新藥藥效學研究的思路和方法詳解演示文稿當前第1頁\共有56頁\編于星期四\1點1（優選）新藥藥效學研究的思路和方法當前第2頁\共有56頁\編于星期四\1點2新藥研究的三個階段和審評尺度

安全性

有效性質量可控性藥學研究藥理毒理研究

臨床研究當前第3頁\共有56頁\編于星期四\1點3新藥研究的法律法規及指導原則《中華人民共和國藥品管理法》（江澤民主席，2001-2-28)《中華人民共和國藥品管理法實施條例》（朱镕基總理，2002-8-4)《藥品注冊管理辦法》（局令第28號）

（邵明立局長，2007-7-10)指導原則……當前第4頁\共有56頁\編于星期四\1點4《藥品注冊管理辦法》（局令第28號）附件1：中藥、天然藥物注冊分類及申報資料要求(33項)

附件2：化學藥品注冊分類及申報資料要求(32項)附件3：生物制品注冊分類及申報資料要求(18項)附件4：藥品補充申請注冊事項及申報資料要求附件5：藥品再注冊申報資料項目附件6：新藥監測期期限表（說明：除以下情形的新藥不設立監測期）

當前第5頁\共有56頁\編于星期四\1點5新藥申報中藥理毒理研究內容及要求當前第6頁\共有56頁\編于星期四\1點6藥理毒理研究資料內容藥理毒理研究資料綜述（中19/化16）主要藥效學試驗資料及文獻資料（20/17）一般藥理研究的試驗資料及文獻資料（21/18）急性毒性試驗資料及文獻資料（22/19）長期毒性試驗資料及文獻資料（23/20）

過敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮膚、粘膜、肌肉等）刺激性等主要與局部、全身給藥相關的特殊安全性試驗研究和文獻資料（24/21）當前第7頁\共有56頁\編于星期四\1點7復方制劑中多種成份藥效、毒性、藥代動力學相互影響的試驗資料及文獻資料（無/22）致突變試驗資料及文獻資料（25/23）生殖毒性試驗資料及文獻資料（26/24）致癌試驗資料及文獻資料（27/25）依賴性試驗資料及文獻資料（23/26）非臨床藥代動力學試驗資料及文獻資料（28/27）

當前第8頁\共有56頁\編于星期四\1點8藥理毒理研究資料內容

藥理毒理研究資料綜述

藥理研究資料

主要藥效、作用機理研究、藥代動力學毒理研究資料一般藥理、急毒、長毒、局部毒性、遺傳毒性、生殖毒性、致癌性當前第9頁\共有56頁\編于星期四\1點9化學藥品注冊分類

1、未在國內外上市銷售的藥品（分6個亞類）。

2、改變給藥途徑尚未在國內外上市銷售的制劑。

3、已在國外上市銷售但尚未在國內上市銷售的藥品（分4個亞類）。

當前第10頁\共有56頁\編于星期四\1點10

4、改變已上市銷售鹽類藥物的酸根、堿基（或者金屬元素），但不改變其藥理作用的原料藥及其制劑。5、改變國內已上市銷售藥品的劑型，但不改變給藥途徑的制劑。

6、已有國家藥品標準的原料藥或者制劑。當前第11頁\共有56頁\編于星期四\1點11新藥申報對藥理毒理研究資料的要求不同注冊分類的藥物所要求提供的藥理毒理研究資料的內容是不同的。（化藥分６類，中藥分９類）

例：雷公藤內酯微乳凝膠化藥1.6類HES130/0.4氯化鈉注射液化藥3.1蛋白琥珀酸鐵原料藥化藥3.1蛋白琥珀酸鐵口服液化藥６類立題和文獻調研非常重要當前第12頁\共有56頁\編于星期四\1點12化藥注冊分類及申報資料項目要求資料分類資料項目注冊分類及資料項目123456化學藥品藥理毒理研究資料16++++++17+*16±*18--18+*16±*18--19+*16±*18--20+*16±*18--21*19*19*19*19*19*1922*13-----23+±±±--24+±±±--25*8-*8*8--26*9-----27+*20*20+*20-當前第13頁\共有56頁\編于星期四\1點13化藥注冊分類與第17號資料注冊分類１，必須提供。注冊分類2，必須提供。所采用的給藥途徑應當與臨床擬用途徑一致。注冊分類３，可用文獻資料代替試驗資料。注冊分類４，提供與已上市銷售藥物比較的主要藥效學試驗資料。如果改變已上市銷售鹽類藥物的酸根、堿基（或者金屬元素）而制成的藥物已在國外上市銷售，則按注冊分類3的申報資料要求辦理。

