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文檔簡介
原核形態與結構第一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五
微生物分為三大類群(根據進化地位、性狀上明顯差別)3.非細胞微生物(acellularmicroorganisms)細胞型1.原核微生物(prokaryotes)2.真核微生物(eukaryoticmicroorganisms)真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、單細胞藻類、原生動物等又稱真細菌(eubacteria),包括普通細菌、放線菌、藍細菌、枝原體、立克次氏體和衣原體等第二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五二、原核生物的定義及種類原核生物:指一大類細胞核無核膜包裹,只存在稱作核區的裸露DNA的原始單細胞生物。
包括兩大類群真細菌(eubacteria)古生菌(archaea)第三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五古生菌(Archaea)
一類生活在條件十分惡劣的極端環境(如高溫、高鹽、高酸等)下的古老的微生物。“伯杰氏手冊”將古生菌分為5個主要類群:產甲烷菌、極端嗜鹽菌、還原硫酸鹽細菌、極端嗜熱S0代謝菌、無細胞壁古生菌。它們的細胞結構(如細胞壁結構和化學、膜脂類結構、分子生物學及代謝)既不完全相同于原核生物,也不同于真核生物,但其結構與真細菌更為接近。
第四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五
原核生物6種類群包括“三菌”細菌化能營養放線菌光能營養:藍細菌
“三體”
支原體
專行細胞寄生
立克次氏體衣原體人工培養:第五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五第一節細菌(bacteria,
bacterium單數)細菌:細胞細短(直徑約0.5um,長0.5~5um)
結構簡單胞壁堅韌二分裂繁殖水生性強單細胞原核生物第六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五生活特性:喜溫暖、潮濕、富含有機物微堿環境(大多數)腐生或寄生,好氧或厭氧,自養或異養第七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五本節內容一、細胞的形態、構造及功能二、細菌的繁殖三、細菌的群體形態四、食品發酵工業、醫藥上常用的細菌第八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五一、細胞的形態、構造及功能(一)個體形態和排列球狀桿狀螺旋狀基本形態第九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五4)異常形態(畸形,衰頹型)
環境條件的變化:物理、化學因子的刺激培養時間過長阻礙細胞正常發育細胞衰老營養缺乏自身代謝產物積累過多異常形態正常形態環境條件恢復正常第十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五常用的染色方法簡單染色法
正染色
革蘭氏染色法鑒別染色法抗酸性染色法
芽孢染色法
死菌
姬姆薩染色法
負染色:莢膜染色法等細菌染色法
活菌:用美藍或TTC(氧化三苯基四氮唑)等作活菌染色第十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(二)大小1、范圍一般細菌的大小范圍:測量單位——mm(微米)0.5~1mm(直徑)0.2~1mm(直徑)
X1~80mm(長度)0.3~1mm(直徑)
X1~50mm(長度)(長度是菌體兩端點之間的距離,而非實際長度)第十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(二)大小1、范圍第十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五光學顯微鏡物鏡的特性在對細菌進行光學顯微鏡觀察時,油鏡最常使用,也最為重要。第十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(nanobacteria)(50nm)
納米細菌最大和最小細菌的個體大小懸殊:(Thiomargaritanamibiensis)(0.75mm)納米比亞硫磺珍珠狀菌10億~100億倍最小:與無細胞結構的病毒相仿最大:肉眼可見第十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五2、測量方法顯微鏡測微尺顯微照相后根據放大倍數進行測算第十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五3、細菌大小測量結果的影響因素個體差異;干燥、固定后的菌體會一般由于脫水而比活菌體縮短1/3-1/4;染色方法的影響,一般用負染色法觀察的菌體較大;幼齡細菌一般比成熟的或老齡的細菌大;環境條件,如培養基中滲透壓的改變也會導致細胞大小的變化。第十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(三)構造特殊構造:部分細菌具有的或一般細菌在特殊環境下才有的構造一般構造:一般細菌都有的構造第十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(三)細胞的結構1、細胞壁(cellwall)(1)概念:是緊貼細胞質膜外側的一層厚實、堅韌的外被。第十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五革蘭氏染色法1)結晶紫初染2)碘溶液媒染3)乙醇脫色4)沙黃復染革蘭氏陰性細菌呈紅色革蘭氏陽性細菌呈深紫色第二十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五G+菌:G-菌:
單層,厚(20~25nm),組分簡單多層,薄(10~15nm),組分復雜
90%肽聚糖(含量高,交聯緊密)內壁層:肽聚糖(含量低,交聯疏松)10%磷壁酸脂多糖外膜磷脂脂蛋白G+細菌與G-細菌細胞壁組成與構造比較
第二十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五
1)G+細菌的細胞壁特點:厚度大(20~25nm)
化學組分簡單,一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。第二十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五
1)G+細菌的細胞壁肽聚糖(peptidoglycan)磷壁酸(teichoicacid)又稱粘肽(mucopeptide)、胞壁質(murein)或粘質復合物(mucocomplex),是真細菌細胞壁中的特有成分。又稱“垣酸”,結合在革蘭氏陽性細菌細胞壁上的一種酸性多糖第二十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五A、肽聚糖厚約20~25nm,由40層左右的網格狀分子交織成的網套覆蓋在整個細胞上。雙糖單位原核生物所特有的已糖第二十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五肽聚糖單體由三部分組成1.雙糖單位2.四肽尾3.肽橋由四個氨基酸分子按L型與D型交替方式連接而成雙糖單位中的β-1,4-糖苷鍵很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解,從而引起細菌因肽聚糖細胞壁的“散架”而死亡。D型氨基酸和DAP可保護肽聚糖免受肽酶的水解第二十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五目前所知的肽聚糖已超過100種,在這一“肽聚糖的多樣性”中,主要的變化發生在肽橋上。肽橋:短肽尾中的第四個氨基酸殘基D-丙氨酸的羧基通過肽鍵與相鄰另一短肽尾中的第三個氨基酸的氨基相連。但有些細菌的肽橋不是兩個短肽尾直接的連接,而是通過一個短肽作為肽橋連接于兩條短肽尾的氨基酸之間,例如金黃色葡萄球菌中的短肽為5個甘氨酸殘基組成。大部分革蘭氏陰性菌中的肽橋不需要短肽而直接通過D-丙氨酸和堿性氨基酸的氨基相連而成。
第二十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五跨越肽聚糖層并與細胞膜相交聯的膜磷壁酸(又稱脂磷壁酸),由甘油磷酸鏈分子與細胞膜上的磷脂進行共價結合后形成。其含量與培養條件關系不大。可用45%熱酚水提取,也可用熱水從脫脂的凍干細菌中提取。B、磷壁酸革氏陽性細菌細胞壁上特有的化學成分(酸性多糖)
按成分分為甘油磷酸核糖醇磷酸
按結合部位分為壁磷壁酸膜磷壁酸壁磷壁酸,它與肽聚糖分子間進行共價結合(以末端磷酸二酯鍵連接在M第6位碳原子上),含量會隨培養基成分而改變,一般占細胞壁重量的10%,有時可接近50%。用稀酸或稀堿可以提取。(參見P18)第二十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五二價陽離子,特別是高濃度的Mg2+。的存在,對于保持膜的硬度,提高細胞膜上需Mg2+的合成酶的活性極為重要。(參見P19)磷壁酸的主要生理功能(自學):p19細胞壁形成負電荷環境,增強細胞膜對二價陽離子的吸收,提高膜結合酶的活力;貯藏磷元素;增強某些致病菌對宿主細胞的粘連、避免被白細胞吞噬以及抗補體的作用;革蘭氏陽性細菌特異表面抗原的物質基礎;噬菌體的特異性吸附受體;能調節細胞內自溶素(autolysin)的活力而調節細胞壁的增長,防止細胞因自溶而死亡。可作為細菌分類、鑒定的依據第二十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五C.
