促胃腸動力藥物篩選第一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六1．了解離體器官試驗特點及注意事項，掌握離體器官試驗的基本技術。2．學習利用離體器官進行藥物篩選的方法，觀察受試物對離體胃、腸平滑肌的影響。3．了解科研課題設計原則，科研課題立項需闡述的相關內容。4．了解科研論文寫作規范（包括圖表制作技巧等）。5．掌握試驗數據統計、處理方法。目的第二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六離體器官試驗常用的離體器官有心臟、血管、腸段、子宮及神經肌肉標本，用離體標本可比較直觀地觀測藥物的作用。不同的動物標本用于測定不同類的藥物作用。背景知識第三頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六

在離體器官法中，不同動物的不同器官都要求最適宜的營養環境，因此各種動物的人工生理溶液成份和配制都有區別。在離體器官研究中應特別引起重視。背景知識滲透壓：要等滲，但不同動物對同一物質的等滲濃度要求不同。如生理鹽水溶液，冷血動物用0.6～0.75%；溫血動物用0.8%～0.9%。各種離子：一定比例的不同電解質離子Na+、K+、Ca2+、Mg2+、H+、OH-等是維持組織器官功能所必須。組織器官不同，對生理溶液中離子的成份和濃度要求亦不同。pH影響：人工生理鹽水中pH一般要求為中性，對于哺乳動物心臟冠狀動脈，酸性生理深夜可使平滑肌松馳；堿性則可使節律加快，振幅縮小。其它條件：葡萄糖提供組織活動所需能量，臨用時再加入，以防變質；有的離體器官需要氧氣，如離體子宮、離體兔心、乳頭肌等。而離體腸管通以空氣就可以了。第四頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六

世界衛生組織調查表明，我國有80%的人患有不同程度胃腸病居世界首位。近年來，功能性胃腸病已受到廣泛的關注，如功能性消化不良、腸胃激綜合征、功能性便秘等，，西方國家人群患病率為5%～24%，每年花費高額的醫療費用，患者的生存質量亦受到不同程度的影響。在最常見造成工作、學習缺勤的疾病中，腸易激綜合征的發病率僅次于普通感冒.目前主要采用解痙劑治療，但只能緩解腹痛，不能治療便秘。而緩瀉劑能緩解便秘，但不能緩解腹痛、腹脹，而且不能長期服用。因此，研究開發新的調節胃腸動力的藥物有重要的社會效益和廣闊的市場前景。背景知識第五頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六背景知識甲氧氯普胺

第一代第二代多潘立酮

它可作用于胃腸道和中樞神經系統，兼有促動力和止吐的功效。可增加食管下端括約肌的張力，使其壓力增加加強胃內固體和液體的排空，還可協調胃竇和十二指腸運動，對腸道無明顯作用第三代西沙比利它對整個胃腸道包括從食管到肛門括約肌均有促動力作用，能增強生理反應，恢復正常的動力模式。臨床常用促動力藥

中藥百合、烏藥、幟實、虎杖

最突出的特點在于標本兼治，但作用機制不明確，組方尚缺少現代藥理學研究的支持。通過離體胃腸平滑肌試驗，探討藥物作用機制、組方依據，為新藥提供線索。第六頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六教學試驗安排

（一）教學分組在一個教學單元內，根據學生人數，將學生分為8組，每組2～5人，并分成上下兩班，4組/班。（二）試驗方案

1．上半班采用胃平滑肌作為試驗材料，建議受試物：百合、或烏藥、或幟實、或虎杖、或四藥合并的水提取物，也可采用各教學單位自行提取的物質，用于篩選。西藥對照：胃復安、西沙必利。2．下半班采用腸平滑肌作為試驗材料，建議受試物：百合、或烏藥、或幟實、或虎杖、或四藥合并的水提取物，也可采用各教學單位自行提取的物質，用于篩選。西藥對照：胃復安、西沙必利。第七頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六試驗方法及步驟

（一）試驗材料1．動物：大鼠（220～280g/只），雄性。2．器材：恒溫平滑肌槽1臺、通氣泵1個、鐵支架1個、止水夾2個，生物信號采集處理系統，張力換能器，1ml注射器4個，培養皿1個，50ml燒杯1個，組織剪、眼科剪各1把，止血鉗兩個，鑷子兩個，絲線若干，移液器一個，砝碼一個。3．試劑：臺氏液。4．受試藥：0.5%胃復安溶液；0.1%西沙必利溶液；20%百合水提取物；10%烏藥水提取物；15%幟實水提取物；15%虎杖水提取物；15%四藥合并的水提取物。第八頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六試驗方法及步驟

