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實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素對(duì)植物水分狀態(tài)的影響第一頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二選用的實(shí)驗(yàn)教材參考用自編實(shí)驗(yàn)教材相關(guān)網(wǎng)絡(luò):/plantphy/
第二頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二
植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)基礎(chǔ)
植物組織含水量和組織水勢(shì)(小液流法)氣孔狀態(tài)觀察(固定、印跡法)硝酸還原酶活性的測(cè)定(磺胺比色法)葉綠體色素的測(cè)定和分析(Arnon法)萌動(dòng)種子呼吸速率(小籃子法)快速測(cè)定種子活力的方法和比較(TTC等法)植物激素對(duì)種子萌發(fā)、胚根和胚芽生長(zhǎng)影響(生物檢測(cè)法)植物細(xì)胞膜透性檢測(cè)(電導(dǎo)法)第三頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二
除第1個(gè)實(shí)驗(yàn)自學(xué)外,第3周開(kāi)始安排8個(gè)實(shí)驗(yàn),平時(shí)實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)占50分,期末考試成績(jī)50分.第四頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二實(shí)驗(yàn)題目
實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?/p>
實(shí)驗(yàn)步驟
結(jié)果與分析
本實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
思考題植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(獨(dú)立完成,交學(xué)委)
第五頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng):1、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備及取材2、操作及觀察3、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與整理4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析(結(jié)合統(tǒng)計(jì)分析分清錯(cuò)誤和誤差)5、思考題6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告第六頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二其它注意事項(xiàng):
合理、安全、在老師指導(dǎo)下使用實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)施;實(shí)驗(yàn)前分組查看器皿;實(shí)驗(yàn)后徹底清洗、按實(shí)驗(yàn)前擺放器皿;一旦損壞物品,及時(shí)到C1020室登記;嚴(yán)禁將任何器皿插入洗液瓶中;每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后由班長(zhǎng)安排3位同學(xué)整體清潔打掃第七頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二
一、植物組織含水量的測(cè)定
二、植物組織水勢(shì)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)二環(huán)境因素對(duì)植物水分狀態(tài)的影響(p105-112)
第八頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二
植物組織含水量和組織水勢(shì)(小液流法)
新鮮和萎蔫植物組織含水量和組織水勢(shì)的比較第九頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二一、植物組織含水量的測(cè)定目的:植物組織含水量與組織水勢(shì)的關(guān)系;植物組織某種成分單位干重水平上的含量比較;原理:x100組織鮮重-組織干重組織鮮重=組織含水量(%)第十頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二器材:小白菜(新鮮葉片,高溫貯藏萎蔫葉片);打孔器、橡膠墊;稱樣鋁盒;烘箱、搪瓷盆、棉布手套;天平第十一頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二鋁盒號(hào)1234鋁盒重量W1W2W4W530片葉圓片(避開(kāi)大葉脈)鮮葉鮮葉干葉干葉鮮重(盒+葉圓片,下同)FW1FW2FW4FW5干重(70-80℃下烘干2h后至恒重)DW1DW2DW4DW5含水量(%)(FWn-DWn)/(FWn–Wn)x100步驟:第十二頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二實(shí)驗(yàn)步驟取鋁盒4個(gè),依次編號(hào)(寫于鋁盒底部)并稱取質(zhì)量,選取生長(zhǎng)一致的待測(cè)材料葉片數(shù)枚,用打孔器打葉圓片120(避開(kāi)葉脈位置,新鮮60枚,萎蔫葉60枚),立即裝到上述鋁盒內(nèi),蓋上盒蓋稱重,將4個(gè)鋁盒(已放入30葉圓片,打開(kāi)蓋子)放在搪瓷盤上置于105oC烘箱中烘1-2hr至恒重,稱重時(shí)需置于干燥器中,待冷卻后稱重,若Wn