細胞壁中含有一些特殊成分的革氏陽性細菌大部分G+細菌細胞壁含脂量很低,但棒桿菌屬、分支桿菌屬諾卡氏菌屬的細胞壁卻含有豐富的稱為分支菌酸(Mycolicacid)的枝鏈羥基脂質:
R1—CH—CH—COOH
R1,R2為很長的碳氫鏈OHR2
分支菌酸與肽聚糖復合在一起。分支桿菌具有抗酸染色的特性,是由于細胞壁中含分支菌酸的緣故。
分支菌酸被認為與這些細菌(白喉棒桿菌,結核分支桿菌)的致病性有關。第二十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五用抗酸性染色(一種鑒別染色技術)對宿主體內的分枝桿菌病原體(紅色,非抗酸性細菌呈蘭色)進行檢測第三十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五A族鏈球菌細胞壁中有特異性的M蛋白,它有抗吞噬作用。大多數金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)細胞壁中有葡萄球菌A蛋白(SPA),它與肽聚糖共價結合,對胰酶敏感,有抗吞噬和抗噬菌體的作用。第三十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五
2)革蘭氏陰性細菌的細胞壁肽聚糖外膜外膜蛋白周質空間第三十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五A、肽聚糖埋藏在外膜層之內,是僅由1~2層肽聚糖網狀分子組成的薄層(2~3nm),含量約占細胞壁總重的10%,故對機械強度的抵抗力較革蘭氏陽性菌弱。
革蘭氏陽性菌與陰性菌肽聚糖結構的差別:內消旋二氨基庚二酸(m-DAP)(只在原核微生物細胞壁上發現)沒有特殊的肽橋,只形成較為疏稀、機械強度較差的肽聚糖網套(參見P16)第三十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五肽聚糖只存在于真細菌中,古生菌和真核生物細胞壁中沒有肽聚糖。D-谷氨酸、D-丙氨酸、m-DAP在蛋白質中未出現過。第三十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五B、外膜(outermembrane),又稱外壁層(參見P19)位于革蘭氏陰性細菌細胞壁外層,可分為內、中、外三層,從內到外由脂蛋白、磷脂和脂多糖等若干種蛋白質組成的膜。第三十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五B、外膜(outermembrane)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)位于細胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖類物質(相對分子質量在10000以上)由三部分組成:
類脂A(內毒素的主要成分)核心多糖O-特異側鏈(O-多糖,O-抗原)O-特異側鏈糖的種類、順序和空間構型是菌株特異的,是抗原特異性的物質基礎KDO:2-酮-3-脫氧辛糖酸Hep:L-甘油-D-甘露庚糖Man:甘露糖Rha:鼠李糖Gal:半乳糖Abe:阿可比糖第三十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五LPS層的主要功能:1)LPS結構的多變,決定了革蘭氏陰性細菌細胞表面抗原決定簇的多樣性;根據LPS抗原性的測定,沙門氏菌(Salmonella)的抗原型多達2107種,一般都源自O-特異側鏈種類的變化。這種多變性是革蘭氏陰性細菌躲避宿主免疫系統攻擊,保持感染成功的重要手段。也可依此用靈敏的血清學方法對病原菌進行鑒定,在傳染病的診斷中有其重要意義。2)LPS負電荷較強,與磷壁酸相似,也有吸附Mg2+、Ca2+等陽離子以提高其在細胞表面濃度的作用,對細胞膜結構起穩定作用。3)類脂A是革蘭氏陰性細菌致病物質——內毒素的物質基礎;4)具有控制某些物質進出細胞的部分選擇性屏障功能;5)許多噬菌體在細胞表面的吸附受體;第三十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五外膜蛋白(outermembraneprotein)
嵌合在LPS和磷脂層外膜上的蛋白。有20余種,但多數功能尚不清楚。第三十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五外膜蛋白(outermembraneprotein)
孔蛋白(porins)是由三個相同分子量(36000)蛋白亞基組成的一種三聚體跨膜蛋白,中間有一直徑約1nm的孔道,通過孔的開、閉,可對進入外膜層的物質進行選擇。非特異性孔蛋白特異性孔蛋白可通過分子量小于800~900的任何親水性分子只容許一種或少數幾種相關物質通過,如維生素B12和核苷酸等。第三十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五外膜蛋白(outermembraneprotein)脂蛋白(lipoprotein)是一種通過共價鍵使外膜層牢固地連接在肽聚糖內壁層上的蛋白,分子量約為7200。第四十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五C、周質空間(periplasmicspace,periplasm),又稱壁膜間隙
在革蘭氏陰性細菌中,一般指其外膜與細胞膜之間的狹窄空間(寬約12~15nm),呈膠狀。周質空間是進出細胞的物質的重要中轉站和反應場所第四十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五在周質空間中,存在著多種周質蛋白(periplasmicproteins)水解酶類;合成酶類;結合蛋白;受體蛋白;第四十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五1、細胞壁C、周質空間
第四十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五D.粘合位點:P19革蘭氏陰性菌細胞壁的許多部位,外膜與質膜直接接觸,是加固革蘭氏陰性菌細胞壁并支撐外膜的另一結構。有人認為物質可通過粘合位點進入細胞而不必穿越周周空間。
第四十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五革蘭氏陽性和陰性細菌一系列生物學特性的比較(參見周德慶P16,表1-3)第四十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五革氏陽性菌革氏陰性菌肽聚糖含量高,交聯密含量低,交聯疏松脂類一般無含量高乙醇作用脫水作用脂溶作用孔徑縮小,結構更緊密孔徑增大,結構變得疏松大分子復合物滯留大分子復合物溶出結果紫色紅色細胞壁結構與革蘭氏染色的關系第四十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(二)細胞的結構(5)細胞壁缺陷細菌:
自發突變——L型細菌
實驗室或宿主體內形成基本去盡——原生質體(G+)缺壁細菌
人工去壁
部分去除——球狀體(G-)
在自然界長期進化中形成——枝原體(參見P21)第四十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(5)細胞壁缺陷細菌:1)L型細菌(L-formofbacteria)細菌在某些環境條件下(實驗室或宿主體內)通過自發突變而形成的遺傳性穩定的細胞壁缺陷變異型。因英國李斯德(Lister)預防研究所首先發現而得名(1935年,念珠狀鏈桿菌Streptobacillusmoniliformis)大腸桿菌、變形桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、分枝桿菌和霍亂弧菌等20多種細菌中均有發現,被認為可能與針對細胞壁的抗菌治療有關。特點:沒有完整而堅韌的細胞壁,細胞呈多形態;有些能通過細菌濾器,故又稱“濾過型細菌”;對滲透敏感,在固體培養基上形成“油煎蛋”似的小菌落(直徑在0.1mm左右);第四十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五1、細胞壁(5)細胞壁缺陷細菌:2)原生質體(protoplast)在人為條件下,用溶菌酶處理或在含青霉素的培養基中培養而抑制新生細胞壁合成而形成的僅由一層細胞膜包裹的,圓球形、對滲透壓變化敏感的細胞,一般由革蘭氏陽性細菌形成。特點:對環境條件變化敏感,低滲透壓、振蕩、離心甚至通氣等都易引起其破裂;有的原生質體具有鞭毛,但不能運動,也不被相應噬菌體所感染;在適宜條件(如高滲培養基)可生長繁殖、形成菌落,形成芽孢。及恢復成有細胞壁的正常結構。比正常有細胞壁的細菌更易導入外源遺傳物質,是研究遺傳規律和進行原生質體育種的良好實驗材料。第四十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(5)細胞壁缺陷細菌:3)球狀體(sphaeroplast),又稱原生質球采用上述同樣方法,針對革蘭氏陰性細菌處理后而獲得的殘留部分細胞壁(外壁層)的球形體。與原生質體相比,它對外界環境具有一定的抗性,可在普通培養基上生長。第五十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(5)細胞壁缺陷細菌:4)支原體(Mycoplasma)在長期進化過程中形成的、適應自然生活條件的無細胞壁的原核生物。因它的細胞膜中含有甾醇(一般原核生物沒有),所以即使缺乏細胞壁,其細胞膜仍有較高的機械強度。第五十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五青霉素的殺菌作用作用原理:β-內酰胺環的結構與肽聚糖單體五肽尾末端D-Ala-D-Ala二肽結構相近,因而可競爭性地抑制轉肽酶的活性,抑制肽聚糖單體間的交聯,形成缺損的細胞壁。作用特點:對生長旺盛的革氏陽性菌有明顯的抑制作用。第五十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五青霉素b-內酰胺環結構與D-丙氨酸末端結構相似,從而能占據D-丙氨酸的位置與轉肽酶結合,并將酶滅活,肽鏈之間無法彼此連接,抑制了細胞壁的合成。第五十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五溶菌酶的作用:通過水解N-乙酰葡萄糖胺與N-乙酰胞壁酸間的β-1,4-糖苷鍵,引起細胞壁“散架”,形成細胞壁完全脫去或部分除去的原生質體(革氏陽性菌)或球狀體(革氏陰性菌)。
在低滲溶液中,原生質體或球狀體因吸水膨脹并最終導致破裂而死亡;在等滲蔗糖溶液中,能得到原生質體或球狀體。第五十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五古生菌的細胞壁周德慶p16古生菌除了熱原體屬沒有細胞壁外,其余都有與真細菌類似功能的細胞壁。古生菌細胞壁中沒有真正的肽聚糖,而是由假肽聚糖、糖蛋白或蛋白質構成。假肽聚糖:
雙糖單位:N-乙酰葡糖胺β–1,3糖苷鍵N-乙酰塔羅糖胺(不被溶菌酶水解)肽尾:L-Glu,L-Ala,L-Lys3個肽橋:L-Glu1個氨基酸組成
第五十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五2、細胞膜(cellmembrane)
細胞質膜(cytoplasmicmembrane),又稱質膜(plasmamembrane)、細胞膜(cellmembrane)或內膜(innermembrane),是緊貼在細胞壁內側、包圍著細胞質的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜,厚約7~8nm,由磷脂(占20%~30%)和蛋白質(占50%~70%)組成。第五十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五觀察方法:質壁分離后結合鑒別性染色(用中性或堿性染料染色)
在光學顯微鏡下觀察;原生質體破裂;超薄切片電鏡觀察;電鏡觀察到的細胞質膜,是在上下兩暗色層之間夾著一淺色中間層的雙層膜結構,這與細胞膜的化學組成有關。第五十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(1)化學組成:磷脂(20~30%)
蛋白質(50~70%)A.磷脂p22親水的極性端疏水的非極性端第五十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五A.磷脂在極性頭的甘油3C上,不同種微生物具有不同的R基,如磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸或磷脂酰肌醇等。非極性尾則由長鏈脂肪酸通過酯鍵連接在甘油的C1和C2位上組成,其鏈長和飽和度因細菌種類和生長溫度而異。第五十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五A.磷脂在生理溫度下,脂肪酸末端排列成固定的晶格。不飽和脂肪酸的雙鍵可導致膜結構的變形。當磷脂分子中二者同時存在時,在一定條件下就阻礙了形成晶格結構所需要的有秩序排列。膜的流動性很大程度上取決于不飽和脂肪酸的結構和相對含量。細胞膜上長鏈脂肪酸的鏈長和飽和度因細菌種類和生長溫度而異,通常生長溫度要求越高的種,其飽和度也越高,反之則低。第六十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五甾醇類物質由磷脂分子形成的雙分子膜中加入甾醇類物質可以提高膜的穩定性真核生物細胞膜中一般含有膽固醇等甾醇,含量為5%-25%。原核生物與真核生物的最大區別就是其細胞膜中一般不含膽固醇。而在幾種細菌中,含有與固醇類似的分子稱為類何帕烷(藿烷類化合物)(hopanoid)。甾醇的一般結構第六十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五B.膜蛋白根據作用功能蛋白:擔負生理機能(轉運蛋白、電子傳遞蛋白、ATP合成酶、合成細胞壁及糖被的酶)
