臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第1頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月第2頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月第十九章

臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)

返回總目錄第3頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月本章內(nèi)容第一節(jié)概述1第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)2第4頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握臨床常見標(biāo)本的采集、送檢和處理的原則臨床常見標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)程序、檢驗(yàn)方法及結(jié)果報(bào)告熟悉TAT、危急值在臨床實(shí)際工作中的應(yīng)用臨床標(biāo)本常見病原菌的檢驗(yàn)方法及鑒定要點(diǎn)了解臨床標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的臨床意義臨床標(biāo)本中正常菌群的分布及常見致病菌本章重點(diǎn)：★病毒標(biāo)本采集和運(yùn)送原則★病毒學(xué)診斷及鑒定常用方法★病毒培養(yǎng)的基本操作學(xué)習(xí)目標(biāo)及重點(diǎn)

第5頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)概述一、臨床標(biāo)本的采集、送檢與處理原則（一）臨床標(biāo)本的采集1.核對檢驗(yàn)單信息

?信息完整、無誤2.選擇適當(dāng)?shù)娜萜鞯?頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月3.早期采集

?使用抗菌藥物前

4.無菌采集

?嚴(yán)格無菌操作技術(shù)第一節(jié)概述第7頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月

5.選擇采集部位和方法第一節(jié)概述第8頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月

6.充足的標(biāo)本量

?足量、適量

7.標(biāo)記標(biāo)本

8.歸放標(biāo)本

?符合生物安全防護(hù)要求第一節(jié)概述第9頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）臨床標(biāo)本的保存和送檢

?立即送檢，否則應(yīng)放入運(yùn)送培養(yǎng)基或保存液中運(yùn)送

1.普通細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本

?室溫：1小時(shí)，4℃：24小時(shí)，運(yùn)送培養(yǎng)基：48小時(shí)

2.苛養(yǎng)菌培養(yǎng)標(biāo)本

?保溫、保濕送檢，“床頭接種”第一節(jié)概述第10頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月3.厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本?防干燥，避免接觸空氣。4.安全運(yùn)送?注意安全防護(hù)

?高致病性傳染病標(biāo)本，按生物安全有關(guān)規(guī)定包裝，由專人運(yùn)送第一節(jié)概述第11頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）臨床標(biāo)本的處理

?核對標(biāo)本與申請單信息常見標(biāo)本處理方式

組織：無菌粉碎研磨后，加生理鹽水制成懸液，接種體液：3000r/mim離心10分鐘后，接種。棉拭子：置運(yùn)送培養(yǎng)基送檢，避免污染。糞便：挑取帶膿、血及黏液部分接種。痰液：檢查標(biāo)本是否有血液、膿液、顆粒、干酪樣物等血液：采集后立即增菌培養(yǎng)厭氧菌培養(yǎng)：檢查標(biāo)本、運(yùn)送方式是否適合厭氧培養(yǎng)，立即接種第一節(jié)概述第12頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月二、培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法的選擇

1.培養(yǎng)基選擇恰當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基或組合第一節(jié)概述第13頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月電熱恒溫培養(yǎng)箱二氧化碳培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)箱2.常用培養(yǎng)方法

?需氧培養(yǎng)、二氧化碳培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)第一節(jié)概述第14頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月三、細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的基本流程（一）細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的基本程序

第一節(jié)概述第15頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)鑒定步驟1.標(biāo)本性狀觀察

?顏色、是否粘稠、是否渾濁、是否膿性、是否帶血等性狀第一節(jié)概述第16頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月革蘭染色抗酸染色墨汁染色2.涂片檢查

?不染色標(biāo)本檢查：檢查細(xì)菌的動(dòng)力

?染色標(biāo)本檢查第一節(jié)概述第17頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月

3.細(xì)菌的分離培養(yǎng)