=鋁盒重,F(xiàn)Wn=鋁盒+葉圓片,DWn=烘干后的鋁盒+葉圓片;5.植物組織含水量為:(FWn-DWn)/(FWn-Wn)x100第十三頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二二、小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?)因陋就簡(jiǎn)測(cè)定植物組織水勢(shì);2)與含水量進(jìn)行比較,分析二者關(guān)系第十四頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二將植物組織分別放在一系列梯度濃度溶液中,①植物組織的水勢(shì)﹤?cè)芤旱臐B透勢(shì),組織吸水而使溶液濃度變大;②植物組織的水勢(shì)﹥?nèi)芤旱臐B透勢(shì),組織水分外流而使溶液濃度變小;③植物組織的水勢(shì)=溶液的滲透勢(shì),外部溶液濃度不變。2.實(shí)驗(yàn)原理
在滲透系統(tǒng)中,水總是從水勢(shì)高處流向水勢(shì)低處。第十五頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二用溶液的滲透勢(shì)(ψπ)代表植物水勢(shì)(ψw)。
ψw=ψπ=-iCRT(單位:兆帕,MPa)i:解離系數(shù)(蔗糖=1.00;CaCl2=2.60;NaCl=1.80)C:等滲濃度(mol/L)R:氣體常數(shù)0.008314L·MPa/(mol
·
K)T:絕對(duì)溫度(273+攝氏溫度)
第十六頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二材料:小白菜(新鮮葉組和萎蔫葉組)儀器設(shè)備:注射針頭打孔器,橡膠墊刻度試管(15mlx12支),小試管(12支)試劑:1M蔗糖,純水,甲烯藍(lán)粉3.材料、儀器設(shè)備與試劑第十七頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二新鮮葉片萎蔫葉片刻度試管管號(hào)123456789101112配制一系列濃度的蔗糖溶液于刻度試管中,體積為10ml
蔗糖溶液c(mol/L)0.10.20.30.40.50.60.10.20.30.40.50.6隨機(jī)取相同葉位葉圓片各10片放入小試管中、從刻度試管中取2ml蔗糖溶液移入小試管中,并使葉圓片完全浸沒(méi)于溶液中小試管管號(hào)123456789101112液滴動(dòng)態(tài)(↑or↓)4.實(shí)驗(yàn)步驟第十八頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二隨機(jī)取相同葉位葉圓片各10片、從刻度試管中取2ml蔗糖溶液,分別放入和移入小試管中,并使葉圓片完全浸沒(méi)于溶液中。30分鐘后,回型針尖沾少許甲烯藍(lán)入小試管,混勻,然后用清潔注射針頭依次取小試管中的藍(lán)色液體,伸入相應(yīng)標(biāo)號(hào)刻度試管溶液中部,注滴同時(shí)觀察并記錄液滴動(dòng)態(tài)。4.實(shí)驗(yàn)步驟第十九頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二取小試管中的藍(lán)色液體第二十頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二輕捏吸管,放入刻度試管深入溶液中部,擠出小液滴取出吸管觀察液滴升降第二十一頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向C=0.3mol/L5.結(jié)果分析第二十二頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向有錯(cuò)誤數(shù)據(jù)第二十三頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向C≈(0.3+0.4)/2mol/L第二十四頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向有錯(cuò)誤數(shù)據(jù)第二十五頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向嚴(yán)重萎蔫葉片的C可能>0.6第二十六頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二幼嫩新鮮葉片的C可能<0.1蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向第二十七頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二1.計(jì)算新鮮和萎焉葉片的含水量,并進(jìn)行比較分析;2.記錄不同濃度溶液中的液流方向;3.計(jì)算兩組葉片的水勢(shì),并結(jié)合各自含水量比較分析。