結構蛋白:維持膜結構
根據分布
整合蛋白(integralprotein)或內嵌蛋白(intrinsicprotein)
周邊蛋白(peripheralprotein)或膜外蛋白(extrinsicprotein)
約占細菌細胞膜的50%~70%,比任何一種生物膜都高,而且種類也多。--------細胞膜是重要的代謝活動中心。第六十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五具運輸功能的整合蛋白(integralprotein)或內嵌蛋白(intrinsicprotein)具有酶促作用的周邊蛋白(peripheralprotein)或膜外蛋白(extrinsicprotein)第六十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(2)結構
①膜的主體是脂質雙分子層;②脂質雙分子層具有流動性;③整合蛋白因其表面呈疏水性,故可“溶”于脂質雙分子層的疏水性內層中;④周邊蛋白表面含有親水基團,故可通過靜電引力與脂質雙分子層表面的極性頭相連;⑤脂質分子間或脂質與蛋白質分子間無共價結合;⑥脂質雙分子層猶如一“海洋”,周邊蛋白可在其上作“漂浮”運動,而整合蛋白則似“冰山”狀沉浸在其中作橫向移動。1972年,辛格(J.S.Singer)和尼科爾森(G.L.Nicolson)
液態鑲嵌模型(fluidmosaicmodel)
P24第六十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五細胞膜是高度有序且不對稱的系統,同時又是柔韌、動態的。流動性:1)膜經受一定程度變形而不被破壞2)膜中各種成分按需要調整分布,表現出膜的多種功能不對稱性:保證膜的方向性功能如:能量轉換中質子梯度產生物質的傳遞第六十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(3)細胞膜的生理功能①物質運輸,選擇性地控制營養物質和代謝產物的運送;②滲透屏障,維持細胞內正常的滲透壓;③合成細胞壁和糖被的各種組分(肽聚糖、磷壁酸、LPS、
莢膜多糖等)的重要基地;④膜上含有氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代謝的酶系,是細胞的產能場所;⑤鞭毛基體的著生部位和鞭毛旋轉的供能部位;(參見P24)第六十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(二)細胞的結構(4)間體(mesosome):細胞質膜內褶而形成的泡囊狀、管狀或層狀的構造。多見于革蘭氏陽性細菌。青霉素酶分泌、DNA復制、分配以及細胞分裂有關“間體”僅是電鏡制片時因脫水操作而引起的一種贗像第六十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五①古生菌與真細菌細胞膜中的磷脂有明顯差異古生菌:異戊二烯甘油醚真細菌:磷酸甘油酯
②古生菌細胞膜中存在著獨特的單分子層或單、雙分子層混合膜(3)古生菌細胞膜的獨特性和多樣性參見周德慶p20第六十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五P25
細胞質的主要成分為核糖體、貯藏物、酶類、中間代謝物、各種營養物和大分子的單體等,少數細菌還有類囊體、羧酶體、氣泡或伴孢晶體等有特定功能的組分。3、細胞質和內含物
細胞質(cytoplasm)是細胞質膜包圍的除核區外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質的總稱。含水量約80%。第六十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五
一些內含物無膜包裹,自由存在于細胞質中,如多聚磷酸鹽顆粒、藻青素顆粒和一些糖原顆粒
另一些內含物則由單層膜(不是典型的雙層膜)所包裹,如聚β-羥丁酸顆粒、某些糖原和硫粒、羧酶體及氣泡等。
內含物膜在組成上各不相同,有些為蛋白質,而另一些則包含脂類。第七十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(1)顆粒狀貯藏物(reservematerials)
各種有機或無機物質的顆粒,主要功能是貯存(碳化合物、無機物和能源),也可將分子連接為特定的形式來降低滲透壓。
糖原:大腸桿菌、克雷伯氏菌、芽孢桿菌和藍細菌等
碳源及能源類
聚β-羥丁酸(PHB):固氮菌、產堿菌和腸桿菌等
硫粒:紫硫細菌、絲硫細菌、貝氏硫桿菌等貯藏物氮源類藻青素:藍細菌
藻青蛋白:藍細菌
磷源(異染粒):迂回螺菌、白喉棒桿菌、結核分枝桿菌P26第七十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五A.聚-β-羥丁酸(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)在含乙酸或丁酸的培養基中生長時,細胞內貯藏的PHB可達其干重的60%。細菌特有的一種類脂性質的碳源類貯藏物(P26)PHB于1929年被發現,至今已發現60屬以上的細菌能合成并貯藏。第七十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五作用:細菌特有的碳源和能源儲藏物維持胞內中性環境降低胞內滲透壓第七十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五用途它無毒、可塑、易降解,被認為是生產醫用塑料、生物降解塑料的良好原料。第七十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五B.多糖類貯藏物在真細菌中以糖原為多糖原粒較小,不染色需用電鏡觀察,用碘液染成紅棕色,可在光學顯微鏡下看到。糖原粒淀粉粒有的細菌積累淀粉粒,用碘液染成深蘭色。第七十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(參見P26)C.異染粒(metachromaticgranules),又稱迂回體或捩轉菌素用蘭色染料染色后呈紅紫色組成:無機偏磷酸的聚合物(一般在含磷豐富的環境下形成。)功能:磷源和能量可降低細胞的滲透壓在暗視野顯微鏡下看到的迂回螺菌(Spirillum
volutans)異染粒(迂回體)第七十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五D.硫粒(sulfurglobules)很多光合細菌(紫硫細菌、紫色細菌、綠色細菌和藍細菌),在進行產能代謝或生物合成時,常涉及對還原性的硫化物(H2S,硫代硫酸鹽等)的氧化,所產生的折光性很強的硫粒,可在周質空間或細胞質中積累。
功能:硫元素儲藏物參與產能代謝和生物合成第七十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五E.藻青素(cyanophycin)