?目的：得到單個(gè)純菌落

?甄別污染菌方法①觀察菌落是否在劃線上②觀察菌落是否與直接涂片染色結(jié)果相符③觀察菌落是否符合擬培養(yǎng)細(xì)菌的生長特點(diǎn)④注意培養(yǎng)時(shí)間第一節(jié)概述第18頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月4.細(xì)菌的鑒定?選擇細(xì)菌檢驗(yàn)鑒定方法的原則★選擇有鑒定價(jià)值的試驗(yàn)：兩種細(xì)菌出現(xiàn)不同的結(jié)果★選擇快速、簡易的試驗(yàn)：如觸酶、氧化酶★綜合考慮試驗(yàn)的敏感性和特異性

第一節(jié)概述第19頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月5.細(xì)菌對抗菌藥物敏感性試驗(yàn)

?紙片擴(kuò)散法

?肉湯稀釋法

?自動(dòng)化儀器法

?E-test法等。第一節(jié)概述第20頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月返回本章內(nèi)容四、細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告原則?標(biāo)本周轉(zhuǎn)時(shí)間（TAT）：從標(biāo)本采集起到臨床醫(yī)生收到檢驗(yàn)結(jié)果的時(shí)間?危急值：指危及到患者生命健康安全的檢驗(yàn)結(jié)果檢驗(yàn)報(bào)告原則?初報(bào)告?預(yù)報(bào)告?最終報(bào)告?報(bào)告抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果第一節(jié)概述第21頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月一、血液及骨髓標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本的采集1.皮膚消毒

?嚴(yán)格執(zhí)行三步法2.采血部位：

?肘靜脈

?肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血

?嬰幼兒采頸靜脈血

第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第22頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月3.采集方法

?嚴(yán)格無菌操作4.采血量

?比例：1:10

?成人8～10ml/瓶

?兒童1～5ml/瓶

?嬰兒1～2ml/瓶

?骨髓1～2ml/瓶

第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第23頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月疾病24小時(shí)內(nèi)24小時(shí)后菌血癥、敗血癥2～3份細(xì)菌性心內(nèi)膜炎3份（1～2小時(shí)）2份不明原因發(fā)熱2～3份2份5.采血時(shí)間和頻度6.標(biāo)本的運(yùn)送和保存立即送檢，室溫保存，切勿冷藏第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第24頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）微生物學(xué)檢驗(yàn)

1.常見病原菌第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第25頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月2.

檢驗(yàn)程序第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第26頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基性狀改變疑似病原菌均勻混濁，指示劑變色革蘭陰性桿菌微混濁，有綠色變化肺炎鏈球菌有菌膜，均勻混濁有綠色熒光銅綠假單胞菌上層澄清，下層有沉淀鏈球菌細(xì)胞層自上而下的溶血溶血性鏈球菌混濁、有膠凍狀凝固現(xiàn)象葡萄球菌灰白色菌膜、培養(yǎng)基清晰枯草芽孢桿菌或類白喉棒狀桿菌3.檢驗(yàn)方法（1）普通細(xì)菌的培養(yǎng)與鑒定

?增菌培養(yǎng)：培養(yǎng)陽性指證及疑似菌列表第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第27頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月陽性培養(yǎng)瓶直接藥敏試驗(yàn)分離培養(yǎng)涂片染色鏡檢細(xì)菌鑒定藥敏試驗(yàn)報(bào)告報(bào)告報(bào)告?陽性培養(yǎng)瓶處理?陰性培養(yǎng)瓶處理于12～18小時(shí)、第3天和第7天至少做3次盲傳，7天無細(xì)菌生長報(bào)告陰性第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第28頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）特殊細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定?腦膜炎奈瑟菌血液骨髓胰胨肉湯或?qū)I(yè)培養(yǎng)瓶巧克力培養(yǎng)基（35℃,

5％～10％C02）鑒定：葡萄糖、麥芽糖發(fā)酵陽性藥敏：CLSI標(biāo)準(zhǔn)腦膜炎奈瑟菌菌落第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第29頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）特殊細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定?草綠色鏈球菌血液骨髓血瓊脂平板（35℃,

