真核生物轉錄特點與加工詳解演示文稿本文檔共20頁；當前第1頁；編輯于星期一\17點59分優選真核生物轉錄特點與加工本文檔共20頁；當前第2頁；編輯于星期一\17點59分TATATFIIDTFIIATFIIBRNA-polII/TFIIFTFIIEPIC12345轉錄起始復合物結合順序本文檔共20頁；當前第3頁；編輯于星期一\17點59分轉錄后的加工原核RNA不需加工，邊轉錄邊翻譯真核RNA需要加工rRNAtRNAmRNA5’加帽3’加尾剪接在轉錄過程中轉錄后進行本文檔共20頁；當前第4頁；編輯于星期一\17點59分真核生物轉錄后的加工意義：轉錄生成的前體RNA,無生物學活性,需加工變為成熟、有活性的RNA加工種類：剪切與剪接、末端添加核苷酸、修飾、RNA編輯本文檔共20頁；當前第5頁；編輯于星期一\17點59分

一、mRNA前體的加工

（一）生成特點：原核：mRNA是多順反子(polycistronic),每分子RNA中含幾種蛋白質信息，RNA壽命短，轉錄沒完時翻譯即開始

例:乳糖操縱子，含Z,Y,A三個基因,分別編碼半乳糖苷酶、透過酶及乙酰基轉移酶

本文檔共20頁；當前第6頁；編輯于星期一\17點59分真核：單順反子,一個mRNA僅編碼一種蛋白質

外顯子:在真核生物基因中編碼蛋白質的序列

內含子:非編碼蛋白的序列,因其插于外顯子之間又稱插入序列,居間序列

hnRNA:為mRNA的前體,轉錄物中外顯子與內含子間隔排列，需經剪接加工后生成mRNA本文檔共20頁；當前第7頁；編輯于星期一\17點59分（二）mRNA前體加工過程

真核：

5‘末端帽子

部位：核內

3‘端多聚A尾部位：核內,胞質有酶也可進行

剪接作用

部位：胞核甲基化(甲基化發生在剪接之前,在非編碼區分子中含1-2個m6A)RNA編輯(某些mRNA的核苷酸序列,在生成轉錄產物后還需插入、刪除或取代一些核苷酸殘基,方能生成具有正確翻譯功能的模板,遺傳信息在mRNA水平上的改變過程，稱為RNA編輯)原核：多順反子mRNA在RNaseⅢ作用下轉變為單獨的順反子本文檔共20頁；當前第8頁；編輯于星期一\17點59分5’加帽pi5’pppG…磷酸酶ppi5’pG…pppG5’GpppG…甲基化酶＋CH3mGpppG…OHOH帽1帽0帽2NNNNOH2NCH3+OHHCH2HOPOPOPOPPPN1N2N3OOHOOHOOHOCH3OCH32'OH79H甲基鳥苷5’，5’-三磷酸本文檔共20頁；當前第9頁；編輯于星期一\17點59分mRNA5`末端帽子特征的生物學功能：I:使mRNA免遭核酸酶的破壞，保持其結構的穩定性；II:利于蛋白質起始因子的識別，從而促進翻譯的起始。本文檔共20頁；當前第10頁；編輯于星期一\17點59分3’加尾AAUAAAAAAAAAAAA……….加尾AATAAAGTGTGTG-----AAUAAAGUGUGUGAAUAAAGUGUGUG酶切轉錄的終止加尾信號GC豐富序列polyA尾（約20～200個A）AAAAAA本文檔共20頁；當前第11頁；編輯于星期一\17點59分高等真核生物（不包括酵母）的mRNA的共同特征：poly(A)添加位點上游11-30個核苷酸區域內存在高度保守的AAUAAA序列。

絕大部分真核生物mRNA3`端含poly(A)尾巴poly(A)尾巴生物學功能：

I:保持mRNA的穩定性，防止被降解；

II:與翻譯起始有關。本文檔共20頁；當前第12頁；編輯于星期一\17點59分應用一：★Poly(A用來從總RNA中分離mRNA本文檔共20頁；當前第13頁；編輯于星期一\17點59分

可設計寡聚Oligo(dT)片段合成cDNA應用二：mRNA:5`NNNN…..NNNNNNAAA…AA3`

TTT…TT5`

cDNA:3`NNNN…..NNNNNNTTT…TT5`本文檔共20頁；當前第14頁；編輯于星期一\17點59分斷裂基因：真核生物的基因由若干個編碼區和非編碼區互相隔開但又連續鑲嵌而成外顯子（exon):基因中出現在mRNA的序列內含子（intron）：基因中不出現于mRNA而被剪接掉的序列核內不均一RNA（hnRNA）：真核生物中編碼蛋白質基因的初級轉錄本，包括5’帽子、3’poly(A)尾、外顯子、內含子，經剪接加工成為mRNA本文檔共20頁；當前第15頁；編輯于星期一\17點59分剪接剪接:在細胞核內,hnRNA剪切掉內含子,將多個外顯子連接為成熟mRNA的過程為剪接例:同一轉錄本,在不同的組織,因剪接差異產生各自不同的mRNA剪接的本質：磷酸酯鍵的轉移剪接特點：剪接部位的結構為內含子末端的特定序列，分布在內含子的三個部位，5‘端剪切點為GU;3’端剪切點為AG；靠近3‘端含A序列的分支點本文檔共20頁；當前第16頁；編輯于星期一\17點59分mRNA的剪接：

hnRNA被剪接體作用，剪除內含子、連接外顯子，產生成熟的mRNA的過程本文檔共20頁；當前第17頁；編輯于星期一\17點59分外顯子內含子DNAmRNA轉錄形成套索RNA，外顯子靠近剪接體去除套索RNA，外顯子連接成熟mRNAmRNA的剪接本文檔共20頁；當前第18頁；編輯于星期一\17點59分套索結構外顯子外顯子內含子內含子5’端斷開前一個外顯子的3’末端攻擊下后個外顯子的5末端’前后外顯子的連接本文檔共20頁；當前第19頁；編輯于星期一\17點59分二、tRNA前體的加工

1、切除多余的核苷酸：RNaseP切