氮源貯藏物,同時還兼有貯存能源的作用。通常存在于藍細菌中。由含精氨酸和天冬氨酸殘基(1:1)的分枝多肽所構成,分子量在25000~125000。第七十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五微生物儲藏物的特點及生理功能:不同微生物其儲藏性內含物不同(例如厭氣性梭狀芽孢桿菌只含PHB,大腸桿菌只儲藏糖原,但有些光和細菌二者兼有)微生物合理利用營養物質的一種調節方式當環境中缺乏能源而碳源豐富時,細胞內就儲藏較多的碳源類內含物,甚至達到細胞干重的50%,如果把這樣的細胞移入有氮的培養基時,這些儲藏物將被作為碳源和能源而用于合成反應。儲藏物以多聚體的形式存在,有利于維持細胞內環境的平衡,避免不適合的pH,滲透壓等的危害。(例如羥基丁酸分子呈酸性,而當其聚合成聚-β-羥丁酸(
PHB)就成為中性脂肪酸了,這樣便能維持細胞內中性環境,避免菌體內酸性增高。)儲藏物在細菌細胞中大量積累,還可以被人們利用。第七十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(2)磁小體(megnetosome)
趨磁細菌細胞中含有的大小均勻、數目不等的Fe3O4顆粒,外有一層膜包裹。P26存在:少數水生螺菌屬等
第八十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五功能:導向作用。即借鞭毛游向對該菌最有利的泥、水界面微氧環境處生活。實用前景:生產磁性定向藥物或抗體,制造生物傳感器等。第八十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(三)細胞的結構(3)羧酶體(carboxysome)一些自養細菌(藍細菌、硝化細菌和硫桿菌)細胞內由單層膜圍成的多角形或六角形內含物內含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(卡爾文循環的關鍵酶)作用:自養細菌的CO2固定場所采用免疫電鏡技術觀察藍細菌cyanobacteriumChlorogloeopsisfritischii中的羧酶體(參見周德慶P21)第八十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(4)氣泡(gasvocuoles)
許多光合營養型、無鞭毛運動的水生細菌中存在的充滿氣體的泡囊狀內含物,大小為0.2~1.0μm×75nm,內由數排柱形小空泡組成,外有2nm厚的蛋白質膜包裹。功能:調節細胞比重以使細胞漂浮在最適水層中獲取光能、O2和營養物質藍細菌生長時依靠細胞內的氣泡而漂浮于湖水表面,并隨風聚集成塊,常使湖內出現“水花”。有些厭氧性光合細菌利用氣泡集中在水下10-30米深處,這樣既能吸收適宜的光線和營養進行光合作用,又可以避免直接與氧接觸。專性好氧的鹽桿菌屬(Halobacterium)的細菌,卻生活在含氧極少的飽和鹽水中,它們細胞中氣泡顯著,其作用被認為是使菌體浮于鹽水表面,以保證細胞更接近空氣。(參見P25)第八十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五氣泡的膜只含蛋白質而無磷脂。二種蛋白質相互交連,形成一個堅硬的結構,可耐受一定的壓力。膜的外表面親水,而內側絕對疏水,故氣泡只能透氣而不能透過水和溶質。第八十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(三)細胞的結構(5)核糖體(ribosome)
功能:合成蛋白質的場所鏈霉素等抗生素通過作用于細菌核糖體的30S亞基而抑制細菌蛋白質的合成,而對人的80S核糖體不起作用,故可治療細菌引起的疾病,而對人體無害。原核生物核糖體的沉降系數是70S50S大亞基30S小亞基
在細菌中,80%~90%核糖體串連在mRNA上,以多聚體的形式存在。第八十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(三)細胞的結構(6)質粒(plasmid)放第八章“微生物學遺傳學”講第八十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五4、核區(nuclearregionorarea)
無核膜、無固定形態的原始細胞核
細菌染色體DNA:
1個環狀雙鏈(通常),高度折疊
細菌染色體DNA也與一些堿性蛋白結合(不是組蛋白,稱為類組蛋白),這種結合使DNA得以超螺旋,具有穩定細菌染色體DNA、適應和調節DNA復制、轉錄、轉譯的作用。又稱核質體,原核,擬核、核基因組、細菌染色體第八十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五功能:負載遺傳信息的主要物質基礎細菌染色體的組織結構:
大腸桿菌染色體由50~100個結構域(domain)或環(loop)組成。其固定在蛋白質-膜的核心或支架上,而此核心或支架又與內膜系統中的間體相連,起著阻止DNA旋轉的屏障作用,以確保結構域在拓撲學上的相互獨立。第八十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五5、芽孢(spore)P331)概念
某些細菌在其生長發育后期,在細胞內形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強的休眠體,稱為芽孢(偶譯“內生孢子”,endospore)。第八十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五P252)芽孢的特點A.抗逆性強(熱、干燥、輻射等)。整個生物界中抗逆性最強的生命體,是否能消滅芽孢是衡量各種消毒滅菌手段的最重要的指標。營養細胞:
60℃,10~20min肉毒梭菌芽孢:
121℃,10min常規加壓蒸汽滅菌的條件:121℃,15min以上115℃,30min以上B.芽孢是休眠體,不是繁殖體。在適宜的條件下可以重新轉變成為營養態細胞(每個細胞只形成一個芽孢,一個芽孢萌發也只形成一個營養體細胞,所以,芽孢僅僅是芽孢細菌生活史中一部分)。產芽孢細菌的保藏多用其芽孢。C.折光性強,不易著色(芽孢染色法)。
第九十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五3)形成條件A.由菌種的遺傳特性決定必需的養料(碳源和/或氮源)耗盡而停止生長時(既進入穩定期時)形成;富含有機氮的培養基(蘇云金芽孢桿菌);培養基中加入Mn2+溫度改變