5％～10％C02、需氧和厭氧環(huán)境）胰酶解酪蛋白大豆肉湯培養(yǎng)瓶鑒定藥敏試驗(yàn)草綠色鏈球菌草綠色鏈球菌菌落7天培養(yǎng)無細(xì)菌生長，培養(yǎng)至第4周，仍無細(xì)菌生長則報(bào)告“經(jīng)4周培養(yǎng)無草綠色鏈球菌生長”第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第30頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月血液骨髓葡萄糖膽汁或膽鹽肉湯MAC、SS35℃培養(yǎng)鑒定;KIA、生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗(yàn)等藥敏試驗(yàn)血液骨髓肝浸液肉湯肝浸液平板或血平板（35℃,

5％～10％C02）涂片、生化鑒定血清學(xué)試驗(yàn)?傷寒沙門菌及其他沙門菌?布魯菌培養(yǎng)4周無細(xì)菌生長，報(bào)告“經(jīng)4周培養(yǎng)無細(xì)菌生長”第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第31頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)本牛心腦浸液或肝浸液血平板或巧克力平板35℃、厭氧培養(yǎng)生化鑒定?厭氧菌?真菌：真菌增菌肉湯增菌→沙保弱培養(yǎng)基（25℃或37℃）→菌落特征→生化鑒定、報(bào)告?L型細(xì)菌高滲液體培養(yǎng)基→血瓊脂平板和L型細(xì)菌培養(yǎng)基→典型“油煎蛋”菌落→返祖、鑒定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第32頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月4.結(jié)果報(bào)告采取分級和限時(shí)報(bào)告制度?初報(bào)告：將鏡檢結(jié)果電話通知主管醫(yī)生?預(yù)報(bào)告：6～8小時(shí)內(nèi)報(bào)告直接藥物敏感結(jié)果?最終報(bào)告：報(bào)告細(xì)菌種屬、藥敏試驗(yàn)、結(jié)果評價(jià)及建議?陰性報(bào)告第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第33頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）臨床意義?排除雜菌污染，從血液和骨髓標(biāo)本中檢出任何細(xì)菌都具有臨床意義?葡萄球菌是血液感染最常見的細(xì)菌?草綠色鏈球菌是亞急性心內(nèi)膜炎的主要致病菌?尿路、膽道、胃腸道炎癥粘膜損傷引起的敗血癥以大腸埃希菌多見?產(chǎn)單核李斯特菌主要引起新生兒敗血癥第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第34頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月互動(dòng)討論草綠色鏈球菌屬人體正常菌群，試分析從血液和痰液標(biāo)本中分離出草綠色鏈球菌各有何臨床意義？第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第35頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月二、腦脊液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本的采集1.采集部位?腰椎穿刺法2.采集量?3～5ml3.標(biāo)本的運(yùn)送和保存?15分鐘內(nèi)送檢，最遲不能超過1小時(shí)。疑似苛養(yǎng)菌感染時(shí)，應(yīng)保溫送檢第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第36頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）微生物學(xué)檢驗(yàn)1.常見病原菌第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第37頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月2.檢驗(yàn)程序第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第38頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月肺炎鏈球菌腦膜炎奈瑟菌流感嗜血桿菌3.檢驗(yàn)方法（1）涂片檢查

?革蘭染色第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第39頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月

