復習回顧1、植物體細胞雜交的原理是什么？2、植物原生質體融合的誘導方法有哪些？

“番茄—馬鈴薯”（理想圖）通過長期的實驗，科學家們采用體細胞雜交技術獲得了“番茄—馬鈴薯”植株。動物細胞也能融合嗎？動物細胞工程選修3現代生物科技專題專題2細胞工程

動物細胞融合與單克隆抗體教學目標了解動物細胞融合的原理、過程和意義。理解單克隆抗體制備的過程和應用1.教學重點：單克隆抗體的制備和應用2.教學難點：單克隆抗體的制備過程重點難點教學過程一.動物細胞融合1.動物融合的過程請同學們閱讀課本P52動物融合思考題1.植物體細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有哪些？離心、電激等物理方法；PEG等化學方法2.動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？能還可以利用滅活的病毒進行誘導3.動物細胞融合的原理是什么？細胞膜的流動性4.你推測一下動物細胞融合有哪些方面的應用嗎？

研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤、生物新品種培育等的重要手段。特別是利用動物細胞融合技術誘導形成雜交瘤細胞。動物細胞融合過程示意圖不同DNA的兩個細胞

滅活的病毒有絲分裂兩個完整的雜交細胞2.動物細胞融合的概念動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程，融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞。主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株主要用途物理、化學方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學（聚乙二醇）誘導方法使細胞分散后誘導細胞融合去除細胞壁后誘導原生質體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性細胞融合的原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較(合作探究)教學反饋

1．動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）

A．誘導融合的方法完全相同B．所用的技術手段完全相同

C．都能形成雜種細胞D．所采用的原理完全相同

2．關于動物細胞融合的說法，不正確的是(

)A．動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程

B．動物細胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞

C．常用的誘導動物細胞融合的因素有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射等

D．與骨髓瘤細胞融合的細胞是經過特定抗原免疫的B淋巴細胞CC提問？1.抗體是由何種細胞產生的？

效應B細胞（漿細胞）。2.一個Ｂ淋巴細胞(漿細胞)能分泌多種抗體嗎？

每一個Ｂ淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。3.一種抗原侵入機體之后，引起機體免疫反應產生的抗體只有一種嗎？

動物在免疫反應過程中，體內產生的特異性抗體種類可多達百萬種以上。4.簡述獲得抗體的傳統途徑？

抗原動物體抗體抗原不純抗體不純二、單克隆抗體刺激漿細胞6.如何獲得化學性質單一、特異性強的抗體？

體外培養單個Ｂ淋巴細胞，提取分泌的抗體7.體外培養淋巴細胞能無限增殖嗎?怎樣解決這個問題？5.這種方法獲得的抗體有什么缺陷？

產量低，純度低，特異性差1.設計方案：一個B淋巴細胞－－只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞－－能夠無限增殖雜種細胞二、單克隆抗體2.制備過程：免疫小鼠培養骨髓瘤細胞融合骨髓瘤細胞B淋巴細胞注射特定抗原蛋白選擇培養基上培養專一抗體檢驗陽性專一抗體檢驗陽性注射到小鼠體內體外培養單克隆抗體克隆雜交細胞分開不同雜交細胞，克隆專一抗體，檢驗陽性細胞

單克隆抗體制備過程示意圖多種雜交細胞合作探究：第一次篩選，和第二次篩選的作用是什么？第一次篩選：得到雜交瘤細胞。第二次篩選：得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。3.單克隆抗體的應用：

①在基礎理論研究中具有重要意義

②在疾病診斷、治療和預防方面，具有

③生物導彈二、單克隆抗體特異性強、靈敏度高等優越性。小結：兩個過程動物細胞培養過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導細胞融合的新方法－－滅活的病毒一個新細胞－－雜交瘤細胞一個優勢－－單克隆抗體特異性強、靈敏度高的優勢教學反饋1.動物細胞融合技術最重要的用途是（）A.克服遠源雜交不親和B.制備單克隆抗體C.培育新物種D.生產雜種細胞B2.單克隆抗體是由下列哪種細胞產生的 （）

A.B淋巴細胞B.T淋巴細胞C.骨髓瘤細胞D.雜交瘤細胞

D3.“生物導彈”是指 （）A.單克隆抗體B.雜交瘤細胞C.產生特定抗體的B淋巴細胞D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物

4.只能使動物細胞融合的常用誘導方法是 （）

A．PEG

B．滅活的病毒C．電刺激D．離心DB當堂達標1.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養基上不能存活增殖的細胞是（）①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A.②④B.①③⑤

C.①②③④

D.②③

C2.動物細胞融合和植物原生質融合決定于()

A.細胞膜的流動性B．細胞膜的選擇透過性

C.細胞質的流動性D．細胞質酶的活性A一.選擇題B體外培養骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數量的細胞群注射到小鼠腹腔AC

3.下圖為某同學根據雜交瘤技術的方法，設計的生產破傷風桿菌的實驗方案制備單克隆抗體不能，沒有將抗原注入小鼠體內，無法獲得產生單一抗體的B淋巴細胞。(1).該實驗方案的目的是：________________(2).該方案能達到預期效果嗎？為什么？(3).A是從小鼠的脾臟中取得__________該細胞能夠產生______。(4).圖中B為________________過程，常用_________________作為誘導劑，該細胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。B淋巴細胞抗體細胞融合滅活的病毒雙親細胞分泌抗體無限增殖三.思考與探究1.植物體細胞雜交技術與動物細胞融合技術有什么不同？2.制備單克隆抗體時，為什么要選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞？提示：植物體細胞雜交技術與動物細胞融合技術基本相同，不同的是植物體細胞融合前需去掉細胞壁，然后再融合；動物細胞融合是兩個體細胞直接融合。

提示：哺乳動物感染抗原后，其體內會形成相應的B淋巴細胞，B淋巴細胞能分泌相應的抗體凝聚或殺死這些抗原。動物在免疫反應的過程中，每一種B淋巴細胞能分泌一種特異性抗體