B.所需條件因種而異各種細菌有其形成芽孢的最適條件,包括pH、供氧情況、溫度、營養、培養基中的離子濃度和種類等。第九十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五4)形成芽孢的菌種產芽孢的細菌多為G+桿菌,也有一些球菌桿菌(好氣性)芽孢桿菌屬(Bacillus)主要產芽孢菌(厭氣性)梭菌屬(Clostridium)球菌:芽孢八疊球菌屬第九十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五P345)構造與耐熱機制芽孢與母細胞相比不論化學組成(皮層含吡啶二羧酸鈣DPA-Ca,芽孢肽聚糖)、細微結構、生理功能等方面都完全不同(參見P33圖2-27)滲透調節皮層膨脹學說芽孢衣結構致密對多價陽離子和水分的透性很差皮層的離子強度很高,產生極高的滲透壓奪取芽孢核心的水分,結果造成皮層的充分膨脹。核心部分的細胞質卻變得高度失水,因此,具極強的耐熱性。第九十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五芽孢抗熱性的可能原因芽孢衣的不通透性;原生質體的高度脫水狀態;含高濃度的吡啶二羧酸鈣DPA-Ca(形成耐熱凝膠樣的物質);存在酸溶性結合蛋白對DNA的穩定作用;含DNA修復酶,可對核心復活后的出芽和生長過程中的DNA進行修復。與所含的一些酶有關。這些酶本身并不抗熱,只是在芽孢中與一些物質結合之后才有抗熱性。(如蠟狀芽孢桿菌中的丙氨酸消旋酶附著在芽孢衣上時抗熱,與芽孢衣分離后不抗熱。)第九十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五6)芽孢形成與萌發第九十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五萌發:3個階段活化:加熱、化學物質(Mn2+,表面活性劑,氨基酸,糖)出芽生長第九十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(三)細胞的結構5、特殊的休眠構造——芽孢(參見P53-54)3)芽孢的形成與芽孢的萌發過程第九十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五7)研究芽孢的意義消毒滅菌的最重要的指標肉類罐頭:肉毒梭狀芽孢桿菌外科器械:破傷風梭菌、產氣莢膜梭菌工業發酵:嗜熱脂肪芽孢桿菌121℃,15min或115℃,30min以上保藏菌種分類依據(芽孢的形態、大小和著生位置是細菌分類和鑒定中的重要指標。)篩選菌種(土樣+肉湯培養基(80℃,10~15min)有些產芽孢細菌可伴隨產生有用的產物,如抗生素(短桿菌肽、桿菌肽等)第九十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五8)伴孢晶體(parasporalcrystal)
(參見P34)
少數芽孢桿菌,例如蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis,簡稱“Bt”)在其形成芽孢的同時,會在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體——δ內毒素,稱為伴孢晶體。用途:伴孢晶體對200多種昆蟲尤其是鱗翅目的幼蟲有毒殺作用,因而可將這類產伴孢晶體的細菌制成有利于環境保護的生物農藥——細菌殺蟲劑。特點:不溶于水,對蛋白酶類不敏感;容易溶于堿性溶劑。第九十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五伴孢晶體鱗翅目幼蟲口服伴孢晶體在腸道迅速溶解(中腸pH為9.0-10.5)吸附于上皮細胞,引起滲透性喪失,腸道穿孔腸道中的堿性溶液進入血液,后者pH升高,昆蟲全身麻痹而死亡第一百頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五9)細菌的其他休眠構造(參見周德慶P26)孢囊(cyst):營養細胞外壁加厚、細胞失水形成抗干旱、紫外線和電離輻射,但不抗熱的圓形休眠體。
棕色固氮菌(Azotobactervinelandii)第一百零一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(三)細胞的結構6、糖被(glycocalyx)1)概念
包被于某些細菌細胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質。糖被按其有無固定層次、層次厚薄又可細分為莢膜(capsule或macrocapsule,大莢膜)、微莢膜(microcapsule)、粘液層(slimelayer)和菌膠團(zoogloea)。P28第一百零二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五糖被
包裹在單個細胞上在壁上有固定層層次厚:(大)莢膜層次薄:微莢膜松散,未固定在細胞壁上:粘液層包裹在群體細胞上:菌膠團(分泌的粘液將許多菌體粘合在一起,形成分支狀的大型粘膠物,細菌群體的共同糖被)第一百零三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五2)成分組分依種而異多糖、多肽或蛋白質(多糖居多)
菌種的遺傳特性決定;也與環境條件有關糖被并非細胞生活的必要結構,但它對細菌在環境中的生存有利。3)形成條件第一百零四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五4)特性(1)對染料親和力低。經特殊的莢膜染色,特別是負染色(又稱背景染色)后可在光學顯微鏡清楚地觀察到它的存在。第一百零五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五4)特性(1)對染料親和力低。經特殊的莢膜染色,特別是負染色(又稱背景染色)后可在光學顯微鏡清楚地觀察到它的存在。(2)在固體培養基上形成表面濕潤、粘液狀的光滑型菌落,即S型菌落。不產糖被的細菌形成表面干燥、粗糙的粗糙型菌落,即R型菌落。在液體培養基中使培養掖的粘度增加。
第一百零六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五5)功能(p23)(1)保護作用(保護菌體免受干旱損傷;防止噬菌體的吸附和裂解;保護致病菌免受宿主白細胞吞噬。)(2)儲藏養料(營養缺乏時重新使用)(3)致病作用(是某些病原菌的毒力因子,如S型肺炎鏈球菌;也是某些病原菌的粘附因子,如唾液鏈球菌和變異鏈球菌附著牙齒表面——齲齒)(4)堆積代謝廢物(5)透性屏障(保護細菌免受重金屬離子毒害)(6)細菌間的信息識別第一百零七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五6)應用(1)菌種鑒定:利用糖被物質的血清學反應(2)制備代血漿和生化試劑(腸膜狀明串珠菌的葡聚糖糖被)(3)制備黃原膠:石油開采、印染、食品等工業(4)污水處理:形成菌膠團的細菌(如生枝動膠菌)是活性污泥中的主要微生物。利野油菜黃單胞菌(Xantomonascampestris)第一百零八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(1)食品發粘變質(2)污染發酵液,阻礙發酵的正常進行(3)增強致病力(4)發生齲齒弊第一百零九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五7、鞭毛(flagellum,復flagella)1)概念P29某些細菌細胞表面著生的一至數十條長絲狀、螺旋形的附屬物,具有推動細菌運動功能,為細菌的“運動器官”。