?抗酸染色?墨汁負(fù)染色

新型隱球菌結(jié)核桿菌第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第40頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）分離培養(yǎng)與鑒定?普通細(xì)菌標(biāo)本→血瓊脂平板和巧克力平板（35℃，CO2環(huán)境）→可疑菌落→形態(tài)、生化試驗(yàn)及血清學(xué)試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)?結(jié)核分枝桿菌標(biāo)本→羅-琴培養(yǎng)基或米氏7H-10培養(yǎng)基→35℃溫箱孵育→可疑菌落→鑒定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第41頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月?真菌標(biāo)本→血平板或沙保弱培養(yǎng)基→25℃及37℃孵育→可疑菌落→形態(tài)、鏡檢及生化反應(yīng)等鑒定。?厭氧菌標(biāo)本→血平板、厭氧血瓊脂平板和硫乙醇酸鈉肉湯→35℃需氧、厭氧培養(yǎng)→可疑菌落→染色鏡檢及生化鑒定、藥敏試驗(yàn)第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第42頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月4.結(jié)果報(bào)告

?初報(bào)告：報(bào)告標(biāo)本直接涂片結(jié)果?預(yù)報(bào)告：報(bào)告標(biāo)本直接藥敏試驗(yàn)結(jié)果?最終報(bào)告：報(bào)告細(xì)菌種屬、藥敏試驗(yàn)、結(jié)果評價(jià)及建議?陰性報(bào)告第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第43頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）臨床意義?腦膜炎奈瑟菌引起細(xì)菌性腦膜炎?結(jié)核分枝桿菌引起的結(jié)核性腦膜炎?真菌性腦膜炎最常見的病原體是新型隱球菌，白假絲酵母菌、球孢子菌好發(fā)于免疫功能低下和惡性疾病患者第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第44頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月三、尿液（泌尿生殖道）標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本的采集1.中段尿采集法2.導(dǎo)尿法3.膀胱穿刺采集法4.集尿法

5.標(biāo)本的運(yùn)送和保存

?立即送檢、及時(shí)接種

?室溫不超過2小時(shí)，4℃不超過8小時(shí)

?淋病奈瑟菌感染尿液標(biāo)本不能冷藏第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第45頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）微生物學(xué)檢驗(yàn)1.常見病原菌第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第46頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月2.檢驗(yàn)程序第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第47頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月3.檢驗(yàn)方法（1）涂片檢查?普通細(xì)菌檢查：取沉淀涂片、染色、鏡檢?淋病奈瑟菌檢查第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第48頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月?念珠菌檢查?結(jié)核分枝桿菌檢查：應(yīng)與恥垢分枝桿菌相鑒別?鉤端螺旋體檢查：暗視野顯微鏡下，發(fā)現(xiàn)一串細(xì)密亮珠、兩端呈鉤狀且沿縱軸旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)的螺旋體時(shí)，報(bào)告找到螺旋體第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第49頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）尿液細(xì)菌計(jì)數(shù)?

計(jì)算：cfu/ml=菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)

或cfu/ml=

?

意義革蘭陽性球菌大于104cfu/ml,革蘭陰性桿菌大于105cfu/ml，應(yīng)考慮為泌尿系統(tǒng)感染第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第50頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月淋球菌菌落（3）分離培養(yǎng)與鑒定

?

普通細(xì)菌培養(yǎng)：沉淀物→血平板和麥康凱平板→35℃培養(yǎng)→菌落觀察→染色鏡檢、生化反應(yīng)、抗菌藥物敏感試驗(yàn)

?

淋病奈瑟菌培養(yǎng)：標(biāo)本→TM或MTM平板→35℃、5％～10％CO2環(huán)境→疑似菌落→涂片鏡檢、生化反應(yīng)鑒定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第51頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月4.結(jié)果報(bào)告

?

初級報(bào)告：標(biāo)本涂片染色鏡檢結(jié)果，如“找到革蘭陰性雙球菌，存在于細(xì)胞內(nèi)（外），形似淋病奈瑟菌”

?

最終報(bào)告：報(bào)告細(xì)菌種屬、菌落計(jì)數(shù)、藥物敏感性試驗(yàn)、結(jié)果評價(jià)及建議

?

陰性報(bào)告：48小時(shí)無細(xì)菌生長者，報(bào)告“48小時(shí)培養(yǎng)無細(xì)菌生長”第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第52頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）臨床意義?