（如雙氯酚酸鈉片雙氯酚酸鉀片）

注冊分類５、６，可免此號資料。當前第14頁\共有56頁\編于星期四\1點14藥效學研究的一般原則和要求當前第15頁\共有56頁\編于星期四\1點15藥效學研究的一般原則隨機（randomization）對照（control）重復（replication）當前第16頁\共有56頁\編于星期四\1點16隨機原則完全隨機化法配對隨機法：先將動物按性別、體重、窩別或其他因素加以配對。區組隨機法：將全部動物按性別、體重、及其他條件分成若干組。如實驗需要分兩個組當前第17頁\共有56頁\編于星期四\1點17區組隨機法0－4入A組，5－9入B組，則查隨機數字表

A：8例；B：12例將最后4個原來都屬B組的數字，按單數入A組，偶數入B組的原則，這樣A、B兩組都有10例動物。

隨機數05278427416838515696…分組ABABBAABAABBABBABBBB…當前第18頁\共有56頁\編于星期四\1點18對照原則沒有比較就沒有區別。所謂“對照”，即設立非處理因素相同、而處理因素與試驗組不一樣的一組對象。實驗組與對照組的實驗動物在種屬、性別、窩別、體重、健康狀況等方面要盡可能相同。對照有多種形式。當前第19頁\共有56頁\編于星期四\1點19重復原則一是在同樣條件能將實驗結果重復出來，即具有重現性；（抗腫瘤實驗要重復三批動物試驗）另一意思是在實驗中應有足夠的動物數或實驗次數，即應具有一定的樣本數。當前第20頁\共有56頁\編于星期四\1點20藥效學研究的常用方法體內試驗法（重現性較體外實驗差，但接近人體情況，是藥物有效性必須評價的內容。）體外試驗法

血清藥理學：將受試藥物經口給與動物后，取其血清作為藥源加入體外反應系統中研究其藥理作用。該方法的干擾因素太多，其應用的可靠性存在爭議。新藥藥效學試驗以體內實驗為主，體外實驗為輔。

當前第21頁\共有56頁\編于星期四\1點21藥效學研究的常用給藥方法預防性給藥治療性給藥（常用）防治結合的給藥方式當前第22頁\共有56頁\編于星期四\1點22新藥藥效學研究的要求（１）證實主要治療作用及較重要的其他治療作用。主要的藥效作用要明確，并力求反映量效和（或）時效關系。藥效學實驗要盡量反映受試藥物的特點（包括作用強度、作用時間、作用特點等）。創新藥或類別高的中藥的藥效學研究要盡可能揭示藥物的作用機制。當前第23頁\共有56頁\編于星期四\1點23新藥藥效學研究的要求（２）體內、體外實驗方法相結合；以體內實驗為主。分清主次，突出重點。主要作用設１～３項，每項選做２～３種實驗方法。其他作用（輔助療效）酌情做２～５項，每項選做１～２種實驗方法。

宜選用１種以上動物進行藥效試驗；每一方面藥理作用要選用２～３種動物模型或細胞模型來做。當前第24頁\共有56頁\編于星期四\1點24新藥藥效學研究的要求（３）局部用藥發揮全身作用的，盡可能進行體內透皮吸收試驗，以了解藥物吸收程度及速度等，有助于評價藥效。中藥材新的藥用部位，以人工方法動物體內的制取物和引種（養殖藥材）的藥效學試驗，均應與原藥材進行對比試驗。以中藥療效為主的中藥或化藥復方制劑，需做復方制劑及組方中的中藥部分、化藥部分三者在藥效／毒理方面的對比試驗，也叫拆方研究．當前第25頁\共有56頁\編于星期四\1點25新藥藥效學研究的要求（4）中藥及其復方要從多方面反映新藥的藥效（如抗腫瘤中藥：抗癌、扶正、增效、減毒等）。有時藥效不夠明顯或僅見作用趨勢，統計學處理無顯著差異，應如實上報作為參考，但僅適用于輔助療效。傳統中藥的藥效學研究要在中醫藥理論指導下，按照疾病的中醫癥候造模。當前第26頁\共有56頁\編于星期四\1點26主要藥效學試驗資料及文獻資料

（中20/化17）內容體外藥效學試驗體內藥效學試驗作用機制研究原則先體外，后體內；先重要，后次要試驗方案依據、條件簡介試驗結果、分析、評價當前第27頁\共有56頁\編于星期四\1點27主要藥效學資料最終評價評述體外/內試驗主要結果預測可能提示的臨床意義

藥物作用的起效和持續時間活性強度，量效關系有效劑量（IC50或ED50）等結果是否支持擬定的適應證/功能主治？作用機理研究能否確認？不能確認或有矛盾的試驗結果如何處理？當前第28頁\共有56頁\編于星期四\1點28主要藥效學資料常見問題