所有弧菌、螺菌和假單胞菌,約半數桿菌和少數球菌有鞭毛第一百一十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五鞭毛的有無和著生方式具有十分重要的分類學意義單端鞭毛端生叢毛兩端生鞭毛周生鞭毛第一百一十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五2)觀察和判斷細菌鞭毛的方法電子顯微鏡直接觀察鞭毛長度:15~20μm;直徑:0.01~0.02μm光學顯微鏡下觀察:鞭毛染色和暗視野顯微鏡根據培養特征判斷:半固體穿刺接種:菌體沿穿刺線擴散生長平板培養基上的菌落形狀:大、薄、不規則,邊緣不整齊第一百一十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五3)結構及運動機制(參見P31圖2-25)革蘭氏陰性菌的鞭毛構造三部分基體鉤形鞘(鞭毛鉤)鞭毛絲第一百一十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五鞭毛的生長方式是在其頂部延伸鞭毛的合成是的自裝配的一個極好例子。其過程“是一個比我們任何人以前所想象的都要更復雜的過”。鞭毛絲組裝所需要的信息就存在于鞭毛蛋白亞基結構中。第一百一十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五鞭毛推動細菌運動的特點速度一般速度在每秒20~80μm范圍,最高可達每秒100μm(每分鐘達到3000倍體長),超過了陸上跑得最快的動物——獵豹的速度(每分鐘1500倍體長或每小時110公里)。拴菌實驗(techered-cellexperiment):研究鞭毛運動機制將細菌放在固定有鞭毛絲或鞭毛鉤蛋白抗體的載玻片上時,鞭毛被其抗體固定,細胞卻圍繞鞭毛迅速旋轉。同樣,如果鞭毛吸附在聚苯乙烯顆粒上,這些顆粒固定了鞭毛而使細菌圍繞鞭毛軸自旋。
第一百一十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五方式細菌以推進方式做直線運動,鞭毛主要通過旋轉來推動細菌運動,猶如輪船的螺旋漿以翻騰形式做短促轉向運動。第一百一十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五
細菌的趨避運動
鞭毛的功能是運動,這是原核生物實現其趨性(taxis)即趨向性的最有效方式。趨化作用(chemotaxis):細菌對某化學物質敏感,通過運動聚集于該物質的高濃度或低濃度區域。趨光性(phototaxis):有的細菌能區別不同波長的光而集中在一定波長光區內。趨磁性(magnetotaxis):趨磁細菌根據磁場方向進行分布。第一百一十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五8、菌毛(fimbria,復數fimbriae)長在細菌體表的纖細、中空、短直、數量較多的蛋白質類附屬物,具有使菌體附著于物體表面的功能。(參見P32)第一百一十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五每個細菌約有250~300條菌毛。有菌毛的細菌一般以革蘭氏陰性致病菌居多,借助菌毛可把它們牢固地粘附于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道等的粘膜上,進一步定植和致病。第一百一十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五9、性毛(pili,單數pilus)構造和成分與菌毛相同,但比菌毛長,數量僅一至少數幾根。一般見于革蘭氏陰性細菌的雄性菌株(即供體菌)功能向雌性菌株(即受體菌)傳遞遺傳物質;
RNA噬菌體的特異性吸附受體。第一百二十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五比較:
鞭毛菌毛性菌毛粗長,柔,少細短,硬直,多比菌毛長,1~數根
運動附著傳遞遺傳物質
G+,G-都有G-較多G-雄性菌株相同點:菌體表面的中空、絲狀蛋白質類附屬物第一百二十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五二、細菌的繁殖方式:
裂殖為主(絕大多數為二等分裂)第一百二十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五分裂過程(1)核的分裂和隔膜的形成(2)橫隔壁的形成(3)子細胞的分離第一百二十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五三、細菌的群體形態(一)固體培養基上(內)的群體形態
1.菌落的定義(p36):將微生物的單個細胞或少量同種細胞接種到固體培養基表面(內部),在適宜的條件下培養一定時間后,在培養基表面(或內部)形成的有一定形態和構造、肉眼可見的細胞集團。
(劃線分離、涂布分離、傾注分離)菌苔:眾多菌落連成一片(斜面接種物)
第一百二十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五菌落特征描述:p36
大小、形狀、隆起程度、邊緣情況、表面狀態、光澤、質地、顏色、透明度第一百二十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五2.細菌菌落的特點
濕、粘、半透明、易挑起、質地均勻、內外正反顏色一致
第一百二十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五不同形態結構細菌的菌落的特點球菌菌落:小、圓、隆起、邊緣整齊桿菌菌落:較大、較圓鞭毛菌菌落:大、扁平、形態不規則或邊緣多缺刻芽孢菌菌落:不透明、粗糙、多褶皺、邊緣不規則莢膜菌菌落:光滑、粘稠、濕潤(透明蛋清狀)
第一百二十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五3.菌落的用途分離純化分類鑒定
細菌菌落也受環境的影響而產生變化,故在菌種鑒定時要注意檢測條件一致。細胞計數選種與育種第一百二十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五(二)半固體培養基上(內)群體形態穿刺接種:運動能力明膠液化情況(三)液體培養基中的群體形態渾濁沉淀菌膜、菌醭第一百二十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五四、食品發酵、醫藥工業常見的細菌枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)
專性好氧菌
個體形態:
G+桿狀,周生鞭毛,有芽孢(橢圓到柱狀,中生到近端生,芽孢囊不膨大)
菌落形態:粗糙,不透明,擴張,污白色