尿液中細(xì)菌數(shù)少于104cfu／ml或104～105cfu/ml之間，反復(fù)多次查出同一細(xì)菌時(shí)，一般也認(rèn)為是病原菌。?

同份尿液中檢出三種或以上不同微生物，應(yīng)認(rèn)為標(biāo)本采集或處理不當(dāng)被污染。?

尿液細(xì)菌學(xué)檢查結(jié)果，應(yīng)結(jié)合臨床考慮綜合第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第53頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月直腸肛拭子四、糞便標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本的采集1.自然排便法?

膿血、黏液糞便2～3克2.直腸拭子法?

成人4～5厘米?

幼兒2～3厘米3.標(biāo)本的運(yùn)送和保存?

卡-布（Cary-Blair）運(yùn)送培養(yǎng)基第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第54頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）微生物學(xué)檢驗(yàn)1.常見病原菌第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第55頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月2.檢驗(yàn)程序第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第56頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月3.檢驗(yàn)方法（1）涂片檢查?

霍亂弧菌檢查：①動(dòng)力檢查：動(dòng)力及制動(dòng)試驗(yàn)②染色鏡檢：革蘭染色，發(fā)現(xiàn)魚群狀排列的革蘭陰性弧菌，可做出初步報(bào)告?

酵母樣菌檢查第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第57頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月葡萄球菌艱難梭菌彎曲菌（1）涂片檢查?葡萄球菌、艱難梭菌、彎曲菌檢查

?糞便中優(yōu)勢菌檢查：推定主要優(yōu)勢菌并及時(shí)報(bào)告結(jié)果第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第58頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月沙門菌志賀菌（2）分離培養(yǎng)與鑒定

?

沙門菌及志賀菌培養(yǎng)糞便或直腸拭子→SS平板、麥康凱平板、GN增菌液→35℃、需氧培養(yǎng)→可疑菌落→生化試驗(yàn)、血清學(xué)反應(yīng)鑒定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第59頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月五種致病性大腸埃希菌

ETEC----腸產(chǎn)毒大腸埃希菌EPEC----腸致病大腸埃希菌EIEC----腸侵襲大腸埃希菌EHEC----腸出血大腸埃希菌EaggEC—腸凝聚性大腸埃希菌（2）分離培養(yǎng)與鑒定

?致病性大腸埃希菌培養(yǎng)膿血或糊狀糞便→麥康凱/伊紅美藍(lán)/中國藍(lán)平板→35℃、需氧培養(yǎng)→可疑菌落→生化反應(yīng)、多價(jià)血清凝集試驗(yàn)鑒定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第60頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月?

霍亂弧菌培養(yǎng)米泔水樣糞便→堿性蛋白胨水增菌→堿性瓊脂平板或TCBS平板→35℃需氧培養(yǎng)→可疑菌落→形態(tài)檢查、動(dòng)力及制動(dòng)試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)鑒定?

副溶血性弧菌培養(yǎng)糞便、可疑食物、嘔吐物→3.5%NaCl蛋白胨水增菌→SS平板、TCBS平板→35℃需氧培養(yǎng)→可疑菌落→生化試驗(yàn)及耐鹽試驗(yàn)鑒定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第61頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月?

金黃色葡萄球菌培養(yǎng)糞便、肛拭子、可疑食物→甘露醇高鹽瓊脂平板、血瓊脂平板→35℃需氧培養(yǎng)→可疑菌落→革蘭染色、凝固酶、DNA酶及甘露醇發(fā)酵鑒定?

小腸結(jié)腸耶爾森菌培養(yǎng)標(biāo)本→NYE、1/15M磷酸鹽増菌液→4℃、25～30℃、35℃、需氧環(huán)境→可疑菌落→生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗(yàn)鑒定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌第62頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月?

