檢測范圍：1．00~300U／ml(由master定標曲線的最低檢測限與最高檢測限決定)。如果測定值低于最低檢測限，報告為＜1．00U／ml。如果測定值高于檢測范圍，報告為＞300U／ml(結(jié)果達到3000U／ml樣本應(yīng)作10倍稀釋)。的標本可用通用稀釋液手工進行1∶10稀釋。稀釋后的標本CA153Ⅱ含量必須高于30U／ml。如用手工稀釋結(jié)果應(yīng)乘上稀釋倍數(shù)。如果是機器自動稀釋，機器會自動計算結(jié)果。8．4·檢測結(jié)果的不確定度：具體參見AFP標準操作規(guī)程的相關(guān)內(nèi)容。9.生物參考區(qū)間本實驗室血清CA153生物參考區(qū)間≤25U／ml。10.性能參數(shù) 或＜100ng／ml)的影響。對于接受高劑量生物素治療的患者(＞5mg／d)，必須在末次生物素治療8h后采集樣本。檢測結(jié)果不受類風濕因子影響(RF不超過1500IU／ml)。通常，當CA153濃度低于20000U／ml時不會出現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)。然而，由于CA153的異源性質(zhì)，因此低于該值的高劑量鉤狀效應(yīng)并能完全避免。如果出現(xiàn)不合理的過低結(jié)果，就應(yīng)當以1∶10稀釋樣本后重新檢測。針對28種常用藥物進行了體外檢測。未發(fā)現(xiàn)有藥物影響檢測結(jié)果。少數(shù)病例中極高濃度的分析物特異性抗體、鏈霉親和素或釕抗體會影響檢測結(jié)果。通過適宜性的實驗設(shè)計可將影響因素降到最低。11.臨床意義體外免疫