（解釋，補做）對使用特殊溶媒未設對照不進行解釋藥效未反映量效關系或時效關系的原因不分析陽性藥未顯示應有的療效的原因不清數據未進行統計學處理或選擇方法不妥藥物的特點未分析、總結結果缺乏專業分析、討論、評價當前第29頁\共有56頁\編于星期四\1點29藥效學實驗要考慮的問題當前第30頁\共有56頁\編于星期四\1點30對受試藥物的要求如果用原料或中藥提取物做試驗，要求符合暫定的質量標準。如果用制劑做試驗，要求處方固定，制備工藝、藥品質量標準應基本穩定。要向藥理毒理研究者提供書面的受試藥物的質檢報告。藥效、毒理應采用同一批號的受試藥物。原則上要求中試樣品。不同給藥途徑對受試物的要求不一樣。

問題1當前第31頁\共有56頁\編于星期四\1點31如何選取動物模型？要求：公認性；與臨床疾病的相似性。類型：自發性動物模型（難得）及誘發性或實驗性動物模型（常見）兩大類。很多動物模型有待改進、完善，更多的有待于創新建立。問題2當前第32頁\共有56頁\編于星期四\1點32動物模型自發性動物模型：突變系的遺傳疾病和近交系的腫瘤模型，如高血糖小鼠、肥胖癥小鼠、高血壓大鼠等。實驗性動物模型：通過化學、物理、生物等因素，人工誘發器官、組織或全身性損害，如動物發熱模型、動物佐劑性關節炎模型、四氧嘧啶所致糖尿病大鼠等。當前第33頁\共有56頁\編于星期四\1點33實驗動物實驗動物的三個特殊要求人工培育，遺傳背景清楚生活環境設施應達國標中的等級標準專門用于科研、教學、生產、檢定、實驗等常用實驗動物小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠（倉鼠）、兔、犬、猴、貓、小型豬、雞等。當前第34頁\共有56頁\編于星期四\1點34如何選擇實驗動物？１選用與實驗動物模型要求相適應的實驗動物規格（年齡、體重、性別等）

如二甲苯致耳廓腫試驗，雄性，25~30g；抗炎試驗多選用雄性動物。２無特殊要求的，選成年健康動物，各種動物體重為：小鼠，18~22g；大鼠，150g~250g；家兔，1.5~2.5kg；比格犬，8~10kg；每一批動物體重相差不超過±20%。３選用解剖、生理特點符合實驗目的要求的實驗動物。同品種不同品系的動物存在特殊的反應，應注意選擇應用。如Wistar大鼠、SD大鼠等。問題3當前第35頁\共有56頁\編于星期四\1點35４選用與人的機能、代謝、機構和疾病特點相似的動物。（獼猴、犬、貓、豬等）５選用人獸共患疾病的實驗動物和傳統應用的實驗動物（SARS:果子貍,禽流感：雞）６實驗動物的選擇和應用需注意符合相應的國際規范（GLP、3R原則）當前第36頁\共有56頁\編于星期四\1點36動物實驗應注意的問題遵循國際“３Ｒ”原則

替代（replacement）減少（reduction）

優化（refinement）

善待動物自我保護當前第37頁\共有56頁\編于星期四\1點37觀察指標如何選擇？特異性：如治療類風濕關節炎藥，抗炎、鎮痛、免疫調節等。客觀性：盡量使用儀器。敏感性：量化性：對質反應指標采用計分法，定量組織學方法，人為地進行定量或半定量。重現性：指標穩定，重現性好。問題4當前第38頁\共有56頁\編于星期四\1點38如何確定藥效學試驗的劑量？臨床等效劑量：根據體表面積折算法在同等體表面積單位時的劑量。（適用于安全系數小的藥物如抗癌藥等）根據臨床用量的體重計算（常用）：根據人用劑量按體重計算。根據半數致死量（LD50）計算：可用其1/20～1/10做為有效劑量的預摸。根據文獻估計劑量問題5當前第39頁\共有56頁\編于星期四\1點39考慮長毒劑量設計：藥效試驗高劑量組應低于長毒試驗的中劑量組或低劑量組，為此藥效試驗的高劑量組，不宜超過人用量的20倍(指大鼠試驗)。根據預試驗測定劑量：通過預試驗找出最小有效量，再做正式試驗。預試驗應以等效劑量為標準進行預摸。正式實驗時常常以等效劑量作為中劑量，大、中、小劑量差為2～3的等比級數為宜。當前第40頁\共有56頁\編于星期四\1點40如何設置劑量組？主要藥效學試驗應設三個劑量組，犬與猴等大動物可設2個劑量組；通常按等比數原則，整體動物劑量按2倍或3.16倍遞增，離體器官劑量按3倍或10倍遞增；安全范圍較小的藥物（如抗腫瘤藥物）可采用等差級數分組；化藥和純度比較高的1、5、7類中藥新藥應盡量作出量-效和時-效關系。進行藥效對比時，一般選用中效劑量。