蔗糖溶液濃度(mol·L-1)
0.10.20.30.40.50.6ψw(MPa)新鮮葉萎蔫葉思考題:
增加或減少蔗糖溶液中葉圓片數(shù)目是否會(huì)影響水勢(shì)測(cè)定結(jié)果,為什么?第二十八頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二拭干葉表水分和泥漬避開(kāi)大的葉脈打葉圓片,混合均勻移液管取溶液和純水配制的蔗糖溶液要混勻潤(rùn)洗移液管和針頭(放回原液)葉圓片浸入溶液中室溫下浸泡30分鐘后再染色盡量少加甲烯藍(lán)輕壓膠管使針筒少量吸入染色溶液滴入后,停止擠壓或放松膠管6.注意事項(xiàng)第二十九頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二液相平衡法:小液流法、稱重法、質(zhì)壁分離法壓力平衡法:壓力室法
氣相平衡法:露點(diǎn)法
植物組織水勢(shì)和滲透勢(shì)的測(cè)定方法:水勢(shì)測(cè)定冰點(diǎn)降低法滲透勢(shì)蒸氣壓滲透壓計(jì)法第三十頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二三、壓力室法測(cè)定植物組織水勢(shì)(如果有時(shí)間則講解)
植物葉片通過(guò)蒸騰作用不斷向環(huán)境散失水分,產(chǎn)生蒸騰拉力。導(dǎo)管中的水分由于“內(nèi)聚力”的作用而形成連續(xù)的水柱。因此,對(duì)于蒸騰著的植物,其導(dǎo)管中的水柱由于蒸騰拉力的作用,承受著一定的張力或負(fù)壓,使水分連貫地向上運(yùn)輸(圖A)。
當(dāng)葉片或枝條被切斷時(shí),木質(zhì)部中的液流由于張力解除迅速縮回木質(zhì)部(圖B)。第三十一頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二
將葉片裝入壓力室鋼筒,葉柄切口朝外,逐漸加壓,直到導(dǎo)管中的液流恰好在切口處顯露時(shí),所施加的壓力正好抵償了完整植株導(dǎo)管中的原始負(fù)壓。這時(shí)所施加的壓力值(通常稱為“平衡壓”)將葉片中的水勢(shì)提高到相當(dāng)于開(kāi)放大氣中導(dǎo)管中液體滲透勢(shì)ψs(sap)的水平(圖C)。第三十二頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二
由于通過(guò)導(dǎo)管周圍完整活細(xì)胞半透膜進(jìn)入木質(zhì)部導(dǎo)管的汁液,其滲透勢(shì)常接近于零(活性溶質(zhì)含量很低)。因此,下式成立:
P+ψw=ψs≈0→ψw=﹣P
式中:P—平衡壓(正值);ψw—葉片或枝條的水勢(shì)(負(fù)值);ψs—木質(zhì)部汁液的滲透勢(shì)。第三十三頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二植物材料:梧桐枝條第三十四頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二操作步驟第三十五頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二1.裝樣時(shí)螺旋環(huán)套不要擰得太緊,以免壓傷植物
組織。
2.加壓速度不能太快,接近葉片水勢(shì)時(shí)加壓速度
要放慢,否則會(huì)影響測(cè)量精度。
3.注意安全,加壓時(shí)不要使臉部處于鋼筒頂蓋正
上方。
4.高壓鋼瓶有危險(xiǎn),搬運(yùn)或使用時(shí)要注意。注意事項(xiàng):第三十六頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二思考題:壓力室法測(cè)定水勢(shì)時(shí),加壓速度過(guò)快對(duì)結(jié)果有何影響?第三十七頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二四、冰點(diǎn)滲透壓計(jì)測(cè)定植物水勢(shì)實(shí)驗(yàn)原理:水溶液的冰點(diǎn)下降值與溶液的摩爾濃度成正比。
1mol的任何非電解質(zhì)溶液溶解于1kg的水中,則使水的冰點(diǎn)由0攝氏度降至-1.875攝氏度。因此已知某溶液的冰點(diǎn)下降值,即可由以下公式計(jì)算出其滲透勢(shì):Os=t/1.875式中:OS為1000克水中所溶解的溶質(zhì)顆粒數(shù)目,即重量摩爾滲透濃度(osmolarity);△t為冰點(diǎn)下降數(shù)值(度);1.857為水的摩爾冰點(diǎn)下降常數(shù)。第三十八頁(yè),共四十二頁(yè),編輯于2023年,星期二被測(cè)樣品的溫度變化過(guò)程第三十九頁(yè),共四十二頁(yè),
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