空腸彎曲菌培養(yǎng)標(biāo)本→Camp-BAP、Skirrow或Butzler血瓊脂→43℃、微需氧環(huán)境→有色半透明菌落→動(dòng)力、生化試驗(yàn)鑒定。?

艱難梭菌培養(yǎng)標(biāo)本→CCFA平板→35℃、厭氧環(huán)境→可疑菌落→生化鑒定、毒素試驗(yàn)第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第63頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月?

真菌培養(yǎng)標(biāo)本→沙保弱瓊脂平板、血瓊脂平板→25℃及37℃培養(yǎng)→可疑菌落→鏡檢、芽管及厚膜孢子試驗(yàn)等鑒定4.結(jié)果報(bào)告?初級報(bào)告：鏡檢典型陽性結(jié)果，報(bào)告臨床。?

最終報(bào)告：報(bào)告細(xì)菌種屬、藥敏試驗(yàn)、結(jié)果評價(jià)及建議；檢出霍亂弧菌應(yīng)立即向當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制中心報(bào)告?

陰性報(bào)告：根據(jù)分離目的菌而定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第64頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）臨床意義?能引起腸道感染的常見致病菌有沙門菌、志賀菌、霍亂弧菌及致病性大腸埃希菌等。?能引起食物中毒的常見致病菌有沙門菌、副溶血弧菌、致病性大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、肉毒梭菌、蠟樣芽胞桿菌等?幽門螺桿菌是引起胃炎、消化性潰瘍主要致病菌，胃癌的危險(xiǎn)因子第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第65頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月互動(dòng)討論正常人糞便中含有大量細(xì)菌，而能引起腸道感染的細(xì)菌種類較多，致病菌和正常菌往往共存生長。試分析如何快速準(zhǔn)確的檢出致病菌？第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第66頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月五、痰液（呼吸道）標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本的采集1.自然咳痰法晨痰最佳，深部痰2.小兒取痰法3.特殊器械采集法4.標(biāo)本的運(yùn)送和保存立即送檢，室溫不超過2小時(shí)第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第67頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）微生物學(xué)檢驗(yàn)

1.常見病原菌第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第68頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月2.檢驗(yàn)程序第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第69頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月白細(xì)胞數(shù)(LP)上皮細(xì)胞數(shù)(LP)細(xì)菌培養(yǎng)＞25個(gè)＜10個(gè)合格＜10個(gè)＞25個(gè)不合格3.檢驗(yàn)方法

（1）涂片檢查目的:①確定標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng)②為選用培養(yǎng)基提供參考適合細(xì)菌培養(yǎng)的痰液鏡檢標(biāo)準(zhǔn)第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第70頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）涂片檢查?普通細(xì)菌檢查：涂片行革蘭染色鏡檢，根據(jù)染色性、形態(tài)及排列初步報(bào)告?結(jié)核桿菌檢查：制成厚涂片，抗酸染色鏡檢?放線菌及諾卡菌檢查硫磺樣顆粒涂片衣氏放線菌第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第71頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月痰培養(yǎng)前的處理①痰液的洗凈②痰液的均質(zhì)化?普通細(xì)菌培養(yǎng)?嗜肺軍團(tuán)菌培養(yǎng)標(biāo)本→血瓊脂、巧克力瓊脂和BCYE瓊脂平板→35℃，5％～10％CO2環(huán)境→根據(jù)培養(yǎng)時(shí)間、菌落特點(diǎn)等鑒定（2）細(xì)菌的培養(yǎng)與鑒定第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第72頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023年2月異染顆粒?

白喉棒狀桿菌培養(yǎng)標(biāo)本→呂氏血清斜面、血瓊脂平板和亞碲酸鉀瓊脂平板→35℃、需氧環(huán)境→典型菌落→形態(tài)、生化試驗(yàn)、毒力試驗(yàn)第二節(jié)臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)第73頁，課件共80頁，創(chuàng)作于2023