問題6當前第41頁\共有56頁\編于星期四\1點41不同種屬動物和人用劑量

之間如何換算？方法1按公斤體重換算

B種動物劑量（mg/kg)=w×A種動物劑量（mg/kg)例：已知小鼠對某藥的最大耐受量為20mg/kg，計算家兔的給藥劑量。查表1，A種動物為小鼠，B種動物為家兔，交叉點為折算系數w=0.37，故家兔給藥劑量為0.37×20mg/kg=7.4mg/kg1.5kg家兔用藥量為11.1mg。問題7當前第42頁\共有56頁\編于星期四\1點42

表１動物與人體的每公斤體重等效劑量折算系數表折算系數小鼠大鼠豚鼠兔貓犬人(0.02kg)(0.2kg)(0.4kg)(1.5kg)(2kg)(12kg)(60kg)B種動物或成人小鼠(0.02kg)1.001.401.602.702.204.809.01大鼠(0.2kg)0.701.001.141.882.303.606.25豚鼠(0.４kg)0.610.871.001.652.053.005.55兔(1.5kg)0.370.520.601.001.231.763.30貓(2kg)0.300.420.480.811.001.442.70犬(12kg)0.210.280.340.560.681.001.80人(60kg)0.110.160.180.300.370.531.00當前第43頁\共有56頁\編于星期四\1點43表2

不同動物劑量折算系數動物種類小鼠大鼠豚鼠家兔

貓猴犬人K(折算系數)10.710.620.370.300.310.210.11簡化倍數97643321注：不同種類動物等效劑量分別相當于人臨床劑量的2~9倍。誤差允許范圍為0.5~1倍。當前第44頁\共有56頁\編于星期四\1點44怎樣給動物麻醉？不同的麻醉劑有不同的藥理作用和副作用，應根據實驗要求與動物種類而加以選擇。麻醉深度的控制是順利完成實驗獲得正確實驗結果的保證。麻醉期間要采取保溫措施。靜脈注射必須緩慢，肌緊張和痛覺消失應停止注射。多用腹腔注射。麻醉深度不夠，要經過一段時間才能補充麻醉劑。補加劑量不超過原注射量的1/4~1/5。

問題9當前第45頁\共有56頁\編于星期四\1點45常用局部麻醉劑普魯卡因：毒性小，見效快，0.5%～1%用于局部浸潤麻醉；利多卡因：見效快，組織穿透性好，1%～2%用于大動物神經干阻滯麻醉，0.25%～0.5%用于局部浸潤麻醉。當前第46頁\共有56頁\編于星期四\1點46常用全身麻醉劑乙醚：安全度大，麻醉深度易于掌握，麻醉后恢復快。適用于各種動物，尤其是做慢性實驗的動物。戊巴比妥鈉：一次給藥的有效時間可延續3h~5h，毒性小，便宜。常配成3%生理鹽水溶液，可加溫溶解，在常溫下放置1～2月不失藥效。適用于急性動物實驗。狗，iv或ip30~35mg/kg，貓、兔、鼠ip40～45mg/kg。

當前第47頁\共有56頁\編于星期四\1點47如何設立對照組？正常對照組模型對照組陽性

模型陽性藥上市銷售的已知有效的同類藥物原劑型對照問題10當前第48頁\共有56頁\編于星期四\1點48陽性對照藥的選擇要求可比性：藥效肯定的同類中藥或化學藥，要求作用（或主治）相同，給藥途徑盡量一致。合法性：應用《藥典》或部頒標準收載，或近來批準生產的合法藥物。擇優性：選用目前醫學界公認有效的代表藥。問題11當前第49頁\共有56頁\編于星期四\1點49一個受試藥可能有幾個陽性對照藥；陽性藥可設一個或多個劑量組；給藥時間和給藥途徑既要考慮受試藥物能完全發揮作用，也要兼顧陽性對照藥的作用特點，不強求同步一致。模型陽性藥必須作出陽性結果，否則有理由懷疑所選方法和指標的可信度。當前第50頁\共有56頁\編于星期四\1點50每組樣本量如何確定？小動物（大鼠、小鼠、蛙）：10～30例，計量資料≥10例,計數資料≥30例；中等動物（兔、豚鼠）：8～12例。計量資料≥6例,計數資料≥20例；大動物（犬、貓、猴）：5～15例。

避免干擾因素：動物、儀器、藥物。問題12當前第51頁\共有56頁\編于星期四\1點51