2023年淺談CNAS—CL09：《實驗室認可準則在微生物領域的應用說明》摘要：

微生物領域的相關檢測在纖檢系統內尚處于起步階段。通過對CNAS-CL09：2023《實驗室認可準則在微生物領域的應用說明》部分條款的學習與探討，提高纖檢系統對微生物實驗室的質控能力，為順利通過微生物實驗室評審及擴項奠定基礎。

關鍵詞：CL09；實驗室認可；微生物

隨著抗菌類纖維紡織品日益受到市場的關注與青睞，對于此類產品的檢測能力便顯得尤為重要。與食藥系統相比，纖檢系統在微生物檢測領域尚處于起步階段，亟待加強。CNAS-CL09：2023《實驗室認可準則在微生物領域的應用說明》明確了實驗室在微生物檢測領域的能力認可準則，對于纖檢系統加強微生物實驗室建設、順利通過微生物實驗室評審及擴項具有現實指導意義。

1修訂背景

近年來，由致病微生物導致的安全事故頻發。相關法規對于實驗室生物安全的要求不斷提高，而對于技術人員專業背景（微生物相關）的要求不夠，導致越來越多的微生物實驗室暴露出各種問題，實際工作中矛盾日益突出。為此，國家認可委在廣泛征求意見、充分討論的基礎上，對CNAS-CL09：2023進行了修訂，既要保證微生物檢驗的準確性，又要符合中國實驗室管理現狀，最終出臺了CNAS-CL09：2023。

CNAS-CL09：2023于2023年5月1日實施。對于初次申請和增加微生物領域的實驗室，自2023年1月1日起按CNAS-CL09：2023執行；對于2023年之前提出申請的，現場評審可按CNAS-CL09：2023執行。2023年5月1日至2023年12月31日為過渡期，新舊文件均可使用。自2023年1月1日起，均按CNAS-CL09：2023執行。

2管理要求

2.1組織

生物安全實驗室[1]，是指通過規范實驗室設計建造、試驗設備配置、個人防護裝備的使用（硬件）、嚴格遵從標準化的操作程序和管理規程，確保操作生物危險因子的工作人員不受試驗對象傷害，確保周圍環境不受其污染，確保試驗因子保持原有本性所采取綜合措施的實驗室。

根據對所操作生物因子采取的防護措施，將實驗室生物安全防護水平分為一到四級。BSL（bio-safetylevel）表示僅從事體外操作的實驗室的相應生物安全防護水平[2]。纖檢系統的生物安全實驗室通常為二級（BSL-2），適合于從未知病原的載體上取樣的檢測和研究，可能含有高致病微生物。它是在BSL-1實驗室的基礎上，實驗區與辦公區的界限更加明顯，實驗室內清潔區和污染區的區分更加明確，按國家標準或地方法規建立實驗室準入門檻，制定應急救治預案，裝備應急救治設施。BSL-2實驗室需配置防護設備和器械，要求就近有高壓消毒鍋、可靠的電力供應和應急照明，要有鎖和自動閉門器、可視窗，最好使用Ⅱ級生物安全柜。

實驗室技術管理者中應至少包括一名具有微生物專業或與微生物密切相關的本科以上學歷和三年以上微生物檢測的工作經歷成員?！拔⑸锩芮邢嚓P專業”通常理解為上過的課程中包含微生物課，如醫學、生物技術、動物學、基因工程、遺傳學等，并能提供相關課程證明材料。該管理者應具有較高的微生物檢測能力和一線工作經歷，從而能夠指導或培訓檢驗人員常規微生物試驗。

2.2管理體系

實驗室應制定生物安全規章制度以確保生物安全，包括以下幾個方面：準入制度；設施設備檢測、維護；人員健康監護（定期體檢）；生物安全自查制度；實驗室資料檔案管理制度；生物安全管理和實驗室人員培訓制度；意外事件處理及報告制度；實驗室安全保衛制度等。

實驗室應設置生物安全責任人和生物安全監督員。生物安全責任人的作用和職責包括以下幾個方面：全面負責主管科室的實驗室生物安全管理工作；負責具體組織落實與貫徹執行相關法律、法規、工作方案、應急預案；負責制定與組織實施本科室實驗室生物安全管理實施細則及相關操作指導書；負責組織本室完成各項生物風險評估并形成相關報告；負責本科室實驗室生物安全設施、試驗環境及個人防護用品的配備與維護；負責組織本科室實驗室生物安全業務技術、專業安全防范知識技能及安全突發事件應急處理措施的培訓與考核；負責本室菌種的安全管理；負責組織微生物相關實驗室有毒有害廢棄物的無害化處理；負責本室各項病原微生物生物安全風險評估并形成評估報告等。