（二）試驗步驟1．對大鼠離體胃平滑肌正常張力的影響試驗。（1）制備胃肌條標本：斷頭處死，立即剖取胃底部浸泡于臺氏液液中，制備成“Z”型，長約2.5cm、寬約0.4cm的胃肌條標本。（2）沖洗浴槽，并在其中加入臺氏液30ml（標線處），加熱，維持水溫在37℃～38℃。調節通氣泵，緩慢通入氣泡，并調節1～2個氣泡/秒。（3）取標本，兩端對角處用絲線結扎。一端掛在通氣鉤上，放入浴槽，另一端從張力換能器的彈簧片小孔中穿出并掛上1g砝碼（給予負荷），打開計算機，進入生物信號采集系統，選擇“張力通道”，觀察活動曲線。待其平衡后，用絲線將掛砝碼的絲線牢牢固定于彈簧片上，除去砝碼。（4）待標本在浴槽內穩定10min左右，記錄一段正常活動曲線，然后用注射器依次向浴槽中滴加藥液0.2ml。每加一組藥時立即標記，并觀察、記錄2min頻率及收縮幅度。每次藥物作用后，用溫暖的臺氏液沖洗2～3次，待張力恢復基線（約5min）后再試驗其他藥物。（5）停止記錄曲線，保存數據。斷電斷氣，取出回腸，沖洗浴槽。第九頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六試驗方法及步驟

2．對大鼠離體胃平滑肌正常張力的影響試驗。打開腹腔，找到回盲部，在離其2～3cm的回腸處剪斷，取出回腸，置于盛有臺氏液的培養皿中，沿腸壁分離并剪去腸系膜，將腸管剪成數段，輕輕沖出腸內容物，最后將腸管剪成2～3cm的小段備用。加樣順序與操作同上。第十頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六試驗結果的原始記錄

給藥前1min內的平均值給藥后第1min內的平均值給藥后第2min內的平均值頻率振幅頻率振幅頻率振幅0.5%胃復安溶液0.1%西沙必利溶液

20%百合水提物10%烏藥水提物

15%幟實水提物15%虎杖水提物15%四藥合并水提物表1藥物對大鼠胃或腸平滑肌作用測定原始數據

第十一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六結果處理

上下班分別收集4組試驗結果，計算平均值及標準差，根據擬研究題目，設計表格，并與給藥前相比，進行統計學差異檢驗。示范表格如下。促進率（%）=（給藥后值-給藥前值）/給藥前值×100%收縮頻率促進率（%）1min2min1min2min0.5%胃復安溶液0.1%西沙必利溶液20%百合水提物10%烏藥水提物15%幟實水提物15%虎杖水提物15%四藥水提物表2受試物對大鼠胃或腸平滑肌收縮頻率的影響（χ±SD，n=4）

第十二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六試驗報告內容及格式要求

（一）題目根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：1．“胃復安、西沙必利對胃腸平滑肌作用特征比較”或2．“中藥促胃腸動力藥篩選及組方依據研究”或3．“中、西藥促胃腸動力作用特征研究”或4．自定。（二）研究背景及意義根據選擇的題目，說明研究背景、立題依據、研究意義。（三）試驗方法根據選擇的題目，描述試驗方法（剔除不必要的試驗方法）。（四）試驗結果根據選擇的題目，選擇所需的試驗數據，并進行統計處理，以圖或表的形式描述結果。（五）討論分析結果，引用相關文獻，并進行充分討論。第十三頁，共十四頁，編輯于2023年，星期六注意事項

1．沖洗和分離腸管時動作應輕柔，盡量避免牽拉腸管。2．標本制備好后，放在盛有溫暖臺氏液的培養皿中保存，以免影響標本的反應性。在整個操作過程中，盡量使腸段在溫暖的臺氏液而不是在空氣中。3．腸管兩端穿線時，切勿將腸管縫死，只需穿過一層腸壁，靠端的位置恰到好處。4．通氣時使氣泡呈小米粒大小均勻上升，水泡不宜過多或過少。5．將腸管放入裕管時，注意腸管和連線都不要觸及管壁；在用砝碼標定后，調節連線松緊度，用線系牢，并且線應垂直