用途:淀粉酶、蛋白酶桿菌肽(bacitracin)抗菌譜與青霉素G相似,對G
+有抑制作用第一百三十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五2.醋酸桿菌個體形態:G-,短桿,單生、成對或鏈狀。培養時間長易形成絲狀、彎曲、棒狀等多種畸形。最適生長溫度:30℃最適pH:5.4~6.3用途:醋酸發酵惡臭醋桿菌(AS.1.41)巴氏醋酸菌(滬釀1.01)第一百三十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五3.保加利亞乳桿菌(Lactobacillusbulgaricus)
(改名為德氏乳桿菌保加利亞亞種)形態:G+,桿狀(常為長桿),成單或成鏈,最適生長T:40~43℃用途:酸奶發酵劑4.嗜熱鏈球菌(Streptococcusthermophilus)
形態:G+,球狀,成對或成鏈最適生長T:40~41℃用途:酸奶發酵劑第一百三十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五5.北京棒桿菌(Corynebacteriumpekinese)形態:G+,短桿或小棒狀,單個或八字排列,無芽孢最適生長溫度:30~32℃用途:谷氨酸發酵6.大腸埃希氏菌(Escherichiacoli)形態:G-,短桿最適生長溫度:37℃用途:食品衛生重要指示菌,作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量
第一百三十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五7.腸膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)G+球菌,常成對或鏈形排列兼性厭氧用途:生產右旋糖酐(代血漿)和葡聚糖(sephadex)8.雙歧桿菌(Bifidobacterium)G+、彎曲和常分叉的桿菌,專性厭氧分離自哺乳嬰兒糞便,能在腸道定植的益生菌最適生長溫度:37℃用途:微生態調節劑第一百三十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五7.蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)用途:細菌殺蟲劑第一百三十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五本節重點一、細菌的形態與大小二、細菌的細胞結構與功能1.細胞壁的結構圖示G+和G-菌細胞壁的主要構造,并簡要說明其異同。2.肽聚糖的構造單體組成;
G+和G-菌肽聚糖結構的異同;溶菌酶與青霉素抑菌作用的機制和特點
第一百三十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五3.LPS三個組成部分;與抗原性有關的部分和毒性的物質基礎4.革蘭氏染色機理5.四類缺壁細菌形成、特點和實際應用;原生質體的制備方法6.細胞膜化學組成;結構模型;7.內含物
第一百三十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五8.芽孢(是休眠體,細胞分化體,不是繁殖體)耐熱機制;產芽孢的微生物種類;與孢囊的不同點;9.糖被、鞭毛、菌毛10.古生菌種類在結構組分上與真細菌的不同(肽聚糖、細胞膜、16SrRNA)第一百三十八頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五三、細菌的繁殖方式四、菌落定義;細菌菌落的一般特征;細胞形態與菌落形態間的相關性;
五、食品發酵工業常用微生物(菌名,用途)第一百三十九頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五名詞:
菌落,芽孢,伴孢晶體,肽聚糖磷壁酸,LPS,原生質體,間體,古生菌,S型菌落,R型菌落,L型細菌第一百四十頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五第二節放線菌(Actinomycetes)第一百四十一頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五第二節放線菌(Actinomycetes)放線菌菌落中的菌絲常從中心向四周輻射狀生長,并因此得名。多數呈菌絲狀生長以無性孢子繁殖、陸生性強
高G+C含量的革氏陽性原核生物
(60%~70%)mol%
放線菌是一類第一百四十二頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五一方面,在形態上具有分枝狀菌絲、菌落形態與霉菌相似,以孢子進行繁殖,這些特征與霉菌相似。放線菌是一類“介于細菌與絲狀真菌之間又接近細菌的一類絲狀單細胞原核生物”近代生物學技術放線菌實際上是屬于真細菌范疇內的原核微生物,只不過其細胞形態為分枝狀菌絲。另一方面,細胞結構和細胞壁化學組成與細菌相似,同屬原核生物第一百四十三頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五放線菌與細菌的相同點:放線菌屬真細菌范疇屬于原核生物,為單細胞;菌絲直徑與細菌相仿;細胞壁主要成分是肽聚糖;有的放線菌產生有鞭毛的孢子,其鞭毛類型與細菌相同;放線菌的噬菌體形態與細菌的相似;
最適生長pH與多數細菌相似;DNA重組方式相同;核糖體同為70S;對溶菌酶敏感;凡對細菌敏感的抗生素,對放線菌亦敏感;第一百四十四頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五放線菌與細菌的不同點:細胞為分枝狀菌絲;菌落形態與霉菌相似;孢子繁殖;第一百四十五頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五二、放線菌分布特點及與人類的關系以孢子或菌絲狀態極其廣泛地存在于自然界,土壤中最多,其代謝產物使土壤具有特殊的泥腥味。能產生大量的、種類繁多的抗生素(在已報道過的近萬種抗生素中,約70%由放線菌產生;而其中90%由鏈霉菌屬產生)。有的放線菌可生產維生素(B12)、酶制制(葡萄糖異構酶,蛋白酶);此外,在甾體轉化、石油脫蠟、烴類發酵、污水處理等方面也有應用。少數寄生型放線菌可引起人、動物(如皮膚、腦、肺和腳部感染)、植物(如馬鈴薯和甜菜的瘡痂病)的疾病。第一百四十六頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五一、形態構造單細胞,大多由分枝發達的無隔膜菌絲組成;菌絲直徑與桿菌類似,約1mm;細胞壁組成與細菌類似,革蘭氏染色陽性(少數陰性);細胞的結構與細菌基本相同,
放線菌的形態極為多樣。共同特征是:第一百四十七頁,共一百七十六頁,編輯于2023年,星期五放線菌細胞壁類型(4大類)細胞壁類型
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