2.3文件控制

對于實驗室現場文件的控制程序，應遵循既要拿取方便又要防止污染的原則。

2.4檢測和校準的分包

實驗室可把一個檢測項目中的部分內容進行分包，但如該分包內容是該項目不可分割的部分，即實驗室不具備該檢測項目的完整技術能力，則該項目不予認可。例如沙門氏菌的檢測、多價鞭毛試驗和多價菌體試驗即為不可分割部分，血清學分型則可分包。

2.5服務和供應品的采購

對于實驗室自制的培養基，例如生理鹽水等，必須有配制記錄，內容包括：配制日期、培養基名稱、成分、制造商、批號、重量、分裝容量規格、數量、滅菌溫度、滅菌時間、pH值、使用人等。

對于微生物檢測來說，每一種培養基都是關鍵培養基，都要進行技術性驗收并記錄以下內容：產品名稱、生產廠商、批號、接收日期、接收文件、產品外觀感官檢查、數量、啟封日期、驗收方法等。

3技術要求

3.1人員

實驗室在新人上崗前應安排全面的體檢，包括色盲色弱。上崗證應具體到項目，并有相關證明材料。新上崗人員及間隔一段時間重新上崗（6個月以上）的人員，可根據相關標準及實驗室條件的變化，對其重新評估。

從教育背景、專業技能、工作經歷、現任崗位授權等方面對人員技術能力進行確認，并具有技術檔案、資格確認、上崗考核和授權、培訓記錄等確認證據。

對于特殊崗位的授權，如感官評定、特種鍋爐容器、特殊設備、生物安全培訓等，需確認檢驗人員相應的資格和技術能力。例如，使用的高壓蒸汽滅菌器，如其壓力容積之積不小于2.5MPa·L，則操作人員需持有特種作業人員證書。

關鍵檢測人員不僅是指直接技術檢測人員，還包括技術負責人、授權簽字人、報告校準人員等。授權簽字人應具有相關專業本科以上學歷，并具有3年以上相關工作經歷，或具有相關專業專科以上學歷和至少10年的微生物相關領域檢測工作經歷。

實驗室應通過培訓班、專業實驗室進修、學術交流等方式，制定人員培訓教育計劃，并通過培訓鑒定、現場考核、講座等形式對其進行評價。

3.2設施和環境條件

實驗室的布局和設施應以能獲得可靠的檢驗結果為重要依據。對于需要在潔凈條件下工作的區域，應有效地監控和記錄環境條件。例如，無菌室內光照應分布均勻，工作臺面的光照度不應低于540lx；紫外燈的數量由房間大小決定，用紫外燈照度儀定期測試紫外燈的強度，要求在距離標的物1m處，照射強度應不低于90lx。

不同區域的有效隔離是為防止潛在的交叉污染，在同一場地空間分開一定的距離或不封閉的間隔，甚至是獨立的空間。對于不同的功能區和試驗用品，要有明顯、清楚的標識加以區分，例如質量、安全、限時、干燥、滅菌等。

3.3設備

對于微生物常用設備，要有校準和頻率的要求并記錄，例如培養箱、水浴振蕩器等，要定期監測溫度；高壓蒸汽滅菌鍋要監測滅菌效果；生物安全柜、潔凈工作臺等，要定期進行微生物和氣流的監測。

3.4測量溯源性

實驗室必須保存有滿足試驗需要的菌株。對于菌種的申購、保管、領用、使用、傳代、存儲等方面，應有文件化的程序并記錄相應內容。

接種傳代時須記錄好菌種名稱、接種日期、接種數量、支取數量、傳代序數、廢棄處理等信息。菌株在傳代后，要做確認試驗，記錄其存活性、純度、生理生化鑒定（革蘭氏染色、糖類發酵試驗、乙酰甲基甲醇試驗、甲基紅試驗、吲哚試驗等）[3]。

4結語

微生物領域的檢測在纖檢系統起步較晚，還有許多不足之處亟待完善。CNAS-CL09：2023對于微生物實驗室評審和建設都具有切實的指導意義，值得我們認真研讀。由于個人能力所限，對其許多條款理解不到位，希望能夠拋磚引玉，加強交流，共同提高纖檢系統微生物檢測能力。

參考文獻：

[1]CNAS-CL09：2023檢